1、精品文檔組培室設(shè)計(jì)規(guī)劃之藥品試劑配置篇在植物組織培養(yǎng)中，所使用的化學(xué)藥劑通常為化學(xué)試劑，根據(jù)它們的純度化學(xué)試劑可以分為優(yōu)級(jí)純(GR.)、分析純(AR.)、化學(xué)純(CP.)等規(guī)格。此外，還有工業(yè)專(zhuān)用、生化試劑等規(guī)格。在研究型的組織培養(yǎng)中，可以采用分析純或優(yōu)極純的藥劑，而在生產(chǎn)型的組織培養(yǎng)中，則可采用化學(xué)純或工業(yè)純的化學(xué)試劑。以MS培養(yǎng)基為例，其使用的常用化學(xué)藥劑如下：(1)硝酸鏤：亦稱(chēng)硝鏤。化學(xué)式為NH4NO3,式量為80.048,其純品為無(wú)色透明菱形結(jié)晶，比重1.73,易溶于水，并吸收大量的熱，在空氣中容易潮解。水溶液呈中性反應(yīng)。由于硝酸鏤是一種易燃、易爆物，因此在使用中應(yīng)該貯存在陰冷之處。已

2、經(jīng)結(jié)塊的硝酸鏤切忌敲打、撞擊，可用水進(jìn)行溶解。(2)硝酸鉀：亦稱(chēng)火硝?；瘜W(xué)式為KNO3,式量為101.104,其純品為無(wú)色透明的棱柱結(jié)晶，比重2.10,易溶于水，幾乎不溶于無(wú)水乙醇。(3)氯化鈣：亦稱(chēng)無(wú)水氯化鈣?；瘜W(xué)式為CaCl2,式量為110.99,其純品為白色結(jié)晶，比重2.15,在空氣中具強(qiáng)吸濕性，易溶于水同時(shí)放出大量的熱。(4)硫酸鎂：亦稱(chēng)瀉鹽。化學(xué)式為MgSO4?7H2O,式量為246.50,其純品為透明菱形結(jié)晶，比重1.68,具苦味，易溶于水，不溶于乙醇，在空氣中稍風(fēng)化。(5)磷酸二氫鉀：亦稱(chēng)磷酸鉀復(fù)合肥?；瘜W(xué)式為KH2PO4,式量為136.09,其純品為正方形無(wú)色結(jié)晶，比重2.33

3、,有較強(qiáng)的酸味，易溶于水，不溶于乙醇。溶液呈微酸性反應(yīng)。磷酸二氫鉀在96C時(shí)會(huì)溶化成透明的液體，這樣就會(huì)轉(zhuǎn)化為偏磷酸鉀，因此在使用時(shí)注意不要使它經(jīng)受高溫環(huán)境。(6)碘化鉀：化學(xué)式為KI,式量為166.02，其純品為透明的小塊結(jié)晶，比重3.115在干燥的空氣中穩(wěn)定，易溶于水，其水溶液在遇光后因析出游離碘而逐漸變黃。(7)硼酸：亦稱(chēng)正硼酸。化學(xué)式為H3BO3,式量為61.84,其純品為六角形白色鱗片狀結(jié)晶，具珠光，比重1.46,溶于水，易溶于乙醇，當(dāng)加熱至107C時(shí)會(huì)失去部精品文檔精品文檔分的水，而轉(zhuǎn)變?yōu)槠鹚帷Ｋ芤撼仕嵝苑磻?yīng)。(8)硫酸鎰：化學(xué)式為MnSO4?5H2O,式量為241.07,其純

4、品為紅色結(jié)晶，比重2.1,具金屬味，易溶于水，不溶于乙醇。在制備過(guò)程中，如果溶液在-46C間結(jié)晶時(shí)，可制成七水硫酸鎰(MnSO4?7H2O);在2040C間時(shí)，可獲得四水硫酸鎰(MnSO4?7H2O);在280C時(shí)加熱，帶有結(jié)晶水的硫酸鎰直至恒重，則可獲得無(wú)水硫酸鎰(MnSO4)。(9)硫酸鋅：亦稱(chēng)鋅磯。化學(xué)式為ZnSO4?7H2O,式量為287.55,其純品為無(wú)色菱形結(jié)晶，比重1.96,在干燥的空氣中會(huì)風(fēng)化，易溶于水，當(dāng)39C時(shí)溶于所含結(jié)晶水，并轉(zhuǎn)變?yōu)閆nSO4?6H2O。(10)鋁酸鈉：化學(xué)式為Na2MoO4,式量為241.98,其純品為無(wú)色結(jié)晶，溶于水。(11)硫酸銅：亦稱(chēng)膽磯。化學(xué)式為

