1、綠豆皮可溶性膳食纖維的制備及其性質(zhì)研究導(dǎo) 師：羅 磊匯報(bào)人：王雅琪河南科技大學(xué)2014級(jí)碩士研究生中檢報(bào)告匯報(bào)內(nèi)容立題背景及意義01研究?jī)?nèi)容與方法02下一步工作計(jì)劃03研究成果04我國(guó)是綠豆年產(chǎn)量達(dá)100多萬(wàn)噸，綠豆皮在加工過(guò)程中被丟棄，造成環(huán)境污染和極大資源浪費(fèi)01大部分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)存在于綠豆皮中，具有多種生理功能02綠豆皮中約含60%的纖維素,已證實(shí)其中可溶性膳食纖維（SDF)具有較強(qiáng)生理功能03一、立題背景及意義 采用超微粉碎技術(shù)對(duì)綠豆皮預(yù)處理并進(jìn)行SDF提取工藝研究對(duì)綠豆皮SDF的性質(zhì)進(jìn)行研究研究?jī)?nèi)容與方法綠豆皮一般營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定綠豆皮膳食纖維組成測(cè)定：Southgate改良法（未完成）水

2、分測(cè)定：直接干燥法灰分測(cè)定：灼燒重量法蛋白質(zhì)測(cè)定：凱氏定氮法脂肪測(cè)定：索氏抽提法淀粉測(cè)定：酶水解法水溶性非消化性多糖水不溶性非纖維素多糖纖維素木質(zhì)素單因素試驗(yàn)二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)粉末粒度液料比酶底比酶解時(shí)間酶解溫度酶底比酶解時(shí)間酶解溫度持水力、膨脹力膽酸鹽體外吸附試驗(yàn)：糠醛比色法體外抗氧化試驗(yàn)體內(nèi)抗氧化試驗(yàn)二、研究?jī)?nèi)容與方法小鼠體內(nèi)抗氧化（正在進(jìn)行）細(xì)胞抗氧化（未完成）還原力清除自由基綠豆皮一般營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定 水分測(cè)定：直接干燥法（GB/T 5009.32003）； 灰分測(cè)定：灼燒重量法（GB/T 5009.42003）； 蛋白質(zhì)測(cè)定：凱氏定氮法（GB/T 5009.52003）； 脂肪測(cè)定：

3、索氏抽提法； 淀粉測(cè)定：酶水解法（GB/T 5009.92003）。測(cè)定結(jié)果：2.1、 綠豆皮膳食纖維組成的研究表2-1 綠豆皮一般營(yíng)養(yǎng)成分樣品水分/%蛋白質(zhì)/%脂肪/%淀粉/%灰分/%綠豆皮11.480.29.601.20.240.064.330.981.200.982.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化SDF2.2.1 提取方法依次加入-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶用含纖維素酶用醋酸-醋酸鈉緩沖溶液溶解水浴、滅酶水浴、滅酶、離心離心40電熱鼓風(fēng)干燥箱中干燥稱重用4倍體積的無(wú)水乙醇沉淀沉淀上清液綠豆皮樣品綠豆皮超微粉超微粉碎綠豆皮2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化表2-2 單因素試驗(yàn)結(jié)果因素最佳水

4、平指標(biāo)粉末粒度2538m（過(guò)400目篩不過(guò)500目） SDF提取率（%）液料比30mL/g酶底比200U/g酶解時(shí)間2h酶解溫度552.2.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化表2-3 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)因素水平表Table 2-3 Factors and levels of three-factor second order rotation combination experimental design編碼因素液料比 X1/（mL/g）酶解溫度X2/酶底比X3/（U/g）-1.68226.6446.59149.55-128501700305520013260230

5、1.68233.3663.41250.45j25302.2.3 二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果 通過(guò)二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)得出超微粉碎輔助提取綠豆皮可溶性膳食纖維的優(yōu)化回歸數(shù)學(xué)模型為：Y=12.556461.52783X10.89335X20.85381X30.96375X2X30.59995X120.78910X220.96942X32；相關(guān)系數(shù) R2=0.9590液料比酶解溫度酶底比SDF提取率X1/（mL/g）X2/X3/（U/g）Y/%11115.96211-19.4331-118.8441-1-113.155-11110.236-11-111.867-1-119.328-1-1-11

