1、PAGE PAGE 22 水生動(dòng)物疫苗注冊(cè)資料要求 一、注冊(cè)分類（一）創(chuàng)新型水生動(dòng)物疫苗 是指未曾在中國(guó)境內(nèi)上市銷售的、用于預(yù)防特定水生動(dòng)物疫病的全細(xì)菌/病毒疫苗（含活/滅活疫苗）、亞單位疫苗、活載體疫苗、DNA疫苗、合成肽疫苗等。（二）改良型水生動(dòng)物疫苗 是指對(duì)已批準(zhǔn)其他申請(qǐng)人生產(chǎn)并上市的水生動(dòng)物疫苗改變抗原型或亞型、菌（毒、蟲）種、表達(dá)載體、亞單位抗原組分、多肽或核酸序列、劑型、接種途徑、生產(chǎn)工藝、靶動(dòng)物、接種劑量、適應(yīng)癥、佐劑、保護(hù)劑，增加抗原含量，提高安全檢驗(yàn)或效力檢驗(yàn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等，且具有明顯臨床優(yōu)勢(shì)的水生動(dòng)物疫苗。二、注冊(cè)資料項(xiàng)目（一）一般資料1.制品名稱。2.證明性文件。3.立題目的

2、與依據(jù)。4.制造及檢驗(yàn)試行規(guī)程（草案）、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其起草說(shuō)明，附各項(xiàng)主要檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序。5.說(shuō)明書、標(biāo)簽和包裝設(shè)計(jì)樣稿。（二）生產(chǎn)與檢驗(yàn)用菌、毒、蟲種的研究資料6.生產(chǎn)用菌、毒、蟲種來(lái)源和特性。7.生產(chǎn)用菌、毒種種子批建立的有關(guān)資料。8.生產(chǎn)用菌、毒種基礎(chǔ)種子的全面鑒定報(bào)告。9.生產(chǎn)用菌、毒種最高代次范圍及其依據(jù)。10.疫苗抗原選擇的依據(jù)。11.檢驗(yàn)用強(qiáng)毒株代號(hào)和來(lái)源。12.檢驗(yàn)用強(qiáng)毒株純凈、毒力、含量測(cè)定、血清學(xué)鑒定或分子生物學(xué)鑒定等試驗(yàn)的詳細(xì)方法和結(jié)果。（三）生產(chǎn)用細(xì)胞的研究資料13.來(lái)源和特性：生產(chǎn)用細(xì)胞的代號(hào)、來(lái)源、歷史（包括細(xì)胞系的建立、鑒定和傳代等），主要生物學(xué)特性、核型分析等

3、研究資料。14.細(xì)胞庫(kù)：生產(chǎn)用細(xì)胞原始細(xì)胞庫(kù)、基礎(chǔ)細(xì)胞庫(kù)建庫(kù)的有關(guān)資料，包括各細(xì)胞庫(kù)的代次、制備、保存及生物學(xué)特性、核型分析、外源因子檢驗(yàn)、致癌/致腫瘤試驗(yàn)等。15.代次范圍及其依據(jù)。（四）主要原輔材料選擇的研究資料16.來(lái)源、檢驗(yàn)方法和標(biāo)準(zhǔn)、檢驗(yàn)報(bào)告等。（五）生產(chǎn)工藝的研究資料17.主要制造用材料、組分、配方、工藝流程等。18.制造用動(dòng)物或細(xì)胞的主要標(biāo)準(zhǔn)。19.構(gòu)建的病毒或載體的主要性能指標(biāo)（穩(wěn)定性、生物安全）。20.疫苗抗原生產(chǎn)工藝的研究。（六）產(chǎn)品的質(zhì)量研究資料21.成品檢驗(yàn)方法的研究及其驗(yàn)證資料。如成品檢驗(yàn)中涉及參考疫苗等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，則應(yīng)提供有關(guān)制備、鑒定、標(biāo)定報(bào)告。22.用于實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)

