1、艾滋病實(shí)驗(yàn)室生物安 全一、 HIV 的生物危害?第一類(lèi)、第二類(lèi)病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。人類(lèi) 免疫缺陷病毒（HIV） 屬第二類(lèi)病原微生物，是 高致病性病原微生物。 HIV 相關(guān)檢測(cè)的生物安全級(jí)別?hiv抗體檢測(cè)（包括篩查和確證實(shí)驗(yàn)）、抗原檢測(cè)和相關(guān)的免疫學(xué)檢測(cè)應(yīng)在符合n級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2） 要 求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。?HIV 分離培養(yǎng)、濃縮、中和試驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)及應(yīng)在出級(jí)生物安全實(shí) 驗(yàn)室（BSL-中進(jìn)行。?hiv核酸提取和檢測(cè)均應(yīng)在符合n級(jí)生物安全中進(jìn)行。?hiv病毒株應(yīng)保存在符合出級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室品，包括全血、血清 、血槳和其他組織（液）、病實(shí)驗(yàn)室。研究工作及其它需要

2、應(yīng)用活病毒的研究工作，實(shí)驗(yàn)室（BSL-2） 要 求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室（ BSL-3） 要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室； HIV 陽(yáng)性樣酸提取物應(yīng)保存在符合 BSL-2 要求的艾滋. 建立安全制度實(shí)驗(yàn)室的安全工作制 度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序（S-SOP）。意外事故處理預(yù)案， 主要是生物安全意外事故。內(nèi)容包括應(yīng)急 處理、登記和報(bào)告、調(diào)查和處理。信息安全及保密制度：與HIV/AIDS檢測(cè)相關(guān)的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密，包 括送檢單、 檢測(cè)記錄、樣品登記 、報(bào)告單及工作人員年度檢測(cè)結(jié)果等，不 得對(duì)無(wú)關(guān)人員透露檢測(cè)結(jié)果。?培訓(xùn)和管理實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行全員安 全培訓(xùn)并強(qiáng)化一普遍性防護(hù)原則口安全意識(shí)，所有的血液、未固定的組織和組織液

3、樣品，均應(yīng)視為有潛在的傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。所有管理和檢測(cè)人員都應(yīng)接受省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室主持的安全培訓(xùn)，包括上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受管理人員 的監(jiān)督。必須對(duì)新上崗人員進(jìn)行安全教育和培訓(xùn)，使他們清楚實(shí)驗(yàn)室工 作的潛在危險(xiǎn)，通過(guò)考核等方式確認(rèn)他們具備安全操作的能力后方可單獨(dú)工作。必須對(duì)新調(diào)入人員、 外來(lái)合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員進(jìn)行生物安全培訓(xùn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任批準(zhǔn)后，方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。生物安全培訓(xùn)和監(jiān)督應(yīng)有客觀詳實(shí)的記錄。實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)詳細(xì)了 解所有工作人員的教育和培訓(xùn)背景、特長(zhǎng) 、性格特點(diǎn)等。要根據(jù)人員特點(diǎn)、工作種類(lèi) 、所涉及的生物材料合理安排工作區(qū)域， 要定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行安全檢查。

4、.個(gè)人保健和防護(hù)遇有手部皮膚有開(kāi)放性傷口及其他不適于工作的情況，應(yīng)暫停工作。皮膚的微小傷口、擦傷等，應(yīng)用防水敷料嚴(yán)密覆蓋。應(yīng)為每一名在艾滋病實(shí)驗(yàn)室工作的人員提供充足的防護(hù)服、一次性乳膠手套、口罩、帽子和覆蓋足背的工作鞋。應(yīng)將清潔的防護(hù)服和其他個(gè)人防護(hù)用品置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)的專用處存放。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置應(yīng)急沖洗眼睛 裝置。工作人員上崗前必須進(jìn)行HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)，應(yīng)接種乙肝疫 苗。應(yīng)每年對(duì)工作人員采血檢測(cè)HIV抗體，血清應(yīng)長(zhǎng)期保留。進(jìn)實(shí)驗(yàn)室工作前要摘除首飾 ，修剪長(zhǎng)的帶刺的指甲，以免刺破手套， 嚴(yán) 禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)穿合適防護(hù)服

