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1、 培養(yǎng)基(培養(yǎng)基(medium)是植物組織培養(yǎng)的重要材料,)是植物組織培養(yǎng)的重要材料,是外植體生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),只有配制出適宜的培養(yǎng)是外植體生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),只有配制出適宜的培養(yǎng)基,才能使組織培養(yǎng)獲得成功?;拍苁菇M織培養(yǎng)獲得成功。 通常植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基包括以下成分,即通常植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基包括以下成分,即水水、無(wú)機(jī)鹽類、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、無(wú)機(jī)鹽類、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、天然有機(jī)物質(zhì)、凝固劑以及其他附加物天然有機(jī)物質(zhì)、凝固劑以及其他附加物等。等。 培養(yǎng)基的主要指標(biāo)是營(yíng)養(yǎng)成分及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物培養(yǎng)基的主要指標(biāo)是營(yíng)養(yǎng)成分及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的濃度。質(zhì)的濃度。(1)按培養(yǎng)基組

2、成物質(zhì)的化學(xué)成分 合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基。(2)按物理性質(zhì) 固體,液體(3)按用途 選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基等 水 無(wú)機(jī)鹽 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分培養(yǎng)基的 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)構(gòu)成要素 天然有機(jī)物質(zhì) ph 凝固劑 其他添加物*1水1.水良好的溶劑,溶解營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),細(xì)胞的滲透、分泌、排泄等作用都是以水為媒介,并且水直接參與代謝作用中的許多反應(yīng)2.水的比熱高,是熱的良導(dǎo)體,調(diào)節(jié)細(xì)胞的溫度 3.恒定的水源是發(fā)酵工廠的關(guān)鍵,水源質(zhì)量很重要* 磷酸鹽、鉀鹽、鈣鹽等礦物鹽*2.無(wú)機(jī)鹽 * 鐵、錳、鈷等微量元素* 功能:構(gòu)成菌體,參與酶的組成,維持酶活性,調(diào)節(jié)滲透壓,調(diào)節(jié)pH值,維持氧化還原電位;* 糖類物質(zhì)

3、碳源和能源*3.有機(jī)營(yíng)養(yǎng) 維生素類 促進(jìn)植物生長(zhǎng)和分化 成分 氨基酸類 提供有機(jī)氮源 促進(jìn)不定芽分化*4植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 植物激素是植物新稱代謝中產(chǎn)生的天然化合物,它能以極微小的用量直接影響植物細(xì)胞的分化、分裂以及發(fā)育,影響植物的形態(tài)建成、開(kāi)花、結(jié)實(shí)、成熟、衰老脫落、休眠、萌發(fā)等生理活動(dòng)。 在植物組織培養(yǎng)中,主要通過(guò)植物激素及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)離體的組織、器官的形態(tài)發(fā)生進(jìn)行調(diào)控。包括誘導(dǎo)細(xì)胞分裂、愈傷組織的生長(zhǎng)、根芽的分化以及體細(xì)胞胚胎發(fā)生等。 椰子汁 (添加量100150ml/l) 酵母提取液 (添加量0.01%0.5%) 5.天然有機(jī) 物質(zhì) 番茄汁(添加量5%10%) 香蕉泥(添加量10020

4、0mg/l)通常富含有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分或者生理活性物質(zhì)*5.PH 值 *滅菌前,一般ph為5.56.0之間。最常用的5.75.8。Ph過(guò)高時(shí),培養(yǎng)基會(huì)變硬,過(guò)低會(huì)影響培養(yǎng)基的凝固。*7凝固劑*瓊脂作為固化劑用于組織培養(yǎng)中,起支持植物的作用,不提供營(yíng)養(yǎng),為海藻中提取的一種高分子化合物,僅溶于熱水(90 以上),成為凝膠,冷卻后(40 以下)即凝固為凝膠。* 瓊脂的用量通常在310g/L.* 瓊脂是組織培養(yǎng)培養(yǎng)基中主要的成本支出,約占80。*8其他添加物 為減少外植體的褐變,需要向培養(yǎng)基中加入防褐變的物質(zhì)(活性炭,維生素C等) 培養(yǎng)滅菌較困難的植物時(shí)可加入一些抗生素物質(zhì)(青霉素,鏈霉素)可抑制雜菌的生長(zhǎng)1、含鹽量較高培養(yǎng)基:含鹽量較高培養(yǎng)基:MS、LS、BL等等 無(wú)機(jī)鹽濃度高,微量元素和有機(jī)成分含量豐富。無(wú)機(jī)鹽濃度高,微量元素和有機(jī)成分含量豐富。適用于多數(shù)營(yíng)養(yǎng)需求量較大的植物。適用于多數(shù)營(yíng)養(yǎng)需求量較大的植物。2、硝酸鉀含量較高培養(yǎng)基:硝酸鉀含量較高培養(yǎng)基:B5、 N6等等銨態(tài)氮含量低,但鹽酸硫胺素和硝酸鉀含量銨態(tài)氮含量低,但鹽酸硫胺素和硝酸鉀含量高高3、中等無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基:中等無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)基:H、Miller等等 大量元素濃度約為大量元素濃度約為MS的的1/2。微量元素種類少但。微量元素種類少但含量高。含量高。4、低無(wú)機(jī)鹽含量培養(yǎng)

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