4、的產(chǎn)品制備和初步檢驗(yàn)報(bào)告。23.實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品的安全性研究報(bào)告。24.實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品的效力研究報(bào)告。25.至少3批產(chǎn)品的穩(wěn)定性（保存期）試驗(yàn)報(bào)告。（七）中間試制研究資料26.由中間試制單位出具的中間試制報(bào)告。（八）臨床試驗(yàn)研究資料27.臨床試驗(yàn)研究資料。28.臨床試驗(yàn)期間進(jìn)行的有關(guān)改進(jìn)工藝、完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等方面的工作總結(jié)及試驗(yàn)研究資料。三、注冊(cè)資料說(shuō)明（一）一般資料1.制品名稱包括通用名、英文名、漢語(yǔ)拼音和商品名。通用名應(yīng)符合獸用生物制品命名原則的規(guī)定。必要時(shí)，應(yīng)提出命名依據(jù)。2.證明性文件包括：（1）申請(qǐng)人合法登記的證明性文件、基因工程產(chǎn)品的安全審批書、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證等證件的復(fù)印件

5、。申請(qǐng)改良型水生動(dòng)物疫苗注冊(cè)的，應(yīng)提供相應(yīng)的獸藥GMP證書復(fù)印件。（2）對(duì)他人的專利不構(gòu)成侵權(quán)的保證書。（3）研究中使用了高致病性病原微生物的，應(yīng)當(dāng)提供有關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批的批準(zhǔn)性文件復(fù)印件。（4）直接接觸制品的包裝材料和容器合格證明的復(fù)印件。3.立題目的與依據(jù)。申請(qǐng)創(chuàng)新型獸藥注冊(cè)的，應(yīng)提供國(guó)內(nèi)外有關(guān)該獸藥研發(fā)、上市銷售現(xiàn)狀及相關(guān)文獻(xiàn)資料。申請(qǐng)改良型獸藥注冊(cè)的，還應(yīng)論述其改良依據(jù)及其臨床優(yōu)勢(shì)。4.制造及檢驗(yàn)試行規(guī)程（草案）、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)參照有關(guān)要求進(jìn)行書寫。疫苗配方應(yīng)明確。起草說(shuō)明中應(yīng)詳細(xì)闡述各項(xiàng)主要標(biāo)準(zhǔn)的制定依據(jù)。各項(xiàng)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序應(yīng)詳細(xì)并具有可操作性。5.說(shuō)明書、標(biāo)簽和包裝設(shè)計(jì)樣稿，應(yīng)按照

6、國(guó)家有關(guān)規(guī)定進(jìn)行書寫和制作。（二）生產(chǎn)與檢驗(yàn)用菌、毒、蟲種的研究資料1.生產(chǎn)用菌、毒、蟲種來(lái)源和特性：原種的代號(hào)、來(lái)源、歷史（包括分離、鑒定、選育或構(gòu)建過(guò)程等），含量，血清學(xué)或分子生物學(xué)特性等。2.生產(chǎn)用菌、毒、蟲種種子批：生產(chǎn)用菌、毒種原始種子批、基礎(chǔ)種子批建立的有關(guān)資料，包括各種子批的傳代方法、數(shù)量、代次、制備、保存方法。3.生產(chǎn)用菌、毒、蟲種基礎(chǔ)種子的全面鑒定報(bào)告（附各項(xiàng)檢驗(yàn)的詳細(xì)方法），包括外源因子檢測(cè)、鑒別檢驗(yàn)、感染滴度、免疫原性、血清學(xué)或分子生物學(xué)特性、純粹或純凈性、毒力穩(wěn)定性、安全性、免疫抑制特性等項(xiàng)目中適宜項(xiàng)目的鑒定報(bào)告。4.檢驗(yàn)用強(qiáng)毒株包括試行規(guī)程（草案）中規(guī)定的強(qiáng)毒株以及研

7、制過(guò)程中使用的各個(gè)強(qiáng)毒株。對(duì)已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株的，應(yīng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株。（三）生產(chǎn)用菌、毒種和生產(chǎn)用細(xì)胞研究資料的免報(bào)細(xì)菌類疫苗一般可免報(bào)資料項(xiàng)目13、14、15。合成肽疫苗一般可免報(bào)資料項(xiàng)目6、7、8、9和13、14、15。DNA疫苗一般可免報(bào)資料項(xiàng)目13、14、15。（四）主要原輔材料選擇的研究資料對(duì)生產(chǎn)中使用的原輔材料，應(yīng)建立企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，如有相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)；如國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中尚未收載，則建議采用相應(yīng)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于生物源性材料，應(yīng)提供符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定的資料。（五）生產(chǎn)工藝的研究資料資料項(xiàng)目20中應(yīng)包括優(yōu)化和固化生產(chǎn)工藝中主要技術(shù)參數(shù)的依據(jù)：1.細(xì)菌/病毒等的接種量、培養(yǎng)條件；2

