1、血小板聚集與GPIIb（二）作用：（二）作用： 1.收縮功能：由收縮功能：由ET、 PGI-2 、TXA2等調(diào)等調(diào)控?？?。2.激活血小板：膠原、基底膜等激活。激活血小板：膠原、基底膜等激活。3.激活凝血系統(tǒng)：膠原激活內(nèi)源性凝血系激活凝血系統(tǒng)：膠原激活內(nèi)源性凝血系統(tǒng)（統(tǒng)（F激活）、激活）、TF激活外源性凝血系激活外源性凝血系統(tǒng)（統(tǒng)（F釋放）釋放）4.局部粘度增高：血管收縮，血流減慢，局部粘度增高：血管收縮，血流減慢，血管通透性升高，血漿外滲血管通透性升高，血漿外滲 5.抗止血功能減弱：抗止血功能減弱： PGI-2 、 t-PA、 AT- 合成分泌減少合成分泌減少 1. 1.膠原暴露，激活內(nèi)凝系統(tǒng)

2、膠原暴露，激活內(nèi)凝系統(tǒng)2.2.釋放釋放TFTF，激活外凝系，激活外凝系統(tǒng)統(tǒng)血管結(jié)構(gòu)示意圖 3.3.損傷的損傷的VECVEC促進與促進與 中性白細胞、中性白細胞、MOMO、 TCTC及及PltPlt的聚集的聚集受損受損VECVEC產(chǎn)生產(chǎn)生: PAF: PAF、vWFvWF等凝血因子；等凝血因子； VECVEC產(chǎn)生產(chǎn)生: PGI: PGI2 2、TM TM 等抗凝物質(zhì)等抗凝物質(zhì)4.VEC4.VEC釋放的促凝和抗凝物質(zhì)釋放的促凝和抗凝物質(zhì)失平衡失平衡血管壁止血作用示意圖2.內(nèi)皮細胞的作用 血管壁完整時血管壁完整時，內(nèi)皮細胞主要表現(xiàn)其抗血內(nèi)皮細胞主要表現(xiàn)其抗血栓活性，即通過：栓活性，即通過：產(chǎn)生并釋放

3、產(chǎn)生并釋放PGI2；產(chǎn)生肝素，并與產(chǎn)生肝素，并與ATIII結(jié)合增強其活性；結(jié)合增強其活性；產(chǎn)生產(chǎn)生TM，并與凝血酶結(jié)合激活蛋白，并與凝血酶結(jié)合激活蛋白C系系統(tǒng)，使統(tǒng)，使Va、VIIIa失活；失活；產(chǎn)生外源性凝血產(chǎn)生外源性凝血抑制物（抑制物（EPI）和磷脂蛋白結(jié)合凝血抑制因）和磷脂蛋白結(jié)合凝血抑制因子等以阻止血栓的形成，保持血液暢通。子等以阻止血栓的形成，保持血液暢通。內(nèi)皮細胞的作用（2） 當(dāng)盡管壁受損時，內(nèi)皮下組織暴露時，血小當(dāng)盡管壁受損時，內(nèi)皮下組織暴露時，血小板迅速粘附于受損處，內(nèi)皮細胞受到刺激釋板迅速粘附于受損處，內(nèi)皮細胞受到刺激釋放：放：內(nèi)皮素；內(nèi)皮素；vWF,促進血小板粘附，保促進血

4、小板粘附，保護護F VIII活性，促進活性，促進F VIII的合成和分泌，的合成和分泌，vWF纖維連接蛋白可與血小板膜糖蛋白纖維連接蛋白可與血小板膜糖蛋白IIb/IIIa結(jié)合，誘導(dǎo)血小板的聚集；結(jié)合，誘導(dǎo)血小板的聚集；PAF；TF；F V;PAI，阻止纖維蛋白降解，阻止纖維蛋白降解，有利于止血。有利于止血。 繼而，內(nèi)皮細胞釋放一些纖溶促進物質(zhì)，溶繼而，內(nèi)皮細胞釋放一些纖溶促進物質(zhì)，溶解局部形成的血栓，修復(fù)血管壁，以恢復(fù)血解局部形成的血栓，修復(fù)血管壁，以恢復(fù)血管的流通性。管的流通性。血小板 胞體直徑胞體直徑2-4um，星形，圓形，橢圓，星形，圓形，橢圓形，逗點狀或不規(guī)則形，胞核無，胞形，逗點狀或

5、不規(guī)則形，胞核無，胞質(zhì)淡藍色或淡紅色，中心部位有細小，質(zhì)淡藍色或淡紅色，中心部位有細小，分布均勻的紫紅色顆粒。有時血小板分布均勻的紫紅色顆粒。有時血小板中央的顆粒非常密集而類似細胞核，中央的顆粒非常密集而類似細胞核，如巨大血小板則易誤認為是有核細胞。如巨大血小板則易誤認為是有核細胞。由于血小板具有聚集性，故骨髓涂片由于血小板具有聚集性，故骨髓涂片上血小板成堆存在。上血小板成堆存在。 靜止期靜止期活化期活化期聚聚集集血小板膜蛋白的作用血小板膜蛋白的作用GPIaCD49b 與與GPIIa復(fù)合，是膠原的受體復(fù)合，是膠原的受體GPIbCD42c 與與GPIX復(fù)合，復(fù)合，vWF受體受體 GPIcCD49

