1、淺談開展血小板抗體淺談開展血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的體會(huì)檢測(cè)項(xiàng)目的體會(huì)陳秉宇陳秉宇浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科2一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)六六 血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用拓展血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用拓展 六大方面六大方面2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院

2、輸血科輸血科3一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（一）（一） 血小板抗體的內(nèi)涵：血小板抗體的內(nèi)涵：（二）（二） 目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況：目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況：（三）三點(diǎn)思考：（三）三點(diǎn)思考：（四）我們的觀點(diǎn)：（四）我們的觀點(diǎn)：2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科4一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（一）（一）血小板抗體的內(nèi)涵：血小板抗體的內(nèi)涵：1 1白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體：白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體： 1 1）針對(duì)）針對(duì)HLA-類抗原（類抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量抗原和少量HLA-C抗原）的抗原）的 HLA-HLA-類抗體（類抗體（ 50-

3、80%50-80% ）。）。 2 2）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼260000016 260000016 ；項(xiàng)目名稱；項(xiàng)目名稱白細(xì)胞特異性和組織白細(xì)胞特異性和組織 相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格9090元元/ /次。次。 3 3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無限定支付范圍；甲乙分類）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無限定支付范圍；甲乙分類甲。甲。2 2血小板特異性和組織相容性抗體：血小板特異性和組織相容性抗體： 1 1）針對(duì)）針對(duì)血小板特異性抗原（血小板特異性抗原（HPA抗原）抗原）的的HPAHPA抗體（抗體（17-25%17-25%）。）。 2 2）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼）物價(jià)收費(fèi)目錄：編碼26

4、0000017 260000017 ；項(xiàng)目名稱；項(xiàng)目名稱血小板特異性和組織血小板特異性和組織 相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格相容性抗體檢測(cè)；價(jià)格9090元元/ /次。次。 3 3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類甲。甲。參考文件：參考文件：浙江省基本醫(yī)療保險(xiǎn)醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目名稱浙江省基本醫(yī)療保險(xiǎn)醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目名稱，浙江省勞動(dòng)和社會(huì)保障廳，浙江省勞動(dòng)和社會(huì)保障廳，2005年版，第年版，第65頁(yè)。頁(yè)。浙江省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格手冊(cè)浙江省醫(yī)療服務(wù)價(jià)格手冊(cè)（修訂版），浙江省物價(jià)局、浙江省衛(wèi)生廳，（修訂版），浙江省物價(jià)局、浙江省衛(wèi)生廳，2010年年12月

5、版，第月版，第44頁(yè)。頁(yè)。 2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科5一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（二）（二） 目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況：目前杭州省級(jí)醫(yī)院開展情況： 1）血小板抗體檢測(cè)試劑注冊(cè)時(shí)間：國(guó)家藥監(jiān)局，）血小板抗體檢測(cè)試劑注冊(cè)時(shí)間：國(guó)家藥監(jiān)局， 2011年年4月月3日。日。 2）我院開展時(shí)間：）我院開展時(shí)間：2011年年5月月26日；關(guān)注和準(zhǔn)備時(shí)間日；關(guān)注和準(zhǔn)備時(shí)間 約約10年。年。 3）現(xiàn)在杭州，浙一醫(yī)院、浙二醫(yī)院、邵逸夫醫(yī)院、浙江省）現(xiàn)在杭州，浙一醫(yī)院、浙二醫(yī)院、邵逸夫醫(yī)院、浙江省中醫(yī)院、中醫(yī)院、 浙江醫(yī)院等相繼開展。浙江醫(yī)院等相繼開展。2022-5-1

6、7浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科6一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（三）三點(diǎn)思考：（三）三點(diǎn)思考：思考思考1： 血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍限列入限列入支付范圍的器官移植，合理？支付范圍的器官移植，合理？思考思考2： 有關(guān)血型與配血的收費(fèi)和有關(guān)血型與配血的收費(fèi)和醫(yī)保限定支付范圍，醫(yī)保限定支付范圍，據(jù)了解沒有征求醫(yī)據(jù)了解沒有征求醫(yī)院輸血科專家的意見，院輸血科專家的意見，合理？合理？ （據(jù)實(shí)地了解，浙江?。〒?jù)實(shí)地了解，浙江省血型與配血的收費(fèi)是上海的血型與配血的收費(fèi)是上海的1/3，江西，江西1/3，且遠(yuǎn)低于西部地區(qū)，