8、.有效物質(zhì)的提取和純化；3.對(duì)動(dòng)物體有潛在毒性物質(zhì)的去除（可能不適用）；4.聯(lián)苗中各組分的配比和抗原相容性研究資料；5.乳化工藝研究（可能不適用）；6.滅活劑、滅活方法、滅活時(shí)間和滅活檢驗(yàn)方法的研究；7.多肽合成工藝研究；8.佐劑、保護(hù)劑配方及其研究；9.成品配方篩選和固化研究。（六）產(chǎn)品的質(zhì)量研究資料1.資料項(xiàng)目23應(yīng)包括：（1）用于實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品的批數(shù)、批號(hào)、批量，試驗(yàn)負(fù)責(zé)人和執(zhí)行人，試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)，主要試驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果綜述；（2）對(duì)非靶動(dòng)物、非使用日齡動(dòng)物的安全試驗(yàn)（可能不適用）；（3）疫苗的水平傳播試驗(yàn)（可能不適用）；（4）對(duì)適宜規(guī)格（日齡、體重或體長(zhǎng)）的靶動(dòng)物、按推薦接種途

9、徑的一次單劑量接種的安全性試驗(yàn)；（5）對(duì)靶動(dòng)物單劑量重復(fù)接種的安全性試驗(yàn)（可能不適用）；（6）至少3批制品對(duì)靶動(dòng)物一次超劑量接種的安全性試驗(yàn)；（7）對(duì)靶動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響（可能不適用）；（8）根據(jù)疫苗的配方使用動(dòng)物種群、疫苗特點(diǎn)、免疫劑量、免疫程序等，提供有關(guān)的制品毒性試驗(yàn)研究資料。必要時(shí)提供休藥期的試驗(yàn)報(bào)告。2.資料項(xiàng)目24應(yīng)包括：（1）用于實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品的批數(shù)、批號(hào)、批量，試驗(yàn)負(fù)責(zé)人和執(zhí)行人，試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)，主要試驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果綜述；（2）至少3批制品通過(guò)每種接種途徑對(duì)每種靶動(dòng)物接種的效力試驗(yàn)；（3）抗原含量與靶動(dòng)物免疫攻毒保護(hù)結(jié)果相關(guān)性的研究（可能不適用）；（4）血清學(xué)效力檢驗(yàn)

10、與靶動(dòng)物免疫攻毒保護(hù)結(jié)果相關(guān)性的研究（可能不適用）；（5）替代動(dòng)物效力檢驗(yàn)與靶動(dòng)物效力檢驗(yàn)結(jié)果相關(guān)性的研究（可能不適用）；（6）不同血清型或亞型間的交叉保護(hù)試驗(yàn)研究（可能不適用）；（7）免疫持續(xù)期試驗(yàn)（免疫接種后可在實(shí)驗(yàn)室外的適宜條件下飼養(yǎng)，但攻毒試驗(yàn)必須在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行）；（8）接種后動(dòng)物體內(nèi)抗體消長(zhǎng)規(guī)律的研究（可能不適用）；（9）免疫接種程序的研究資料。（七）中間試制報(bào)告中間試制報(bào)告由中間試制單位出具，應(yīng)包括以下內(nèi)容：1.中間試制的生產(chǎn)負(fù)責(zé)人和質(zhì)量負(fù)責(zé)人、試制時(shí)間和地點(diǎn)；2.生產(chǎn)產(chǎn)品的批數(shù)（連續(xù)3批）、批號(hào)、批量（應(yīng)達(dá)到正式生產(chǎn)批量的1/3以上）；3.每批中間試制產(chǎn)品的詳細(xì)生產(chǎn)和檢驗(yàn)報(bào)告

