1、臨床微生物標(biāo)本采集方法一 導(dǎo)管尖培養(yǎng)標(biāo)本采集 物品準(zhǔn)備：無菌試管、標(biāo)本標(biāo)簽、無菌剪刀、無菌手套操作者進(jìn)行衛(wèi)生消毒，戴帽子、外科口罩戴無菌手套，將拔除的中央導(dǎo)管用無菌剪刀剪長約5CM，導(dǎo)管尖端放入無菌試管內(nèi)。脫手套，洗手，標(biāo)本及時送檢二、留置導(dǎo)尿管患者中段尿培養(yǎng)標(biāo)本采集物品準(zhǔn)備：治療車、速干手消毒劑、治療方盤內(nèi)有蓋培養(yǎng)試管1支、打火機一支、無菌手套一副、0.5%碘伏消毒液棉球（置換藥碗內(nèi)）數(shù)個、無菌鑷子1個、彎盤1個、酒精燈1盞（A）操作人員準(zhǔn)備：著裝規(guī)范（衛(wèi)生手消毒、帽子、口罩、 口罩、）;患者準(zhǔn)備：確認(rèn)患者（核對姓名、床號、腕帶），導(dǎo)尿管已夾住松開患者導(dǎo)尿管，棄其前段尿液使用0.5%碘伏溶液

2、棉球消毒導(dǎo)尿管的采樣部位操作者用速干手消毒劑手消毒后戴無菌手套，使用無菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管的采樣部位抽取10-20ml尿液，退出注射器 協(xié)助者點燃酒精燈，用燃燒法消毒試管管口和蓋子將注射器內(nèi)尿液注入試管（避免污染）協(xié)助者再次用燃燒法消毒試管管口和蓋子，隨即蓋緊試管（標(biāo)本不得倒置，以免污染），熄滅酒精燈，貼好檢驗單標(biāo)簽清理好用物，手衛(wèi)生，尿標(biāo)本及時送檢注意事項1、采集指征：懷疑有尿路感染時，應(yīng)考慮做尿培養(yǎng)。2、采集時機：抗菌藥物使用之前，留置導(dǎo)尿管者須 夾管30min以上。3、采樣部位：應(yīng)選擇尿管采樣口或靠近尿道的導(dǎo)尿 管管壁。4、采樣部位的消毒：使用0.5%碘伏液棉球沿采樣點 由內(nèi)而外消毒，每

3、個棉球只使用一次。5、無菌物品需檢查包裝和有效期，確保合格。6、采樣過程中避免污染。三、開放性傷口培養(yǎng)標(biāo)本采集物品準(zhǔn)備用生理鹽水徹底沖洗傷口用拭子深入傷口基底部或傷口與正常組織邊緣處采集兩個標(biāo)本，分別用于革蘭染色和培養(yǎng)將用于革蘭染色的標(biāo)本置于無菌標(biāo)本杯中將用于培養(yǎng)的標(biāo)本置于需氧運送培養(yǎng)基中，密閉保存分別標(biāo)注患者及標(biāo)本信息，30min內(nèi)送檢，否則置4冰箱冷藏，24h內(nèi)送檢四、使用中紫外線燈輻照度值測定法方法：紫外線強度照射指示卡測定法物品準(zhǔn)備：標(biāo)尺、紫外線強度照射指示卡放好標(biāo)尺，開啟紫外線燈開啟紫外線燈5min后，將指示卡置于紫外線燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上照射1min后，關(guān)掉紫外線燈，

4、觀察指示卡色塊的顏色，進(jìn)行結(jié)果判定。將指示卡色塊的顏色與“燈管強度90uW/CM”、“燈管強度70uW/CM”標(biāo)準(zhǔn)色塊進(jìn)行比較，判定測定結(jié)果 五、消毒劑染菌量采樣用物準(zhǔn)備：碘伏、含9ml中和劑試管、無菌注射器、酒精燈、手消毒劑、記號筆手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥消毒試管口：將試管放在酒精燈上旋轉(zhuǎn)進(jìn)行消毒，此為重要步驟。無菌法取注射器用無菌注射器抽取使用中的消毒劑1ml將抽取的消毒劑注入含9ml中和劑的試管內(nèi)，注意不接觸試管口再次用酒精燈消毒試管口將消毒劑與中和劑振蕩充分混勻用記號筆在試管壁編寫號碼，送檢備注：中和劑的選擇：1、醇類與酚類消毒劑用普通營養(yǎng)肉湯中和。2、含氯消毒劑、含碘消毒劑和過

5、氧化物消毒 劑用含0.1%硫代硫酸鈉中和劑。3、氯與定、季銨鹽類消毒劑用含0.3%吐溫- 80和0.3卵磷脂的中和劑。4、醛類消毒劑用含0.3%甘氨酸中和劑。5、含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑可在中和劑中 加入吐溫-80到0.3%，也可使用經(jīng)該消毒劑消毒 效果監(jiān)測的中和劑鑒定試驗確定的中和劑。六、潔凈手術(shù)室空氣沉降菌采樣一、采樣前準(zhǔn)備1、當(dāng)日術(shù)畢，按常規(guī)對手術(shù)間所有物表及地面進(jìn)行濕式清潔和擦拭。2、檢查凈化空調(diào)系統(tǒng)運作是否正常，當(dāng)日完成手術(shù)間清潔后，調(diào)節(jié)空調(diào)系統(tǒng)處于待機狀態(tài)，次晨打開系統(tǒng)運行30min。自凈后采樣。二、采用平板沉降法1、采樣時間:在凈化空調(diào)開啟30min進(jìn)行采樣，采樣時潔凈手術(shù)