6、f與與GPIIa復(fù)合，復(fù)合，F(xiàn)n與層素受體與層素受體GPIIaCD29與與GPIa和和Ic復(fù)合，膠原復(fù)合，膠原Fn受體受體GPIIb/IIIaCD41a Fg的受體，也是的受體，也是vWF和和Fn受受體體GPIVCD36TSP的受體的受體GPV凝血酶的受體凝血酶的受體GPIXCD42a 同同GPIb粘附粘附血小板的膜蛋白結(jié)構(gòu)模式圖血小板的膜蛋白結(jié)構(gòu)模式圖 膜磷脂（2）膜脂質(zhì)：）膜脂質(zhì)：主要成分為磷脂主要成分為磷脂 組成：鞘磷脂（組成：鞘磷脂（SPH）、磷脂酰膽堿（）、磷脂酰膽堿（PC）、）、磷脂酰、乙醇胺（磷脂酰、乙醇胺（PE）、磷脂酰絲氨酸）、磷脂酰絲氨酸（PS）、磷脂酰肌醇（）、磷脂酰肌醇

7、（PI）、溶血卵磷脂。）、溶血卵磷脂。 作用：血小板活動時，作用：血小板活動時，PS從血小板膜內(nèi)側(cè)從血小板膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)至外側(cè)，成為血小板第三因子（翻轉(zhuǎn)至外側(cè)，成為血小板第三因子（PF3）。）。TXA2及及PGI2作用：相互拮抗作用，維持動作用：相互拮抗作用，維持動態(tài)平衡態(tài)平衡 a. 產(chǎn)生產(chǎn)生PAF骨架與管道系統(tǒng) 血小板細胞器和內(nèi)容物(二二)血小板的作用血小板的作用 (1)血小板粘附功能血小板粘附功能血小板可直接粘附于血管內(nèi)皮血小板可直接粘附于血管內(nèi)皮下成分，如膠原及彈性蛋白等，亦可通過下成分，如膠原及彈性蛋白等，亦可通過vWF及纖及纖維連接蛋白等粘附蛋白介導(dǎo)而發(fā)生粘附。維連接蛋白等粘附蛋白介導(dǎo)而

8、發(fā)生粘附。 (2)血小板聚集功能血小板聚集功能血小板聚集是血小板參與止血血小板聚集是血小板參與止血和血栓形成的重要環(huán)節(jié)，當(dāng)血小板粘附于血管破損和血栓形成的重要環(huán)節(jié)，當(dāng)血小板粘附于血管破損處或受到凝血酶、處或受到凝血酶、ADP等活化劑作用后即被活化，等活化劑作用后即被活化，活化的血小板相互粘附在一起即為血小板聚集。血活化的血小板相互粘附在一起即為血小板聚集。血小板聚集與小板聚集與GPIIb- IIIa、纖維蛋白原、鈣離子有關(guān)。、纖維蛋白原、鈣離子有關(guān)。 血小板聚集的機理 目前認為有三條途徑：目前認為有三條途徑：1.ADP途徑，途徑，ADP、膠原、凝血酶、腎上腺素等均可誘導(dǎo)血小膠原、凝血酶、腎上腺

9、素等均可誘導(dǎo)血小板釋放內(nèi)源性板釋放內(nèi)源性ADP。后者可引起血小板聚。后者可引起血小板聚集。集。2.TXA2途徑途徑：PGG2、PGH2及及TXA2可誘導(dǎo)血小板發(fā)生聚集反應(yīng)，但不依賴可誘導(dǎo)血小板發(fā)生聚集反應(yīng)，但不依賴ADP途徑。途徑。3.PAF途徑途徑：不依賴上兩者。：不依賴上兩者。 血小板聚集需要血小板聚集需要GPIIb-IIIa和鈣離子、纖維和鈣離子、纖維蛋白原的參與蛋白原的參與 。血小板聚集活化誘導(dǎo)劑 (3)血小板的釋放反應(yīng)血小板的釋放反應(yīng) 血小板活化劑可血小板活化劑可以直接引起血小板釋放反應(yīng)并引起二相以直接引起血小板釋放反應(yīng)并引起二相血小板聚集血小板聚集 (4)促凝作用促凝作用 PF3可

10、提供催化表面；完成可提供催化表面；完成因子因子X和因子和因子II的活化。另外，血小板內(nèi)的活化。另外，血小板內(nèi)容物中包含有種類較多的凝血因子，血容物中包含有種類較多的凝血因子，血小板活化釋放時，因凝血因子的釋放而小板活化釋放時，因凝血因子的釋放而加強局部的凝血作用。加強局部的凝血作用。血小板的作用血小板的作用(3) （5）血塊收縮功能）血塊收縮功能活化的血小板釋放血活化的血小板釋放血塊收縮蛋白，使血塊收縮，有利于創(chuàng)口的塊收縮蛋白，使血塊收縮，有利于創(chuàng)口的縮小和愈合?？s小和愈合。 （6）維護血管內(nèi)皮的完整性）維護血管內(nèi)皮的完整性血小板能填血小板能填充受傷內(nèi)皮細胞所造成的空隙，參與血管充受傷內(nèi)皮細胞

11、所造成的空隙，參與血管內(nèi)皮細胞的再生和修復(fù)過程，能增強血管內(nèi)皮細胞的再生和修復(fù)過程，能增強血管壁的抗力，減低血管壁的通透性和脆性。壁的抗力，減低血管壁的通透性和脆性。 血小板止血功能示意圖 一一. . 凝血因子的一般特性凝血因子的一般特性（一）依賴維生素（一）依賴維生素 K 凝血因子凝血因子（二）接觸激活因子（二）接觸激活因子（三）凝血酶敏感因子（三）凝血酶敏感因子（四）其他因子四）其他因子Thr mbosis （一）依賴維生素（一）依賴維生素 K K 凝血因子凝血因子F、F、F、F：共同特征：共同特征： N末端含有末端含有羧基谷氨酸殘基，此羧基依賴羧基谷氨酸殘基，此羧基依賴VitK在合成的最