7、且遠(yuǎn)低于西部地區(qū)，合理？合理？ ）思考思考3： 社會(huì)在進(jìn)步，醫(yī)學(xué)在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應(yīng)該更社會(huì)在進(jìn)步，醫(yī)學(xué)在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應(yīng)該更新和創(chuàng)新？以適應(yīng)社會(huì)和醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要。新和創(chuàng)新？以適應(yīng)社會(huì)和醫(yī)學(xué)發(fā)展的需要。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科7一血小板抗體的簡(jiǎn)介一血小板抗體的簡(jiǎn)介（四）我們的觀點(diǎn)：（四）我們的觀點(diǎn)： 1 患者和醫(yī)院的輸血安全重于泰山！患者和醫(yī)院的輸血安全重于泰山！ 2 輸注血小板是臨床治療的重要手段，今后輸注血小板是臨床治療的重要手段，今后 必將有更大發(fā)展。必將有更大發(fā)展。 3 大行何不做小微？大行何不做小微？2022-5-

8、17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科8二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義二開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義 關(guān)于血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的說明關(guān)于血小板抗體檢測(cè)項(xiàng)目的說明（2011-11-21） 院醫(yī)保辦：院醫(yī)保辦： 因血小板抗體引起的臨床問題和疾病已引起全社會(huì)的嚴(yán)重因血小板抗體引起的臨床問題和疾病已引起全社會(huì)的嚴(yán)重關(guān)注，成為臨床亟待解決的問題。關(guān)注，成為臨床亟待解決的問題。 血小板抗體檢測(cè)（或篩選）包括白細(xì)胞特異性和組織相容血小板抗體檢測(cè)（或篩選）包括白細(xì)胞特異性和組織相容性抗體和血小板特異性和組織相容性抗體。性抗體和血小板特異性和組織相容性抗體。 血小板抗體是引起臨床非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)

9、的最主要血小板抗體是引起臨床非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)的最主要原因，非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)是臨床很常見的輸血不良反應(yīng)，原因，非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)是臨床很常見的輸血不良反應(yīng)，文獻(xiàn)報(bào)道輸注紅細(xì)胞為文獻(xiàn)報(bào)道輸注紅細(xì)胞為26%，輸注血小板為，輸注血小板為2030%，多次，多次輸血患者高達(dá)輸血患者高達(dá) 2763，而非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)與血，而非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)與血小板抗體密切相關(guān)，是影響臨床安全輸血的嚴(yán)重因素。血小板小板抗體密切相關(guān)，是影響臨床安全輸血的嚴(yán)重因素。血小板抗體的檢測(cè)對(duì)于預(yù)防和減少非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)非常有意抗體的檢測(cè)對(duì)于預(yù)防和減少非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)非常有意義。義。2022-5-1

10、7浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科9二開展開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義二開展開展血小板抗體檢測(cè)的目的和意義 血小板抗體是臨床引起免疫性血小板輸注無效的最血小板抗體是臨床引起免疫性血小板輸注無效的最主要原因，文獻(xiàn)報(bào)道主要原因，文獻(xiàn)報(bào)道2080%多次輸血的患者出現(xiàn)免疫性多次輸血的患者出現(xiàn)免疫性血小板輸注無效，血小板輸注無效會(huì)導(dǎo)致昂貴的血液和醫(yī)血小板輸注無效，血小板輸注無效會(huì)導(dǎo)致昂貴的血液和醫(yī)療資源的極大浪費(fèi)，同時(shí)給患者造成較大的經(jīng)濟(jì)損失和身療資源的極大浪費(fèi)，同時(shí)給患者造成較大的經(jīng)濟(jì)損失和身體損害。體損害。 血小板抗體的檢測(cè)是臨床診斷和治療與血小板抗體血小板抗體的檢測(cè)是臨床診斷和治療與血