6、室大門應(yīng)保持關(guān)閉，以維持手術(shù)室正壓狀態(tài)和潔凈度。2、采樣護(hù)士準(zhǔn)備：在采樣前應(yīng)洗手（或手消毒）戴口罩，帽子，穿無菌衣。操作時應(yīng)輕穩(wěn)，避免污染培養(yǎng)皿。3、采樣方法：把瓊脂平板放在室內(nèi)各采樣點，采樣時把平板蓋打開扣放于平板少許邊沿上，同時培養(yǎng)皿下墊滅菌療巾，暴露30min后，蓋上平板蓋，并作好手術(shù)間標(biāo)志及平板上注明手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)，固定培養(yǎng)皿，放指定容器內(nèi)。防再次污染。4、采樣順序：采樣時平板應(yīng)從科室最靠內(nèi)的房間放置，依次向外布放，每個手術(shù)間也是從最靠里的位置放置平板，最后放置最靠門的采樣點。采樣點分布均勻，收取平板順序相反。5、布點要求：百級手術(shù)間，手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺兩側(cè)0.9m以內(nèi)，兩端0.4m內(nèi)）呈

7、對角線，東南西北中5點，周邊區(qū)（距墻1m，每邊2個）8點，共需13個培養(yǎng)皿；千級手術(shù)間，手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺兩側(cè)0.6m以內(nèi)，兩端0.4m以內(nèi)）呈單角線3點，周邊區(qū)（距1機，長邊2個，短邊1個）6點，共需9個培養(yǎng)皿；萬級手術(shù)間:手術(shù)區(qū)（手術(shù)臺4邊，0.4m以內(nèi)）呈對角線3點，周邊區(qū)（距離1m每邊1個）4點，共需7個培養(yǎng)皿。檢測時可做一次空白對照和模擬操作。模擬操作將一個對照皿打開后立即封蓋，兩個對照結(jié)果必須為陰性，整個操作過程應(yīng)符合無菌要求。6、采樣高度：潔凈手術(shù)間的手術(shù)區(qū)采樣高度為0.8-1.2m,周邊區(qū)在地面或0.8m采樣，與醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范要求高度相符。7、培養(yǎng)條件：采樣后的培養(yǎng)基按

8、要求送至化驗室（細(xì)菌定）在37培養(yǎng)箱培養(yǎng)，24h觀察結(jié)果。8、判斷結(jié)果：（1）百級潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于 0.2cfu/30min,周邊區(qū)小于0.4cfu/30min（2）千級潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于 0.75cfu/30min,周邊區(qū)小于 1.5cfu/30min。（3）萬級潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)小于 2cfu/30min,周邊小于4cfu/30min.（4）普通手術(shù)間小于5cfu/30min.百級手術(shù)間 千級手術(shù)間萬級手術(shù)間十萬級手術(shù)間注意事項：1、平皿的取送與放置方法：拿取平皿時，大在下，小在上，采樣時要大在上，小在下，大的斜蓋在小的平皿上，不能兩個平皿同時向上。2、在化驗單上注明平皿暴露時間。七、

9、非潔凈環(huán)境空氣沉降菌采樣待測房間準(zhǔn)備，靜止至少10min物品準(zhǔn)備根據(jù)待測房間面積大小，按GB15982要求放置培養(yǎng)皿田 暴露時間 產(chǎn)房.導(dǎo)管房.新生兒.重癥監(jiān)護(hù)室.器官移植房.血液病病區(qū).燒傷病房:15min 普通病房:5min從里到外逐個打開培養(yǎng)皿蓋，扣放于平皿旁（注：手、頭等嚴(yán)禁從培養(yǎng)基上方越過）暴露規(guī)定時間后，按打開反方向蓋上平皿蓋，及時送檢八、物體表面采樣醫(yī)院物體表面采樣的對象：一切與醫(yī)療活動相關(guān)的物體表面均可以作為采樣的對象：治療臺、治療車、器械車、器械臺、麻醉機、新生兒暖箱、診療儀器、床頭柜、床尾桌、監(jiān)護(hù)儀按鈕、血壓器袖帶、聽診器、床欄、遙控器、門把手、電腦鍵盤、鼠標(biāo)、電話機、病歷

10、夾等。采樣時間：常規(guī)：消毒處理后進(jìn)行采樣暴發(fā)流行：未處理表面，隨機采樣采樣面積：常規(guī):100cm時，全部表面；100cm時取100cm。暴發(fā)流行：不限，盡可能多采。九、衛(wèi)生手消毒效果采樣醫(yī)務(wù)人員手采樣的意義：1、引起醫(yī)源性感染的因素很多，醫(yī)務(wù)人員手可以充當(dāng)醫(yī)源性感染的媒介，手的微生物污染是造成醫(yī)院感染的最直接的傳播途徑，由于醫(yī)務(wù)人員的手傳播的細(xì)菌而造成的醫(yī)院感染約占30%。因此醫(yī)護(hù)人員做好手的清潔消毒是控制醫(yī)院感染的重要措施之一。2.促進(jìn)醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生的依從性。3.進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。物品準(zhǔn)備酒精燈外焰燒灼采樣試管管口，用無菌棉簽蘸取中和試劑被檢者衛(wèi)生手消毒后，雙手五指并攏，用棉拭子在一手曲面從指跟到指端往返涂擦2遍，涂擦過程中同時轉(zhuǎn)動棉拭子；同法采集另一只手取無菌剪刀，酒精燈外焰燒灼采樣試管管口剪去棉拭子手接觸部分投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)；酒精燈外焰燒灼試管管口后蓋上瓶蓋十、外科手消毒效果采樣物品準(zhǔn)備：無菌棉拭子、試管架、含中和劑的無菌洗脫液、滅菌剪刀、酒精燈、打火機、采樣單、采樣記號筆、手消毒劑被檢者著裝規(guī)范，外科手消毒后保持雙手位于胸