1、常用細(xì)菌生化反應(yīng)試驗(yàn)常用細(xì)菌生化反應(yīng)試驗(yàn)糖醇類(lèi)代謝試驗(yàn)糖醇類(lèi)代謝試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)V-P試驗(yàn)試驗(yàn)葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)（葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O/F試驗(yàn)）試驗(yàn)）七葉苷水解試驗(yàn)七葉苷水解試驗(yàn)半乳糖苷滲透酶試驗(yàn)半乳糖苷滲透酶試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)原理原理 多糖多糖單糖單糖丙酮酸丙酮酸酸性產(chǎn)物酸性產(chǎn)物(或產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)酸產(chǎn)氣)pH 指示劑呈酸性指示劑呈酸性變色變色(若產(chǎn)氣者有氣泡出現(xiàn)若產(chǎn)氣者有氣泡出現(xiàn))培養(yǎng)基：糖發(fā)酵管、半固體發(fā)酵管、微培養(yǎng)基：糖發(fā)酵管、半固體發(fā)酵管、微量發(fā)酵管量發(fā)酵管試劑：酚紅、溴甲酚紫等試劑：酚紅、溴甲酚紫等結(jié)果結(jié)果:培養(yǎng)基呈酸性變色培養(yǎng)基呈酸性變色應(yīng)用：觀察

2、細(xì)菌對(duì)糖度的應(yīng)用：觀察細(xì)菌對(duì)糖度的 分解情況，常分解情況，常用于腸道桿菌的鑒定用于腸道桿菌的鑒定糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果判斷糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果判斷反應(yīng)現(xiàn)象反應(yīng)現(xiàn)象結(jié)果描述結(jié)果描述酸性酸性變色變色、有氣泡、有氣泡分解分解糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣酸性酸性變色變色、無(wú)氣泡、無(wú)氣泡分解分解糖產(chǎn)酸、不產(chǎn)糖產(chǎn)酸、不產(chǎn)氣氣培養(yǎng)基不變色培養(yǎng)基不變色不分解不分解糖糖甲基紅試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解糖，產(chǎn)生丙酮酸，進(jìn)一原理：細(xì)菌分解糖，產(chǎn)生丙酮酸，進(jìn)一步生成大量混合酸，使培養(yǎng)基步生成大量混合酸，使培養(yǎng)基pH維持在維持在4.4以下，加入甲基紅后，使甲基紅呈現(xiàn)以下，加入甲基紅后，使甲基紅呈現(xiàn)紅色反應(yīng)。此為甲基紅試驗(yàn)紅色反應(yīng)。此為

3、甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性。陽(yáng)性。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水試劑：甲基紅試劑試劑：甲基紅試劑結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色紅色：+ 培養(yǎng)基不變色：培養(yǎng)基不變色： 應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌伏普試驗(yàn)（伏普試驗(yàn)（V-P試驗(yàn)）試驗(yàn)）原理：細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，丙酮原理：細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中乙酸脫羧生成乙酰甲基甲醇，在堿性環(huán)境中乙酰甲基甲醇被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白酰甲基甲醇被氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白

4、胨中的精氨酸所含的胍基結(jié)合，生成紅色化胨中的精氨酸所含的胍基結(jié)合，生成紅色化合物。合物。培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基呈現(xiàn)紅色紅色：+ 培養(yǎng)基不變色：培養(yǎng)基不變色： 應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主應(yīng)用：是腸道桿菌常用的生化反應(yīng)試驗(yàn)，主要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌要用于區(qū)別大腸肝菌和產(chǎn)氣腸桿菌葡萄糖葡萄糖丙酮酸丙酮酸大量混合酸大量混合酸pH降至降至4.4以下以下甲基紅試劑甲基紅試劑培養(yǎng)基培養(yǎng)基變紅變紅甲基紅試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅VP試驗(yàn)脫酸葡萄糖發(fā)酵形成丙酮酸后的不同代謝途徑葡萄

5、糖發(fā)酵形成丙酮酸后的不同代謝途徑葡萄糖丙酮酸大量混合酸pH降至4.4以下甲基紅試劑培養(yǎng)基變紅乙酰甲基甲醇二乙酰V-P試劑培養(yǎng)基變紅脫酸蛋白質(zhì)類(lèi)代謝試驗(yàn)蛋白質(zhì)類(lèi)代謝試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)苯丙氨酸脫氨試驗(yàn)苯丙氨酸脫氨試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)原理：細(xì)菌產(chǎn)生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的原理：細(xì)菌產(chǎn)生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基質(zhì)（吲哚），靛基質(zhì)與試劑色氨酸，生成靛基質(zhì)（吲哚），靛基質(zhì)與試劑對(duì)二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基質(zhì)。對(duì)二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基質(zhì)。培養(yǎng)基：蛋白胨水培養(yǎng)基：蛋白胨水試劑：靛基質(zhì)試劑（含對(duì)二甲基氨基苯甲醛）試劑：靛基