11、；4.中間試制中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題等。（八）臨床試驗(yàn)研究資料1.應(yīng)按照獸藥臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范和有關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則的要求提出擬進(jìn)行的臨床試驗(yàn)的詳細(xì)方案，并報(bào)告已經(jīng)進(jìn)行的臨床試驗(yàn)的詳細(xì)情況。2.臨床試驗(yàn)中應(yīng)使用至少3批檢驗(yàn)合格的中間試制產(chǎn)品進(jìn)行較大范圍使用對(duì)象動(dòng)物試驗(yàn)，進(jìn)一步觀察制品的安全性和效力。3.臨床試驗(yàn)中魚的數(shù)量至少10000尾。4.預(yù)防用生物制品臨床試驗(yàn)應(yīng)在不少于3個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。5.臨床上特別不容易獲得的野生及稀有水生動(dòng)物的數(shù)量應(yīng)滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，一般不少于100例。四、新制品注冊(cè)資料項(xiàng)目表資料分類資料項(xiàng)目注冊(cè)分類及資料項(xiàng)目要求全細(xì)菌（病毒）類疫苗亞單位疫苗重組疫苗DNA疫苗多肽疫苗一般資料123

12、45生產(chǎn)與檢驗(yàn)用菌、毒、蟲種的研究資料6-7-8-9-101112生產(chǎn)用細(xì)胞的研究資料13-14-15-主要原輔材料選擇的研究資料16生產(chǎn)工藝的研究資料171819-20產(chǎn)品的質(zhì)量研究資料2122232425中間試制研究資料26臨床試驗(yàn)研究資料2728注：“” 指必須報(bào)送的資料?！?”指免報(bào)資料?！啊敝父鶕?jù)制品特點(diǎn)選擇性報(bào)送。五、進(jìn)口注冊(cè)資料及其說(shuō)明（一）進(jìn)口注冊(cè)的申報(bào)資料項(xiàng)目1.一般資料。（1）生物制品名稱；（2）證明性文件；（3）生產(chǎn)綱要、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，附各項(xiàng)主要檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序；（4）說(shuō)明書、標(biāo)簽和包裝設(shè)計(jì)樣稿。2.生產(chǎn)與檢驗(yàn)用菌、毒、蟲種的研究資料。3.生產(chǎn)用細(xì)胞的研究資料。4.主要原輔

13、材料選擇的研究資料。牛源材料符合有關(guān)規(guī)定的資料。5.生產(chǎn)工藝的研究資料。6.產(chǎn)品的質(zhì)量研究資料。7.至少3批產(chǎn)品的生產(chǎn)和檢驗(yàn)報(bào)告。8.臨床試驗(yàn)研究資料（包括上市后不良反應(yīng)監(jiān)測(cè)情況）。（二）進(jìn)口注冊(cè)資料的說(shuō)明1.申請(qǐng)進(jìn)口注冊(cè)時(shí)，應(yīng)報(bào)送資料項(xiàng)目18。2.證明性文件包括：（1）生產(chǎn)企業(yè)所在國(guó)家（地區(qū)）獸藥管理部門批準(zhǔn)生產(chǎn)、銷售的證明文件，生產(chǎn)企業(yè)所在國(guó)家（地區(qū)）獸藥管理部門頒發(fā)的符合獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的證明文件，上述文件必須經(jīng)公證或認(rèn)證后，再經(jīng)中國(guó)使領(lǐng)館確認(rèn)。（2）由境外企業(yè)駐中國(guó)代表機(jī)構(gòu)辦理注冊(cè)事務(wù)的，應(yīng)當(dāng)提供外國(guó)企業(yè)常駐中國(guó)代表機(jī)構(gòu)登記證復(fù)印件；（3）由境外企業(yè)委托中國(guó)代理機(jī)構(gòu)代理注冊(cè)事務(wù)的，

14、應(yīng)當(dāng)提供委托文書及其公證文件，中國(guó)代理機(jī)構(gòu)的營(yíng)業(yè)執(zhí)照復(fù)印件；（4）申請(qǐng)的制品或使用的處方、工藝等專利情況及其權(quán)屬狀態(tài)說(shuō)明，以及對(duì)他人的專利不構(gòu)成侵權(quán)的保證書；（5）該制品在其他國(guó)家注冊(cè)情況的說(shuō)明，并提供證明性文件或注冊(cè)編號(hào)。3.用于申請(qǐng)進(jìn)口注冊(cè)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，應(yīng)為申請(qǐng)單位在中國(guó)境外獲得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。未經(jīng)批準(zhǔn)，不得為進(jìn)口注冊(cè)產(chǎn)品在中國(guó)境內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。在注冊(cè)過(guò)程中，根據(jù)要求需由中國(guó)境內(nèi)有關(guān)單位進(jìn)行臨床驗(yàn)證試驗(yàn)的，應(yīng)符合中國(guó)獸藥臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范的要求。4.全部申報(bào)資料應(yīng)當(dāng)使用中文并附原文，原文非英文的資料應(yīng)翻譯成英文，原文和英文附后作為參考。中、英文譯文應(yīng)當(dāng)與原文內(nèi)容一致。5.進(jìn)口注冊(cè)資料的其他要求與國(guó)