11、小板抗體有關(guān)的疾病的重要依據(jù)。有關(guān)的疾病的重要依據(jù)。 鑒于血小板抗體對(duì)臨床的重要價(jià)值，為此該項(xiàng)目得鑒于血小板抗體對(duì)臨床的重要價(jià)值，為此該項(xiàng)目得到今年到今年11月月1日衛(wèi)生廳質(zhì)量檢查組的充分肯定。目前我省日衛(wèi)生廳質(zhì)量檢查組的充分肯定。目前我省兄弟醫(yī)院已相繼開展。兄弟醫(yī)院已相繼開展。 輸血科輸血科 2011年年11月月21日日2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科10三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述（一）原理（一）原理（二）試劑組成（二）試劑組成（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（四）操作（四）操作2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科

12、11三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述（一）原理（一）原理 1、基于固相紅細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)（、基于固相紅細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)（SPRCA）原理。）原理。 2、反應(yīng)板中已包被抗血小板單克隆抗體，血小板懸液經(jīng)、反應(yīng)板中已包被抗血小板單克隆抗體，血小板懸液經(jīng) 離心洗滌后可在反應(yīng)孔底部形成血小板單層。離心洗滌后可在反應(yīng)孔底部形成血小板單層。 3、加入血清或血漿，在孔中經(jīng)過孵育后，若該血清或血漿、加入血清或血漿，在孔中經(jīng)過孵育后，若該血清或血漿中含有血小板抗體，則該抗體與反應(yīng)孔中的血小板單層結(jié)中含有血小板抗體，則該抗體與反應(yīng)孔中的血小板單層結(jié)合，未結(jié)合的成分通過洗滌被去除。合，未結(jié)合的成分通過洗滌

13、被去除。 4、加入抗人、加入抗人IgG及人及人IgG致敏紅細(xì)胞（指示紅細(xì)胞），經(jīng)離致敏紅細(xì)胞（指示紅細(xì)胞），經(jīng)離心后指示紅細(xì)胞通過抗人心后指示紅細(xì)胞通過抗人IgG的橋連與血小板單層上的血的橋連與血小板單層上的血小板抗體結(jié)合，因此陽(yáng)性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞平鋪在反應(yīng)孔小板抗體結(jié)合，因此陽(yáng)性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞平鋪在反應(yīng)孔底部表面。而陰性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞在離心力的作用下聚底部表面。而陰性反應(yīng)為指示紅細(xì)胞在離心力的作用下聚集于反應(yīng)孔底部中央。集于反應(yīng)孔底部中央。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科12三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述（二）試劑組成（二）試劑組成1 低

14、離子溶液（低離子溶液（L.I.M）2 反應(yīng)版：在加入干燥劑的自封袋中密封保存；保存溫度為反應(yīng)版：在加入干燥劑的自封袋中密封保存；保存溫度為28。3 25*濃縮洗滌液濃縮洗滌液4 抗人抗人IgG5 陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照6 陰性對(duì)照陰性對(duì)照7 指示紅細(xì)胞指示紅細(xì)胞2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科13（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（7）1 所有試劑平衡至室溫。所有試劑平衡至室溫。2 25*濃縮洗滌液：使用前用蒸餾水以濃縮洗滌液：使用前用蒸餾水以1：24稀釋成洗滌工作液。稀釋成洗滌工作液。3 血小板抗體篩檢細(xì)胞：血小板抗體篩檢細(xì)胞： 1）為多人份）為多人份O型健康者血小板，經(jīng)

15、冷凍干燥制成。型健康者血小板，經(jīng)冷凍干燥制成。 2）使用前每支加生理鹽水）使用前每支加生理鹽水500 l ，室溫（，室溫（1825）靜置）靜置5分鐘分鐘 3）溶解后的濃度為）溶解后的濃度為10020109個(gè)個(gè)/L 4）使用前應(yīng)充分溶解和混勻）使用前應(yīng)充分溶解和混勻 5）溶解后室溫可保存）溶解后室溫可保存24小時(shí)，但不可小時(shí)，但不可4保存保存4 指示紅細(xì)胞：指示紅細(xì)胞： 1）指示紅細(xì)胞的表面已致敏人）指示紅細(xì)胞的表面已致敏人IgG抗體抗體 2）使用前平衡至室溫（）使用前平衡至室溫（1825） 3）加樣時(shí)應(yīng)充分搖勻）加樣時(shí)應(yīng)充分搖勻 4）若指示紅細(xì)胞出現(xiàn)溶血、細(xì)菌污染、過期則不能使用）若指示紅細(xì)胞