12、后環(huán)節(jié)轉(zhuǎn)接上去。在合成的最后環(huán)節(jié)轉(zhuǎn)接上去。合成部位：合成部位：肝臟肝臟維生素維生素K依賴因子依賴因子 II、VII、IX、X 維生素維生素K又稱為凝血維生素，天然維生素又稱為凝血維生素，天然維生素K有有K1和和K2兩種，人工合成的是兩種，人工合成的是2-甲基萘醌甲基萘醌的衍生物。的衍生物。 肝細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)合成的某些凝血因子的無肝細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)合成的某些凝血因子的無活性前體，在以維生素活性前體，在以維生素K為輔助因子的羧化為輔助因子的羧化酶作用下，將其分子中多數(shù)谷氨酸羧化成酶作用下，將其分子中多數(shù)谷氨酸羧化成羧基谷氨酸，易與羧基谷氨酸，易與Ca+在螯合，然后經(jīng)水在螯合，然后經(jīng)水解轉(zhuǎn)變成有活性的凝血

13、因子，并脫去解轉(zhuǎn)變成有活性的凝血因子，并脫去1分子分子多肽。多肽。 維生素維生素K1廣泛分布于綠色植物及動物廣泛分布于綠色植物及動物肝臟中，肝臟中，K2則是人體腸道細菌的代謝則是人體腸道細菌的代謝產(chǎn)物，在魚肉中也較豐富。產(chǎn)物，在魚肉中也較豐富。 由于腸道梗阻、腹瀉等原因引起脂類消由于腸道梗阻、腹瀉等原因引起脂類消化吸收不良，或在長期服用廣譜抗菌素化吸收不良，或在長期服用廣譜抗菌素抑制了腸道細菌生成的情況下，易引起抑制了腸道細菌生成的情況下，易引起維生素維生素K的缺乏。新生兒腸道的缺乏。新生兒腸道 中無細菌，中無細菌，很少合成維生素很少合成維生素K，攝入量也不足，易，攝入量也不足，易缺乏。缺乏。

14、 （二）接觸系統(tǒng)因子（二）接觸系統(tǒng)因子F、F、PK、HMWK： 共同特征：共同特征： 可被液相物質(zhì)（可被液相物質(zhì)（a）或固相物質(zhì)（體外）或固相物質(zhì)（體外 帶負電荷）激活。帶負電荷）激活。 活化后的因子能接觸激活其他因子。活化后的因子能接觸激活其他因子。 可參與纖溶和補體系統(tǒng)的活化?？蓞⑴c纖溶和補體系統(tǒng)的活化。 缺乏：無出血，而有血栓形成及纖溶活性缺乏：無出血，而有血栓形成及纖溶活性 下降的趨勢。下降的趨勢。合成部位：合成部位：肝臟肝臟 a 膠 原 固相激活激肽釋放酶激肽釋放酶HMWK激肽激肽激肽釋放酶原激肽釋放酶原XIIfXIXIa纖維蛋白原纖維蛋白原前激活物前激活物纖溶酶原激纖溶酶原激活物活

15、物 （三）凝血酶敏感因子（三）凝血酶敏感因子F、F、F、F：共同特征：共同特征： 對凝血酶（對凝血酶（a）敏感。）敏感。合成部位：合成部位：F 、 肝臟肝臟 F 不明不明 F 肝、血小板肝、血小板（四）其他因子（四）其他因子F、F、vWF：合成部位：合成部位：F 腦、胎盤、肺等各種組織腦、胎盤、肺等各種組織 F Ca2+ vWF 內(nèi)皮、血小板內(nèi)皮、血小板 酶八、輔三、底物一酶八、輔三、底物一 II、VII、IX、X、K依賴依賴 肝臟合成血中全肝臟合成血中全 I、II、V、VIII血清無血清無 因子因子（即纖維蛋白原，（即纖維蛋白原，fibrinogen,Fg）：）： 由三對多肽鏈組成的對稱性二

16、由三對多肽鏈組成的對稱性二聚體糖蛋白，三條多肽鏈分別是聚體糖蛋白，三條多肽鏈分別是(A)、(B)、。Fg是血漿中含量最高的凝血是血漿中含量最高的凝血因子，血漿中濃度為因子，血漿中濃度為2.04.0g/L。其功。其功能除直接參與凝血過程外，還具有其能除直接參與凝血過程外，還具有其他多樣功能，如與血小板膜糖蛋白他多樣功能，如與血小板膜糖蛋白b/a結(jié)合而倡導(dǎo)血小板聚集反應(yīng)、結(jié)合而倡導(dǎo)血小板聚集反應(yīng)、參與動脈粥樣硬化及腫瘤血行轉(zhuǎn)移等，參與動脈粥樣硬化及腫瘤血行轉(zhuǎn)移等，F(xiàn)g水平升高還是誘發(fā)心、腦血管疾病水平升高還是誘發(fā)心、腦血管疾病發(fā)病的重要因素。發(fā)病的重要因素。 FII(凝血酶原凝血酶原)是單鏈糖蛋白

17、，是單鏈糖蛋白，分子量分子量68,000，血漿濃度血漿濃度200mg/L。在多成分酶復(fù)合物凝血酶。在多成分酶復(fù)合物凝血酶原酶作用下，凝血酶原分子蘇氨酸位先斷裂，原酶作用下，凝血酶原分子蘇氨酸位先斷裂，釋放含有釋放含有Glaa的活化肽（的活化肽（fragment1、2）；）；接著異亮氨酸斷裂，產(chǎn)生由重鏈和輕鏈組成的接著異亮氨酸斷裂，產(chǎn)生由重鏈和輕鏈組成的-凝血酶，活性位絲氨酸位于重鏈。凝血酶原凝血酶，活性位絲氨酸位于重鏈。凝血酶原活化肽是近年來許多研究的主要內(nèi)容?；罨氖墙陙碓S多研究的主要內(nèi)容。1985年年Covers-Riemslag等發(fā)現(xiàn)，凝血酶原活化肽在等發(fā)現(xiàn)，凝血酶原活化肽在凝血酶原激

