1、2014.9+微生物標本送檢要求+規(guī)范采集和送檢血培養(yǎng)+協(xié)助明確病情診斷+推測病情進展+觀察病情變化+制定正確的治療措施+有利于合理使用抗菌藥物，減少和延緩耐藥菌的出現(xiàn)+無菌體液標本價值更高，臨床意義更大!+無菌體液包括：血液、腦脊液、胸腹水、中段尿、關節(jié)液、膿液、其他無菌體液或分泌物等。+血培養(yǎng)結果對感染性疾病的診斷、治療和預后都有極為重要的臨床意義！+采血指征了解不夠，送檢率低+不正確采樣（如采血時機不合適、采血套數(shù)不夠，采血量不足、采血部位不對、標本暫存不當）+污染問題+陽性檢出率低+檢驗周期過長+厭氧培養(yǎng)不受重視等+患者出現(xiàn)以下一種或同時具備幾種臨床表現(xiàn)時可作為血培養(yǎng)的重要指征：+體溫

2、：發(fā)熱（38）或低溫（36）+寒戰(zhàn)、休克+白細胞增多：10.0X109/L,特別有核左移現(xiàn)象時+粒細胞減少：1.0X109/L+血小板減少，皮膚黏膜出血+昏迷、多器官衰竭、血壓降低、呼吸心率異常加快等+局部感染：肺炎、尿路感染、腦膜炎、等+免疫功能低下的患者+其他：如CPR內(nèi)毒素、PCT等升高時+CAP菌血癥發(fā)生率：+住院患者：4%14%+重癥患者：18%+大多數(shù)CAP的指南推薦住院的患者進行血培養(yǎng)+HAP菌血癥發(fā)生率：10%30%+所有懷疑VAP的患者均應進行血培養(yǎng)+研究表明：細菌通常在寒戰(zhàn)和發(fā)熱前1小時入血，此時為采集血標本進行病原菌培養(yǎng)的最佳時機；+采血應盡可能在抗菌藥物之前進行。+若患

3、者已接受抗菌藥物治療，則應選用含抗菌藥物吸附劑的培養(yǎng)瓶進行血培養(yǎng)。+CLSI（美國臨床實驗室標準化協(xié)會）建議（2007）+對于每位需要血培養(yǎng)的患者需要采取2至3套+對于成年患者的血培養(yǎng)，只采單一的血培養(yǎng)是不允許的，因為單一的血培養(yǎng)的結果的臨床意義很難解釋。+對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時或短時間間隔（10分鐘內(nèi)）從不同部位（如雙臂）每次采集23套標本，每套應包括一個需氧瓶和一個厭氧瓶+采血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，不需要重復采血培養(yǎng)，因為治療后的2至5天內(nèi)血液中的感染細菌不會馬上消失。+血培養(yǎng)“雙側雙瓶”或“雙管雙套”，是指從一個采血部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再從另一部位采血接種另一套培養(yǎng)

4、瓶。+成人一套血培養(yǎng)：應該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個，也叫“一份”+一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應從另一個穿刺點獲得+兒童一般只做需氧培養(yǎng)，但仍需從多個部位采集多次，特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)+雙側：兩個部位采血，左右兩側手臂+雙瓶：需氧瓶和厭氧瓶+Khanan等對7070份同時做需氧瓶和厭氧瓶的血培養(yǎng)結果分析顯示：+640份血培養(yǎng)陽性，陽性率為9%+其中需氧和厭氧同時陽性為55%+僅需氧瓶陽性為26%+僅厭氧瓶陽性為19%+研究表明：一套血培養(yǎng)選擇1個需氧瓶和1個厭氧瓶組合檢測出的葡萄球菌、腸桿菌科菌中某些菌和厭氧菌比一對需氧瓶多。+如果血培養(yǎng)只做需氧瓶培養(yǎng)，漏檢的不僅是嚴格厭氧菌，也會影