16、出現(xiàn)溶血、細(xì)菌污染、過期則不能使用 5）加樣時(shí)沒有充分搖勻或離心不充分，可導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果）加樣時(shí)沒有充分搖勻或離心不充分，可導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果 三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科145 制備血小板懸液：制備血小板懸液： 1）抗體檢測(cè)采用）抗體檢測(cè)采用3人份等比例混合人份等比例混合O型血小板懸液型血小板懸液 2）機(jī)采血小板需用生理鹽水進(jìn)行）機(jī)采血小板需用生理鹽水進(jìn)行5-10倍稀釋后混合倍稀釋后混合 3） 血小板懸液濃度約為血小板懸液濃度約為50150109個(gè)個(gè)/L 4）當(dāng)天采血）當(dāng)天采血8小時(shí)內(nèi)小時(shí)內(nèi)EDTA或枸櫞酸鈉抗凝

17、血經(jīng)或枸櫞酸鈉抗凝血經(jīng)200 g離心離心10分鐘分鐘 后，取上層后，取上層2/3富血小板血漿富血小板血漿(PRP)可直接使用可直接使用 5）交叉配血直接采用供者血小板）交叉配血直接采用供者血小板 6）血小板懸液應(yīng)貯存于塑料容器中，室溫可保存）血小板懸液應(yīng)貯存于塑料容器中，室溫可保存24小時(shí)，但不可小時(shí)，但不可 4保存保存6 待檢樣本：血清或血漿樣本應(yīng)新鮮，待檢樣本：血清或血漿樣本應(yīng)新鮮，3000rpm離心離心5min以去除析出的以去除析出的纖維蛋白及其它有形成份，取上清進(jìn)行檢測(cè)。纖維蛋白及其它有形成份，取上清進(jìn)行檢測(cè)。 7 打開水浴箱，將濕盒平衡至打開水浴箱，將濕盒平衡至37。（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

18、（三）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備（7）三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科15（四）操作（四）操作1 依據(jù)檢測(cè)量取出反應(yīng)板條，標(biāo)記陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及待檢樣品孔，依據(jù)檢測(cè)量取出反應(yīng)板條，標(biāo)記陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及待檢樣品孔，未使用的板條應(yīng)封好儲(chǔ)存于配有干燥劑的試劑盒中。未使用的板條應(yīng)封好儲(chǔ)存于配有干燥劑的試劑盒中。2 向反應(yīng)孔中加入向反應(yīng)孔中加入1滴（滴（50 l）上述血小板懸液，輕搖反應(yīng)板）上述血小板懸液，輕搖反應(yīng)板10 秒鐘，秒鐘，使反應(yīng)孔中的保護(hù)劑充分溶解。使反應(yīng)孔中的保護(hù)劑充分溶解。3 用平板離心機(jī)將反應(yīng)板以用平板離心機(jī)將反應(yīng)板

19、以50g （650rpm）離心）離心5分鐘，使血小板固定分鐘，使血小板固定在微孔底部表面。在微孔底部表面。4 倒出反應(yīng)孔中的液體，并用滴管滴加洗滌工作液清洗倒出反應(yīng)孔中的液體，并用滴管滴加洗滌工作液清洗3次，洗滌過程次，洗滌過程中應(yīng)輕搖微孔板，然后再輕輕甩掉洗滌液。最后一次洗滌后將反應(yīng)板中應(yīng)輕搖微孔板，然后再輕輕甩掉洗滌液。最后一次洗滌后將反應(yīng)板倒置于吸水紙上輕輕吸干殘余液體（切勿拍打）。倒置于吸水紙上輕輕吸干殘余液體（切勿拍打）。5 立即向每個(gè)反應(yīng)孔中加入立即向每個(gè)反應(yīng)孔中加入2滴（滴（100 l）低離子溶液，并向相應(yīng)孔中加）低離子溶液，并向相應(yīng)孔中加入入1滴滴(50l)待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照