18、活過程中起調(diào)節(jié)作用。凝血酶原激活過程中起調(diào)節(jié)作用。1987年年P(guān)ieters等報道，它具有中和肝素的作用。等報道，它具有中和肝素的作用。 組織因子組織因子TF又稱為組織凝血活酶又稱為組織凝血活酶（廣泛存在于（廣泛存在于人體和動物組織細胞中，特別在腦、肺和胎盤組人體和動物組織細胞中，特別在腦、肺和胎盤組織中含量豐富，屬于糖蛋白，分子量織中含量豐富，屬于糖蛋白，分子量46,000。TF是由脫輔基蛋白和磷脂組成的脂蛋白，蛋白是由脫輔基蛋白和磷脂組成的脂蛋白，蛋白部分占有酶活性。部分占有酶活性。TF的某些區(qū)域呈現(xiàn)傳遞膜蛋的某些區(qū)域呈現(xiàn)傳遞膜蛋白特征，可能含有因子白特征，可能含有因子VII的細胞表面受體

19、。純的細胞表面受體。純化的脫輔基蛋白化的脫輔基蛋白III單獨不具備任何促凝活性，但單獨不具備任何促凝活性，但與適量的磷脂重組后可重現(xiàn)促凝活性。與適量的磷脂重組后可重現(xiàn)促凝活性。 因子因子（即鈣離子，（即鈣離子，Ca2+） ：在凝血過程中在凝血過程中Ca2+參與參與F與與FXIII的活化，參與的活化，參與Fa與與Fa、TF和和Fa、Fa與與Fa等復(fù)合等復(fù)合物的活化。物的活化。Ca2+主要促使活化主要促使活化的凝血因子與磷脂表面形成復(fù)合的凝血因子與磷脂表面形成復(fù)合物，從而促進纖維蛋白的形成，物，從而促進纖維蛋白的形成，最后使血液凝固。最后使血液凝固。 因子因子V（factor V,FV）：）：FV

20、單鏈糖單鏈糖蛋白，分子量蛋白，分子量330,000，血漿濃度，血漿濃度30nmol/L。FV是是FXa的輔因子，參與的輔因子，參與凝血酶原的激活。近年來，血小板凝血酶原的激活。近年來，血小板FV也得到分離，在牛主動脈內(nèi)皮細胞也也得到分離，在牛主動脈內(nèi)皮細胞也發(fā)現(xiàn)有發(fā)現(xiàn)有FV活性。活性。FV可被凝血酶和可被凝血酶和FXa激活，但凝血酶可能是生理性激活劑。激活，但凝血酶可能是生理性激活劑。FV缺陷有副血友病之稱。缺陷有副血友病之稱。FV缺陷有缺陷有CRM和和CRM形式。形式。FV缺陷病人缺陷病人通常僅有輕度出血癥狀。通常僅有輕度出血癥狀。 因子因子VII（factor VII，F(xiàn) VII） F V

21、II屬于單屬于單鏈糖蛋白，分子量鏈糖蛋白，分子量60,000，血漿濃度約為，血漿濃度約為10mg/L。它是由。它是由TF介導(dǎo)的凝血激活途徑介導(dǎo)的凝血激活途徑的啟動酶，本身具有水解酶活性（通常表示的啟動酶，本身具有水解酶活性（通常表示為為VII（a）。在適宜條件下，可以二異丙）。在適宜條件下，可以二異丙基氟磷酸（基氟磷酸（DFP）摻入）摻入FVII（a）絲氨酸活）絲氨酸活性位。性位。FVII（a）可進一步被因子）可進一步被因子Xa或凝血或凝血酶反饋激活，在異亮氨酸位分裂成雙鏈形式酶反饋激活，在異亮氨酸位分裂成雙鏈形式（VIIa），重鏈含絲氨酸活性位（分子量約），重鏈含絲氨酸活性位（分子量約295

22、00），輕鏈含），輕鏈含Glas(分子量約分子量約23500)。在此激活反應(yīng)過程中，無活性肽釋放。在此激活反應(yīng)過程中，無活性肽釋放。FVII（a）經(jīng)激活轉(zhuǎn)變成）經(jīng)激活轉(zhuǎn)變成FVIIa后，凝血活性增加后，凝血活性增加約約100倍。倍。 因子因子VIII（factor VIII，F(xiàn) VIII） F VIII是由復(fù)合多是由復(fù)合多肽鏈組成的糖蛋白，其分子量因測定方法不同差肽鏈組成的糖蛋白，其分子量因測定方法不同差異很大（約異很大（約200000），血漿濃度約），血漿濃度約11.5nmol/L。在血漿中，在血漿中，F(xiàn) VIII促凝蛋白（促凝蛋白（F VIII：C）與）與vWF緊密結(jié)合，難于純化。近年來，

23、人緊密結(jié)合，難于純化。近年來，人F VIII:C的的cDNA密碼得到解析，有關(guān)密碼得到解析，有關(guān)F VIII:C的結(jié)構(gòu)和功能的結(jié)構(gòu)和功能得到深入了解。血友病得到深入了解。血友病A缺乏缺乏FVIII，可根據(jù)血漿，可根據(jù)血漿FVIII：C活性分為重癥（活性分為重癥（1），中等度（），中等度（15）和輕度（和輕度（525）。）。 vWF系一種多聚體，成熟系一種多聚體，成熟vWF是不均一蛋是不均一蛋白，白， vWF的亞單位分子量為的亞單位分子量為250,000，由，由2050個氨基酸殘基組成。二聚體的分子量個氨基酸殘基組成。二聚體的分子量由由500,0001000,000。血漿。血漿vWF抗原濃度抗原

