1、熒光定量熒光定量PCR檢測(cè)的檢測(cè)的研發(fā)進(jìn)展研發(fā)進(jìn)展廈門安普利生物工程有限公司廈門安普利生物工程有限公司曾慶華曾慶華 PCR檢測(cè)系統(tǒng)的組成檢測(cè)系統(tǒng)的組成PCR檢測(cè)系統(tǒng)PCR儀及配套設(shè)備PCR試劑盒操作人員PCR檢測(cè)系統(tǒng)的組成廈門安普利生物工程有限公司模板制備進(jìn)展模板制備進(jìn)展（磁性分離取代加熱法）（磁性分離取代加熱法）1、破碎細(xì)胞或病原體，釋放目的基因熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化廈門安普利生物工程有限公司裂解液釋放目的基因破碎細(xì)胞、病原體充分水解結(jié)合在核酸上的組白質(zhì)模板制備進(jìn)展模板制備進(jìn)展（磁性分離取代加熱法）（磁性分離取代加熱法）熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化廈門安普利生物工程有限公司 水解 未水解 DNARNA酶基因完

2、整擴(kuò)增效率高檢測(cè)重復(fù)性好基因降解擴(kuò)增效率低檢測(cè)重復(fù)性差模板制備進(jìn)展模板制備進(jìn)展（磁性分離取代加熱法）（磁性分離取代加熱法） 洗脫：細(xì)胞碎片 中分子物質(zhì) 重金屬離子熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化廈門安普利生物工程有限公司洗滌液抑制因子吸附到非特異性顆粒上細(xì)胞碎片磁性納米顆粒選擇性吸附核酸磁性納米顆粒選擇性吸附核酸模板制備進(jìn)展模板制備進(jìn)展（磁性分離取代加熱法）（磁性分離取代加熱法）熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化廈門安普利生物工程有限公司磁性納米顆粒模板制備進(jìn)展模板制備進(jìn)展（磁性分離取代加熱法）（磁性分離取代加熱法）基因富集作用熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化廈門安普利生物工程有限公司洗脫液模板制備進(jìn)展模板制備進(jìn)展（磁性分離取代加熱法）（磁性

3、分離取代加熱法）熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化廈門安普利生物工程有限公司模板制備的自動(dòng)化模板制備的自動(dòng)化容易污染容易污染手工手工無(wú)法勝任無(wú)法勝任步驟步驟繁瑣繁瑣操作操作復(fù)雜復(fù)雜容易容易污染污染自動(dòng)化設(shè)備廈門安普利生物工程有限公司熒光檢測(cè)試劑優(yōu)化液體處理的自動(dòng)化液體處理的自動(dòng)化1、從標(biāo)本管取樣到PCR擴(kuò)增系統(tǒng)配制全程自動(dòng)化；2、一次 處理 96個(gè)標(biāo)本，4只移液器同時(shí)處理通量大，速度快；3、采用一次性濾芯Tip頭，非接觸液面檢測(cè)系統(tǒng)，避免交叉污染；4、100%外排凈化層流通風(fēng)系統(tǒng) ，避免遺留污染，生物安全性好；5、血清、血漿、分泌物標(biāo)本可以同時(shí)處理，并行檢測(cè)多種項(xiàng)目，適合臨床使用。ANAS1000儀器自動(dòng)化進(jìn)展

4、趨勢(shì)廈門安普利生物工程有限公司 儀器自動(dòng)化進(jìn)展趨勢(shì)廈門安普利生物工程有限公司ANAS1000全自動(dòng)核算提取工作站實(shí)現(xiàn)了從標(biāo)本管取樣到PCR擴(kuò)增系統(tǒng)配制全程自動(dòng)化；采用一次性濾芯吸咀，避免交叉污染；一次可以處理96個(gè)標(biāo)本，4只移液器同時(shí)處理，通量大，速度快。儀器自動(dòng)化進(jìn)展趨勢(shì)廈門安普利生物工程有限公司采用100%外排凈化層流通風(fēng)系統(tǒng) ，避免遺留污染，生物安全性好。同時(shí)血清、血漿、分泌物標(biāo)本可以同時(shí)處理，并行檢測(cè)多種項(xiàng)目，適合臨床使用。PCR 反應(yīng)體系的研究進(jìn)展反應(yīng)體系的研究進(jìn)展（提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性穩(wěn)定性）（提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性穩(wěn)定性） 增加反應(yīng)體積提高準(zhǔn)確性標(biāo)本體積發(fā)展方向廈門安普利生物工程有限公司低