20、及陰性對(duì)照。低離子溶液將由紫待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照。低離子溶液將由紫色變?yōu)樘焖{(lán)或青綠色，如仍為紫色可能漏加樣本。色變?yōu)樘焖{(lán)或青綠色，如仍為紫色可能漏加樣本。三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科16（四）操作（四）操作6 用封口膠將反應(yīng)孔封好，輕搖微孔板混勻后置于濕盒中，用封口膠將反應(yīng)孔封好，輕搖微孔板混勻后置于濕盒中，37水浴孵水浴孵育育30分鐘。分鐘。7 按步驟按步驟5.4洗滌反應(yīng)板洗滌反應(yīng)板5次。次。8 立即加入立即加入1滴（滴（50 l）抗人）抗人IgG試劑及試劑及1滴（滴（50 l）指示細(xì)胞，輕輕震）指

21、示細(xì)胞，輕輕震蕩混勻。蕩混勻。9 將反應(yīng)板以將反應(yīng)板以200g（1300rpm）離心）離心5分鐘。將待檢孔與對(duì)照孔的結(jié)果分鐘。將待檢孔與對(duì)照孔的結(jié)果進(jìn)行比較，判讀結(jié)果。進(jìn)行比較，判讀結(jié)果。10 結(jié)果判定結(jié)果判定 10.1 陽(yáng)性或弱陽(yáng)性結(jié)果：陽(yáng)性或弱陽(yáng)性結(jié)果： 指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部平鋪形成細(xì)胞層為陽(yáng)性；若指示細(xì)胞只結(jié)合到指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部平鋪形成細(xì)胞層為陽(yáng)性；若指示細(xì)胞只結(jié)合到部分孔底，并且結(jié)合的區(qū)域比陰性對(duì)照大為弱陽(yáng)性。表明待檢者血清部分孔底，并且結(jié)合的區(qū)域比陰性對(duì)照大為弱陽(yáng)性。表明待檢者血清或血漿中含有血小板抗體。或血漿中含有血小板抗體。 10.2陰性結(jié)果：陰性結(jié)果： 指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部

22、中央形成細(xì)胞聚集。表明待檢者血清或血漿指示細(xì)胞在反應(yīng)孔底部中央形成細(xì)胞聚集。表明待檢者血清或血漿 中不含血小板抗體。中不含血小板抗體。三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述三血小板抗體檢測(cè)技術(shù)的簡(jiǎn)述2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科17 附附 血小板抗體檢測(cè)簡(jiǎn)易操作程序血小板抗體檢測(cè)簡(jiǎn)易操作程序l一、準(zhǔn)備工作：一、準(zhǔn)備工作：l1、試劑復(fù)溫；、試劑復(fù)溫；l2、濕盒在水浴箱中平衡至、濕盒在水浴箱中平衡至37；l3、配制洗滌工作液（蒸餾水；、配制洗滌工作液（蒸餾水；1：24）；）；l4、制備血小板懸液（加生理鹽水、制備血小板懸液（加生理鹽水500 l）；）； l5、待檢樣本、待檢樣本3

23、000rpm離心離心5min。 l二、操作步驟：二、操作步驟：l6、 標(biāo)記反應(yīng)板條標(biāo)記反應(yīng)板條 ；l7、加血小板懸液、加血小板懸液1滴（滴（50 l），輕搖反應(yīng)板），輕搖反應(yīng)板10秒鐘；秒鐘；l8、平板離心機(jī)、平板離心機(jī)50g （650rpm）離心）離心5分鐘；分鐘；l9、洗滌、洗滌3次；次；l10、加低離子溶液、加低離子溶液2滴（滴（100 l）；）；l11、加待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照、加待檢者樣本、陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照1滴滴(50l)；l12、封孔，輕搖反應(yīng)板、封孔，輕搖反應(yīng)板10秒鐘，濕盒中秒鐘，濕盒中37水浴孵育水浴孵育30分鐘；分鐘；l13、洗滌、洗滌5次；次；l14、加抗人、加

