1、 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所劉淑芝劉淑芝中藥凝膠膏劑共性技術(shù)適宜性研究中藥凝膠膏劑共性技術(shù)適宜性研究中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所匯報提綱匯報提綱v一、簡述一、簡述v二、共性技術(shù)的適宜性二、共性技術(shù)的適宜性v三、生產(chǎn)過程的適宜性三、生產(chǎn)過程的適宜性v四、評價方法的適宜性四、評價方法的適宜性v五、技術(shù)推廣情況五、技術(shù)推廣情況中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 一、簡述一、簡述中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所1中藥經(jīng)皮給藥制劑研究概況、特點、存在問題、發(fā)展趨勢。2中藥經(jīng)皮給藥依托劑型：中藥巴布劑、中藥貼劑、中藥橡膠膏劑、軟膏劑、水凝膠、噴劑等。3中藥經(jīng)皮給藥要解決的關(guān)鍵問題：生物相容性、藥物相容性

2、、質(zhì)量可控與均一性、設(shè)備的適宜性、評價方法等。1課題支持基本情況中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 概況概況v經(jīng)皮給藥系統(tǒng)TTS(Transdermal Therapeutical System,TTS) 研究是目前藥學(xué)界研究的熱點。據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測，2030年內(nèi)，有30以上的藥物將改成經(jīng)皮給藥制劑，因此經(jīng)皮給藥制劑國內(nèi)外發(fā)展空間廣闊，市場容量巨大。由于中藥所含成分復(fù)雜，而復(fù)方用藥仍然是中藥主要形式，如何在保持中醫(yī)復(fù)方用藥特色的前提下，研究中藥新型經(jīng)皮給藥系統(tǒng),是中藥制劑研究的艱巨而又迫切的任務(wù)。因此運用現(xiàn)代技術(shù)和材料科學(xué)發(fā)展的最新成果研究和開發(fā)中藥新型經(jīng)皮給藥系統(tǒng)，開展現(xiàn)代技術(shù)對傳統(tǒng)中藥的適應(yīng)性和

3、可行性，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)和評價方法研究，解決嚴(yán)重制約中藥經(jīng)皮給藥發(fā)展的瓶頸技術(shù)難題，傳承中醫(yī)藥優(yōu)勢與特色，實現(xiàn)中藥經(jīng)皮產(chǎn)品打入國際主流市場，具有重要意義。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 中藥經(jīng)皮給藥制劑依托的劑型中藥經(jīng)皮給藥制劑依托的劑型v 中藥橡膠膏劑：目前市場流通的主流劑型v 中藥黑膏藥：屬于傳統(tǒng)保留劑型，有些老字號產(chǎn)品仍然具有市場。v 各種性質(zhì)的軟膏類v 中藥噴霧劑、酊劑、氣霧劑v 中藥凝膠貼劑（巴布劑）：處于研發(fā)與產(chǎn)業(yè)化形成階段v 中藥貼劑：基質(zhì)輔料國產(chǎn)化研發(fā)（國外藥用基質(zhì)成熟）中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 要解決的關(guān)鍵問題要解決的關(guān)鍵問題：v 橡膠膏的刺激性、過敏性，生物相容性。v 黑膏藥的環(huán)境、

4、重金屬、使用不便、污染衣物v 壓敏膠的基質(zhì)、載藥量，藥物的相容性問題。v 巴布劑的粘彈性、標(biāo)準(zhǔn)化、產(chǎn)業(yè)化問題v 經(jīng)皮促滲方法和技術(shù)問題中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 關(guān)鍵技術(shù)：關(guān)鍵技術(shù)：v橡膠膏橡膠膏：依據(jù)天然橡膠為基礎(chǔ)的橡皮膏的結(jié)構(gòu)特點，進(jìn)行聚合和改構(gòu)研究，對新型橡膠膏基質(zhì)性能進(jìn)行評價和結(jié)構(gòu)優(yōu)化，同時對中藥橡膠膏的關(guān)鍵技術(shù)工藝及設(shè)備進(jìn)行系統(tǒng)研究，北京化工大學(xué)張軍營教授已經(jīng)進(jìn)行了SIS熱熔壓敏膠在橡膠膏中的開發(fā)和ESIS熱熔壓敏膠的試驗工作。v中藥貼劑中藥貼劑：從壓敏膠的改性方面進(jìn)行有成效的研究，并向產(chǎn)業(yè)化推廣。v中藥巴布劑：中藥巴布劑：基于復(fù)合型通用輔料及成型技術(shù)，解決目前存在的粘性不足問題、規(guī)

5、范制劑標(biāo)準(zhǔn)問題，產(chǎn)業(yè)化問題。（重點介紹）v經(jīng)皮促滲方法問題經(jīng)皮促滲方法問題：化學(xué)促滲、物理促滲、中藥揮發(fā)油促滲、載體促滲中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所課題支持課題支持v 國家國家“863863計劃、計劃、”“”“十一五十一五”支撐計劃項支撐計劃項目目 v “國家重大新藥創(chuàng)制國家重大新藥創(chuàng)制”- -綜合性中藥新藥開綜合性中藥新藥開發(fā)技術(shù)大平臺發(fā)技術(shù)大平臺v “國家重大新藥創(chuàng)制國家重大新藥創(chuàng)制”- -生產(chǎn)過程控制技術(shù)生產(chǎn)過程控制技術(shù)平臺平臺 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 總體目標(biāo)總體目標(biāo)v以萸連巴布劑為模型藥，以萸連巴布劑為模型藥，完成中藥凝完成中藥凝膠膏劑（巴布劑）的適宜性研究。膠膏劑（巴布劑）的適宜性研