5、（白大衣、隔離衣或一次性工作服 ）、戴 手套和口罩、穿實(shí)驗(yàn)室專用的工作鞋。如接觸物的傳染性大、應(yīng)戴雙層手套；含有 HIV 的液體（樣品或病毒 培養(yǎng)液）有可能?chē)姙R 時(shí)，應(yīng)戴防護(hù)眼鏡、穿防水（如塑料）圍 裙。工作完畢，先脫去手套， 再脫去防護(hù)服，用肥皂和流動(dòng)水洗手。穿過(guò)的污染的防護(hù)服應(yīng)及時(shí)放入污物袋中，消毒后方可洗滌或廢棄。操作過(guò)程中，如 發(fā)現(xiàn)防護(hù)服被污染應(yīng)立即更換 ，如手套破損，應(yīng)立即丟棄、洗手并換上新手套。不能用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。不要將手套清洗或消毒后再次使用，因?yàn)槭褂帽砻婊钚詣┣逑纯墒故痔讓?duì)水的通透性增加，消毒劑可以引起手套的破損。禁止使用口腔吸液管，必須使

6、用移液器來(lái)操作實(shí)驗(yàn)的所有液體。.試劑及樣品的管理應(yīng)嚴(yán)格按要求妥善保存血清及其它體液樣品，應(yīng)按有關(guān)規(guī)定設(shè)立專門(mén)儲(chǔ)存陽(yáng)性血清、質(zhì)控品的血清庫(kù)和 / 或 毒種庫(kù)，應(yīng)上鎖并指定專人管理。對(duì)存放試劑和有毒有害物質(zhì)的區(qū)域應(yīng)進(jìn)行監(jiān)控，冷藏柜 、冰箱、培養(yǎng)箱和存放生物試劑、化學(xué)危 險(xiǎn)品、放射性物質(zhì)的容器，置于工作人員視線之 外的地點(diǎn)時(shí)應(yīng)上鎖。. 實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒工作完畢應(yīng)對(duì)工作臺(tái)面消毒，推薦用0.10.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥 20min 以上； 操作過(guò)程 中如有樣品、檢測(cè)試劑外濺，應(yīng)及 時(shí)消毒。如有大量高濃度的傳染性液體濺出，在清潔之前應(yīng)先用1%的 次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。5

7、 樣品的采集和處理抽取靜脈血液（或以 其它方式收集血液樣品）時(shí)要注意安全，戴手套，謹(jǐn)慎操作， 樣，應(yīng)按常規(guī)將手指 其它物體表面造成污 密封頭，防止離心時(shí)防止血液污染雙手。應(yīng)小心防止被針頭和或耳垂局部消毒。刺破皮膚后，迅速把濾染。采血后待血樣干燥后再包裝送檢。液體溢出或在超/ 高速離心時(shí)形成氣溶膠。應(yīng)使用一次性注射器，其它利器刺傷。如用濾紙采紙沾上，切勿讓血液滴落在離 心 樣品時(shí)要使用密閉的罐和6樣品的帶入、帶出和操作不得將非實(shí)驗(yàn)室物品 帶入實(shí)驗(yàn)室。包裝有測(cè)試樣品的包裹應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室的安全柜內(nèi)打開(kāi)，不能在收 發(fā)地點(diǎn)或倉(cāng)庫(kù)等地點(diǎn)打開(kāi)，同時(shí)，打開(kāi)包裹應(yīng)具有處理感染源的的人員應(yīng)接受過(guò)處理感染源方面的訓(xùn)練并

8、 設(shè)備并準(zhǔn)備好可消毒的容器。打開(kāi)樣品容器時(shí)要小溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)心，防止內(nèi)容物潑濺。要核對(duì)樣品與送檢立即將尚存留的樣品移出，對(duì)樣品管和盛穿戴合適的防護(hù)服；實(shí)驗(yàn)室單，檢查樣品管有無(wú)破損和 器進(jìn)行消毒，同時(shí)要按照程序報(bào)告有關(guān)負(fù)責(zé)人。要檢查樣品的狀況， 記錄有無(wú)嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過(guò) 多以及黃疸等情況。如污染過(guò)重或者認(rèn)為不 能接受，則應(yīng)將樣品用安全方式廢棄，同 時(shí)將情況通知送樣人。 常規(guī)處理血液、體液樣品可在工作臺(tái)上進(jìn)行，如樣品有可能濺出，則應(yīng)戴手套、口罩和防護(hù)眼鏡，在生物安全柜中操作。將樣品轉(zhuǎn)送到其他實(shí) 驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)防止對(duì)工作人員、患者或環(huán)境造成污染。護(hù)送樣品的人應(yīng)清楚接收地點(diǎn)和 接收人，實(shí)驗(yàn)