5、CuSO4?5H2O,式量為249.71,其純品為深藍(lán)色結(jié)晶，比重2.29,具強(qiáng)烈的金屬味，易溶于水，在干燥的空氣中容易風(fēng)化，而變成白色粉末，即無(wú)水硫酸銅。水溶液呈弱酸性反應(yīng)。(12)氯化鉆：亦稱(chēng)氯化亞鉆?；瘜W(xué)式為CoCl2?6H2O,式量為372.26,其純品為紅色單斜結(jié)晶，比重1.84,在室溫下穩(wěn)定，極易溶于水，可溶于乙醇。在4552C時(shí)加熱，會(huì)逐漸變?yōu)镃oCl2?4H2O0(13)乙二胺四乙酸二鈉：化學(xué)式為Na2EDTA?2H2O,式量為372.26，其純品為白色結(jié)晶狀粉末，無(wú)味、無(wú)毒、可溶于水，容易和金屬離子形成絡(luò)合物。(14)硫酸亞鐵：亦稱(chēng)黑磯、鐵磯?；瘜W(xué)式為FeSO4?7H2O,式

6、量為278.02,其純品為淡綠色結(jié)晶，比重1.89,易溶于水，不溶于乙醇，在干燥空氣中風(fēng)化而變?yōu)榘咨勰?15)甘氨酸：亦稱(chēng)氨基醋酸、氨基乙酸。化學(xué)式為C2H5NO2,式量為75.07。純品為白色結(jié)晶性粉末。味甜，能溶于水，微溶于醇，幾乎不溶于醍。233C開(kāi)始分解。密封閉光保存。(16)肌醇：亦稱(chēng)環(huán)已六醇?；瘜W(xué)式為C6H12。6,式量為180.16。為構(gòu)建細(xì)胞壁的材料。它在離子平衡、磷脂代謝、碳水化合物合成等過(guò)程中起著重要的作用。(17)煙酸：亦稱(chēng)維生素B5?；瘜W(xué)式為C6H5NO2,式量為123.11。純品為無(wú)色針狀結(jié)晶。無(wú)氣味，在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇、不溶于醍、酯類(lèi)溶劑。熔點(diǎn)236C

7、。密封閉光保存。(18)鹽酸毗哆醇：亦稱(chēng)維生素B6、鹽酸毗哆素?；瘜W(xué)式為C8H12ClNO3,式量為精品文檔精品文檔205.64。純品為白色結(jié)晶。無(wú)氣味，在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。205212C分解。密封閉光保存。(19)鹽酸硫胺素：亦稱(chēng)維生素B1?；瘜W(xué)式為Ci2H17CiN4OS?HCl,式量為337.28。純品為白色結(jié)晶。在空氣中穩(wěn)定，能溶于水、乙醇，不溶于酸。密封閉光保存。(20)6-芳基腺喋吟：縮寫(xiě)為BA,亦稱(chēng)6-BA、普魯馬林。是一種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，化學(xué)式為C12H11N5,式量為225.26。純品為白色結(jié)晶，熔點(diǎn)235C,難溶于水，易溶于丙酮、乙醇等有機(jī)溶劑，在酸性介

8、質(zhì)中較為穩(wěn)定。其主要的生理作用為能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，誘導(dǎo)芽分化，延緩葉衰老，促進(jìn)細(xì)胞分裂。(21)蔡乙酸：縮寫(xiě)為NAA,亦稱(chēng)a-蔡乙酸、生長(zhǎng)素、1-蔡乙酸。是一種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，化學(xué)式為C12H10O2,式量為186.20。純品為白色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)133135C,沸點(diǎn)285C(分解)。在冷水中微溶，在熱水中易溶，易溶于冰醋酸、丙酮、乙醛等有機(jī)溶劑中。在空氣潮解，見(jiàn)光會(huì)變色。它有a和3兩種類(lèi)型，通常所說(shuō)的蔡乙酸指的是a型。其主要生理作用為能夠誘導(dǎo)根分化，防止器官脫落，誘導(dǎo)無(wú)籽果實(shí)，促使種子萌發(fā)等。(22)腺喋吟：縮寫(xiě)為AD,化學(xué)式為C5H5N5?3H2O,式量為189.13。純品為白色結(jié)晶性粉

