分子生物學(xué)常用技術(shù) (2)_第1頁
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1、關(guān)于分子生物學(xué)常用技術(shù) (2)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第一頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三頁,共31頁(a)(b)(c)(d)(e)基因組基因組DNADNA限制片段限制片段硝酸纖維素濾膜硝酸纖維素濾膜同探針同源雜交的基同探針同源雜交的基因因DNA片段片段X光底片光底片現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第八頁,共31頁核酸雜交常用幾種膜的性核酸雜交常用幾種膜的性能比較能比較現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第九頁,共31頁. . 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十一頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十二頁,共31頁

2、現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十三頁,共31頁足跡實驗(足跡實驗(footprinting assayfootprinting assay) 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十四頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十五頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十六頁,共31頁凝膠電泳凝膠電泳和和現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十七頁,共31頁me分離分離DNA并用并用六氫吡啶切割六氫吡啶切割現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十八頁,共31頁5 5、SouthwesternSouthwestern雜交雜交6 6、NorthwesternNorthwestern雜交雜交現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十九頁,共31頁.PCR.PCR技術(shù)技術(shù) 1 1、基因擴增原理條件、基因擴增原理條件 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十頁,共3

3、1頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十一頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十二頁,共31頁ParameterConcentrationTemplatepHdNTPsGelatinPrimersMg2+ oncentrationEnzymeTotal volume10 attomoles(1106 molecules)8.4(10mM Tris-Hcl)200 M(each one)100 g/ml (optional)0.5 M(each one);(0.11.0M)0.5mM50% at 95 for 40 min1.110-4 substitutions per cycle0.5mM10mM5 to 3only5 adenosines現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十六頁,共31頁現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十七頁,共31頁 3 3、PCRPCR用于融合基因的克隆用于融合基因的克隆 現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十八頁,共31頁.體外轉(zhuǎn)錄與體外翻譯體外轉(zhuǎn)錄與體外翻譯1 1、體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)、體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十九頁,共31頁. .基因瞬間表達與穩(wěn)定表達基因瞬間表達與穩(wěn)定表達2 2、常用的體外翻譯系統(tǒng)、常用的體外翻譯系統(tǒng) 小麥胚、兔網(wǎng)織紅血球小麥胚、兔網(wǎng)織紅血球下節(jié)

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