24、濃度約為約為10mg/L。 vWF有兩方面的功能，第一作為血漿中凝有兩方面的功能，第一作為血漿中凝血因子血因子的載體，第二促進血小板粘附于的載體，第二促進血小板粘附于受損血管壁。受損血管壁。vWF的缺乏可導(dǎo)致血管性血的缺乏可導(dǎo)致血管性血友?。ㄓ巡。╲WD）。）。 因子因子IX（factor IX，F(xiàn) IX） FIX又稱抗血友病又稱抗血友病B因因子，子，是單鏈糖蛋白，分子量是單鏈糖蛋白，分子量57000，血漿濃度約，血漿濃度約80nmol/L。F IX可被可被F IXa或或TFF VII(a)復(fù)合物激復(fù)合物激活，兩者反應(yīng)都需要鈣離子的存在?；?，兩者反應(yīng)都需要鈣離子的存在。F IX的的N端丙端丙酸

25、位斷裂后產(chǎn)生由二硫鍵連接的雙鏈形成，纈氨酸酸位斷裂后產(chǎn)生由二硫鍵連接的雙鏈形成，纈氨酸位斷裂后也產(chǎn)生雙鏈形成（位斷裂后也產(chǎn)生雙鏈形成（F IXa），同時釋放含碳），同時釋放含碳水化合物的肽段（分子量水化合物的肽段（分子量9000）。絲氨酸活性位位）。絲氨酸活性位位于于C端（端（27000區(qū)）。由于區(qū)）。由于FIXa失掉分子量失掉分子量9000的的活性肽，分子量變成活性肽，分子量變成46500。 因子因子X（factor X，F(xiàn) X） F X(又稱為又稱為Stuart-Prower因子因子)是雙鏈糖蛋白，分子量約是雙鏈糖蛋白，分子量約55000，血，血漿濃度約漿濃度約160nmol/L。F X是

26、由重鏈（分子量是由重鏈（分子量37000）和輕鏈（分子量）和輕鏈（分子量17000）組成，肽鏈之間）組成，肽鏈之間由二硫鍵連接，輕鏈相當(dāng)于其它維生素由二硫鍵連接，輕鏈相當(dāng)于其它維生素K依賴性凝依賴性凝血蛋白的血蛋白的N端，含有端，含有12個個Glas。F X既可被多成分既可被多成分酶復(fù)合物酶復(fù)合物F X酶（酶（tenase,由由F IXa、F VIIIa、鈣離、鈣離子和磷脂組成）激活，又可被子和磷脂組成）激活，又可被TFFVIIa復(fù)合物激復(fù)合物激活。在活。在F X酶或酶或TFF VIIa復(fù)合物的激活作用下，復(fù)合物的激活作用下，重鏈上的異亮氨酸位斷裂，生成重鏈上的異亮氨酸位斷裂，生成-F X，同

27、時釋放，同時釋放分子量分子量7000的肽段。的肽段。-F Xa具有自動水解酶的作具有自動水解酶的作用，可進一步使其丙氨酸位斷裂，產(chǎn)生用，可進一步使其丙氨酸位斷裂，產(chǎn)生-F Xa。-F Xa也可以水解蘇氨酸位，但過程緩慢，可能也可以水解蘇氨酸位，但過程緩慢，可能不具有生理學(xué)意義。不具有生理學(xué)意義。 因子因子XI（factor XI, FXI）：）：FXI是由兩個等同的多是由兩個等同的多肽鏈組成的的糖蛋白，分子量肽鏈組成的的糖蛋白，分子量210,000，據(jù)，據(jù)cDNA密碼核苷酸順序分析，每個肽鏈由密碼核苷酸順序分析，每個肽鏈由607個氨基酸殘個氨基酸殘基組成，其中約基組成，其中約58的順序與前激肽

28、釋放酶相同，的順序與前激肽釋放酶相同，F(xiàn)XI在循環(huán)中以非共價鍵與高分子量激肽原結(jié)合成在循環(huán)中以非共價鍵與高分子量激肽原結(jié)合成雙分子復(fù)合物，當(dāng)接觸活化反應(yīng)發(fā)生時與表面結(jié)合。雙分子復(fù)合物，當(dāng)接觸活化反應(yīng)發(fā)生時與表面結(jié)合。FXI在在-FXIa限制性蛋白酶作用下，每個多肽鏈上限制性蛋白酶作用下，每個多肽鏈上的精的精369-異亮異亮370位斷裂，生成由重鏈（分子量位斷裂，生成由重鏈（分子量48000）和輕鏈（分子量）和輕鏈（分子量35000）組成的）組成的FXIa。每。每個輕鏈占有一個活性位，氨基酸順序呈典型的絲氨個輕鏈占有一個活性位，氨基酸順序呈典型的絲氨酸蛋白酶。還原凝膠電泳分析顯示，酸蛋白酶。還原

29、凝膠電泳分析顯示，F(xiàn)XI與高分子與高分子量激肽原結(jié)合的部位位于重鏈部分。該部位也是在量激肽原結(jié)合的部位位于重鏈部分。該部位也是在FXIa、FXI激活過程中的鈣離子結(jié)合位。激活過程中的鈣離子結(jié)合位。 因子因子XII（factor XII, FXII）：）：FXII是單鏈糖蛋白，由是單鏈糖蛋白，由536個氨基酸殘基組成，分子量個氨基酸殘基組成，分子量80000。FXII在血漿在血漿激肽釋放酶限制性蛋白酶水解作用下產(chǎn)生兩種活性激肽釋放酶限制性蛋白酶水解作用下產(chǎn)生兩種活性酶形式，即酶形式，即-F XIIa和和-FXIIa。在。在FXII活化過程中，活化過程中，首先精氨酸首先精氨酸353位斷裂，產(chǎn)生分子

