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1、 實 習 三 實習主要內(nèi)容 一、肥達氏反應(yīng)結(jié)果觀察 二、藥敏試驗結(jié)果觀察 三、病毒學實驗 病毒形態(tài)觀察(照片) 病毒培養(yǎng)法及病毒感染性測定(錄像) 病毒感染致細胞病變效應(yīng)(錄像) 四、真菌及其它微生物實習(示教)肥達氏反應(yīng)結(jié)果觀察 一、觀察方法: 先觀察對照管(6號),正確結(jié)果應(yīng)無凝集反應(yīng), 再從1管開始觀察;觀察凝集片與沉淀的比例 根據(jù)液體透明度和凝集塊多少,以4+,3+,2+,+,- 記錄于P65表5-4 , 觀察前勿搖動試管 記錄完后,可輕輕振蕩各管,觀察凝塊的形態(tài) 凝集片與沉淀的比例肥達氏反應(yīng)結(jié)果觀察+- 100%凝集 75%凝集 50%凝集 25%凝集 不凝集區(qū)分 沉淀:中央,圓,實
2、心(只有Ag,沒有Ab) 凝集片:圓片狀,邊緣不整齊,貼管壁。輕輕搖動, 可見凝塊浮起( Ag-Ab復(fù)合物) Ag 一定,患者血清倍比稀釋,Ab含量遞減,則形成Ag-Ab復(fù)合物也遞減,凝集塊也就越小,剩余Ag就形成中心的沉淀根據(jù)凝集片與沉淀的比例區(qū)分:4+,3+,2+,+,-(液體透明度和凝集塊多少)二、觀察指標: 效價:通常以能產(chǎn)生50%凝集(+)的血清最大稀釋倍數(shù) 做為該血清的凝集效價。 O抗體凝集效價在1:80以上 ,H抗體在1:160以上, PA,PB效價在1:80以上有診斷意義 報校價:4種形式 確定值-出現(xiàn)“+” eg號出現(xiàn)“+” 效價為1:160 大于“+” eg 號出現(xiàn) “+”
3、,效價1:640 小于“+” eg 號出現(xiàn)“+”,則效價15mm :高度敏感; 1015mm:中度敏感; 10mm:低度敏感; 無抑菌環(huán):耐藥P- 青霉素 AM-氨芐青霉素 GM -慶大霉素S-鏈霉素 E-紅霉素 CM-克林霉素 亞洲甲型流感病毒球形或絲狀,負鏈分節(jié)段RNA,包膜有2種刺突-HA,NA 腺病毒雙鏈DNA,無包膜,在宿主細胞呈晶格樣排列,整齊排列 鼻病毒(放大倍數(shù))無包膜,在宿主細胞呈晶格樣排列(同腺病毒),放大之后包涵體呈多邊形,而腺病毒包涵體卻為圓形 冠狀病毒球形,單鏈RNA,核衣殼為螺旋狀,有包膜,包膜上刺突排列間隙較寬,形如日冕狀或冠狀冠狀病毒-電鏡下形態(tài)圖 輪狀病毒圓球
4、形,雙層衣殼,內(nèi)衣殼由22-24個輻射亞單位附著于核心上,與外衣殼相連,呈車輪狀原代單層兔腎細胞CPE(細胞病變)-HSV(單純皰疹病毒)感染的兔腎細胞,細胞變圓、膨大,脫落腺病毒感染的兔腎細胞1、單細胞真菌酵母菌呈圓形或卵圓形。如酵母菌、白色念珠菌等。2、多細胞真菌(絲狀菌或霉菌)菌絲芽生孢子多細胞真菌大多長出菌絲和孢子,交織成團,稱絲狀菌雙稱霉菌。如孢子絲菌、小孢子菌、表皮癬菌、毛癬菌等。Fungus:是一類真核細胞型微生物,具有細胞壁(無肽聚糖),具有典型的細胞核和完善的細胞器真菌營養(yǎng)要求不高,一般細菌培養(yǎng)基上能生長。常用沙保培養(yǎng)基1.菌落觀察 P75菌落類型:(1)酵母型菌落:圓形,較
5、白色,邊緣整齊表面光滑,濕潤, 假菌絲不深入培養(yǎng)基(新生隱球菌)(2)類酵母型菌落:表面和酵母菌型菌落相似, 假菌絲深入培養(yǎng)基(白假絲酵母菌)(3)絲狀菌落:由許多疏松的菌絲體構(gòu)成。絲狀交織成團,使 菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀,菌落正背兩面呈現(xiàn)不同 的顏色酵母菌菌落絲狀菌落霉菌菌落 2.真菌的形態(tài)觀察 菌絲(hypha)-是真菌營養(yǎng)體的基本單位 孢子(spore)-是真菌的繁殖體,由生殖菌絲產(chǎn)生 菌絲和孢子的形態(tài)特征有助于真菌的鑒別。厚膜孢子菌絲產(chǎn)生胞壁厚,大,圓的孢子(菌絲內(nèi)胞漿濃縮形成,是真菌的休眠形式)孢子囊孢子:菌絲末端膨大成孢子囊,內(nèi)含許多孢子,鏡下呈蒲公英狀大分生孢子:體積較大,多細胞組成呈梭形,棒狀,梨形(菌絲底端)小分生孢子:體積較小,一個細胞構(gòu)成,外壁薄,球形,卵形,棍棒狀(底端或任一部位)鍍銀染色,褐
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