1、3.3.培養(yǎng)基是用液體的還是固體的？培養(yǎng)基中的成培養(yǎng)基是用液體的還是固體的？培養(yǎng)基中的成分有何特點？分有何特點？2.3.單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備 醫(yī)院一般怎樣檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒？醫(yī)院一般怎樣檢測人體內(nèi)是否存在乙肝病毒？ 抗體抗體 細(xì)胞兩兩融合后，有哪細(xì)胞兩兩融合后，有哪些類型？些類型？ 陽性孔陽性孔 抗體抗體 抗原抗原 應(yīng)答應(yīng)答 抗體的不純性抗體的不純性 動物細(xì)胞受到抗原刺激動物細(xì)胞受到抗原刺激, ,引起免疫反響產(chǎn)生的球蛋白引起免疫反響產(chǎn)生的球蛋白. .不是自己的而又能引起免疫應(yīng)答反響的物質(zhì)就是抗原不是自己的而又能引起免疫應(yīng)答反響的物質(zhì)就是抗原. .一種抗原有多種不同的決定簇一

2、種抗原有多種不同的決定簇, ,刺激的是多種刺激的是多種B B細(xì)胞細(xì)胞, ,作用于作用于不同的不同的B B細(xì)胞后細(xì)胞后, ,會產(chǎn)生多種抗體會產(chǎn)生多種抗體, , 這是多克隆的這是多克隆的, , 故不純故不純! ! 抗原抗原 B B細(xì)胞細(xì)胞漿細(xì)胞漿細(xì)胞 抗體抗體 刺激刺激 怎么才能得到純的抗體怎么才能得到純的抗體? ? 光純還不行光純還不行, ,還要大量還要大量. .怎么辦怎么辦? ? 但，有但，有問題問題: : 找，什么細(xì)胞能無限繁殖呢找，什么細(xì)胞能無限繁殖呢? ? 思路就出來了思路就出來了: :要想獲單一的純抗體要想獲單一的純抗體, ,就必須從一個就必須從一個B B細(xì)胞出發(fā)細(xì)胞出發(fā). .讓讓B

3、B細(xì)胞大量繁殖細(xì)胞大量繁殖( (克隆克隆) )就可以產(chǎn)生大量抗體了就可以產(chǎn)生大量抗體了. .B B細(xì)胞是不能無限繁殖的細(xì)胞是不能無限繁殖的. .怎么辦怎么辦? ?癌癌! ! 只有癌細(xì)胞只有癌細(xì)胞. . 但它不能產(chǎn)生抗體但它不能產(chǎn)生抗體. .癌細(xì)胞能無限繁殖癌細(xì)胞能無限繁殖, ,但不能產(chǎn)生抗體但不能產(chǎn)生抗體.B.B細(xì)胞能產(chǎn)生抗體細(xì)胞能產(chǎn)生抗體, ,但不能大但不能大量繁殖量繁殖. .融合呀融合呀! !只要將兩個細(xì)胞融合即可互補(bǔ)只要將兩個細(xì)胞融合即可互補(bǔ). . 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 HAT篩選篩選大量培養(yǎng)大量培養(yǎng)PEGPEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)細(xì)胞融合B 脾脾骨髓瘤骨髓瘤瘤瘤 問題問題: : 在培養(yǎng)體系

4、中在培養(yǎng)體系中, , 有有4 4種細(xì)胞種細(xì)胞. B. B細(xì)胞、瘤細(xì)胞細(xì)胞、瘤細(xì)胞, ,和雜交細(xì)胞。和雜交細(xì)胞。 我們還是拿不到我們還是拿不到McAb,McAb,怎么辦怎么辦? ? 篩選！篩出雜交瘤細(xì)胞。怎么篩篩選！篩出雜交瘤細(xì)胞。怎么篩? ? 又是一個思路問題。又是一個思路問題。 關(guān)鍵一步關(guān)鍵一步 結(jié)合同位素的單抗結(jié)合同位素的單抗-生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈圖中圖中B為為_過程，過程，常用常用_作為誘導(dǎo)劑作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承，該細(xì)胞繼承_的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能_,又能又能_ 。B體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 圖10黑面綿羊去黑面綿羊去核卵細(xì)胞核卵細(xì)胞白面綿羊卵白面綿羊卵腺細(xì)胞