5、濃度樣本標(biāo)本體積 50ul標(biāo)本體積 50ulCt值28.5Ct值33.0檢測(cè)下限敏感度PCR 反應(yīng)體系的進(jìn)展反應(yīng)體系的進(jìn)展啟用新型聚合酶反應(yīng)體積發(fā)展方向廈門安普利生物工程有限公司熱啟動(dòng)熱啟動(dòng)Taq 高溫高溫RT PCR普通 Taq HotStar 高溫RT 55準(zhǔn)確性重復(fù)性準(zhǔn)確性重復(fù)性PCR 反應(yīng)體系的進(jìn)展反應(yīng)體系的進(jìn)展 不追求高速，強(qiáng)調(diào)準(zhǔn)確性反應(yīng)體積發(fā)展方向廈門安普利生物工程有限公司反應(yīng)體積20ul毛細(xì)管反應(yīng)體積5-20ul384孔反應(yīng)板科研實(shí)驗(yàn)臨床檢驗(yàn)PCR儀器發(fā)展趨勢(shì)儀器發(fā)展趨勢(shì)（大體積逐孔掃描）（大體積逐孔掃描）PCR儀器發(fā)展趨勢(shì)廈門安普利生物工程有限公司全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)Gen

6、elight9800cobas TaqMan48 分析儀分析儀 逐孔掃描檢測(cè)準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)檢測(cè)準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)驗(yàn)證試驗(yàn)廈門安普利生物工程有限公司第三方標(biāo)準(zhǔn)品科學(xué)的方法學(xué)高敏感試劑盒自動(dòng)化高精密儀器結(jié)果客觀、準(zhǔn)確結(jié)果客觀、準(zhǔn)確說(shuō)服力強(qiáng)說(shuō)服力強(qiáng)第三方標(biāo)準(zhǔn)品第三方標(biāo)準(zhǔn)品給出客觀的參考值標(biāo)準(zhǔn)必須可溯源驗(yàn)證試驗(yàn)廈門安普利生物工程有限公司（1.200.24）106IU/外標(biāo)定量的數(shù)學(xué)模型外標(biāo)定量的數(shù)學(xué)模型1，理論模型需要滿足的條件： 各樣本間的核酸提取效率一致2，實(shí)際應(yīng)用中各樣本的提取效率是不同的，提取效率的影響因素主要包括：抑制因素、提取方法、操作理論模型與實(shí)際情況理論模型與實(shí)際情況。 廈門安普利生物工程有限公司驗(yàn)證試驗(yàn)外標(biāo)的兩種處理模式外標(biāo)的兩種處理模式 優(yōu)點(diǎn)：（1）生成的標(biāo)準(zhǔn)曲線穩(wěn)定，不需要每次都做標(biāo)準(zhǔn)品 缺點(diǎn)：（1）無(wú)法消除核酸提取過(guò)程中的系統(tǒng)誤差；（2）丟失標(biāo)準(zhǔn)品的部分質(zhì)控功能；（3）定量精確性不好不經(jīng)過(guò)核酸提取，直接擴(kuò)增 優(yōu)點(diǎn)：（1）可以消除系統(tǒng)誤差；（2）可以反應(yīng)質(zhì)控信息；（3）定量精確 缺點(diǎn)：（1）需要每次都做標(biāo)準(zhǔn)品才能體現(xiàn)優(yōu)勢(shì)和臨床樣本經(jīng)過(guò)相同的核酸提取操作廈門安普利生物工程有限公司驗(yàn)證試驗(yàn)敏感性敏感性以第三方標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)參比品倍倍稀釋成均勻梯度驗(yàn)證試驗(yàn)廈門安普