1、第四次實驗第四次實驗動物實驗的基本操作訓(xùn)練動物實驗的基本操作訓(xùn)練Basic Operation in Animal Experiment 動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練1 實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?1.1.學(xué)習(xí)捉拿家兔的正確方法和固定。學(xué)習(xí)捉拿家兔的正確方法和固定。2.2.掌握常用手術(shù)器械的正確使用方法。掌握常用手術(shù)器械的正確使用方法。3.3.學(xué)習(xí)動物實驗的基本操作技術(shù)，包括麻學(xué)習(xí)動物實驗的基本操作技術(shù)，包括麻醉、切口與止血、氣管插管術(shù)、神經(jīng)分離術(shù)、醉、切口與止血、氣管插管術(shù)、神經(jīng)分離術(shù)、頸動脈插管術(shù)、輸尿管插管術(shù)、膀胱插管術(shù)。頸動脈插管術(shù)、輸尿管插管術(shù)、膀胱插管術(shù)。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練2健康家兔健康家兔, ,

2、雌雄不拘雌雄不拘, ,體重體重2.02.02.5Kg2.5Kg 實驗對象實驗對象 動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練3 實驗內(nèi)容實驗內(nèi)容 1.1.家兔的捉拿、麻醉與固定家兔的捉拿、麻醉與固定2.2.頸總動脈、神經(jīng)分離術(shù)頸總動脈、神經(jīng)分離術(shù)3.3.氣管插管氣管插管4.4.動脈插管動脈插管5.5.膀胱插管膀胱插管6.6.輸尿管插管輸尿管插管動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練41.1.器材：器材： 兔手術(shù)臺、哺乳類手術(shù)器械一套、三通、兔手術(shù)臺、哺乳類手術(shù)器械一套、三通、動脈夾、動脈插管、氣管插管、輸尿管插管、動脈夾、動脈插管、氣管插管、輸尿管插管、膀胱插管、紗布、棉線、注射器、綁腿帶、污膀胱插管、紗布、棉線、注射器、綁腿帶、污

3、物杯。物杯。2.2.藥品：藥品： 25%25%氨基甲酸乙酯溶液氨基甲酸乙酯溶液( (烏拉坦烏拉坦) ) 實驗器材和藥品實驗器材和藥品 動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練5 實驗方法實驗方法 一、家兔的一、家兔的捉拿捉拿與稱重與稱重 右手抓住家兔頸背部皮膚，右手抓住家兔頸背部皮膚，輕輕將家兔提起，迅速以左輕輕將家兔提起，迅速以左手托住其臀部，使家兔體重手托住其臀部，使家兔體重主要落左掌心上，以免損傷主要落左掌心上，以免損傷動物頸部。動物頸部。注意點：注意點： 家兔一般不咬人，但腳家兔一般不咬人，但腳爪銳利，在掙扎易抓傷捕捉爪銳利，在掙扎易抓傷捕捉者，所以捕捉時要特別注意者，所以捕捉時要特別注意其四肢。其四肢。

4、1.1.家兔的捉拿家兔的捉拿動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練6圖圖2 2 錯誤捉拿法錯誤捉拿法可損傷兩腎可損傷兩腎 可造成皮下出血可造成皮下出血 可損傷兩耳可損傷兩耳 動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練7 將家兔放在嬰兒秤上，待家兔安靜的時候?qū)⒓彝梅旁趮雰撼由?，待家兔安靜的時候觀察體重并記錄。觀察體重并記錄。2.2.家兔的稱重家兔的稱重注意點：注意點： (1)(1)調(diào)零調(diào)零 (2)(2)切勿使勁按壓稱面切勿使勁按壓稱面動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練8二、家兔的麻醉二、家兔的麻醉1. 1. 藥品藥品:25%:25%氨基甲酸乙酯氨基甲酸乙酯( (又名又名: :烏拉坦烏拉坦) )2. 2. 參考劑量參考劑量:1g:1gkg kg ，相

5、當于，相當于4ml4mlkg kg 3. 3. 給藥途徑給藥途徑: :耳緣靜脈耳緣靜脈圖圖3 3 家兔耳緣靜脈家兔耳緣靜脈( (紅色箭頭紅色箭頭) )動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練94.4.家兔耳緣靜脈注射方法家兔耳緣靜脈注射方法(1)(1)助手按下圖的方式將家兔固定助手按下圖的方式將家兔固定圖圖4 4 家兔耳緣靜脈麻醉前固定家兔耳緣靜脈麻醉前固定 助手的一側(cè)上肢彎助手的一側(cè)上肢彎曲與同側(cè)的軀干夾住家曲與同側(cè)的軀干夾住家兔的后半部位，同時該兔的后半部位，同時該側(cè)的手托住家兔的腹部，側(cè)的手托住家兔的腹部，另一只向上抓住家兔的另一只向上抓住家兔的頸背部頸背部。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練10(2)(2)注射方法注射

