1、目錄抗菌藥物的作用機(jī)制抗菌藥物的作用機(jī)制常用抗菌藥物簡介常用抗菌藥物簡介真菌微生物檢驗的操作流程真菌微生物檢驗的操作流程2013年年CHINET細(xì)菌耐藥監(jiān)測情況細(xì)菌耐藥監(jiān)測情況一.細(xì)菌的分類與命名 細(xì)菌的分類：1.以細(xì)菌的形態(tài)和生理生化特征為依據(jù)的分類2.用化學(xué)分析和核酸分析，以細(xì)菌大分子物質(zhì)（核酸，蛋白質(zhì)）結(jié)構(gòu)的同源程度進(jìn)行分類 分類等級：界，門，綱，目，科，屬，種 細(xì)菌分類系統(tǒng)：國際上普遍采用伯杰分類系統(tǒng) 現(xiàn)在使用的是伯杰鑒定細(xì)菌學(xué)手冊第9版 革蘭氏陰性菌 革蘭氏陽性菌臨床常見的致病菌 G+：金葡菌、表皮葡萄球菌、溶血鏈球菌（草綠色鏈球菌等）,型溶血鏈球菌（A組和B組),非溶血性鏈球菌、肺

2、炎鏈球菌、腸球菌屬，產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌等。 G-菌: 奈瑟球菌、不動桿菌屬（鮑曼不動桿菌、洛菲不動桿菌） 、假單胞菌屬（銅綠假單胞菌和其他）、布魯菌屬、百日咳桿菌、軍團(tuán)菌屬，腸桿菌科細(xì)菌（大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、變形桿菌屬、腸桿菌屬、傷寒沙門菌、沙門菌屬、志賀菌屬、鼠疫桿菌等） 、流感嗜血桿菌，脆弱擬桿菌、核酸桿菌，破傷風(fēng)芽孢桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、肉毒桿菌、艱難梭菌，弧菌科，結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌。 其他病原微生物：放線菌屬、諾卡菌屬，立克次體屬、支原體屬、衣原體屬、各種病毒、某些原蟲（瘧原蟲、弓形體等）和各種真菌等。二.細(xì)菌微生物檢驗的一般操作流程 標(biāo)本的采集與處理 標(biāo)本的顯微鏡檢查（細(xì)

3、菌的形態(tài)檢查） 細(xì)菌的分離培養(yǎng)與接種 細(xì)菌的鑒定（生化反應(yīng)，血清學(xué)鑒定等，不常見的細(xì)菌會用到細(xì)菌自動鑒定儀) 藥敏試驗 向臨床發(fā)送報告臨床標(biāo)本采集與處理標(biāo)本采集的一般原則：1.早期：病程早期，急性期，未使用抗菌藥物之前2.無菌：要確保無污染菌3.根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集：例如，尿液標(biāo)本，疑為厭氧菌感染，要用無菌注射器行膀胱穿刺術(shù)抽取尿液4.采集適量的標(biāo)本（血培養(yǎng)瓶大人5-10ml,兒童1-3ml)5 .注意自身安全常見標(biāo)本的采集 血液標(biāo)本：嚴(yán)格無菌操作，用0.5%的碘伏消毒瓶蓋和靜脈采血部位（先注入需氧瓶，后注入?yún)捬跗浚坏梅湃氡?，?yīng)立即送檢。 尿標(biāo)本：囑咐病人留取早晨清潔中段尿,

4、留尿前應(yīng)仔細(xì)清洗會陰部，將前段尿排去，中段尿留取約10-20ml，直接排入專用的無菌杯中。 痰標(biāo)本：（漱口）晨痰為佳，用力咳出呼吸道深部的痰，吐入無菌標(biāo)本杯。應(yīng)大于1ml。 糞便標(biāo)本：采集膿血，粘液部分2-3g,外觀無異常的大便應(yīng)從不同部位取材，放入無菌杯中。標(biāo)本的處理 標(biāo)本的處理：對環(huán)境敏感的細(xì)菌（如腦膜炎奈瑟菌 ，淋病奈瑟病等應(yīng)保溫并立即送檢）。其他標(biāo)本最好在采集后2h內(nèi)送檢。若不能及時送檢，標(biāo)本應(yīng)在一定環(huán)境下保存，如支氣管洗液，心包液，痰，尿等標(biāo)本應(yīng)在保存在4環(huán)境中。標(biāo)本的顯微鏡檢查 1.不染色細(xì)菌標(biāo)本的檢查 2.細(xì)菌染色標(biāo)本的檢查： (1)革蘭染色：細(xì)菌學(xué)中最經(jīng)典，最常用的染色方法，可

