1、關(guān)于體液免疫球蛋白測定 (2)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第1頁，共28頁 第一節(jié) 血清IgG、IgA、IgM 測定 一、血清IgG、IgA、IgM測定 二、血清IgG、IgA、IgM測定的臨床意義 第二節(jié) 血清IgD和IgE測定 一、IgD測定及臨床意義 二、IgE測定及臨床意義 第三節(jié) 尿液及腦脊液Ig測定 一、尿液Ig測定及臨床意義 二、腦脊液Ig測定及臨床意義現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第2頁，共28頁 第四節(jié) 血清IgG亞類測定及臨床意義 第五節(jié) M蛋白測定及臨床意義 第六節(jié) 輕鏈測定及臨床意義 第七節(jié) 冷球蛋白的檢測 思考題小結(jié)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第3頁，共28頁v免疫球蛋白（免疫球蛋白（Ig）：抗體活性、化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體

2、相似）：抗體活性、化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似v重 鏈 性 質(zhì) ，重 鏈 性 質(zhì) ，I g分分5類 ：類 ：I g G ( )、I g A ( )、I g M ( )、 IgD()、IgE()v輕鏈性質(zhì)，輕鏈性質(zhì)，Ig分分2型：型：、vIg占血漿蛋白總量：占血漿蛋白總量：20%v檢測意義：反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病檢測意義：反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病vIg含量：血清含量：血清 IgG、IgA、IgM：g/L、 IgD、IgE：mg/L 體液體液 IgG、IgA、IgM：mg/L 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第4頁，共28頁第一節(jié) 血清IgG、IgA、IgM 測定 IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和細(xì)胞外液

3、中的主要抗體，也是機(jī)體再次免疫的主要抗體。 IgA分為血清型和分泌型，是參與黏膜局部免疫的主要抗體，主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液中。 IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是個(gè)體發(fā)育過程中最早合成和分泌的抗體，也是抗原刺激誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第5頁，共28頁一、血清IgG、IgA、IgM測定測定方法 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法 免疫濁度法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第6頁，共28頁n原理原理n誤差主要原因誤差主要原因n評(píng)價(jià)評(píng)價(jià) 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法示意圖單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法示意圖 原理 誤差主要原因 評(píng)價(jià) 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第7頁，共28頁免疫濁度法 直接透射比濁法

4、速率散射比濁法 注意點(diǎn) 評(píng)價(jià)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第8頁，共28頁二、血清IgG、IgA、IgM測定的臨床意義低Ig血癥:先天性低Ig血癥（免疫缺陷?。?； 獲得性低Ig血癥(蛋白丟失). 高Ig血癥:多克隆Ig增高（感染）； 單克隆Ig增高（免疫增殖?。?現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第9頁，共28頁第二節(jié) 血清IgD、IgE測定 正常人血清中IgD含量很低，膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR，是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。 IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌，為親細(xì)胞抗體，引起I型超敏反應(yīng)；與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第10頁，共28頁一、 血清IgD測定及臨床意

5、義 測定方法： 放射免疫分析法 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 免疫比濁法 酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第11頁，共28頁 IgD：生物功能不詳 增高：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、 敗血癥、新生兒溶血病 降低：意義不大現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第12頁，共28頁二、 血清IgE測定及臨床意義測定方法總IgE測定：放射免疫分析法 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 免疫比濁法 酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測定：免疫斑點(diǎn)法 酶聯(lián)免疫吸附法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第13頁，共28頁IgE臨床意義： 增高：變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。 降低：意義不大現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第14頁，共28頁第三節(jié) 尿液及腦脊液Ig測定 正常人尿液中的Ig含

