1、專題14 生物技術(shù)實(shí)踐一、選擇題1（2014屆北京東城區(qū)示范校高三12月教學(xué)質(zhì)量調(diào)研）下列有關(guān)發(fā)酵食品加工的操作，正確的是A. 制作果酒時(shí)應(yīng)對葡萄進(jìn)行反復(fù)沖洗以避免雜質(zhì)的影響B(tài). 制作果醋時(shí)應(yīng)避免通入空氣以保證有關(guān)菌種正常代謝C. 制作腐乳時(shí)應(yīng)適量加鹽以避免豆腐變質(zhì)、變軟D. 制作酸奶時(shí)應(yīng)保證有氧環(huán)境以提高酸奶的酸度2（2014屆北京東城區(qū)示范校高三12月教學(xué)質(zhì)量調(diào)研）下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是A. 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B. 取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上C. 將實(shí)驗(yàn)組和對

2、照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)D. 確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)3（2014屆四川米易中學(xué)高三12月月考）下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中，不合理的有A.在進(jìn)行果酒發(fā)酵過程中要定期“放氣”，并注意防止外界細(xì)菌進(jìn)入發(fā)酵瓶B.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C.植物耐鹽突變體可通過添加適量 NaCl 的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得D.電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)和數(shù)量以及樣品分子大小不同，產(chǎn)生的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離4（2013-2014學(xué)年四川彭州高三上期期中考試）在釀制果醋果酒的過程中，下列相關(guān)說法正確的是()。A果醋的制作

3、需用醋酸菌，醋酸菌是兼性厭氧型細(xì)菌，需先通一段時(shí)間氧氣后密封B在果醋發(fā)酵過程中，溫度控制在1825 ，發(fā)酵效果最好C當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌可將葡萄中的糖分解成醋酸而釀制成果醋D某同學(xué)用帶蓋的瓶子制備葡萄酒的過程中，每隔12小時(shí)左右將瓶蓋擰松一次，其目的是向瓶中通氣，以保證微生物的發(fā)酵5（2014屆浙江杭州外國語學(xué)校高三期中考試）某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是A消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害B在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞C出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基

4、因選擇性表達(dá)的調(diào)控D生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑6（2014屆浙江省寧波市效實(shí)中學(xué)高三上學(xué)期期中考試）加工橘子罐頭時(shí)采用酸堿處理脫去中果皮（橘絡(luò)）會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物，不能產(chǎn)生所用酶的是A生長在麥麩上的黑曲霉B生長在酸奶中的乳酸菌C生長在棉籽殼上的平菇D生長在木屑上的木霉7（2014屆北京市東城區(qū)普通校高三上期期中聯(lián)考）細(xì)菌需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列與此有關(guān)的說法正確的是A.乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B.氮源不可能作為細(xì)菌的能源物質(zhì)C.瓊脂是細(xì)菌生長和繁殖中不可缺少的一

5、種物質(zhì)D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長出的不都是尿素分解菌8（2014屆北京市東城區(qū)普通校高三上期期中聯(lián)考）某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌 B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次二、非選擇題9（2014屆湖南益陽箴言中學(xué)高三上期期中考試）請分析回答下列問題：(1)無菌技術(shù)主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。常用的滅菌方法有_（1分）滅菌、干熱滅菌和_（1分）滅菌。(2)稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的正確操作步驟是 ( )土壤取樣稱取10 g土壤加入盛有

6、90 mL無菌水的錐形瓶中制備土壤提取液吸取0.1 mL溶液進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A B C D(3)利用酵母菌將葡萄汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來檢驗(yàn)，在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈_（1分）色。在發(fā)酵過程中，隨著酒精度的提高，發(fā)酵液逐漸呈現(xiàn)深紅色，原因是_(4)從野生酵母菌群中分離純化酵母菌，最常使用的接種方法是_（1分）和_（1分）兩種。酵母菌適合生活在偏酸性環(huán)境，而放線菌則適合生活在偏堿性環(huán)境中，分離二者所用的培養(yǎng)基稱為_。(5)在腐乳制作的過程中，起主要作用的微生物是_。(6)腐乳制作過程中影響其風(fēng)味和品質(zhì)的因

7、素有哪些 ( )鹽的用量酒的種類和用量發(fā)酵溫度發(fā)酵時(shí)間香辛料的用量A B C D10（2014屆云南部分名校高三12月統(tǒng)一考試）下圖為通過花藥培養(yǎng)獲得月季花粉植株的一種途徑。請回答下列相關(guān)問題。（1）選擇花藥時(shí)一般要通過來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。一般來說，在期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞的一側(cè)。為此，通常會(huì)選擇的花蕾，成功率最高。（2）胚狀體也叫，一般是由某些脫分化的細(xì)胞轉(zhuǎn)變而來，在形態(tài)上具有與發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，胚芽、胚軸、胚根等結(jié)構(gòu)完整，具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。（3）上述途徑是通過胚狀體階段發(fā)育成植株，還可以將花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成，再將其誘導(dǎo)分化成植株。（4）某同學(xué)在培養(yǎng)