6、方法( (視頻視頻) )圖圖5 5 家兔耳緣靜脈注射方法家兔耳緣靜脈注射方法靜脈穿刺意外靜脈穿刺意外( (視頻視頻) )動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練11(3)(3)耳緣靜脈注射要點：耳緣靜脈注射要點： 充分暴露耳背外緣耳緣靜脈。充分暴露耳背外緣耳緣靜脈。 左食指、中指輕夾耳根部使靜脈充盈。左食指、中指輕夾耳根部使靜脈充盈。 注射點的選擇。注射點的選擇。 從遠心端以從遠心端以3030角度進針刺入靜脈后順血管平行方向角度進針刺入靜脈后順血管平行方向深入深入1cm1cm。 左手拇指、食指在刺入部位將針頭與兔耳固定。左手拇指、食指在刺入部位將針頭與兔耳固定。 注意注入速度和密切觀察家兔的反應(yīng)。注意注入速度和密

7、切觀察家兔的反應(yīng)。 注射完后注意止血。注射完后注意止血。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練12(4)(4)麻醉效果麻醉效果動物呼吸平穩(wěn)深慢動物呼吸平穩(wěn)深慢角膜反射遲鈍或消失角膜反射遲鈍或消失肢體肌肉松弛肢體肌肉松弛皮膚夾捏反射消失皮膚夾捏反射消失動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練13 (5) (5) 麻醉意外麻醉意外 麻醉過量麻醉過量 實驗動物會出現(xiàn)兩種情況，一是呼吸、心實驗動物會出現(xiàn)兩種情況，一是呼吸、心搏驟?；蜷g斷等情況：二是動物全身皮膚色表紫，呼吸運動搏驟停或間斷等情況：二是動物全身皮膚色表紫，呼吸運動淺而慢。要密切觀察動物生命體征的變化，做好實施各項搶淺而慢。要密切觀察動物生命體征的變化，做好實施各項搶救工作的準

8、備。救工作的準備。 麻醉過淺麻醉過淺 動物可能出現(xiàn)掙扎、尖叫等表現(xiàn)，需要及動物可能出現(xiàn)掙扎、尖叫等表現(xiàn)，需要及時地追加麻醉藥物，但一次追加不宜超過總量時地追加麻醉藥物，但一次追加不宜超過總量1 13 3，并密切，并密切觀察動物是否已達到麻醉的基本狀態(tài)。觀察動物是否已達到麻醉的基本狀態(tài)。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練141.1.仰臥固定仰臥固定圖圖6 6 家兔仰臥固定法家兔仰臥固定法 頭部用一根粗棉線拉住頭部用一根粗棉線拉住兔的兩只門齒后栓在兔板的兔的兩只門齒后栓在兔板的鐵柱或固定于鉤上。兩前肢鐵柱或固定于鉤上。兩前肢平直放在胸腰部兩側(cè)平直放在胸腰部兩側(cè), ,用粗棉用粗棉繩的一端縛扎腕關(guān)節(jié)以上部繩的一端縛

9、扎腕關(guān)節(jié)以上部位位, ,縛繩從背后左右交叉穿過縛繩從背后左右交叉穿過, ,壓在對側(cè)前肢的前臂上壓在對側(cè)前肢的前臂上, ,再緊再緊扎于兔板兩側(cè)的木鉤上扎于兔板兩側(cè)的木鉤上, ,兩后兩后肢左右分開肢左右分開, , 縛繩扎踝關(guān)節(jié)縛繩扎踝關(guān)節(jié)以上部位以上部位, ,另一端分別固定于另一端分別固定于兔板后兩側(cè)的木鉤上兔板后兩側(cè)的木鉤上, , 三、固定方法三、固定方法動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練15(1)(1)活結(jié)的打法；活結(jié)的打法； (2)(2)頸部必須放正拉直，且不要超過鐵桿；頸部必須放正拉直，且不要超過鐵桿；(3)(3)縛繩要緊扎于兔板兩側(cè)的木鉤上，防止家縛繩要緊扎于兔板兩側(cè)的木鉤上，防止家兔掙扎時掙脫縛繩；