24、抗人IgG試劑試劑1滴（滴（50 l）；）；l15、加指示細(xì)胞、加指示細(xì)胞1滴（滴（50 l），輕搖反應(yīng)板），輕搖反應(yīng)板10秒鐘；秒鐘；l16、平板離心機(jī)、平板離心機(jī)200g（1300rpm）離心）離心5分鐘；分鐘；l17、判讀結(jié)果。、判讀結(jié)果。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科18四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況1、2011年年6月月1日日12月月31日共計(jì)檢測(cè)日共計(jì)檢測(cè) 次，次， 月平均檢測(cè)月平均檢測(cè) 人次，平均月增加收入人次，平均月增加收入 元；計(jì)劃元；計(jì)劃 2012年有年有較大幅度的增長(zhǎng)；社會(huì)效益明顯。較大幅度的增長(zhǎng)；社會(huì)效益明顯

25、。2、血小板抗體檢測(cè)總陽(yáng)性率。、血小板抗體檢測(cè)總陽(yáng)性率。3、反復(fù)輸血的血液病患者的血小板抗體陽(yáng)性率。、反復(fù)輸血的血液病患者的血小板抗體陽(yáng)性率。4、有妊娠史婦女的血小板抗體陽(yáng)性率。、有妊娠史婦女的血小板抗體陽(yáng)性率。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科19四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科20四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科21四四 我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況我院開展血小板抗體檢測(cè)的簡(jiǎn)況2022-

26、5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科22五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì) 抗抗HLA抗體、抗血小板抗體檢查結(jié)果（日本）抗體、抗血小板抗體檢查結(jié)果（日本）癥狀癥狀報(bào)告數(shù)報(bào)告數(shù)抗抗HLA抗體抗體抗血小板抗體抗血小板抗體蕁麻疹蕁麻疹37828/326(8.6%)5/296(1.7%)過敏反應(yīng)過敏反應(yīng)373/36(8.3%)1/33(3.0%)過敏性休克過敏性休克11112/104(11.5%)2/96(2.1%)血壓降低血壓降低290/25(0.0%)0/23(0.0%)呼吸困難呼吸困難4611/43(25.6%)3/38(2.4%)發(fā)熱反

27、應(yīng)發(fā)熱反應(yīng)15444/139(31.7%)9/115(7.9%)其它其它335/31(16.1%)2/26(7.7%)總計(jì)總計(jì)788103/704(14.6%)22/627(3.65)2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科23五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)（一）輸注紅細(xì)胞懸液：（一）輸注紅細(xì)胞懸液：1、我們研究認(rèn)為：血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的非溶血性、我們研究認(rèn)為：血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的非溶血性 發(fā)熱反應(yīng)明顯高于血小板抗體檢測(cè)陰性患者；血小板發(fā)熱反應(yīng)明顯高于血小板抗體檢測(cè)陰性患者；血小板 抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者經(jīng)干預(yù)后非溶血性發(fā)熱

28、反應(yīng)明顯下降?？贵w檢測(cè)陽(yáng)性患者經(jīng)干預(yù)后非溶血性發(fā)熱反應(yīng)明顯下降。2、干預(yù)措施：、干預(yù)措施： 1）建議使用去白的紅細(xì)胞（血庫(kù)型或床旁型白細(xì)胞濾器）建議使用去白的紅細(xì)胞（血庫(kù)型或床旁型白細(xì)胞濾器） 2）建議使用洗滌的紅細(xì)胞）建議使用洗滌的紅細(xì)胞 3）使用藥物）使用藥物 4）配血報(bào)告的）配血報(bào)告的“備注備注”欄注明：欄注明：“請(qǐng)防范請(qǐng)防范FNHTR等等”。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科24五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)（二）（二） 輸注血漿：輸注血漿： 1）輸血性急性肺損傷）輸血性急性肺損傷(transfusion rel