9、室負(fù)責(zé)人或其指定的人員應(yīng) 及時(shí)確認(rèn)樣品已送達(dá)指定的 實(shí)驗(yàn)室，被轉(zhuǎn)入安全 位置并得到妥善處理。被污染或可能污染的 材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。用后的 包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。 用于照國(guó)際空運(yùn)協(xié)會(huì)（IATA） 的規(guī)則進(jìn)行包裝和標(biāo)記， 并提交相應(yīng)的資料。使用利器注意事項(xiàng)應(yīng)盡量避免在實(shí) 驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時(shí)應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷，并應(yīng)對(duì)用過(guò)的物 品進(jìn)行消毒。應(yīng)使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險(xiǎn)性。應(yīng)將用過(guò)的銳器直接放入耐穿、防滲漏的利器盒，用過(guò)的針頭應(yīng)直接放入堅(jiān)固的容器內(nèi)，消毒后廢棄禁止將使用后的一次性針頭重新

10、套上針頭套。禁止用手直接接觸使用過(guò) 的針頭、刀片等利器。 污染物處理艾滋病實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消 毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法物理消毒方法高壓蒸汽消毒，121 C,保持1520min;干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒）140C,保持23h?；瘜W(xué)消毒方法含氯消毒劑（次氯酸 鈉，含有效氯20005000mg/L）75%乙醇2%戊二醛艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室物 品常用的消毒方法 廢棄物缸： 5000mg/L 次氯酸鈉。生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面：75%乙 醇 。溢出物： 50

11、00mg/L 次氯酸鈉。污染的臺(tái)面和器具： 2000mg/L 次氯酸 鈉 ,也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧 乙酸。器械可用 2%戊二醛消毒。 生物安全柜生物安全柜處理危險(xiǎn)性微生物時(shí)所用的箱型空氣凈化安全裝置。? I 類(lèi)生物安全柜至少裝置一個(gè)高效空 氣過(guò)濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化，工作時(shí)柜正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半，上部為觀察窗，下部為操作窗口。外部空氣由操作窗吸進(jìn)，而不可能由操作窗口逸出。工作狀態(tài)時(shí)保證工作人員不受侵害，但不保證實(shí)驗(yàn)對(duì)象不受污染。? n類(lèi)生物安全柜至少裝置一個(gè)高效空氣過(guò)濾器對(duì)排氣進(jìn)行凈化，工作空間為經(jīng) 高效過(guò)濾器凈化的無(wú)渦流的單向流空氣。工作時(shí)柜正面玻璃推拉窗打開(kāi)一半，上部為觀察窗，下部為操作窗口

12、。外部空氣由操作窗吸進(jìn)，而不可能由操作窗口逸出。工作狀態(tài)下遵守操作規(guī)程時(shí)既保證工作人員不受侵害，又保證實(shí)驗(yàn)對(duì)象不受污染。?CLASS I破生物安全柜CLASS I破生物安全柜根據(jù) 結(jié)構(gòu)以及氣流分配不同主要是外排氣流不同分為：A型：（30%排在室內(nèi)）B型：B1 （70%接管道外排）；B2 （100%接管道外排）；B3 （30%接管道外排）CLASSII A生物安全柜生物安全柜的 使用 位置 操作 人員 。意外事故處理發(fā)生意外事故時(shí)，應(yīng)針對(duì)事故的類(lèi)型立即進(jìn)行緊急處理，主要包括：皮膚針刺傷或切割傷，應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗，盡可能擠出損傷處的血液，用70%乙醇或其它消毒劑消毒70%乙 醇或其它皮膚

13、消盡快脫掉污染的衣物，進(jìn)行。發(fā)生大范圍污染物故現(xiàn)場(chǎng)，查清情況，確定消但甲醛有致癌作用，不宜傷口。皮膚污染：用水和肥皂沖洗污染部位，并用適當(dāng)?shù)南緞┙荻緞?。粘膜污染：用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。衣物污染：消毒處理。污染物潑濺：小范圍污染物潑濺，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理和清洗潑濺事故時(shí)，應(yīng)立即通知實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事 毒的程序。發(fā)生空氣污染時(shí)，可采用低溫蒸汽甲醛氣體對(duì)空氣進(jìn)行消毒，用于生物安全柜和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)空氣消毒。 如果發(fā)生重大潑濺事故，應(yīng)采取以下措施進(jìn)行： 從污染處疏散人 員，但要防止污染擴(kuò)散；控制污染擴(kuò)散， 鎖門(mén)并禁止人員進(jìn)入； 通知 實(shí)驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)、安全負(fù)責(zé)人等，查清情況，