15、內(nèi)新制品注冊(cè)資料的相應(yīng)要求一致。附件2水生動(dòng)物疫苗實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見(jiàn)稿）1.目的 為水生動(dòng)物疫苗實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)研究提供原則性指導(dǎo)。 2.背景 水生動(dòng)物疫苗的安全性是考察其質(zhì)量的最重要指標(biāo)之一。獸藥注冊(cè)辦法中對(duì)獸用生物制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定。 3. 基本要求 3.1 實(shí)驗(yàn)室及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。 3.2 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的要求 實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)應(yīng)使用靶動(dòng)物進(jìn)行。有充分資料證明與靶動(dòng)物安全試驗(yàn)結(jié)果有相關(guān)性時(shí)，可使用其他敏感的水生動(dòng)物作為模式動(dòng)物。 實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物應(yīng)健康易感,不攜帶影響試驗(yàn)結(jié)果判定的特定病原或特定抗體。必

16、要時(shí)應(yīng)使用普通級(jí)、清潔級(jí)或SPF級(jí)易感實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的種類、年齡、個(gè)體大小、體重和生理狀態(tài)（如性成熟）應(yīng)與疫苗說(shuō)明書中擬規(guī)定的靶動(dòng)物相一致。實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的來(lái)源/遺傳背景應(yīng)盡量避免存在差異性。 試驗(yàn)中應(yīng)使用敏感性高的品系。 每批制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)中所用水生動(dòng)物應(yīng)不少于 30 尾，來(lái)源困難或經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的動(dòng)物應(yīng)不少于5尾。 3.3 對(duì)制品的要求 實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)室制品的生產(chǎn)用菌（毒、蟲）種、制品組成和配方等，應(yīng)與規(guī)?；a(chǎn)的產(chǎn)品相同。實(shí)驗(yàn)室制品應(yīng)經(jīng)過(guò)必要的性狀、含量、純粹/純凈性等初步檢驗(yàn)，且結(jié)果須在預(yù)期的可接受范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室制品中主要成分的含量應(yīng)不低于規(guī)模化生產(chǎn)時(shí)的出廠標(biāo)準(zhǔn)。 3.

17、4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 在試驗(yàn)開始前，應(yīng)制定詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)方案，其內(nèi)容應(yīng)包括受試疫苗的種類，試驗(yàn)開始和結(jié)束的日期，實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的年齡、種類等特征，疫苗配方，對(duì)照組的設(shè)置，每組動(dòng)物的來(lái)源和數(shù)量、飼養(yǎng)條件、試驗(yàn)管理和觀察方式，結(jié)果的判定方法及標(biāo)準(zhǔn)等。 試驗(yàn)時(shí)應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照組。如有對(duì)照疫苗，還可設(shè)對(duì)照疫苗組。應(yīng)采用適當(dāng)方法將實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物隨機(jī)分配至受試疫苗接種組和各對(duì)照組。在所有試驗(yàn)中，應(yīng)以相同方式接種受試疫苗和對(duì)照疫苗，并對(duì)對(duì)照疫苗組和受試疫苗組動(dòng)物進(jìn)行相同處理。 3.5 養(yǎng)殖水質(zhì)的要求 在疫苗接種期間，實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖用水的水質(zhì)參數(shù)，如溫度和鹽度（如淡水與海水）應(yīng)與疫苗應(yīng)用的實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境相似。必要時(shí)應(yīng)設(shè)置合理的溫