29、ated acute lung injury， TRALI)：文獻(xiàn)報(bào)道，輸血后發(fā)生的一系列嚴(yán)重呼吸窘迫病文獻(xiàn)報(bào)道，輸血后發(fā)生的一系列嚴(yán)重呼吸窘迫病,其其80%病例病例 輸入的血液中含有血小板抗體。輸入的血液中含有血小板抗體。 研究已經(jīng)證實(shí)：血小板抗體是引起研究已經(jīng)證實(shí)：血小板抗體是引起TRALI的重要因素之一。的重要因素之一。 上海市血液中心楊穎教授認(rèn)為中國(guó)免疫性上海市血液中心楊穎教授認(rèn)為中國(guó)免疫性TRALI發(fā)病雖少，但發(fā)病雖少，但 嚴(yán)重型較多。嚴(yán)重型較多。 2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科25 不同國(guó)家不同國(guó)家TRALI發(fā)生發(fā)生死亡率死亡率 UK SHOT 德國(guó)德

30、國(guó) 丹麥丹麥 法國(guó)法國(guó) 加拿大加拿大 1996-2003 1995 2002 1999 2002 1994 98 2000 03 例數(shù)例數(shù) 139 101 6 34 21發(fā)生率發(fā)生率% 7 3 7 0-15 0-5死亡率死亡率% 9 NR NR 20 9五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科26五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì) 2）僅輸注血漿患者的比例：）僅輸注血漿患者的比例： 每個(gè)醫(yī)院的功能、理念、管理的差異性。每個(gè)醫(yī)院的功能、理念、管理的差異性。

31、 我院輸注血漿患者的比例：我院輸注血漿患者的比例： 僅輸注血漿患者的比例為僅輸注血漿患者的比例為3.7% 3）對(duì)于特殊患者，檢測(cè)患者、供者血液的血小板抗體是可）對(duì)于特殊患者，檢測(cè)患者、供者血液的血小板抗體是可行的、必要的，目的是進(jìn)一步保證輸血安全。行的、必要的，目的是進(jìn)一步保證輸血安全。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科27五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)（三）輸注血小板（三）輸注血小板1.1.輸輸注注血小板是提高患者血小板計(jì)數(shù)，血小板是提高患者血小板計(jì)數(shù)，改善臨床改善臨床出血出血癥狀癥狀最最為快速、有效的方法和手段。為快

32、速、有效的方法和手段。2.2.輸輸注注血小板并不是每次都能達(dá)到滿意效果，血小板并不是每次都能達(dá)到滿意效果，研究已經(jīng)證明研究已經(jīng)證明反復(fù)多次隨機(jī)輸注血小板的患者，體內(nèi)極易產(chǎn)生血小板抗反復(fù)多次隨機(jī)輸注血小板的患者，體內(nèi)極易產(chǎn)生血小板抗體，體，引起引起血小板輸注無效。血小板輸注無效。HLAHLA和和HPAHPA抗體是引起免疫性抗體是引起免疫性 血小板輸注無效血小板輸注無效的主要原因，其中的主要原因，其中HPAHPA抗體可引起嚴(yán)重血抗體可引起嚴(yán)重血小板同種免疫反應(yīng)。小板同種免疫反應(yīng)。3 3 文獻(xiàn)報(bào)道，臨床血小板輸注無效發(fā)生率為文獻(xiàn)報(bào)道，臨床血小板輸注無效發(fā)生率為30%70%，其，其中免疫因素引起的血小

33、板輸注無效約為中免疫因素引起的血小板輸注無效約為20%。4.4.我國(guó)目前絕大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)采用隨機(jī)輸注血小板，導(dǎo)致我國(guó)目前絕大多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)采用隨機(jī)輸注血小板，導(dǎo)致 血小板輸注無效頻繁發(fā)生。血小板輸注無效頻繁發(fā)生。2022-5-17浙江省人民醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院 輸血科輸血科28五五 如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)如何應(yīng)對(duì)血小板抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者的體會(huì)（三）輸注血小板（三）輸注血小板5.5.血小板輸注無效的后果：血小板輸注無效的后果： 1 1）患者發(fā)生免疫反應(yīng)，加重病情。）患者發(fā)生免疫反應(yīng)，加重病情。 2 2）患者病情得不到改善，病危甚至死亡。）患者病情得不到改善，病危甚至死亡。 3 3）浪費(fèi)財(cái)力、物力、寶貴的血小