5、將所有細(xì)菌分為GG（2）抗酸染色：大多數(shù)為非抗酸性細(xì)菌，所以只針對麻風(fēng)病，結(jié)核病的細(xì)菌檢查（3）熒光染色：敏感性強(qiáng)，效率高且容易觀察細(xì)菌的分離培養(yǎng)與接種 培養(yǎng)基的選擇1.血平板：適合各類細(xì)菌的生長，一般細(xì)菌檢驗標(biāo)本的分離，都接種此平。2.巧克力血平板：含V和X因子，適合苛養(yǎng)菌的生長，如嗜血桿菌，奈瑟菌，肺炎鏈球菌等。（大巧添加了萬古霉素，抑制了G+菌的生長。3.麥康凱平板：供分離發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌。（糞便）4.XLD:主要用于分離志賀氏菌屬，亦可用于分離沙門氏菌。（糞便）5.CLED:（胱氨酸乳糖無電解質(zhì)培養(yǎng)基）:無抑制性，用于泌尿系統(tǒng)致病菌的分離和培養(yǎng)（尿標(biāo)本的接種）6.羅氏培養(yǎng)基

6、：用于培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌。7.營養(yǎng)肉湯：各類標(biāo)本及細(xì)菌的增殖。各類培養(yǎng)基圖片各類培養(yǎng)基圖片細(xì)菌的接種 1平板劃線法：一般細(xì)菌的接種，及分純都使用此方法。 2.斜面接種法：用于單個菌落的純培養(yǎng)，保存或者觀察細(xì)菌的某些特性。 3.液體接種法 4.涂布接種法：常用于紙片法藥物敏感性試驗。細(xì)菌的鑒定細(xì)菌鑒定用到的各類生化反應(yīng)：1.糖類的發(fā)酵試驗2.七葉苷水解實驗3.吲哚試驗4硫化氫試驗5.枸櫞酸鹽試驗6.氧化酶試驗7.觸酶試驗8.凝固酶試驗等等.抗菌藥物敏感性試驗 3.E-text法：該方法結(jié)合擴(kuò)散法和稀釋法的原理和特點，操作簡便如擴(kuò)散法，但可以同稀釋法一樣直接定量測出藥物對待檢菌的MIC?？咕幬锩舾?/p>

7、性試驗 結(jié)果的測量科瑪嘉瓊脂培養(yǎng)基細(xì)菌分布情況 其中：腸桿菌科細(xì)菌占所有分離菌株的44.8 ， 其中最多見者依次為大腸埃希菌、 克雷伯菌屬、 腸桿菌屬、 變形桿菌屬； 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌占所有分離菌株的26.7 ， 其中最多見者依次為不動桿菌屬、 銅綠假單胞菌和嗜麥芽窄食單胞菌。32013年中國CHINET耐藥監(jiān)測菌種分布4二.腸桿菌科細(xì)菌的耐藥情況 腸桿菌科細(xì)菌 ： 大腸埃希菌、 克雷伯菌屬（ 肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌） 和奇異變形桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株的檢出率分別為54 、 31.8和16.5 。上述產(chǎn) ESBLs株對青霉素類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、喹諾酮類 ，甲氧啶 磺胺甲口 惡

8、唑的耐藥率均顯著高于非產(chǎn) ESBLs株。產(chǎn)酶大腸埃希對環(huán)丙沙星、慶大霉素和哌拉西林的耐藥率均接近或高于50 。腸桿菌科細(xì)菌對種碳青霉烯類的耐藥率仍然較低，不同菌種的耐藥率大多在10 以下。5 2012年中國CHINET碳青霉耐藥腸桿菌科細(xì)菌的分布特點和耐藥性分析 2012年 中 國CHINT細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)15所醫(yī)院臨床分離的CRE（ 對亞胺培南、 美羅培南和厄他培南中任一種耐藥者)，共1499株 分離自門急診患者138株(9.2),住院患者1361株（ 90.8 )不同種屬碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細(xì)菌對常用抗菌藥物耐藥率和敏感率對碳青霉耐藥腸桿菌科細(xì)菌敏感的相關(guān)藥物 藥敏結(jié)果顯示多黏菌素類，替加環(huán)素、 磷霉素和阿米卡星對CRE菌株有良好抗菌活性 。根據(jù)臨床研究資料， 上述抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用的療效均優(yōu)于單藥治療。采用的聯(lián)合給藥方案有黏菌素或氨基糖苷類( 主要為阿米卡星）聯(lián)合碳青霉烯類、黏菌素聯(lián)合替加環(huán)素或利福平、 氨基糖苷類聯(lián)合磷霉素。目前在耐藥革蘭陰性菌菌株不斷出現(xiàn)以及新抗菌藥物的研發(fā)進(jìn)展緩慢的形勢下， 一些傳統(tǒng)抗菌藥物的應(yīng)用價值得到重新評估， 如磷霉素對 MRSA、 PRSP 、CRE均有較高的敏感率 。參考文獻(xiàn) 胡付品,汪 復(fù)，孫自鏞，陳中舉等.2012年中國CHINET碳青霉烯類耐