6、質(zhì)試劑（含對(duì)二甲基氨基苯甲醛）結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色液面：結(jié)果：加入試劑后，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色液面：+ 培養(yǎng)基液面為黃色：培養(yǎng)基液面為黃色： 應(yīng)用：用于腸道桿菌的鑒定應(yīng)用：用于腸道桿菌的鑒定靛基質(zhì)試驗(yàn)原理靛基質(zhì)試驗(yàn)原理色氨酸酶色氨酸酶色氨酸色氨酸 靛基質(zhì)靛基質(zhì)（吲哚）（吲哚） 玫瑰靛基質(zhì)玫瑰靛基質(zhì)（玫瑰吲哚）（玫瑰吲哚）對(duì)二甲基氨基苯甲對(duì)二甲基氨基苯甲醛醛硫化氫試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)原理：細(xì)菌分解蛋白質(zhì)中的含硫氨基酸，原理：細(xì)菌分解蛋白質(zhì)中的含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽生成硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽或鉛鹽結(jié)合生成黑色絡(luò)合物。或鉛鹽結(jié)合生成黑色絡(luò)合物。培養(yǎng)基：含硫酸亞鐵或醋酸

7、鉛的培養(yǎng)基培養(yǎng)基：含硫酸亞鐵或醋酸鉛的培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基結(jié)果：培養(yǎng)基 變黑變黑 為陽(yáng)性，不變黑為為陽(yáng)性，不變黑為陰性陰性應(yīng)用：常用于腸道桿菌的鑒定應(yīng)用：常用于腸道桿菌的鑒定苯丙氨酸脫氨實(shí)驗(yàn)苯丙氨酸脫氨實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)菌的具有的苯丙氨酸脫氨酶，原理：細(xì)菌的具有的苯丙氨酸脫氨酶，可使培養(yǎng)基中的苯丙氨酸脫氨，形成苯可使培養(yǎng)基中的苯丙氨酸脫氨，形成苯丙酮酸，后者與三氯化鐵作用，形成綠丙酮酸，后者與三氯化鐵作用，形成綠色化合物。色化合物。培養(yǎng)基：苯丙氨酸瓊脂培養(yǎng)基：苯丙氨酸瓊脂試劑：試劑：10三氯化鐵三氯化鐵結(jié)果：加入試劑后培養(yǎng)基呈現(xiàn)結(jié)果：加入試劑后培養(yǎng)基呈現(xiàn)綠色綠色為陽(yáng)為陽(yáng)性性應(yīng)用：多用于腸道桿菌的鑒定應(yīng)

8、用：多用于腸道桿菌的鑒定苯丙氨酸脫氨試驗(yàn)原理苯丙氨酸脫氨試驗(yàn)原理苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸脫氨酶苯丙氨酸脫氨酶苯丙酮酸苯丙酮酸10三氯化鐵三氯化鐵綠色化合物綠色化合物尿素酶試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)原理：產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌，能水解尿素生原理：產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌，能水解尿素生成氨和成氨和CO2，氨使培養(yǎng)基呈堿性變色。，氨使培養(yǎng)基呈堿性變色。培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基試劑：酚紅指示劑試劑：酚紅指示劑結(jié)果：培養(yǎng)基變紅：結(jié)果：培養(yǎng)基變紅：+ 培養(yǎng)基不變色培養(yǎng)基不變色應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒定應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒定尿素酶試驗(yàn)原理尿素酶試驗(yàn)原理尿素尿素尿素酶尿素酶氨氨+CO2培養(yǎng)基培養(yǎng)基pH升高升高酚紅呈堿性變色酚紅呈堿

9、性變色枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理：某些細(xì)菌能力利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽原理：某些細(xì)菌能力利用培養(yǎng)基中的枸櫞酸鹽作為唯一的碳源，也能利用其中的銨鹽作為唯一的碳源，也能利用其中的銨鹽 作為唯作為唯一碳源，細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳一碳源，細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分解枸櫞酸鹽產(chǎn)生碳酸鹽和分解銨鹽生成的氨，使培養(yǎng)基變堿，是酸鹽和分解銨鹽生成的氨，使培養(yǎng)基變堿，是指示劑呈堿性反應(yīng)。指示劑呈堿性反應(yīng)。培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)基：枸鹽酸鹽培養(yǎng)基試劑：溴麝香草酚藍(lán)（試劑：溴麝香草酚藍(lán)（pH6.0以下呈黃色，以下呈黃色，pH7.6以上呈藍(lán)色）以上呈藍(lán)色）結(jié)果：培養(yǎng)基變藍(lán)：結(jié)果：培養(yǎng)基變藍(lán)：+ 培養(yǎng)基不變色：培養(yǎng)基不變色：應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒別應(yīng)用：腸桿菌科屬間鑒別枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)原理枸櫞酸鹽銨鹽碳酸鹽氨培養(yǎng)基pH下降溴麝香草酚藍(lán) 呈堿性變色培養(yǎng)基變藍(lán)培養(yǎng)基糖發(fā)酵試驗(yàn)糖發(fā)酵試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)靛基質(zhì)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)鑒定：血清學(xué)鑒定：用已知抗體鑒定未知的細(xì)菌或標(biāo)本中的用已知抗體鑒定未知的細(xì)菌或標(biāo)本中的抗原抗原血清學(xué)診斷：血清學(xué)診斷：用已知抗原檢測(cè)血清中的特異性抗體用已知抗原檢測(cè)血清中的特異性抗體血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定試劑（診斷血清）試劑（診斷血清） ：含抗體：含抗體 檢測(cè)對(duì)象：特異性抗原檢測(cè)對(duì)象：特異性抗原方法：直接凝集試驗(yàn)