8、過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌。若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入染料，培養(yǎng)幾種菌后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌。（5）在培養(yǎng)過程中為了檢驗(yàn)制備的培養(yǎng)基是否合格，采取的措施是，如果，說明培養(yǎng)基制備成功，否則需要重新制備。11（2014屆寧夏銀川一中高三第五次月考）我國四川省宜賓市的柑橘種植由于受到柑橘大實(shí)蠅的危害，橘農(nóng)遭受到了很大的損失，當(dāng)?shù)卣氡M一切辦法幫助橘農(nóng)盡量減少損失。（1）有人想提取橘皮精油獲取利潤，一般提取橘皮精油的方法是_法，新鮮的柑橘皮中含有大量的

9、果蠟、果膠和水分，如直接壓榨，出油率較低。為了提高出油率，需將柑橘皮干燥去水，并用浸泡，浸泡時(shí)間為10h以上，這樣壓榨時(shí)不會(huì)。（2）橘皮精油的提取若采取水蒸氣蒸餾法，會(huì)出現(xiàn)原料_和有效成分_等問題。（3）從橘皮中提取的橘皮精油的特點(diǎn)是，具有誘人的橘香味。（4）某橘農(nóng)發(fā)現(xiàn)自家有一株橘樹具有抗蟲性狀，欲利用花藥離體培養(yǎng)技術(shù)大量繁殖，則應(yīng)選擇花粉發(fā)育至_期的花藥培養(yǎng)成功率最高。選擇花藥時(shí)，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期，最常用的方法有_法，某些植物的花粉不易著色，需采用_ _法。12（2014屆四川米易中學(xué)高三12月月考）請分析回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐方面的問題：.現(xiàn)有磨漿機(jī)、燒

10、杯、滴管、量筒、玻璃棒、漏斗、紗布、蘋果、試管、蒸餾水、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2的果膠酶溶液、一定濃度的鹽酸和氫氧化鈉溶液，下表是某小組利用上述材料進(jìn)行的有關(guān)實(shí)驗(yàn)：(“”表示不加)，請回答下列問題：操作順序項(xiàng)目燒杯甲乙丙丁1加入蘋果泥20ml20ml20ml20ml22ml/2ml2ml3加入不同液體2ml蒸餾水2ml蒸餾水2ml鹽酸溶液2ml氫氧化鈉溶液4水浴恒溫，玻璃棒攪拌15分鐘15分鐘15分鐘15分鐘（1）表中處的內(nèi)容是。（2）比較燒杯甲、丙、丁的結(jié)果可知：能影響酶的活性。（3）若要驗(yàn)證果膠酶的作用，應(yīng)把兩個(gè)燒杯同時(shí)取出并過濾相同時(shí)間，觀察并比較。.從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的是法；一般情況下，提

11、取胡蘿卜素時(shí)，提取效率與原料顆粒的含水量成比；將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定的結(jié)果如右圖所，請據(jù)圖回答。A、B、C、D四點(diǎn)中，屬于標(biāo)準(zhǔn)樣品的樣點(diǎn)是；乙代表的物質(zhì)是。13（2014屆湖北武穴中學(xué)高三學(xué)期12月月考）下表是篩選異養(yǎng)型細(xì)菌的培養(yǎng)基配方。（1）苯胺是致癌物質(zhì)，土壤中有分解苯胺的異養(yǎng)型細(xì)菌，此培養(yǎng)基中的成分X除了為目的菌提供能源外，還能提供（寫全得分），該培養(yǎng)基從作用看屬于培養(yǎng)基。制備固體培養(yǎng)基時(shí)調(diào)節(jié)PH在步驟后；對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用是方法。（2）右上圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖。則獲得圖B效果的接種方法是。運(yùn)用A所示接種方法統(tǒng)計(jì)的菌落常常比活菌的實(shí)際

12、數(shù)目。在探究“酵母菌種群數(shù)量變化”實(shí)驗(yàn)已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0.4mm3，觀察到右上圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個(gè)中格共有藍(lán)藻80個(gè)，則1ml樣液中約有藍(lán)藻個(gè)（3）在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素，原理用方程式表示為；在篩選能夠分解纖維素的微生物過程中，常用到染色法。14（2014屆河北唐山灤南一中高三12月月考）下圖甲是以蘋果為原料生產(chǎn)果醋的生產(chǎn)工藝，乙曲線表示溫度、酒精度對醋酸發(fā)酵的影響，請分析回答問題：(1)酒精發(fā)酵的適宜溫度為18-25，溫度過高，酵母菌代謝減慢甚至死亡，原因是溫度過高，影響_。(2