5、響兼性厭氧菌的分離率。+有研究顯示，血培養(yǎng)只做一套的檢出率僅為65%，做2套和3套的檢出率分別為80%和96%+成人一般從雙側上肢靜脈采血（肘靜脈），必要時從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng)。兒童和嬰幼兒采集部位多為頸部和腹股溝。+不建議采取動脈血，其診斷的價值不高，且增加了抽血污染的機會和穿刺的危險。+盡量避免從靜脈留置導管采血培養(yǎng)，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導管內(nèi)采血，也應該從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標本以幫助陽性結果的判斷。+采血量是影響靈敏度的最關鍵因素+成人一份標本2個培養(yǎng)瓶（需氧+厭氧），每瓶8-10ml+要求至少采集2份標本，即30-40ml.+兒童一般只需采集需氧瓶，在保證

6、采集量1%總血量下，一般為1-3ml+采血量不足時應優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90%以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染。+血培養(yǎng)采血量是影響病原菌檢出率的最重要的可變因素+一般情況下，成人菌血癥患者外周血中細菌濃度為1-10CFU/ml，成人血培養(yǎng)采血量在2-30ml之間，病原菌檢出率與采血量成正比例增長。+由于兒童患者血液中病原菌濃度較高，一般約為成人血流感染病原菌濃度的10倍，血培養(yǎng)標本量無需等同成人。采血量一定要夠！+采血量不足時應優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90%的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染+真菌和嚴格的需氧菌（如假單胞桿菌和嗜麥芽窄食單胞菌）幾乎全部只能從需氧瓶中分離到。+同時采集需氧瓶和厭

7、氧瓶的血培養(yǎng)標本時，應先注入?yún)捬跗?，因為有些厭氧菌對氧極度敏感，在空氣中很短時間內(nèi)即死亡。+對于非持續(xù)性菌血癥，應同時或短時間內(nèi)采集2-3套血培養(yǎng)，因為體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)會在15-30min內(nèi)清除進入人體內(nèi)的細菌。每份血培養(yǎng)間隔應不超過30分鐘。+可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血做血培養(yǎng)，30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，采集后立即進行抗菌藥物的經(jīng)驗治療。如果24小時內(nèi)報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。+可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1小時采集1套，連續(xù)采集3套標本。如果24內(nèi)報告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。+皮膚消毒程序：+用75%酒精棉簽消毒皮膚，待干30秒；+再用碘伏（10%碘伏60秒

8、）或碘酊（2%碘酊30秒）消毒皮膚；+最后使用75%酒精脫碘+洗必泰時間和碘酊一樣（但不能用于小于2個月嬰兒皮膚消毒）+培養(yǎng)瓶消毒程序：+去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋；+75%酒精消毒培養(yǎng)瓶瓶口；+自然待干；+將標本注入培養(yǎng)瓶內(nèi)；顛倒混勻標本和肉湯，以避免血液凝集。+血培養(yǎng)對無菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其他標本要高+所以要最先采集血培養(yǎng)標本。+污染率的指標應是3%（100份標本里只能有不到3個標本出現(xiàn)污染）+不需要冷藏，保存在15-25的室溫即可。+溫度過低會導致對溫度敏感的某些病原微生物死亡，如奈瑟氏菌。+溫箱會導致細菌進入生長對數(shù)期，從而錯過檢測的最佳時期。+接種后的培養(yǎng)瓶最好立即送到

9、實驗室，最遲不能超過2小時。+污染導致的血培養(yǎng)假陽性是一個較為普遍的問題，即使采用最好的血培養(yǎng)標本采集方法也很難將污染率降至2%以下。+判斷血培養(yǎng)污染的金標準并不存在，比如凝固酶陰性葡萄球菌既是最常見的污染菌，也是現(xiàn)在常見的菌血癥病原菌之一，其臨床意義的判定仍是一個世界性難題，需要臨床醫(yī)生和實驗室人員相互溝通，綜合分析。+血培養(yǎng)污染的鑒別注意依靠一下幾個方面：微生物鑒定、陽性檢出時間、重復培養(yǎng)結果以及臨床特征等。+一般超過72小時報警的往往為污染菌；單純一次的凝固酶陰性表皮葡萄球菌陽性往往為污染可能；多次血培養(yǎng)為同一種菌或其他體液培養(yǎng)結果一致可排除污染可能；不能僅憑血培養(yǎng)報告定義血流感染，要密切結合臨床排除污染。留置靜脈導管標本采集要求方法一（繼續(xù)留置導管）：采集2個部位血培養(yǎng)，其中一套來自外周靜脈