18、度梯度。 4.實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)的內(nèi)容和方法 可采用肉眼觀察和/或顯微鏡觀察方法，至少觀察14日。每日監(jiān)實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的死亡、發(fā)病、全身和/或局部反應(yīng)情況。應(yīng)監(jiān)測(cè)和記錄所有不良反應(yīng)的性質(zhì)和頻率。 4.1 一次單劑量接種的安全試驗(yàn) 按照推薦的接種途徑，用適宜規(guī)格（日齡、體重或體長(zhǎng)）的靶動(dòng)物，接種1個(gè)劑量，至少觀察2周。評(píng)估指標(biāo)應(yīng)包括臨床癥狀、局部炎癥、組織病變等。對(duì)于可用于多種動(dòng)物的制品，應(yīng)用各種靶動(dòng)物進(jìn)行安全試驗(yàn)。 4.2 對(duì)在實(shí)際使用中可能進(jìn)行多次接種的制品應(yīng)進(jìn)行單劑量重復(fù)接種安全試驗(yàn)。有關(guān)要求同4.1。 4.3 一次超劑量接種的安全試驗(yàn) 按照4.1進(jìn)行，但接種劑量為推薦免疫劑量的數(shù)倍至一百倍不等。

19、通常情況下，滅活疫苗的安全試驗(yàn)劑量為推薦免疫劑量的2倍，活疫苗的安全試驗(yàn)劑量為推薦免疫劑量的10100倍。 4.4 對(duì)共患病原微生物或已有文獻(xiàn)報(bào)道有共感染的非靶動(dòng)物、非使用日齡動(dòng)物的安全試驗(yàn)（活疫苗可能適用） 有些病原可感染多種動(dòng)物或多個(gè)日齡段的動(dòng)物，這類制品的安全試驗(yàn)中，除應(yīng)考察制品對(duì)靶動(dòng)物和使用日齡動(dòng)物的安全性外，還應(yīng)對(duì)非使用對(duì)象動(dòng)物和非使用日齡動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)，以考察對(duì)靶動(dòng)物群使用該制品后對(duì)非靶動(dòng)物群可能引起的安全風(fēng)險(xiǎn)。 4.5 疫苗水平傳播試驗(yàn)（活疫苗可能適用） 適用于毒力較強(qiáng)的活疫苗，評(píng)估使用該類疫苗免疫后，對(duì)周圍飼養(yǎng)的同品種易感動(dòng)物的潛在危害性及其對(duì)環(huán)境的污染，為正確使用疫苗

20、提供科學(xué)依據(jù)。 4.6 對(duì)靶動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響試驗(yàn) 對(duì)食用水生動(dòng)物的制品應(yīng)進(jìn)行本項(xiàng)試驗(yàn)。使用這類制品后，觀察記錄一定周期內(nèi)靶動(dòng)物的生長(zhǎng)情況，如體重變化、飼料系數(shù)等，評(píng)估制品對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響。如果在一定試驗(yàn)周期內(nèi)無(wú)法評(píng)價(jià)對(duì)生產(chǎn)性能的影響，可用臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)代替。 4.7 其他安全試驗(yàn) 用于制備水生動(dòng)物疫苗的一些非生物源性物質(zhì)，如礦物油佐劑、鋁膠佐劑等，用于食品動(dòng)物后，可能對(duì)人類的生命健康造成危害，這類制品的安全試驗(yàn)中應(yīng)包括有關(guān)化學(xué)物質(zhì)在靶動(dòng)物體內(nèi)的殘留試驗(yàn)，為制定該制品的休藥期提供必要的支持性數(shù)據(jù)。 4.8 相關(guān)說(shuō)明 上述實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)項(xiàng)目中，4.1 和 4.3 項(xiàng)通常是必不可少的，而4.2、

21、4.4、4.5、4.6和4.7項(xiàng)有時(shí)是不必要的，應(yīng)根據(jù)制品的種類、性質(zhì)、靶動(dòng)物等具體情況選擇進(jìn)行。4.3項(xiàng)內(nèi)容通常是制定成品安全檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的最直接依據(jù)，應(yīng)有連續(xù)3批實(shí)驗(yàn)室制品的試驗(yàn)數(shù)據(jù)。附件3水生動(dòng)物疫苗實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則（征求意見(jiàn)稿）1.目的 為水生動(dòng)物疫苗實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)研究提供原則性指導(dǎo)。2.背景 水生動(dòng)物疫苗的免疫效力是考察其質(zhì)量的最重要指標(biāo)之一。獸藥注冊(cè)辦法中對(duì)獸用生物制品的實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行了詳細(xì)規(guī)定。3.基本要求3.1 實(shí)驗(yàn)室及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。3.2 實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的要求 實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)應(yīng)使用靶動(dòng)物進(jìn)行。有充分資料證明與靶動(dòng)物效力試驗(yàn)