9、末。在空氣中穩(wěn)定，微溶于水。它是合成細(xì)胞分裂素的前體，主要的生理功能為促進(jìn)細(xì)胞分裂。(23)赤霉酸：縮寫(xiě)為CA3,亦稱(chēng)激動(dòng)素，濫長(zhǎng)素、九二零等。是一種植物激素，純品為八面體雙錐形白色結(jié)晶，熔點(diǎn)233-235(分解)，難熔于水，其鉀鹽、鈉鹽易溶于水，易熔于丙酮、甲醇、乙醇。赤霉素的化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，但應(yīng)該在低溫環(huán)境下進(jìn)行貯藏，其水溶液不穩(wěn)定。其主要的生理作用為促進(jìn)細(xì)胞的伸長(zhǎng)，防止離層形成，能夠解除休眠。(24)蔗糖：化學(xué)式為C12H22O11,式量為342.30。純品為無(wú)色單斜型結(jié)晶、白色顆粒或晶體粉未。味甜，在空氣中穩(wěn)定，易溶于水，能溶于乙醇，可被稀酸水解為果糖、葡萄糖。在160-180C間分

10、解。密封保存。(25)瓊脂：亦稱(chēng)洋菜。是從石花菜等海藻中所提取的白色粘膠狀物質(zhì)，在熱水中能溶解，其溶液遇冷凝固，可用于配制培養(yǎng)基，作為外植體的支撐物。(26)肌醇：化學(xué)式為C6H12O6,式時(shí)為180.16。純品為白色結(jié)晶粉末，有甜味，在空氣中不潮解。溶于水，微溶于醇，熔點(diǎn)225-227C。密封保存。精品文檔精品文檔組培室設(shè)計(jì)規(guī)劃之儀器設(shè)備配置篇在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，根據(jù)所培養(yǎng)的植物種類(lèi)、生產(chǎn)規(guī)模，選擇合適的器材、設(shè)施是十分必要的，只有這樣才能確保整個(gè)操作過(guò)程的順利進(jìn)行。在器材、設(shè)施的選擇上，不要貪大求洋，應(yīng)該在其是否實(shí)用上多下功夫。在研究型的組織培養(yǎng)操作中，往往對(duì)器材、設(shè)施的要求較高；而在生

11、產(chǎn)型的組織培養(yǎng)中，則對(duì)器材、設(shè)施的要求卻較為粗放，因此管理者必須根據(jù)實(shí)際情況來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)器材、設(shè)施的遴選。在植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中，從外植體的采收到試管苗的定植都必須要在特定的環(huán)境中進(jìn)行，例如，培養(yǎng)基的配制要在專(zhuān)用的器材、設(shè)施中進(jìn)行；外植體的接種要在專(zhuān)用的器材、設(shè)施中進(jìn)行。應(yīng)該根據(jù)植物組織培養(yǎng)不同階段的需要，選擇不同的器材、設(shè)施。只有從降低投入、提高工效、節(jié)約勞力等諸方面加以考慮，才能降低培養(yǎng)成本、提高培養(yǎng)效率。在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，所使用的器材種類(lèi)較多，但它們通?？梢苑譃橥ㄓ闷骶摺⑹⒕?、計(jì)量器械、滅菌器械、接種器械、培養(yǎng)器械等幾種類(lèi)型。在使用這些容器、設(shè)備時(shí)，必須要了解它們的基本用途，并學(xué)會(huì)它們

12、的基本用法。例如，不能給容量瓶加熱；必須用磨砂玻璃燈罩來(lái)熄滅正在燃燒的酒精燈；應(yīng)該定期更換超凈工作如的無(wú)菌濾膜等等。詳細(xì)操作可參考具體設(shè)備、容器的使用說(shuō)明。(1)通用器械燒杯：用來(lái)盛放、溶解化學(xué)藥劑等。常用的規(guī)格有50ml、100ml、250ml500ml、1000ml。烘箱：用來(lái)烘干器械。恒溫水?。河脕?lái)溶解瓊脂等物質(zhì)。玻璃攪拌棒：用來(lái)配制培養(yǎng)基。洗耳球：用來(lái)輔助吸取、轉(zhuǎn)移少量液體。冰箱：用來(lái)貯存化學(xué)藥劑、植物材料等。牛角勺：用來(lái)轉(zhuǎn)移化學(xué)藥劑。玻璃漏斗：用來(lái)過(guò)濾溶液。剪刀：用來(lái)修剪外植體或剪切嫩莖。器械架：在無(wú)菌操作期間用來(lái)放置滅菌的器械。(2)各種盛具搪瓷淺盤(pán)：用來(lái)承載各種器械容器。精品文檔