6、究。v建立與完善中藥巴布劑技術(shù)參數(shù)并形建立與完善中藥巴布劑技術(shù)參數(shù)并形成共性技術(shù)。成共性技術(shù)。v建立中藥巴布劑綜合評價體系。建立中藥巴布劑綜合評價體系。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所研究內(nèi)容研究內(nèi)容v 1 1、文獻(xiàn)資料的調(diào)研、文獻(xiàn)資料的調(diào)研v 2 2、模型藥分析方法研究、模型藥分析方法研究v 3 3、模型藥、模型藥萸連巴布劑的提取、精制工藝研究萸連巴布劑的提取、精制工藝研究v 4 4、基質(zhì)輔料的適宜性研究基質(zhì)輔料的適宜性研究v 5 5、制備工藝關(guān)鍵技術(shù)的適宜性研究制備工藝關(guān)鍵技術(shù)的適宜性研究v 6 6、影響因素研究、影響因素研究v 7 7、綜合評價體系的適宜性綜合評價體系的適宜性v 8 8、中試驗證

7、、中試驗證中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所二、共性技術(shù)的適宜性中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 （一）模型藥的提取與精制工藝研究（一）模型藥的提取與精制工藝研究v 1 1、文獻(xiàn)調(diào)研：、文獻(xiàn)調(diào)研：查閱文獻(xiàn)二百余篇，發(fā)表“中藥巴布劑的研究思路與方法”和“中藥提取工藝綜述”兩篇綜述文章。v 2 2、萸連處方藥預(yù)選：、萸連處方藥預(yù)選：v 萸連處方由吳茱萸、黃連、木香組成。確定黃連藥材的產(chǎn)地為四川綿陽，鹽酸小檗堿的含量為：7.19%，巴馬丁的含量為：1.89%，符合藥典規(guī)定。確定貴州產(chǎn)吳茱萸，其吳茱萸堿、次堿總含量1.741%。符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 表表1 不同來源黃連藥材有效成分含量不同來源黃連藥材

8、有效成分含量樣品鹽酸巴馬汀含量%鹽酸小檗堿含量%含量和% 黃連藥材四川11.444.125.56黃連藥材黃連藥材四川綿陽四川綿陽21.897.199.08黃連藥材 四川雅安31.657.288.93中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所表表2不同產(chǎn)地吳茱萸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量比較不同產(chǎn)地吳茱萸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量比較產(chǎn)地藥材名稱吳茱萸堿含量（）吳茱萸次堿含量（）堿和次堿之和（）廣西吳茱萸0.1120.1100.222四川吳茱萸0.466浙江小花吳茱萸0.0970.0590.156湖南小花吳茱萸0.2450.1440.389江西（樟樹）中花吳茱萸0.1620.1000.262湖北（陽新）中花吳茱萸

9、0.1720.1070.280湖南（新晃）中花吳茱萸0.3050.1330.438貴州貴州吳茱萸吳茱萸1.2711.2710.4430.4431.7141.714中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 3、提取方法的選擇、提取方法的選擇 ：單因素比較：單因素比較：分提與合提的比較，選擇分提。v 4、提取條件的選擇（正交設(shè)計）、提取條件的選擇（正交設(shè)計）v 黃連醇提條件的優(yōu)選黃連醇提條件的優(yōu)選:用70%乙醇、提取3次，每次1.5小時。（正交設(shè)計） v 吳茱萸、木香提取條件的優(yōu)選：吳茱萸、木香提取條件的優(yōu)選： 提取揮發(fā)油后80%乙醇，提取3次，每次1.5小時。（正交設(shè)計） 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 5 5、

10、不同純化方法的藥效學(xué)比較、不同純化方法的藥效學(xué)比較v 離心純化：水提液離心v 酸沉淀純化： 70%乙醇提取，回收乙醇，加沸水溶解，攪拌過濾，濾液加HCL調(diào)PH1-2，過濾，濃縮、干燥得。 v 大孔樹脂吸附純化v 三種純化方法制備巴布膏樣品，與原口服給藥途徑平行設(shè)組，以對實驗性大鼠胃潰瘍的影響為指標(biāo)，進(jìn)行藥效學(xué)比較.為工藝選擇提供依據(jù)。v 結(jié)論結(jié)論：選擇吳茱萸、木香提油后80%乙醇提取，黃連選擇醇提水溶后酸沉的工藝方法。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所1 基質(zhì)輔料的適宜性研究234結(jié)果 制備技術(shù)的適宜性研究影響因素的研究（二）（二）關(guān)鍵技術(shù)的適宜性研究中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所1、基質(zhì)輔料的適宜性研究、基

11、質(zhì)輔料的適宜性研究 輔料配方優(yōu)化輔料配方優(yōu)化 主要基質(zhì)輔料的作用主要基質(zhì)輔料的作用 驗證試驗驗證試驗中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 基質(zhì)輔料配方優(yōu)化基質(zhì)輔料配方優(yōu)化v 配方選擇配方選擇：以三種配方為基礎(chǔ)，包括：本課題已獲得的專利基質(zhì)配方；用于新藥研制的優(yōu)選基質(zhì)配方；新調(diào)制配方。最后確定了用于本課題研究的主體配方。v 對基質(zhì)配方的整合對基質(zhì)配方的整合：確定最佳配方，并對新型輔料的作用、不同功能輔料的選擇、工藝的優(yōu)化進(jìn)行了實驗研究。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 巴布劑基質(zhì)配方的優(yōu)化：擬對基質(zhì)處方中的賦形劑、保濕劑、溶劑的加入量進(jìn)行考察。實驗采用正交實驗設(shè)計進(jìn)行實驗，以感官指標(biāo)和初粘力綜合指標(biāo)對制備的巴布劑