22、結(jié)果有平行關(guān)系的，可使用其他動(dòng)物作為替代動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物應(yīng)健康易感，不攜帶影響試驗(yàn)結(jié)果判定的特定病原或特定抗體。必要時(shí)應(yīng)使用普通級(jí)、清潔級(jí)或SPF級(jí)易感實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的種類、年齡、個(gè)體大小、體重和生理狀態(tài)（如性成熟）應(yīng)與疫苗說(shuō)明書中擬規(guī)定的靶動(dòng)物相一致。實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的來(lái)源/遺傳背景應(yīng)盡量避免存在差異性。每批制品的實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中所用水生動(dòng)物應(yīng)不少于30 尾，來(lái)源困難或經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的動(dòng)物應(yīng)不少于5尾。3.3 養(yǎng)殖水質(zhì)的要求在疫苗接種期間，實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖用水的水質(zhì)參數(shù)，如溫度和鹽度（如淡水與海水）應(yīng)與疫苗應(yīng)用的實(shí)際養(yǎng)殖環(huán)境相似。必要時(shí)應(yīng)設(shè)置合理的溫度梯度。3.4 對(duì)制品的要求實(shí)驗(yàn)室

23、效力試驗(yàn)中所用實(shí)驗(yàn)室制品的生產(chǎn)用菌（毒、蟲）種、制品組成和配方等，應(yīng)與規(guī)?；a(chǎn)的產(chǎn)品相同。實(shí)驗(yàn)室制品應(yīng)經(jīng)過(guò)必要的性狀、含量、純粹/純凈性等初步檢驗(yàn)，且結(jié)果須在預(yù)期的可接受范圍內(nèi)。為了同時(shí)證明產(chǎn)品“規(guī)程”中所規(guī)定的基礎(chǔ)種子使用代次范圍的合理性，通常用處于最高代次水平的病毒（或細(xì)菌）抗原制備疫苗后，進(jìn)行效力試驗(yàn)。一旦試驗(yàn)結(jié)果證明最高代次水平的疫苗具有令人滿意的免疫效果，則可認(rèn)為規(guī)定范圍內(nèi)的基礎(chǔ)種子均具有令人滿意的免疫原性。如果每批規(guī)?；a(chǎn)的產(chǎn)品出廠時(shí)的“效力檢驗(yàn)”采取與參考疫苗對(duì)比的方法，則在實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中，除應(yīng)使用實(shí)驗(yàn)室制品進(jìn)行效力試驗(yàn)外，還應(yīng)用參考疫苗進(jìn)行系統(tǒng)的效力試驗(yàn)。3.5 對(duì)攻擊用

24、強(qiáng)毒的要求 在多數(shù)實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)中可能會(huì)使用攻毒用強(qiáng)毒。對(duì)已經(jīng)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株的，應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株，必要時(shí)增加使用當(dāng)時(shí)的流行株。對(duì)沒(méi)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株的，可使用自行分離的強(qiáng)毒株，但需報(bào)告其來(lái)源、歷史和有關(guān)鑒定結(jié)果。使用高致病性病原微生物的，應(yīng)按有關(guān)規(guī)定事先獲得有關(guān)部門批準(zhǔn)。3.6 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 在試驗(yàn)開始前，應(yīng)制定詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)方案，其內(nèi)容應(yīng)包括受試疫苗的種類，試驗(yàn)開始和結(jié)束的日期，實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的年齡、種類等特征，疫苗配方，對(duì)照組的設(shè)置，每組動(dòng)物的來(lái)源和數(shù)量、飼養(yǎng)條件、試驗(yàn)管理和觀察方式，結(jié)果的判定方法及標(biāo)準(zhǔn)等。試驗(yàn)時(shí)應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照組。如有對(duì)照疫苗，還可設(shè)對(duì)照疫苗組。應(yīng)采用適當(dāng)方法將實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物隨