13、精品文檔塑料盆：用于清洗培養(yǎng)容器。鐵絲筐：用來(lái)盛放滅菌容器等物品。純水水桶：用來(lái)存放去離子水或蒸儲(chǔ)水。常用的規(guī)格有10L、20L。塑料桶：用來(lái)存放洗滌溶液、廢棄溶液。各種規(guī)格的磨砂玻璃瓶：用來(lái)盛放培養(yǎng)母液，以及各種植物生長(zhǎng)物質(zhì)。(3)計(jì)量器械量筒：用來(lái)量取一定體積的液體。常用的規(guī)格有25ml、50ml、100ml、500ml1000ml。容量瓶：用來(lái)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。常用的規(guī)格有50ml、100ml、500ml、1000ml大肚移液管：用來(lái)吸取定量溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml?？潭纫埔汗埽河脕?lái)吸取定量植物生長(zhǎng)物質(zhì)溶液。常用的規(guī)格有1ml、5ml、10ml移液管架：用來(lái)放置、固定移液管

14、。酸度計(jì)：用來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基的pH。藥物天平：用來(lái)稱(chēng)取配制培養(yǎng)基的藥品。分析天平：用來(lái)稱(chēng)取少量有化學(xué)試劑，進(jìn)行化學(xué)分析。(4)滅菌器械磨砂口玻璃瓶：用來(lái)對(duì)植物材料進(jìn)行表面滅菌。酒精燈：用來(lái)進(jìn)行接種器材的表面滅菌。細(xì)菌過(guò)濾器：用來(lái)過(guò)濾不能進(jìn)行高溫滅菌的試劑溶液。無(wú)菌濾紙：用來(lái)汲取器材、植物材料表面的水分。無(wú)菌脫脂棉：用來(lái)進(jìn)行器械、植物材料表面的滅菌處理。真空泵：用來(lái)吸濾滅菌。高壓滅菌鍋：對(duì)培養(yǎng)基、接種器材進(jìn)行滅菌處理。可調(diào)試電爐：用來(lái)加熱高壓滅菌鍋。皮下注射器：用來(lái)對(duì)溶液進(jìn)行過(guò)濾、除菌。紫外線(xiàn)滅菌燈：用來(lái)對(duì)接種室、培養(yǎng)室、操作室等工作環(huán)境進(jìn)行滅菌處理。(5)接種器械超凈工作臺(tái)：用來(lái)過(guò)濾通過(guò)接種工作臺(tái)

15、面的空氣，以便進(jìn)行無(wú)菌操作。小型噴霧器：裝載滅菌藥液，來(lái)給超凈工作臺(tái)等處噴霧滅菌。鈍頭鐐子：在接種操作、繼代培養(yǎng)時(shí)移取植物材料。尖頭鐐子：用來(lái)分離植物材料。精品文檔精品文檔解剖刀：用來(lái)切割植物材料。打孔器：用來(lái)切取大小一致的圓柱形植物材料。雙目顯微鏡：在解剖較小的外植體時(shí)，用來(lái)觀(guān)測(cè)材料。細(xì)菌濾膜：用來(lái)進(jìn)行溶液的常溫除菌。接種針：用來(lái)轉(zhuǎn)移細(xì)胞團(tuán)、愈傷組織。(6)培養(yǎng)器械試管：用來(lái)作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有2cmX15cm、3cmX15cm培養(yǎng)皿：用來(lái)作為外植體的培養(yǎng)容器。常用的規(guī)格有直徑9cm、12cm。錐形瓶：即三角燒瓶，主要作為培養(yǎng)器材，常用的規(guī)格有50ml、100ml顯微鏡：用來(lái)觀(guān)