12、基質(zhì)進(jìn)行評價。v 確定最佳工藝。即賦形劑比例為確定最佳工藝。即賦形劑比例為1：4：1.5，保濕劑用，保濕劑用量為量為45g，溶劑用量，溶劑用量40g。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所主要輔料對基質(zhì)的貢獻(xiàn)主要輔料對基質(zhì)的貢獻(xiàn)v 效應(yīng)面優(yōu)化法效應(yīng)面優(yōu)化法（Response-surface Design）包括了試驗設(shè)計、建模、檢驗?zāi)Ｐ秃线m性、因子效應(yīng)的評估、考察以及尋求因子最佳操作條件。其試驗設(shè)計中包含了因子分析、中心點和星點三部分設(shè)計內(nèi)容。v 效應(yīng)面優(yōu)化法兼顧考慮了因素與效應(yīng)之間線性或非線性關(guān)系，采用多元高次回歸函數(shù)模型作為估計的工具，將多因素試驗中因素與效應(yīng)指標(biāo)的相互關(guān)系進(jìn)行曲線擬合，并依此對函數(shù)的效應(yīng)

13、面和等高線圖進(jìn)行分析，研究因素與效應(yīng)值之間，因素之間的相互關(guān)系，并迅速找到各因素的最佳組合區(qū)域各因素的最佳組合區(qū)域。 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 主要影響因素的考察主要影響因素的考察：v 黏性劑的作用：粘性劑的品種、加入條件、加入量的選擇；v 骨架材料的作用：品種、加入條件、加入量的選擇；v 交聯(lián)劑的作用；v檢測方法檢測方法v 初黏力：采用滾球平面停止法滾球平面停止法，滾球從斜面上滾下，經(jīng)過水平放置的巴布膏表面，測定滾球在巴布膏膏面的滾動距離，判定巴布膏的黏性大小。滾球直徑1.82 cm，重量24.86 g，滾動距離越小，黏性越大。每個樣品測定10次，以平均值計算。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所實驗

14、方法與結(jié)果實驗方法與結(jié)果v 多元線性回歸： Y = 13.392 - 0.847X1 + 2.500X2 - 0.830X3 R2 = 0.661v 二次多項式回歸模型： Y = 24.135 - 4.186X1 - 4.796X2 - 4.160X3 - 0.333X1X2 + 0.300X1X3 + 1X2X3 + 0.362X12 + 21.479X22 + 0.291X32 R2 = 0.977，Adj-R2 = 0.947v 簡化模型及其方差分析表簡化模型及其方差分析表v Y = 24.244 - 4.414X1 + 2.500X2 - 4.205X3 + 0.300X1X3 + 0

15、.395X12 + 0.309X32 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所項目B0B1B2B3B13B11B33估計值24.244- 4.4142.500- 4.2050.3000.3950.309標(biāo)準(zhǔn)差1.1590.7251.4170.5430.0530.1140.064t20.914-6.0921.764-7.7395.6813.4484.807P0.0000.0000.1080.0000.0000.0060.001R2 = 0.970，Adj-R2 = 0.952簡化處理后的二項式各系數(shù)及其顯著性檢驗表簡化處理后的二項式各系數(shù)及其顯著性檢驗表中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所方差來源方差和自由度均方差FP模型

16、64.997610.83353.9530.0001殘差2.008100.201總誤差67.00516R2=0.970，Adj-R2=0.952擬合模型方差分析表擬合模型方差分析表中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 由上表方差分析可以看出，F(xiàn)回歸=53.953，P=0.0001，表明模型高度顯著；模型的調(diào)整確定系數(shù)（Adj R-Squared）Adj-R2=0.952，說明該模型能解釋95.2%響應(yīng)值的變化，該模型的擬合程度良好，實驗誤差小，用該模型可以對巴布劑處方進(jìn)行分析和預(yù)測。從上面簡化后各系數(shù)的顯著性檢驗看，模型一次項X1、X3；交互項X1X3；二次項X12、X32（P0.01）都具有極顯著性，一

17、次項X2（P=0.108）有一定的影響，但無顯著性。其他項對結(jié)果影響不大。v 通過對結(jié)果的分析可以看出，黏性劑通過對結(jié)果的分析可以看出，黏性劑P和骨架材料和骨架材料C的用量對滾球的用量對滾球的滾動距離具有明顯的影響。二者用量的增加能夠顯著增加巴布的滾動距離具有明顯的影響。二者用量的增加能夠顯著增加巴布劑的黏性，使得滾球距離的減小。劑的黏性，使得滾球距離的減小。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 模型三因素趨勢圖 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所粘性劑粘性劑P和交聯(lián)劑對滾球距離的影響等高線圖及三維曲面圖和交聯(lián)劑對滾球距離的影響等高線圖及三維曲面圖v粘性劑增加，交聯(lián)劑減少，滾球距離減小。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所粘性

18、劑粘性劑P和骨架材料和骨架材料C對滾球距離的影響等高線圖及三維曲面圖對滾球距離的影響等高線圖及三維曲面圖隨著粘性劑用量與骨架材料用量的增加，滾球滾動的距離明顯減小。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所骨架材料骨架材料C和交聯(lián)劑對滾球距離的影響等高線圖及三維曲面圖和交聯(lián)劑對滾球距離的影響等高線圖及三維曲面圖隨著骨架材料用量的增加和交聯(lián)劑用量的減少，滾球滾動的距離明顯減小。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 上圖顯示：交聯(lián)劑的影響不顯著，尚未達(dá)到能夠顯著影響巴布膏黏性的用量水平。交聯(lián)劑使用的目的，是使其與黏性劑粘性劑P和骨架材料C產(chǎn)生交聯(lián)，增強(qiáng)巴布劑基質(zhì)的粘彈性。過量的交聯(lián)劑會急劇的增加基質(zhì)的內(nèi)聚力，而使得基質(zhì)黏性的