6、1.669-1.682008.35101.6820013.77110-1.68208.53120-1.682012.521300-1.6828.2414001.68211.321500012.461600012.541700012.731800011.481900013.432000012.63試驗(yàn)號(hào)變異來(lái)源平方和自由度均方比值FP值X129.6645129.664581.068600.0001X210.1422110.142227.717080.0003X39.264319.264325.317860.0004X124.827014.827013.191340.0037X228.350418

7、.350422.820420.0006X3212.6026112.602634.441010.0001X1X20.279510.27950.763710.3863X1X31.688511.68854.614380.0501X2X36.914416.914418.896100.0011回歸85.664399.5183F2=26.0120.0001剩余3.6592100.3659 失擬1.693050.3386F1=0.8610.5632誤差1.966150.3932 總和89.323519 表2-5 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合試驗(yàn)結(jié)果方差分析表Table 2-5 Analysis of varianc

8、e for the regression model developed for extraction yield of polysaccharides表2-4 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果Table 2-4 Three-factor second order rotation combination experimental results2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化2.2 綠豆皮SDF的提取工藝優(yōu)化酶解溫度/酶解溫度/最佳參數(shù)組合：酶底比酶解溫度液料比提取率（實(shí)際）提取率（理論）190U/g6033mL/g14.02%14.08%2.3 綠豆皮可溶性膳食纖維性質(zhì)研究2.3.1 綠

9、豆皮持水力和膨脹力試驗(yàn)結(jié)果編號(hào)持水性/%膨脹力/(mL/g)13742.5624012.8133932.64平均值3892.67表2-6 綠豆皮SDF持水力和膨脹力測(cè)定結(jié)果Table2-6 The water-holding capacity and swelling capacity of SDF from Phaseolus Radiatus hull2.3 綠豆皮可溶性膳食纖維性質(zhì)研究2.3.2 膽酸鹽體外吸附試驗(yàn)結(jié)果圖2-1 膽酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2-1 calibration curve of bile sodium圖2-2 膽酸鈉溶液吸光度值隨時(shí)間變化圖Fig.2-2 Absorb

10、ance of Sodium cholate solution at different time3.732.612.3 綠豆皮可溶性膳食纖維性質(zhì)研究2.3.3 體外抗氧化試驗(yàn)結(jié)果圖2-5 綠豆皮SDF對(duì)羥自由基的清除作用Fig.2-5 Scavenging effects of SDF from Phaseolus Radiatus hull against hydroxyl radicals圖2-4 綠豆皮SDF對(duì)DPPH自由基的清除作用Fig.2-4 Scavenging effects of SDF from Phaseolus Radiatus hull against DPPH r

11、adicals圖2-3 綠豆皮SDF的還原力Fig.2-3 Reducing power of SDF from Phaseolus Radiatus hull當(dāng)質(zhì)量濃度為4mg/mL時(shí)，其還原力為1.526當(dāng)濃度為和4mg/mL時(shí)，其對(duì)DPPH自由基清除率為82.65%當(dāng)濃度為4mg/mL時(shí)，其對(duì)羥自由基清除率為85.16%2.3.4 小鼠體內(nèi)抗氧化研究分組皮下注射灌胃正常對(duì)照組生理鹽水生理鹽水模型對(duì)照組D-半乳糖生理鹽水樣品低劑量組D-半乳糖低濃度樣品（200 mg/kg）樣品中劑量組D-半乳糖中濃度樣品（400 mg/kg）樣品高劑量組D-半乳糖高濃度樣品（600 mg/kg）表2-6小

12、鼠分組給藥方案小鼠品種： BarB/C小鼠、8周齡、體重202g。分組情況： 50只小鼠隨機(jī)分成5組，每組10只，雌雄各半喂養(yǎng)情況： 小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)2周，給藥30d，試驗(yàn)期間飼喂普通飼料，自由攝食和飲水，按右表方案給藥，給藥最后一天空腹過(guò)夜。稱重后眼眶采血，取血后的小鼠頸椎脫臼處死，取其肝臟，以冰生理鹽水洗去浮血，濾紙吸干，稱重。2.3.4 小鼠體內(nèi)抗氧化研究2.3.4 小鼠體內(nèi)抗氧化研究總抗氧化能力的測(cè)定：total antioxidant capacity, T-AOC試劑盒；總超氧化物歧化酶活力測(cè)定：superoxide dismutase, T-SOD試劑盒；丙二醛含量測(cè)定：maleic dialdehyde, MDA試劑盒；谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活力測(cè)定：glutathione