16、察植物材料。成套載玻片：用來(lái)制作植物材料顯微制片。鋁箔：用于培養(yǎng)容器封口。橡皮筋：用來(lái)束緊培養(yǎng)容器的封口材料。血球計(jì)數(shù)器：用來(lái)進(jìn)行植物細(xì)胞計(jì)數(shù)?？照{(diào)：用來(lái)調(diào)節(jié)操作間、培養(yǎng)室的溫度。搖床：用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。組培室設(shè)計(jì)規(guī)劃之生產(chǎn)規(guī)模的確定采用組培快繁技術(shù)進(jìn)行植物種苗的工廠(chǎng)化生產(chǎn)，包括入選品種外植體的篩選及獲取、外植體滅菌誘導(dǎo)培養(yǎng)、無(wú)菌材料繁殖、繼代擴(kuò)繁、單株生根、出瓶過(guò)度煉苗、包裝進(jìn)入市場(chǎng)等工藝程序。由于組培苗生產(chǎn)從進(jìn)瓶到出瓶都是在無(wú)菌條件下完成，故考慮建設(shè)一個(gè)組培工廠(chǎng)生產(chǎn)規(guī)模時(shí)通常以購(gòu)買(mǎi)多少無(wú)菌工作臺(tái)來(lái)衡量，原則上，根據(jù)繁殖品種的不同一個(gè)無(wú)菌工作臺(tái)可按年生產(chǎn)15-20萬(wàn)苗計(jì)算。如規(guī)劃一個(gè)生產(chǎn)

17、量達(dá)500萬(wàn)株的組培室，需設(shè)25-30個(gè)無(wú)菌操作位置。另外一種計(jì)算方法是，根據(jù)市場(chǎng)需求規(guī)精品文檔精品文檔律，按最高供應(yīng)季節(jié)需求量除以月生產(chǎn)量來(lái)確定必須購(gòu)置的無(wú)菌工作臺(tái)數(shù)量。當(dāng)工作臺(tái)數(shù)量確定后，才能設(shè)計(jì)無(wú)菌工作臺(tái)的擺放方式，計(jì)算出接種室的需求面積。按日生產(chǎn)組培苗瓶數(shù)及培養(yǎng)期，結(jié)合周轉(zhuǎn)期計(jì)算需要的培養(yǎng)架數(shù)量，以此為基礎(chǔ)很容易就可以計(jì)算出培養(yǎng)室需求面積，一般為一臺(tái)無(wú)菌工作臺(tái)，需配備培養(yǎng)架4架(1.2mx0.5mX5層)，無(wú)菌操作室與培養(yǎng)室的面積比例為1:(1.5-2.0),或者根據(jù)培養(yǎng)架數(shù)量確定培養(yǎng)室面積，一般每個(gè)培養(yǎng)架需要1.0-1.2個(gè)m2。圍繞組培工廠(chǎng)建設(shè)，其他必備的配套設(shè)施設(shè)備及操作用具購(gòu)置

18、的數(shù)量，應(yīng)以每個(gè)無(wú)菌工作臺(tái)的需求量計(jì)算，解剖刀、鐐子、刀片等常用工具還要有充足的備用量。試管苗出瓶、移栽需要安排在過(guò)渡培養(yǎng)溫室或大棚內(nèi)進(jìn)行?，F(xiàn)代的組培工廠(chǎng)還需要建有種質(zhì)資源保存圃、原原種、原種圃、生產(chǎn)性栽培展示區(qū)等，其面積的大小應(yīng)根據(jù)不同植物的種類(lèi)來(lái)確定。因此現(xiàn)代化組培工廠(chǎng)的建設(shè)，需要認(rèn)真規(guī)劃、仔細(xì)計(jì)算、合理投資，使之既有系統(tǒng)性又實(shí)用，才能充分發(fā)揮最大的生產(chǎn)潛力。在今后的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中，盡量降低成本，提高產(chǎn)品質(zhì)量和品種的可靠性。組培常用設(shè)備和器材1、高壓蒸氣滅菌鍋：用于培養(yǎng)基、蒸儲(chǔ)水和接種器械的滅菌消毒。2、超菌工作臺(tái)：用于培養(yǎng)物的無(wú)菌操作。(由鼓風(fēng)機(jī)、濾板、操作臺(tái)、紫外燈和照明燈組成)3、接種工具：包括雙筒實(shí)體顯微鏡、鐐子、剪刀、解剖刀、酒精燈或電熱滅菌器4、培