19、消失。交聯(lián)劑的加入在不影響粘性的情況下，增強(qiáng)了膏體的內(nèi)聚力是最佳的。v 結(jié)果結(jié)果：綜合以上分析，在三維曲面上選取表面黏性較大的處方組合區(qū)域，確定了最佳用量。將其數(shù)值帶入上述模型，得預(yù)測值為：Y = 5.82 cm。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所驗證試驗結(jié)果表驗證試驗結(jié)果表編號滾動距離（cm）實驗均值預(yù)測值偏差15.65.565.820.2625.635.5中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所2 2、制備工藝的適宜性研究、制備工藝的適宜性研究基質(zhì)成型工藝研究v 基質(zhì)成膠條件基質(zhì)成膠條件A：通過成型工藝條件的選擇，調(diào)整輔料添加順序，高分子材料復(fù)配，達(dá)到成膠條件，并完成巴布劑成型過程。制成膏體可以貼敷，不沾皮膚。v

20、基質(zhì)成膠條件基質(zhì)成膠條件B：基質(zhì)輔料中加入適量交聯(lián)劑，使高分子材料形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，膏體內(nèi)聚力強(qiáng)，不爛膏，選擇交聯(lián)劑的加入方式和適宜的量。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v制劑成型工藝研究v 中藥用于臨床多以復(fù)方的形式，中藥外用貼膏劑又以大復(fù)方居多，藥味多成分復(fù)雜，提取方法各異。中藥浸膏、中藥外用藥中揮發(fā)性成分等對成型的影響十分重要。因此，基質(zhì)成型后，制劑的成型也不容忽視。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所3、影響因素的研究影響因素的研究 交聯(lián)劑的影響交聯(lián)劑的影響v 研究表明，交聯(lián)劑的加入對巴布劑基質(zhì)的涂展性涂展性、黏性黏性以及基質(zhì)基質(zhì)的狀態(tài)的狀態(tài)有比較大的影響，交聯(lián)劑的用量越大，交聯(lián)的速度越快，基質(zhì)的表面黏性越小

21、。實驗選用5種常用的交聯(lián)劑氯化鈣、硫酸鋅、氯化鋁、甘氨酸鋁和復(fù)合鋁鹽，交聯(lián)劑用量根據(jù)品種不同采用常用量，以初粘力和感官指標(biāo)綜合評價，選擇適合本基質(zhì)處方的交聯(lián)劑。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 膏體流變學(xué)特性對工藝參數(shù)的影響膏體流變學(xué)特性對工藝參數(shù)的影響v 對于巴布劑基質(zhì)特性的研究，目前多涉及到膏體表面的物理性狀的描述。而對于其膏體在受到外力作用、溫度變化等情況下的內(nèi)在變化較少研究。本實驗采用高粘度流變儀，測定了巴布劑基質(zhì)的一些流變學(xué)性質(zhì)及工藝條件對膏體流變學(xué)特性的影響， 用以指導(dǎo)工藝參數(shù)的確定。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 初步結(jié)論初步結(jié)論：巴布劑粘彈性及模量受溫度影響非常大，即常溫時交聯(lián)度越大，樣

22、品強(qiáng)度越大；因此，對于巴布劑來說，在50以上時巴布劑基質(zhì)的流動性最好，適宜于混合攪拌和涂布。涂布中需要保持50以下溫度。v 從實驗結(jié)果也可以看出，樣品的溫度逐漸升高，可以看出樣品的粘彈性及模量的變化情況；溫度上升到80后開始降溫，樣品的粘彈性和模量逐漸恢復(fù)。樣品的粘彈性和儲能模量可以恢復(fù)至原來水平。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 剪切應(yīng)力測試101102103104PaGG101001,00010,000100,000Pa剪 切 應(yīng) 力 RheoplusAnton Paar GmbHShear stress sweep 2PP25-SN8954; d=1 mmG儲能模量G損耗模量Shear stre

23、ss sweep 3PP25-SN8954; d=1 mmG儲能模量G損耗模量Shear stress sweep 4PP25-SN8954; d=1 mmG儲能模量G損耗模量1101001,00010,000Pa 101001,00010,000Pas 0204060801001/s剪 切 速 率 .RheoplusAnton Paar GmbHFlow curve 1PP25-SN8954; d=1 mm剪切應(yīng)力粘度Flow curve 2PP25-SN8954; d=1 mm剪切應(yīng)力粘度Flow curve 3PP25-SN8954; d=1 mm剪切應(yīng)力粘度剪切速率的掃描測試-1-0.