30、量位斷裂，產(chǎn)生分子量80,000的雙鏈活的雙鏈活性性-FXIIa。-FXIIa是由重鏈（分子量是由重鏈（分子量50,000）輕鏈）輕鏈（分子量（分子量28,000）組成，肽鏈之間由二硫鏈連接。）組成，肽鏈之間由二硫鏈連接。N端位于重鏈區(qū)，具有很強的表面結(jié)合能力。重鏈端位于重鏈區(qū)，具有很強的表面結(jié)合能力。重鏈部分含若干折疊區(qū)域，也見于其他相關(guān)的蛋白（如部分含若干折疊區(qū)域，也見于其他相關(guān)的蛋白（如纖維結(jié)合蛋白纖維結(jié)合蛋白I和和II型、蛋白型、蛋白C、FIX和和FX），其中環(huán)），其中環(huán)餅區(qū)也見于纖溶酶原、組織纖溶酶原激活物、尿激餅區(qū)也見于纖溶酶原、組織纖溶酶原激活物、尿激酶和凝血酶原。酶和凝血酶原。

31、C端位于輕鏈，占有酶活性中心，端位于輕鏈，占有酶活性中心，其組成和結(jié)構(gòu)與其他絲氨酸蛋白水解酶相似。其組成和結(jié)構(gòu)與其他絲氨酸蛋白水解酶相似。 大多數(shù)大多數(shù)FXII缺陷病人為常染色體顯性遺傳，缺陷病人為常染色體顯性遺傳，也有為數(shù)不多的隱性遺傳病例報道，兩性也有為數(shù)不多的隱性遺傳病例報道，兩性均可受累。均可受累。FXII缺陷不像其他凝血因子缺缺陷不像其他凝血因子缺陷，病人無任何出血癥狀，相反，卻常合陷，病人無任何出血癥狀，相反，卻常合并血栓栓塞性疾病，如首例發(fā)現(xiàn)的并血栓栓塞性疾病，如首例發(fā)現(xiàn)的FXII缺缺陷病人陷病人Hagmen先生最終死于肺栓塞。實先生最終死于肺栓塞。實際上從那時起，接觸活化凝血理

32、論（內(nèi)源際上從那時起，接觸活化凝血理論（內(nèi)源凝血活化途徑）就已面臨著嚴峻挑戰(zhàn)，現(xiàn)凝血活化途徑）就已面臨著嚴峻挑戰(zhàn)，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)TF-a復(fù)合物可使復(fù)合物可使F活化成活化成Fa.，啟動內(nèi)源性凝血系統(tǒng)；同時與啟動內(nèi)源性凝血系統(tǒng)；同時與F結(jié)合后形結(jié)合后形成成Fa，促進凝血酶的形成，由此可解釋，促進凝血酶的形成，由此可解釋FXII缺陷病人不引起出血，反而可導(dǎo)致血缺陷病人不引起出血，反而可導(dǎo)致血栓性疾病。栓性疾病。 前激肽釋放酶（前激肽釋放酶（prekallilarein, PK）：）：PK是單是單鏈糖蛋白，由鏈糖蛋白，由619年氨基酸殘基組成，分子量為年氨基酸殘基組成，分子量為88000。與。與F X

33、I相似，相似，PK在血漿里以非共價鍵形成在血漿里以非共價鍵形成與高分子量激肽原結(jié)合成復(fù)合物，在接觸活化反應(yīng)與高分子量激肽原結(jié)合成復(fù)合物，在接觸活化反應(yīng)過程中與反應(yīng)表面結(jié)合。血漿過程中與反應(yīng)表面結(jié)合。血漿PK經(jīng)蛋白酶水解活經(jīng)蛋白酶水解活化后可生成兩種活性酶形式?；罂缮蓛煞N活性酶形式。 高分子量激肽原（高分子量激肽原（high molecular wight kininogen, HMWK）HMWK也是糖蛋白，由也是糖蛋白，由626個氨基酸殘基組成，分子量為個氨基酸殘基組成，分子量為110000。HMWK是是接觸活化反應(yīng)中的非酶性蛋白輔因子。接觸活化反應(yīng)中的非酶性蛋白輔因子。1985年年Kit

34、amura等闡明了人等闡明了人HMWK血漿的完全基因結(jié)構(gòu)。血漿的完全基因結(jié)構(gòu)。在血漿激肽釋放酶的作用下，在血漿激肽釋放酶的作用下，HMWK的兩個內(nèi)肽鏈的兩個內(nèi)肽鏈斷列，釋放血管活性物質(zhì)舒緩激肽，并生成由重鏈斷列，釋放血管活性物質(zhì)舒緩激肽，并生成由重鏈和輕鏈組成的雙分子肽鏈。和輕鏈組成的雙分子肽鏈。N端位于重鏈而端位于重鏈而C端位端位于輕鏈。重鏈與于輕鏈。重鏈與HMWK相同，不含促凝活性。輕鏈相同，不含促凝活性。輕鏈區(qū)域內(nèi)富含組氨酸、賴氨酸和甘氨酸。這些具有很區(qū)域內(nèi)富含組氨酸、賴氨酸和甘氨酸。這些具有很高陽性電荷的區(qū)域可能高陽性電荷的區(qū)域可能HMWK 與陰性表面結(jié)合。與陰性表面結(jié)合。除激肽釋放酶

35、外，除激肽釋放酶外，-FXIIa也顯示激活也顯示激活HMWK，但，但激活速率慢。激活速率慢。 I：纖維蛋白原：纖維蛋白原 II：凝血酶原：凝血酶原 III：組織因子、組織凝血活酶：組織因子、組織凝血活酶 V：易變因子：易變因子 VII：穩(wěn)定因子：穩(wěn)定因子 VIII：抗血友病球蛋白：抗血友病球蛋白 IX：血漿凝血活酶成分：血漿凝血活酶成分 X：Stuart-Prower因子因子 XII：接觸因子：接觸因子 二二. . 凝血因子的功能及其分子基礎(chǔ)凝血因子的功能及其分子基礎(chǔ)（一）纖維蛋白形成的基礎(chǔ)（一）纖維蛋白形成的基礎(chǔ)（二）凝血酶形成的基礎(chǔ)（二）凝血酶形成的基礎(chǔ)（三）凝血活化的基礎(chǔ)（三）凝血活化的