10、兔掙扎時掙脫縛繩；(4)(4)拉出舌頭，拉出舌頭，以免阻塞呼吸道以免阻塞呼吸道。2.2.注意事項注意事項動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練16四、止血四、止血 1.1.壓迫止血法壓迫止血法 用溫?zé)猁}水紗布或棉球壓迫止血。用溫?zé)猁}水紗布或棉球壓迫止血。 2.2.鉗夾止血法鉗夾止血法 對準出血點迅速、準確鉗對準出血點迅速、準確鉗夾夾，一般，一般細小血管用此法。細小血管用此法。 3.3.結(jié)扎止結(jié)扎止血法血法 較大的血管出血，用血管鉗夾住出較大的血管出血，用血管鉗夾住出血點，結(jié)扎止血血點，結(jié)扎止血。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練17五、頸部手術(shù)五、頸部手術(shù)1.1.氣管插管術(shù)氣管插管術(shù)( (視頻視頻) ) 用手術(shù)刀時，先用手或

11、器械使兩側(cè)組織牽拉緊張用手術(shù)刀時，先用手或器械使兩側(cè)組織牽拉緊張情況下，以刀刃作垂直的輕巧的切開，不要作刮削的情況下，以刀刃作垂直的輕巧的切開，不要作刮削的動作。動作。圖圖7 7 切皮運刀方法切皮運刀方法動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練18圖圖8 8 氣管插管示意圖氣管插管示意圖甲狀軟骨甲狀軟骨倒倒“T”T”形切口形切口 “Y”“Y”形氣管插管形氣管插管結(jié)扎線結(jié)扎線結(jié)扎線頭結(jié)扎線頭動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練19(2)(2)氣管插管術(shù)操作要點：氣管插管術(shù)操作要點： 頸部正中切開皮膚，鈍性分離暴露氣管、穿線備用。頸部正中切開皮膚，鈍性分離暴露氣管、穿線備用。 于氣管中段第三或第四軟骨環(huán)上向頭端作一縱向倒于氣管中段第

12、三或第四軟骨環(huán)上向頭端作一縱向倒“T”T”形切口。形切口。 將氣管導(dǎo)管由切口向胸部方向插入氣管腔內(nèi)。將氣管導(dǎo)管由切口向胸部方向插入氣管腔內(nèi)。 在氣管軟骨環(huán)之間進行結(jié)扎，并將棉線固定于插管分在氣管軟骨環(huán)之間進行結(jié)扎，并將棉線固定于插管分叉處。叉處。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練20(3)(3)注意事項注意事項 頸部皮膚切口，皮下組織和頸前肌肉群的分離均在一頸部皮膚切口，皮下組織和頸前肌肉群的分離均在一定要沿正中線進行。定要沿正中線進行。 分離肌肉時，要順著肌肉的走向鈍性分離，而且動作分離肌肉時，要順著肌肉的走向鈍性分離，而且動作須輕柔，止血鉗插入不宜過深，以防損傷深層的食管和血須輕柔，止血鉗插入不宜過深，

13、以防損傷深層的食管和血管。管。 插管之前先用蘸有生理鹽水的棉球，擠盡水分后進行插管之前先用蘸有生理鹽水的棉球，擠盡水分后進行清理氣管內(nèi)的血液和分泌物，以保證氣道通暢。清理氣管內(nèi)的血液和分泌物，以保證氣道通暢。 插管時動作輕柔，若見插管內(nèi)有血，應(yīng)取出插管擦凈插管時動作輕柔，若見插管內(nèi)有血，應(yīng)取出插管擦凈血液，再進行插管。血液，再進行插管。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練212.2.頸部神經(jīng)分離術(shù)頸部神經(jīng)分離術(shù)( (視頻視頻) )（最粗、明亮）（最粗、明亮）（較細）（較細）（最細、常與（最細、常與交感神經(jīng)貼在交感神經(jīng)貼在一起）一起）圖圖7 7 血管神經(jīng)鞘示意圖血管神經(jīng)鞘示意圖迷走神經(jīng)迷走神經(jīng)減壓神經(jīng)減壓神經(jīng)交

14、感神經(jīng)交感神經(jīng)頸總動脈頸總動脈動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練22(2)(2)神經(jīng)分離術(shù)操作要點：神經(jīng)分離術(shù)操作要點： 暴露神經(jīng)的手法。暴露神經(jīng)的手法。 仔細辨認神經(jīng)，用玻璃分針輕輕分離神經(jīng)。仔細辨認神經(jīng)，用玻璃分針輕輕分離神經(jīng)。 分離神經(jīng)的先后順序分離神經(jīng)的先后順序。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練233.3.頸總動脈插管術(shù)頸總動脈插管術(shù)( (視頻視頻) ) (1)(1)頸總動脈插管術(shù)操作要點：頸總動脈插管術(shù)操作要點： 于氣管一側(cè)小心分離頸總動脈約于氣管一側(cè)小心分離頸總動脈約3cm3cm穿兩線備用。穿兩線備用。 遠心端結(jié)扎、近心端用動脈夾夾緊。遠心端結(jié)扎、近心端用動脈夾夾緊。 用眼科剪與血管呈用眼科剪與血管呈454