24、500.511.522.533.544.55% 100101Pas| *|01002003004005006007008009001,000sTime tRheoplusAnton Paar GmbHBase plus Medicine(Creep) 2PP25; d=1 mmStrain|*|Complex ViscosityBase (Creep) 4PP25; d=1 mmStrain|*|Complex Viscosity100200300400500600700800900Pas| *|05001,0001,5002,0002,5003,0003,5004,0004,5005,000

25、5,5006,000PaGG203040506070C溫 度 TRheoplusAnton Paar GmbHTemperature sweep 1PP25-SN8954; d=1 mm|*|復(fù)數(shù)粘度G儲能模量G損耗模量Temperature sweep 2PP25-SN8954; d=1 mm|*|復(fù)數(shù)粘度G儲能模量G損耗模量剪切力消失后的恢復(fù)溫度掃描測試中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 溫度降低后的恢復(fù)05001,0001,5002,0002,5003,0003,5004,0005,000PaGG050100150200250300350400450500550600700Pas| *|20304

26、050607080CTemperature TG, G = f ( T )Anton Paar GmbHBase plus Medicine (Temperature) 1PP25; d=1 mmGStorage ModulusGLoss Modulus|*|Complex Viscosity.溫度升高對樣品的粘彈性等物理特性并沒有產(chǎn)生破壞性，溫度降低，樣品的性能能夠隨之恢復(fù)。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所結(jié)果與討論結(jié)果與討論 巴布劑具有復(fù)雜的流變學(xué)特性。在剪切速率、剪切應(yīng)力、溫度變化下樣品的粘彈性、流動性變化明顯，這對于巴布劑的生產(chǎn)、使用具有明顯的意義。巴布劑制備中需要良好的流動性能，以利于各種材

27、料及藥物的混合均勻，這個在增強(qiáng)剪切、升高溫度下可以實現(xiàn)；在巴布劑的儲藏、使用中所需要的粘彈性能，隨著剪切的結(jié)束、溫度的降低，結(jié)構(gòu)逐漸成型，滿足使用的要求。巴布劑流變學(xué)的測試結(jié)果，為巴布劑的生產(chǎn)與質(zhì)量控制、使用提供了條件與參數(shù)依據(jù)。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所3、結(jié)果、結(jié)果v 經(jīng)過一系列實驗研究，確定了v 1.確定了主模型藥-萸連巴布劑的提取、純化工藝；v 2.確定了成型工藝條件和具體工藝參數(shù)；v 3.對主要基質(zhì)材料在配方中的作用進(jìn)行了研究和進(jìn)一步的優(yōu)化。v 4.完善了巴布劑技術(shù)平臺，使該技術(shù)對各種藥物具廣泛的共溶性，可滿足經(jīng)皮給藥的臨床應(yīng)用要求，具有粘彈性好，載藥量大，刺激性、過敏性小，保濕、透氣

28、、抗老化的特點，并且可反復(fù)揭貼，解決了長期以來中藥巴布劑粘性差、生產(chǎn)周期長，制劑工藝條件不易控制的關(guān)鍵問題。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 三、生產(chǎn)過程的適宜性中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 1、中試量、中試量：首先對主模型藥萸連巴布膏進(jìn)行三批中試驗證試驗，每批5000-10000帖的考察。v 2、工藝參數(shù)、工藝參數(shù)：將實驗室優(yōu)化的技術(shù)參數(shù)應(yīng)用到中試生產(chǎn)中，包括：提取與純化工藝參數(shù)屬于中藥一般性工藝，與其它制劑的要求相當(dāng)，不另行規(guī)定；浸膏濃縮中要求相對密度，歸到浸膏參數(shù)項下；中藥浸膏入藥參數(shù)：浸膏濃度：相對密度1.25-1.35（50測），浸膏細(xì)度：需過100目以上篩，揮發(fā)油可最后直接加或環(huán)糊精包合物入

29、藥。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 四、評價系統(tǒng)的適宜性四、評價系統(tǒng)的適宜性中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所安全性安全性中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所1 1、建立分析方法、建立分析方法v 建立了黃連中鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的HPLC含量測定。v 建立了吳茱萸堿、次堿HPLC含量測定方法。v 建立了能在一次進(jìn)樣中同時完成樣品中吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀和小檗堿四個成分含量測定的HPLC分析方法，并進(jìn)行了方法學(xué)研究。結(jié)果表明，方法可行，滿足定量分析要求，且簡單、快捷，大大減少了分析工作量。并用于體內(nèi)外的透皮吸收的含量測定中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所2 2、透皮吸收效果評價、透皮吸收效果評價v接收液含量測定方法學(xué)研究（H

30、PLC）v釋放度釋放度v釋放度與透皮實驗研究釋放度與透皮實驗研究中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所萸連巴布劑釋放度評價萸連巴布劑釋放度評價v 采用改良的Franz擴(kuò)散池裝置，以萸連巴布膏中的吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿4種成分為指標(biāo)，以PEG-乙醇%-蒸餾水(1:3:6)為接收液，以小鼠皮膚為屏障，分別在0.5h、1、2、4、8、14、24小時時取樣，測定接收液中四種指標(biāo)成分的含量，計算累積釋放量Q，繪制其Q-T1/2曲線，考察其體外釋放行為；平行6個樣品，從結(jié)果來看6份樣品中4種指標(biāo)成分吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿24小時的累積釋放量和時間的平方根均有顯著的線性相關(guān)關(guān)系，符合Higuc

31、hi方程。v釋放度結(jié)果：24小時累積釋放百分率分別為：44.00%，65.54%，59.00%，44.70%。 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿的平均釋放度曲線（吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿的平均釋放度曲線（n=6） 吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿四種成分釋放度曲線吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿四種成分釋放度曲線 （n=6）中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 四種成分釋放度四種成分釋放度Q-T曲線圖曲線圖中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 四種成分釋放度四種成分釋放度Q-T1/2擬合曲線圖擬合曲線圖中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所體外透皮吸收研究體外透皮吸收研究v本實驗條