14、確定消毒處理的 程序； 必要時(shí)可進(jìn)行生物安全柜和/ 或?qū)嶒?yàn)室的低溫蒸汽甲醛氣體消毒，使用這種方法生物安全柜和/或?qū)嶒?yàn)室必須密 閉，人員必須離開(kāi)。 具體操作可按說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。溢漏處可用經(jīng) 消毒劑浸泡的吸水物質(zhì)覆蓋； 消毒劑作用 10 15 分鐘后，移走吸水性物質(zhì)，用消毒劑沖洗， 用水清洗 .意外及事故的登記 、報(bào)告和檢測(cè)對(duì)重大意外和事故必須進(jìn)行登記，對(duì)職業(yè)暴露事故應(yīng)填寫(xiě)一艾滋病職業(yè)暴露人員個(gè)案登記表II。對(duì)重大意外和事故必須進(jìn)行報(bào)告和檢測(cè) 步驟 1：確定暴露級(jí)別步驟2:確定HIV傳染源頭嚴(yán)重程度哪些情況暴露不會(huì)導(dǎo)致 HIV 感染由于職業(yè)暴露而導(dǎo)致的 HIV 感染的概率是很小的， 并不是每一次職業(yè)暴

15、露都會(huì)導(dǎo)致 HIV 感染的發(fā)生，許多情況下可以不必過(guò)度緊張擔(dān)心，如：（ 1）經(jīng)證實(shí)接觸的可疑血液或體液為 HIV 陰性；（ 2）完整無(wú)損皮膚或無(wú)新鮮流血的陳舊性傷口等接觸HIV 陽(yáng)性血液、感染性體液； （ 3）完整無(wú)破損皮膚或無(wú)新鮮流血的陳舊性傷 口等接觸 HIV 陽(yáng)性血液、感染性體液且及 時(shí)沖洗消毒后；（4）完整粘膜或皮膚粘膜結(jié)合部短時(shí)接觸少量、低滴度（如HIV血漿濃度低于1500拷貝/毫升） HIV 陽(yáng)性血液或感染性體液； 感染風(fēng)險(xiǎn)?應(yīng)將職業(yè)暴露補(bǔ)救防防護(hù)用品貯存，并能?要求醫(yī)護(hù)人員在發(fā)生職業(yè)暴露備案登記存?規(guī)范建立健康檔案，-改善洗手條件：配手的步驟、時(shí)間以圖包裝，防滲漏，防遺?制定減輕

16、職業(yè)壓力的?建立暴露后預(yù)防和普案例提示在處理一次性醫(yī)療用裝在耐刺的朔料桶中護(hù)藥品放在醫(yī)務(wù)人員 24 小時(shí)都能拿取的地方。?保證有足夠的醫(yī)療隨時(shí)取用。職業(yè)暴露的第一時(shí)間按照處置流程進(jìn)行防 護(hù)，并及時(shí)報(bào)告感染辦進(jìn)行檔管理。定期免疫接種。?加 強(qiáng)過(guò)程控制中相關(guān)細(xì)節(jié)的管理備感應(yīng)或腳踏式洗手裝置，以洗手液替代肥皂。-洗手標(biāo)準(zhǔn)化：將洗示方式張貼于洗手處。-醫(yī)療廢物嚴(yán)格按分類(lèi)處 理，明顯標(biāo)識(shí)，雙層撒。-銳器置入銳器盒內(nèi)。策略 ?新職員安全操作培訓(xùn)遍性應(yīng)急預(yù)防方案品時(shí)，要將針頭、刀片等銳器與其它物品，以免發(fā)生被混在污物中的銳器扎傷等事分開(kāi)存放和處理，銳器等要 故。暴露級(jí)別為 2 級(jí)，暴露源級(jí)別為重度類(lèi)型；3 、在發(fā)生職業(yè)暴露后馬上進(jìn)行局部緊 急處理是對(duì)的；4 、發(fā)生職業(yè)暴露后，最好在4 小時(shí)內(nèi)服藥 ，即使超過(guò)了 24 小時(shí)仍然要服藥。案例提示1、在臨床工作中，尤其在為艾滋病人的醫(yī)療操作中，一要注意戴口罩，二要戴防護(hù)眼鏡。2、這屬于粘膜的暴露，不要用眼藥水滴眼，否則容易損傷粘膜，增加感染的機(jī)會(huì)。3 、在暴露源不明時(shí)，先采取必要的預(yù) 防措施，待暴露源明確后，要根據(jù)暴露級(jí) 別和暴露源類(lèi)型重新調(diào)整用藥方案。三、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制?試劑盒內(nèi)部對(duì)照 ：陽(yáng)性、 陰性對(duì)照?室內(nèi)質(zhì)控品：外部質(zhì)控品。以此數(shù)據(jù)繪制質(zhì)控圖-