15、5的角度從遠心端開始在向心的角度從遠心端開始在向心一側(cè)剪開管壁的一側(cè)剪開管壁的1/31/3。 插管前導(dǎo)管和壓力換能器的肝素化插管前導(dǎo)管和壓力換能器的肝素化。 插管后結(jié)扎固定。插管后結(jié)扎固定。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練24(2)(2)注意事項注意事項 分離動脈時不要損傷動脈的小分支，以免造成出血。分離動脈時不要損傷動脈的小分支，以免造成出血。 頸總動脈剪口不宜過大或過小，過大易于使頸總動頸總動脈剪口不宜過大或過小，過大易于使頸總動脈插斷，過小導(dǎo)管不易插入。脈插斷，過小導(dǎo)管不易插入。 動脈導(dǎo)管的插入端要光滑，不能過尖，以防刺破動動脈導(dǎo)管的插入端要光滑，不能過尖，以防刺破動脈壁，引起大出血。脈壁，引起大出

16、血。 未扎緊動脈插管前不要松動動脈夾。未扎緊動脈插管前不要松動動脈夾。 動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練25六、腹部手術(shù)六、腹部手術(shù)1.1.膀胱插管術(shù)膀胱插管術(shù)( (視頻視頻) ) (1)(1)膀胱插管操作要點：膀胱插管操作要點： 在恥骨聯(lián)合上方備皮，做一在恥骨聯(lián)合上方備皮，做一3 35cm5cm的切口，沿腹白線的切口，沿腹白線打開腹腔，暴露膀胱，將膀胱向下方翻開，可見白色輸尿打開腹腔，暴露膀胱，將膀胱向下方翻開，可見白色輸尿管。管。 結(jié)扎尿道口。結(jié)扎尿道口。 膀胱底部剪一小口，插入導(dǎo)管，與切口處的膀胱壁膀胱底部剪一小口，插入導(dǎo)管，與切口處的膀胱壁結(jié)扎固定。結(jié)扎固定。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練26(2)(2)注

17、意事項注意事項 因腹壁與腹腔內(nèi)臟緊貼，作腹壁切口時一定因腹壁與腹腔內(nèi)臟緊貼，作腹壁切口時一定提起腹壁，以免傷及腹腔內(nèi)臟。提起腹壁，以免傷及腹腔內(nèi)臟。 動作輕柔，以免引起損傷性尿閉。動作輕柔，以免引起損傷性尿閉。 注意膀胱插管不要插入過深。注意膀胱插管不要插入過深。動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練272.2.輸尿管插管術(shù)輸尿管插管術(shù)( (視頻視頻) ) (1)(1)輸尿管插管操作要點：輸尿管插管操作要點： 在恥骨聯(lián)合上方備皮，做一在恥骨聯(lián)合上方備皮，做一3 35cm5cm的切口，沿腹白線的切口，沿腹白線打開腹腔，暴露膀胱，將膀胱向下方翻開，可見白色輸尿打開腹腔，暴露膀胱，將膀胱向下方翻開，可見白色輸尿管。管

18、。 游離輸尿管，下方穿游離輸尿管，下方穿2 2根線，在入膀胱處用一細線結(jié)根線，在入膀胱處用一細線結(jié)扎輸尿管，另一細線打松結(jié)備用。扎輸尿管，另一細線打松結(jié)備用。 待輸尿管充盈后，在結(jié)扎處前方的管壁上剪一楔形待輸尿管充盈后，在結(jié)扎處前方的管壁上剪一楔形小口（小于管徑小口（小于管徑1/21/2），從此孔向腎臟方向插管，固定。），從此孔向腎臟方向插管，固定。 動物實驗技術(shù)操作訓(xùn)練28(2)(2)輸尿管插管應(yīng)注意：輸尿管插管應(yīng)注意： 因腹壁與腹腔內(nèi)臟緊貼，作腹壁切口時一定提起腹壁，因腹壁與腹腔內(nèi)臟緊貼，作腹壁切口時一定提起腹壁，以免傷及腹腔內(nèi)臟。以免傷及腹腔內(nèi)臟。 分離輸尿管時，注意分清輸精管，輸精管為圍繞輸尿分離輸尿管時