32、件同釋放度，以萸連巴布膏中的吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿4種成分為指標(biāo)，取已經(jīng)制備好的萸連巴布膏小貼，以PEG-乙醇%-蒸餾水為接收液。將半透膜換成鼠皮。v分別在0.5h、1、2、4、8、14、24小時時取樣，取樣時傾出全部接收液，然后再注入新鮮的接收液，測定接收液中四種指標(biāo)成分的含量，計算累積透皮量Q，繪制其Q-T曲線。v吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿4中指標(biāo)成分的體外經(jīng)皮滲透過程均符合零級過程。24小時累積透皮百分率分別為：10.97%，21.36%，11.18%，5.63%。v 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 吳茱萸堿、吳茱萸次堿、巴馬汀、小檗堿的平均透皮曲線（吳茱萸堿、吳茱萸次

33、堿、巴馬汀、小檗堿的平均透皮曲線（n=6）中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 四種成分四種成分Q-T體外累積透皮曲線圖體外累積透皮曲線圖中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所體內(nèi)藥動學(xué)研究體內(nèi)藥動學(xué)研究-黃連中有效成分黃連中有效成分v目的：觀察單次經(jīng)皮給萸連巴布劑后兔體內(nèi)的血藥濃度，通過計算確定藥代動力學(xué)參數(shù)，評價該制劑體內(nèi)經(jīng)皮滲透行為。v指標(biāo)成分：鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿。鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿。v方法：取家兔家兔6 6只只，于給藥前24h兔子背部脫毛1015cm，給藥前取0h的血，按12g生藥/kg 經(jīng)皮給藥，取萸連巴布劑膏均勻涂于兔脫毛區(qū)域，敷上塑料薄膜再用透明膠帶環(huán)繞固定8h，給藥后給藥后1h1h、2h2h、4

34、h4h、8h8h、12h12h、24h24h、48h48h取血取血。在兔耳緣靜脈處沿靜脈劃開一小口將血滴于肝素化試管中，3000 r/min 離心15min 。取血漿1ml于-20冰箱保存待用。v Waters系列高效液相色譜高效液相色譜儀系統(tǒng)，2487型雙波長紫外檢測器，Waters 1515-717自動進(jìn)樣系統(tǒng)， 進(jìn)行一系列方法學(xué)研究進(jìn)行一系列方法學(xué)研究。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 結(jié)論結(jié)論v 1，家兔經(jīng)皮給藥萸連巴布劑后，血漿中巴馬汀、小檗堿的藥-時曲 線符合一室模型。v 2，巴馬汀和小檗堿藥動學(xué)參數(shù)初步表明，滯后時間短、吸收速率快, 達(dá)峰時間短，藥物經(jīng)皮吸收迅速，可以較快發(fā)揮藥效作用。

35、v 3，萸連巴布劑經(jīng)皮給藥8h，巴馬汀和小檗堿的消除半衰期710h，平均駐留時間1315h，根據(jù)巴布劑經(jīng)皮給藥作用特點，延長給藥時間，可維持較長時間的有效血藥濃度，從而發(fā)揮長效作用。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所參數(shù)單位數(shù)值A(chǔ)KeKaLag timet1/2（ke）t1/2（ka）T（peak）C（max）AUCCL/F（s）V/F(c)ng/ml1/h1/hhhh hng/ml（ng/ml）*hg/kg/h/(ng/ml)g/kg/(ng/ml)153.89145.310.1120.0402.3932.9620.2770.5786.8422.2251.2121.1443.31642.49074.2

36、0832.8901097.85735.050.0170.0120.1450.074巴馬汀主要藥代動力學(xué)參數(shù)（巴馬汀主要藥代動力學(xué)參數(shù)（ xs）中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 萸連巴布劑給藥后巴馬汀藥-時曲線（n=6）中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所參數(shù)單位數(shù)值A(chǔ)KeKaLag timet1/2（ke）t1/2（ka）T（peak）C（max）AUCCL/F（s）V/F(c)ng/ml1/h1/hhhh hng/ml（ng/ml）*hg/kg/h/(ng/ml)g/kg/(ng/ml)1096.7621381.8080.1090.0854.71687.1960.7690.2309.9136.8201.015

37、1.0722.9112.259541.869367.3419120.7267227.4190.00250.00220.02580.0159小檗堿主要藥代動力學(xué)參數(shù)（xs） 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 萸連巴布劑給藥后小檗堿藥-時曲線（n=6） 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所藥動學(xué)試驗研究藥動學(xué)試驗研究- -吳茱萸堿、次堿吳茱萸堿、次堿 建立了同時測定血漿中吳茱萸堿、吳茱萸次堿HPLC方法。 通過方法學(xué)論證,吳茱萸堿和吳茱萸次堿最低檢測濃度分別為5ng/ml、15ng/ml、(S/N=3)(S/N=3) 。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所方方 法法v 取巴布劑膏1g（含吳茱萸堿：6.19mg/g膏，20.63

38、mg/kg，吳茱萸次堿：4.66 mg/g,15.53mg/kg，涂于大鼠背部去毛部位，面積約為25平方厘米，取0h、1h、4h、8h、12h、24h的大鼠血2ml分離血漿（每個時間點3只），按“樣品處理方法”處理后，進(jìn)樣 。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所結(jié)果結(jié)果：巴布膏大鼠經(jīng)皮給藥后，血中吳茱萸堿、吳茱萸次堿的藥時數(shù)據(jù)經(jīng)3p97軟件擬合后，符合一級吸收的一室開放模型。 巴布劑膏中吳茱萸堿的含量比吳茱萸次堿高，但是給藥后的C（max）、AUC值后者較高，說明吳茱萸次堿的經(jīng)皮吸收比吳茱萸堿好。與體外透皮實驗結(jié)果一致。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所吳茱萸堿的藥動學(xué)參數(shù)吳茱萸堿的藥動學(xué)參數(shù)參數(shù)參數(shù)單位單位數(shù)據(jù)數(shù)