13、)酒精發(fā)酵轉(zhuǎn)入醋酸發(fā)酵時(shí)，酒精度范圍為_%，并將溫度控制在_0C左右，此外還需調(diào)整的發(fā)酵條件是通入_空氣。(3)酒精發(fā)酵初期溶液中有氣泡產(chǎn)生，氣泡的成分是_。在整個(gè)發(fā)酵過程中pH的變化趨勢是：逐漸_。(4)為提高果酒的品質(zhì)，更好地抑制其他微生物的生長，除接入合適的菌種外，還應(yīng)對原料和裝置分別進(jìn)行_。調(diào)整糖度，是為了給酵母菌提供豐富的_源。15（2014屆內(nèi)蒙古巴彥淖爾一中高三上期期中考試）微生物強(qiáng)化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)該類微生物的實(shí)驗(yàn)操作。請回答下列問題

14、：(1)土壤是微生物的大本營，該類微生物應(yīng)取自的土壤。(2)為篩選和純化該類微生物，從功能上分，應(yīng)選用培養(yǎng)基。常用的接種方法是。(3)接種后，應(yīng)密封培養(yǎng)的原因是，培養(yǎng)一段時(shí)間后在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時(shí)選取就可獲得高效菌株。(4)擴(kuò)大培養(yǎng)過程中需要對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。取02mL樣品，用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng)，最后統(tǒng)計(jì)三個(gè)平板，菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為個(gè)/mL。該統(tǒng)計(jì)結(jié)果 (低于、高于)實(shí)際值。在聯(lián)系能力。16（2014屆湖南衡陽八中高三上期第三次月考）某化工廠的污水池中含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A.磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基成

15、功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示，請分析回答：(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選_。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源來自培養(yǎng)基中的_。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是_。(3)培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量_的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用_的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。17（2014屆河北衡水中學(xué)高三上期期中考試）利用不同微生物的發(fā)酵作用來制作果灑，果醋、腐乳和酸奶等食品的歷史悠久，遍布民間，一般稱作傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識，回答以下問題：（1）果酒和

16、果醋的制作：酵母菌是釀制葡萄酒不可缺少的微生物，如果要獲得優(yōu)質(zhì)野生酵母菌最好在葡萄園的土壤中采樣，利用酵母菌發(fā)酵制作葡萄灑要控制的溫度為。果酒發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來檢驗(yàn)，在酸性條件下呈現(xiàn)色。喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后變酸的原因是（用化學(xué)反應(yīng)式表示）。（2）腐乳的制作：腐乳制作有多種微生物參與，其中起主要作用的是。豆腐發(fā)酵主要利用微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶等，通過發(fā)酵，豆腐中營養(yǎng)物質(zhì)的種類（減少、增多），且更易于消化和吸收。（3）乳酸發(fā)酵：含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶，原因是。測定泡菜中亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸

17、鹽結(jié)合形成染料。18（2014屆山西忻州一中高三上期期中考試）（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用十分廣泛，果酒和果醋就是常見例子。當(dāng)發(fā)酵裝置由果酒釀造轉(zhuǎn)為果醋釀造時(shí)，首先要提高，其次要注意通入。（2）微生物培養(yǎng)基通常在壓力為100kPa，溫度為條件下，滅菌15至30min，然后待培養(yǎng)基冷卻至?xí)r，在酒精燈火焰附近倒平板。（3）菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇的莖上部新萌生的側(cè)枝；進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)時(shí)，一般將pH控制在左右，溫度控制在18至22，并每天光照12h。植物激素中，生長素和細(xì)胞分裂素是關(guān)鍵性激素。（4）植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等，柑橘芳香油的制備通常使用法。為提高出油率，需要將柑橘皮干燥去水，并

18、用浸泡。19（2014屆北京市東城區(qū)普通校高三上期期中聯(lián)考）克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如圖。卵母細(xì)胞良種豬體細(xì)胞重組細(xì)胞早期胚胎受體子宮克隆豬總mRNAcDNA擴(kuò)增產(chǎn)物PCRX不同發(fā)育時(shí)期提取請回答：（1）圖中過程采用的技術(shù)手段稱做技術(shù)。（2）過程所用的培養(yǎng)液與植物組織的培養(yǎng)基從成分上主要區(qū)別是前者必須含有。（3）在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl-2 mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平。圖中X表示過程。從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl-2 mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成2種用于PCR擴(kuò)增，除此以外在PCR反應(yīng)體系中還應(yīng)包含的主要成分有擴(kuò)增緩沖液、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及。PCR擴(kuò)增過程第一輪循環(huán)的模板是。（4）克隆豬的成功培育說明。20（2014屆北京市東城區(qū)普通校高三上期期中聯(lián)考）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖甲所示）。（1）圖甲中，過程需要的酶有