36、基礎(chǔ)（一）纖維蛋白形成的基礎(chǔ)（一）纖維蛋白形成的基礎(chǔ)1.纖維蛋白的形成纖維蛋白的形成（1）分解）分解（2）聚合）聚合（3）凝固）凝固2.因子因子的激活的激活1.纖維蛋白的形成纖維蛋白的形成（1）分解：）分解：E區(qū)區(qū)D區(qū)區(qū)D區(qū)區(qū)1. 1.纖維蛋白的形成纖維蛋白的形成FibrinogenFibrinT ThrombinFibrinopeptides A BFibrin monomerdesAAdesBBFgFibrinogen精精-甘甘（1）分）分 解：解： 分解（分解（FM的形成）：的形成）：在凝血酶作用下，在凝血酶作用下，F(xiàn)g的的（A）鏈上精（）鏈上精（16）-甘（甘（17）鍵和）鍵和Fg的的

37、鏈上精（鏈上精（14）-甘（甘（15）鍵先后被裂解，）鍵先后被裂解，分別釋出纖維蛋白肽分別釋出纖維蛋白肽A（FPA）和纖維蛋白）和纖維蛋白肽肽B（FPB）。此時的）。此時的Fg分別轉(zhuǎn)變成纖維分別轉(zhuǎn)變成纖維蛋白蛋白I（Fb-I）和纖維蛋白）和纖維蛋白II（Fb-II）。現(xiàn)）。現(xiàn)在同意稱謂在同意稱謂“去去A去去B的纖維蛋白原的纖維蛋白原”或或“desAAdesBBFg”，也有人將其稱為血，也有人將其稱為血栓前體蛋白（栓前體蛋白（PTP）。）。 （2）聚）聚 合合FibrinogenFibrinT ThrombinFibrin monomer FMdesAAdesBBFgSoluble FMFact

38、or XIIIaSoluble fibrin monomer SFM 聚合（聚合（FM的聚合）：的聚合）：FPA和和FPB從從Fg中釋放后，中釋放后，F(xiàn)b-I和（或）和（或）Fb-II分子分子N端端區(qū)的自身聚合位點被暴露。如區(qū)的自身聚合位點被暴露。如FPA的的釋放，使釋放，使Fb-I分子分子E區(qū)暴露出區(qū)暴露出A位點，位點，與另一與另一Fb-I的的D區(qū)相應(yīng)位點結(jié)合；區(qū)相應(yīng)位點結(jié)合；FPB的釋放，的釋放，F(xiàn)b-II分子分子E區(qū)暴露出區(qū)暴露出B位點，位點，與相鄰與相鄰Fb-II的的D區(qū)相應(yīng)位點結(jié)合，形成區(qū)相應(yīng)位點結(jié)合，形成纖維蛋白單體聚合物。這種聚合物以纖維蛋白單體聚合物。這種聚合物以氫鍵聚合，很不

39、穩(wěn)定，可溶于氫鍵聚合，很不穩(wěn)定，可溶于50molL（30）尿素或）尿素或1單氯（碘）醋酸單氯（碘）醋酸溶液中，故稱為可溶性溶液中，故稱為可溶性FM聚合物聚合物（SFM）。）。 （3）凝）凝 固固FibrinogenFibrinT ThrombinFibrin monomerdesAAdesBBFgFibrin PolymerFactor XIIIaCa2+ ：CO-NH 凝固（交聯(lián)纖維蛋白形成）：凝固（交聯(lián)纖維蛋白形成）：SFM在在FXIIIa和和Ca2+作用下，作用下，鏈分子和鏈分子和鏈之間以共價鍵鏈之間以共價鍵（-CO-NH-）交聯(lián)，形成不）交聯(lián)，形成不溶性溶性FM聚合物，此即纖維蛋聚合物

40、，此即纖維蛋白（白（fibrin，F(xiàn)b）。）。2. 2.因子因子 XIIIXIII的活化的活化Activation of factor XIII賴氨酸連接賴氨酸連接 因子因子XIII的激活的激活 FXIII在凝血酶和在凝血酶和Ca2+的作用下，的作用下，F(xiàn)XIII2鏈鏈N端的精端的精-甘甘鍵斷裂，脫去兩條鍵斷裂，脫去兩條MW為為4000的小肽，的小肽，生成無活性的中間產(chǎn)物生成無活性的中間產(chǎn)物22，然后在，然后在Ca2+作用下，作用下，22發(fā)生解離，生成發(fā)生解離，生成有谷氨酰胺酶活性的有谷氨酰胺酶活性的FXIIa（2）。）。2是是2的載體，無活性。的載體，無活性。 FXIIIa能使一個能使一個F

41、M的側(cè)鏈上的谷氨酰的側(cè)鏈上的谷氨酰胺與另一個胺與另一個FM側(cè)鏈上的賴氨酸之間形側(cè)鏈上的賴氨酸之間形成成（谷氨酞）賴氨酸聯(lián)結(jié)，此作用谷氨酞）賴氨酸聯(lián)結(jié)，此作用主要在纖維蛋白的主要在纖維蛋白的鏈之間以及鏈之間以及鏈之鏈之間進行。間進行。 三三. . 凝血機制凝血機制（一）內(nèi)源凝血途徑（一）內(nèi)源凝血途徑（二）外源凝血途徑（二）外源凝血途徑（三）共同途徑（三）共同途徑FIBRIN CLOTFIBRIN CLOTFigure 3. COAGULATION CASCADE內(nèi)源凝血系統(tǒng)內(nèi)源凝血系統(tǒng)固、液固、液FIBRIN CLOTFIBRIN CLOTFigure 3. COAGULATION CASCAD