39、據(jù)AKeKaLag timeT1/2（ka）T1/2（ke）T（peak）C（max）AUCCL/F（s） V/F（c）g/ml1/h1/hhhhhg/ml（g/ml）*hmg/kg/h/（g/ml）(mg/kg）/（g/ml）0.8685370.1143440.2240041.8499223.0943556.0619436.1321600.2108943.7184908.27486472.368111中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所吳茱萸次堿的藥動學(xué)參數(shù)吳茱萸次堿的藥動學(xué)參數(shù)參數(shù)參數(shù)單位單位數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)AKeKaLag timeT1/2（ka）T1/2（ke）T（peak）C（max）AUCCL/F（s

40、） V/F（c）g/ml1/h1/hhhhhg/ml（g/ml）*hmg/kg/h/（g/ml）(mg/kg）/（g/ml）1.218887 0.118484 0.2195921.3534733.1565275.8501126.1023140.2723474.7366234.600324 38.826397中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所吳茱萸堿和吳茱萸次堿藥吳茱萸堿和吳茱萸次堿藥- -時曲線時曲線 n=5n=500.050.10.150.20.250.30.350.40.450.50510152025t/h/gmL-1中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所3、藥效學(xué)評價抑制胃潰瘍抑制胃潰瘍 實驗以胃潰瘍面積、胃潰

41、瘍抑制率為指標(biāo)，萸連片藥粉為陽性藥，考察萸連巴布膏對大鼠實驗性胃潰瘍的抑制作用對大鼠實驗性胃潰瘍的抑制作用?？寡紫[抗炎消腫 實驗采用致炎劑交叉菜致炎的大鼠足爪腫脹模型大鼠足爪腫脹模型，以市售扶他林為陽性藥，考察萸連巴布膏的抗炎消腫作用。 鎮(zhèn)痛抗炎鎮(zhèn)痛抗炎 實驗以小鼠扭體次數(shù)以小鼠扭體次數(shù)，吸光度為指標(biāo)，以阿司匹林腸溶片為抗炎陽性藥，元胡止痛片為鎮(zhèn)痛抗炎陽性藥，通過小鼠扭體和通透性實驗，考察萸連巴布膏的抗痛、鎮(zhèn)炎作用。 中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所組別劑量g生藥/kg潰瘍指數(shù)潰瘍發(fā)生率%潰瘍抑制百分率%賦形劑對照-3.02.1690萸連口服組1.52.252.2263.625.0胃康靈1.32.2

42、72.2083.324.2外用大劑量12.02.52.077016.7中劑量6.03.02.26700小劑量3.03.332.4672.70萸連巴布膏對實驗性大鼠胃潰瘍的的影響萸連巴布膏對實驗性大鼠胃潰瘍的的影響中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所組別劑量（g生藥/kg）胃蛋白酶排出量（活性單位/h）PH值胃液體積(ml)賦形劑對照-44.7819.892.70.911.56.2萸連口服組1.568.9920.64*4.22.1*11.94.2胃康靈1.368.5822.854.61.8*9.43.5外用大劑量12.069.7022.13*4.11.715.24.4中劑量6.094.8836.03*2.4

43、0.618.26.0*小劑量3.064.3219.702.61.212.35.1萸連巴布膏對實驗性大鼠胃潰瘍胃液的影響萸連巴布膏對實驗性大鼠胃潰瘍胃液的影響中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所組別劑量（g生藥/kg）吸光度（A）扭體次數(shù)抑制率（%）賦形劑-0.4060.05230.06.4-元胡止痛組13.2（片）-13.19.0*56.33阿司匹林組0.250.2590.022*-口服連萸組3.00.3320.05721.610.2*28.0外用1.5g生藥/kg1.50.3720.11422.08.0*26.673.0g生藥/kg3.00.3470.14110.210.666.16.0g生藥/kg6.

44、00.2980.095*15.512.7*48.3312.0g生藥/kg12.00.2650.099*14.69.3*51.48萸連巴布膏對小鼠抗炎鎮(zhèn)痛作用的影響萸連巴布膏對小鼠抗炎鎮(zhèn)痛作用的影響（XSD ,n=10）中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所組別劑量g/kg腫脹度（ml）0.5h1h2h4h6h對照組0.1180.0640.1890.0590.1970.0780.2590.0780.2620.074口服萸連粉2.10.0530.058*0.0720.086*0.2050.0600.2050.0870.2680.068扶他林組50.10800630.1040.054*0.1370.0910.13

45、90.091*0.1410.075*大劑量120.1330.0830.1510.0380.1570.0500.2520.0970.2420.128中劑量60.0760.0680.0820.048*0.0860.069*0.1390.038*0.1430.076*小劑量30.0700.0610.1100.082*0.0950.070*0.1620.094*0.1500.086抗炎消腫實驗結(jié)果抗炎消腫實驗結(jié)果中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所組別劑量g/kg抑 制 率（%）0.5h1h2h4h6h對照組-10.4515.2818.0723.4923.04口服萸連粉2.158.6959.449.4823.15

46、1.60扶他林組548.8956.5249.8357.3258.38大劑量128.046.9924.277.445.42中劑量646.6962.8764.3155.2450.06小劑量341.7645.3357.7841.7443.53萸連巴布膏對角叉菜膠致大鼠足趾腫脹抑制率的影響萸連巴布膏對角叉菜膠致大鼠足趾腫脹抑制率的影響中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v結(jié)論結(jié)論v 藥效學(xué)實驗研究結(jié)果表明，萸連巴布膏具有明顯的抑制胃潰瘍，鎮(zhèn)痛抗炎和消腫的作用，證明萸連巴布膏具有與口服給藥相同的藥理作用。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 4 4、安全性評價、安全性評價主要內(nèi)容: 過敏性實驗 刺激性實驗中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究