6、量甚微，當(dāng)機(jī)體的免疫功能異?；蜓装Y反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí)，可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞或電荷屏障受損，從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。 生理情況下，Ig根據(jù)其分子量大小，通過血腦屏障的難易度不同，IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí)，腦脊液組分發(fā)生改變。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第15頁，共28頁一、尿液Ig測定及臨床意義尿液： 腎小球?yàn)V膜受損程度：選擇性蛋白尿指數(shù) 增高有臨床意義：腎病、免疫增殖病 可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診 斷腎小球疾病的種類現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第16頁，共28頁二、腦脊液Ig測定及臨床意義腦脊液： 血腦屏障受損程度：白蛋白商值、CSF-IgG指數(shù) 增高有臨床意

7、義：多發(fā)性硬化癥、中樞神經(jīng)系 統(tǒng)感染現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第17頁，共28頁第四節(jié) 血清IgG亞類測定及臨床意義Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降測定方法： 單向免疫擴(kuò)散法 免疫比濁法（常用） 放射免疫分析法 酶聯(lián)免疫吸附法臨床意義：IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化 免疫缺陷病降低明顯 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第18頁，共28頁第五節(jié) M蛋白測定及臨床意義 M蛋白： B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白 臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第19頁，共28頁M蛋白測定蛋白區(qū)帶電泳：經(jīng)典方法 計(jì)算蛋白含量和百分比免

8、疫比濁法： 免疫球蛋白定量 準(zhǔn)確性高、快速免疫電泳： M蛋白分型免疫固定電泳： M蛋白分型及鑒定，分辨 率高現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第20頁，共28頁GAMIgG-型M蛋白Marker 免疫固定電泳模式圖現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第21頁，共28頁第六節(jié) 輕鏈測定及臨床意義本周蛋白的檢測 樣本：尿液 方法：免疫電泳、加熱沉淀（簡便易行）Ig和-Ig定量檢測 樣本：尿液、血液 方法：單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法（常用，準(zhǔn)確、快速）應(yīng)用：M蛋白血癥的分型及鑒定現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第22頁，共28頁第七節(jié) 冷球蛋白的檢測冷球蛋白： 在低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白 在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確 多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合

9、物，其抗原可以是外源 性的，也可以是內(nèi)源性的現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第23頁，共28頁冷球蛋白的類型及臨床意義 I型：為單克隆冷球蛋白型，占25%40%;多見于免疫增生性疾病 型：單克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%25%;多見于自身免疫性疾病 型：多克隆混合型冷球蛋白，約占50% ;多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第24頁，共28頁1.1.免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？2.2.什么是免疫球蛋白什么是免疫球蛋白? ?其分子基本結(jié)構(gòu)其分子基本結(jié)構(gòu)? ?3.3.免疫球蛋白分類及亞類免疫球蛋白分類及亞類? ?4.4.血清免疫球蛋白測定方法有哪些血清免疫球蛋白測定方法有

10、哪些? ?5.5.比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。6.6.免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM測定有何臨床意義？測定有何臨床意義？思考題現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第25頁，共28頁7.7.免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgG亞類測定有何臨床意義？亞類測定有何臨床意義？8.8.單向免疫擴(kuò)散測定中有哪些主要影響因素？單向免疫擴(kuò)散測定中有哪些主要影響因素？9.9.如何保證速率散射比濁法測定結(jié)果準(zhǔn)確？如何保證速率散射比濁法測定結(jié)果準(zhǔn)確？10.10.如何評(píng)估腎小球?yàn)V過膜破壞程度？如何評(píng)估腎小球?yàn)V過膜破壞程度？11.11.如何判定血腦屏障受損程度？如何判定血腦屏障受損程度？12.12.如何正確選擇測定如何正確選擇測定M M蛋白的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目蛋白的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目? ?現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第26頁，共28頁 n免疫球蛋白是由漿細(xì)胞所產(chǎn)生能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合免疫球蛋白是由漿細(xì)胞所產(chǎn)生能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的球蛋白的球蛋白n分為分為IgG IgG 、IgAIgA、IgMIgM、IgEIgE和和IgDIgD五類，其相應(yīng)重鏈分別五類，其相應(yīng)重鏈分別稱為稱為鏈、鏈、鏈、鏈、鏈、鏈、鏈和鏈和鏈鏈n輕鏈分為