42、ETissue factor（TF）aa-TF- Ca2+外源凝血系統(tǒng)外源凝血系統(tǒng)（二）（二） 外源凝血途徑外源凝血途徑FIBRIN CLOTFIBRIN CLOTFigure 3. COAGULATION CASCADE共同途徑共同途徑（三）（三） 共同途徑共同途徑Figure 3. COAGULATION CASCADEInjury to vessel exposes collagen fiber血小板計數(shù)血小板計數(shù)（platelet count , PC或或PLT）血小板光鏡結(jié)構(gòu)血小板光鏡結(jié)構(gòu)血小板電鏡結(jié)構(gòu)血小板電鏡結(jié)構(gòu) 參于止血和凝血參于止血和凝血 表面糖衣表面糖衣, ,凝血因子凝血因

43、子;顆粒內(nèi)凝血物質(zhì)顆粒內(nèi)凝血物質(zhì). . 凝血因子凝血因子 凝血酶原凝血酶原凝血酶凝血酶 纖維蛋白原纖維蛋白原纖維蛋白纖維蛋白 血細胞血細胞 保護血管內(nèi)皮，參與血管內(nèi)皮修復(fù)，防止動保護血管內(nèi)皮，參與血管內(nèi)皮修復(fù)，防止動脈粥樣硬化脈粥樣硬化血小板功能血小板功能血凝塊血凝塊一、計數(shù)方法一、計數(shù)方法顯微鏡手工計數(shù)法顯微鏡手工計數(shù)法 血細胞分析儀計數(shù)血細胞分析儀計數(shù) 流式細胞儀分析流式細胞儀分析 （100300）109/L二、參考范圍二、參考范圍PCPC202010109 9/L/L可引起自發(fā)性出血可引起自發(fā)性出血危險三、臨床意義 1 1、生理性、生理性 正常人血小板數(shù)正常人血小板數(shù)1d內(nèi)可有內(nèi)可有6%

44、10%的變化，的變化，表現(xiàn)為早晨較低，午后較高；春季較低，表現(xiàn)為早晨較低，午后較高；春季較低，冬季略高；平原較低，高原較高；月經(jīng)前冬季略高；平原較低，高原較高；月經(jīng)前較低，月經(jīng)后較高；妊娠中晚期升高，分較低，月經(jīng)后較高；妊娠中晚期升高，分娩后即降低；運動后升高，休息后恢復(fù)；娩后即降低；運動后升高，休息后恢復(fù)；靜脈血比毛細血管血高靜脈血比毛細血管血高10%。三、臨床意義 2 2、病理性、病理性 血小板減少：血小板減少：血小板數(shù)量低于血小板數(shù)量低于100109/L稱為血小板減少。引起血小板數(shù)減少的原稱為血小板減少。引起血小板數(shù)減少的原因：因： 血小板生成障礙血小板生成障礙 血小板破壞增加血小板破壞

45、增加 血小板消耗增多血小板消耗增多 血小板分布異常血小板分布異常 血小板增多：血小板增多：血小板數(shù)量超過血小板數(shù)量超過400109/L稱為血小板增多稱為血小板增多病病。引起血小板數(shù)增多的。引起血小板數(shù)增多的原因：原因：骨髓增生性疾病骨髓增生性疾病急性大出血、急性溶血急性大出血、急性溶血脾切除后脾切除后感染及炎癥性疾病感染及炎癥性疾病腫瘤腫瘤三、臨床意義2 2、病理性、病理性 “血凝常規(guī)血凝常規(guī)”檢驗項目是一組凝血檢驗項目是一組凝血因子篩選試驗，包括測定：因子篩選試驗，包括測定：白陶土白陶土部分凝血活酶時間（部分凝血活酶時間（KPTTKPTT）或活化）或活化部分凝血活酶時間（部分凝血活酶時間（A

46、PTTAPTT），），凝血凝血酶原時間（酶原時間（PTPT），），凝血酶（凝固）凝血酶（凝固）時間（時間（TTTT或或TCTTCT）和和纖維蛋白原纖維蛋白原（FgFg）定量。）定量。 1白陶土部分凝血活酶時間（白陶土部分凝血活酶時間（KPTT） 【參考值】【參考值】 373.3秒，受檢者的測定值較正常對照值秒，受檢者的測定值較正常對照值延長延長超過超過10秒以上才有病理意義。秒以上才有病理意義。 【臨床意義】【臨床意義】 （1）KPTT延長延長 ：因子因子、和和血漿水平減低，血漿水平減低，如血友病甲如血友病甲/乙；因子乙；因子減少還見于部分血管性血友病減少還見于部分血管性血友病患者；患者；嚴重的嚴重的凝血酶原、因子凝血酶原、因子、因子、因子和纖維蛋和纖維蛋白原缺乏白原缺乏，如肝病、阻塞性黃疸、新生兒出血癥、腸，如肝病、阻塞性黃疸、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合癥、吸收不良綜合癥、囗服抗凝劑、應(yīng)用道滅菌綜合癥、吸收不良綜合癥、囗服抗凝劑、應(yīng)用肝素以及纖維蛋白原缺乏血癥等；肝素以及纖維蛋白原缺乏血癥等；纖溶活性增強，纖溶活性增強，如繼發(fā)性、原發(fā)性纖溶亢進及循環(huán)血液中有纖維蛋白如繼發(fā)性、原發(fā)性纖溶亢進及循環(huán)血液中有纖維蛋白(原原)降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物(FDP); 血循環(huán)中有血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)抗凝物質(zhì)，如抗因，如抗因子子/抗體，狼瘡抗凝物質(zhì)等?？贵w，狼瘡抗凝物質(zhì)等。 （2