47、所刺激性實驗刺激性實驗v 觀察外用藥萸連巴布劑對家兔完整皮膚及破損皮膚所產(chǎn)生的局部刺激反應(yīng)及其程度，為臨床的安全用藥提供科學(xué)依據(jù)。本試驗采用萸連巴布劑給家兔完整皮膚和破損皮膚單次和多次給藥，劑量為710cm2/只/次。以行為活動、外觀特征、體重、水腫及紅斑為指標(biāo)，進(jìn)行實驗研究。v 結(jié)果顯示，結(jié)果顯示，單次給藥，完整皮膚和破損皮膚組均未出現(xiàn)紅斑、水腫等刺激反應(yīng)，平均積分值為0；連續(xù)給藥，完整皮膚組動物及破損皮膚組均未見紅斑或水腫，平均積分值均為0； 說明，萸連巴布劑對家兔完整皮膚、破損皮膚均無刺激性。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所過敏性實驗過敏性實驗v 觀察萸連巴布劑是否會導(dǎo)致豚鼠皮膚出現(xiàn)過敏反應(yīng)，為

48、臨床安全用藥提供依據(jù)。以一般指標(biāo)（籠旁觀察、豚鼠體重測量）、2，4-二硝基致敏的紅斑、水腫為指標(biāo)，結(jié)果給藥后，豚鼠的體重增長與對照組比較無明顯差異，一般觀察指標(biāo)無明顯異常，皮膚未出現(xiàn)過敏反應(yīng)。而陽性對照藥2,4二硝基氯代苯明顯引起豚鼠皮膚過敏反應(yīng)。v 實驗證明實驗證明：萸連巴布劑不會引起豚鼠皮膚的過敏反應(yīng)結(jié)果給藥后，豚鼠的體重增長與對照組比較無明顯差異，一般觀察指標(biāo)無明顯異常，皮膚未出現(xiàn)過敏反應(yīng)。而陽性對照藥2,4二硝基氯代苯明顯引起豚鼠皮膚過敏反應(yīng)。萸連巴布劑不會引起豚鼠皮膚的過敏反應(yīng)。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所5 5、質(zhì)量評價、質(zhì)量評價 主要內(nèi)容主要內(nèi)容v 藥材標(biāo)準(zhǔn)的制定v 薄層鑒別v HP

49、LC 法測定萸連巴布膏的含量中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所藥材標(biāo)準(zhǔn)藥材標(biāo)準(zhǔn)：黃連黃連v 測定湖南、四川、云南三個產(chǎn)地的黃連藥材中鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。v 暫定黃連藥材中鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量總和不得少于4.0%。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所吳茱萸吳茱萸v 對湖南、四川兩個產(chǎn)地吳茱萸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量測定，結(jié)果均符合藥典規(guī)定。v 參照藥典標(biāo)準(zhǔn)，暫定吳茱萸藥材中吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量總和不得少于0.15%。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所1黃連的鑒別3木香的鑒別2吳茱萸的鑒別薄層鑒別中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 黃連：參考2005版中國藥典一部方法。結(jié)果供試品與對照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏

50、色的斑點，陰性無干擾。黃連的鑒別圖譜1，2 ，3 供試品 4：黃連對照藥材 5 黃連空白中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v吳茱萸：參考2005版中國藥典方法。結(jié)果供試品與對照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。吳茱萸的鑒別圖譜1，2 ，3 供試品 4：吳茱萸對照藥材 5 吳茱萸空白中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v 木香：參照藥典的方法，未取得較好的結(jié)果。后改用甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸 (10：1：0.1)為展開劑展開,預(yù)飽和30分鐘。結(jié)果供試品色譜在與對照藥材相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。木香的鑒別圖譜1，2 ，3 供試品 4：木香對照藥材 5 木香空白中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所萸連巴

51、布膏的含量測定方法研究v 供試品溶液的制備v 方法學(xué)考察v 萸連巴布膏含量限度的制定中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所樣品名稱標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍（g）R吳茱萸堿Y=2E+06x-2368.50.01088-0.5440.9997吳茱萸次堿Y=2E+06x-5808.10.0088-0.440.9998鹽酸巴馬汀Y=2E+06x-323140.0288-1.440.9993鹽酸小檗堿Y=2E+06x-299180.2896-4.480.9999回歸方程與線性范圍中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v精密度試驗 吳茱萸堿、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的RSD分別為1.66%、1.86%、1.

52、30%、1.54%，均符合精密度實驗的要求，說明該方法的精密度良好。v重復(fù)性試驗 吳茱萸堿、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿的RSD分別為0.77%、0.75%、1.72%、1.22%，均符合重復(fù)性實驗的要求，說明該方法的重復(fù)性良好。v穩(wěn)定性試驗 吳茱萸堿、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿RSD分別為0.67%、1.5%、1.64%、1.80%，說明吳茱萸堿、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿在24小時的穩(wěn)定性良好。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所v空白試驗空白試驗v 按照藥品成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案【制法】項下方法，制備陰性樣品，按照含量測定項下條件測定。結(jié)果表明復(fù)方萸連巴布膏的陰性樣品，在吳茱萸堿、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿相應(yīng)的位置未出現(xiàn)色譜峰，表明陰性樣品無干擾。中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所 回收率回收率v 取已知含量的萸連巴布劑，分別加入?yún)擒镙菈A、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿對照品，按上述色譜條件進(jìn)行測定，計算回收率。v 結(jié)果吳茱萸堿、吳茱萸次堿、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的平均回收率分別：101.8%、97.0%、97.8%、101.3%，