25、機(jī)分配至受試疫苗接種組和各對(duì)照組。在所有試驗(yàn)中，應(yīng)以相同方式接種受試疫苗和對(duì)照疫苗，并對(duì)對(duì)照疫苗組和受試疫苗組動(dòng)物進(jìn)行相同處理。4.實(shí)驗(yàn)室效力試驗(yàn)的內(nèi)容及方法4.1 靶動(dòng)物免疫攻毒試驗(yàn) 該方法是考察水生動(dòng)物疫苗免疫效力的最基本方法。其基本方法是：用實(shí)驗(yàn)室制品接種一定數(shù)量的動(dòng)物，經(jīng)一定時(shí)間后，采用攻毒用強(qiáng)毒株對(duì)上述免疫動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物一起進(jìn)行攻毒，在攻毒后一定時(shí)間內(nèi)，觀察動(dòng)物的發(fā)病或死亡情況，統(tǒng)計(jì)免疫及對(duì)照動(dòng)物發(fā)病率或死亡率，或計(jì)算相對(duì)保護(hù)率，評(píng)估制品的效力；必要時(shí)，在觀察期結(jié)束時(shí)，將所有動(dòng)物撲殺，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查，有時(shí)還應(yīng)進(jìn)行病原分離，根據(jù)免疫動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物的眼觀病理學(xué)變化、組織病理學(xué)變化或病

26、原分離情況評(píng)估制品的免疫效力。靶動(dòng)物免疫攻毒試驗(yàn)的具體方法可分為：定量免疫定量強(qiáng)毒攻擊法、定量免疫變量強(qiáng)毒攻擊法、變量免疫定量強(qiáng)毒攻擊法等，具體試驗(yàn)中可根據(jù)制品和疾病的具體情況選擇一種或數(shù)種適宜方法。4.1.1 定量免疫定量強(qiáng)毒攻擊法 該方法中以定量的受試疫苗接種適宜動(dòng)物，經(jīng)一定時(shí)間后，用定量的強(qiáng)毒進(jìn)行攻擊，觀察動(dòng)物接種后所建立的免疫力。4.1.2 定量免疫變量強(qiáng)毒攻擊法 該方法中將動(dòng)物分為兩大組，一為免疫組，一為對(duì)照組，兩大組又各分為相等的若干小組，每小組的動(dòng)物數(shù)相等。免疫組各小組動(dòng)物均用同一劑量的受試疫苗進(jìn)行免疫接種，經(jīng)一定時(shí)間后，與對(duì)照組一起，同時(shí)用不同稀釋度強(qiáng)毒進(jìn)行攻擊，觀察、統(tǒng)計(jì)免疫

27、組與對(duì)照組各小組的發(fā)病率、死亡率、病變率或感染率，分別計(jì)算免疫組與對(duì)照組的LD50（或 ID50），比較免疫組與對(duì)照組動(dòng)物對(duì)不同劑量強(qiáng)毒攻擊的耐受力。4.1.3 變量免疫定量強(qiáng)毒攻擊法（PD50試驗(yàn)） 該方法中將疫苗稀釋為不同的免疫劑量，并分別接種動(dòng)物，間隔一定時(shí)間待動(dòng)物的免疫力建立以后，各免疫組均用同一劑量的強(qiáng)毒攻擊，觀察一定時(shí)間，用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算能使50%的動(dòng)物得到保護(hù)的免疫劑量(PD50 )。4.1.4如因動(dòng)物來(lái)源困難等導(dǎo)致無(wú)法用靶動(dòng)物建立適宜的攻毒模型，并有充分的科學(xué)依據(jù)證明采用替代動(dòng)物抗體測(cè)定法、替代動(dòng)物免疫攻毒法等其他方法與靶動(dòng)物免疫攻毒效力之間有一定相關(guān)性時(shí)，可采用替代方法取代靶

28、動(dòng)物免疫攻毒試驗(yàn)。4.2 疫苗抗原（細(xì)菌或病毒）含量與靶動(dòng)物免疫攻毒保護(hù)力相關(guān)性的研究（最小免疫劑量試驗(yàn)） 疫苗內(nèi)抗原（細(xì)菌或病毒）含量與免疫攻毒保護(hù)率之間，在一定范圍內(nèi)通常存在明顯平行關(guān)系，此時(shí)，就可以根據(jù)最小免疫劑量試驗(yàn)結(jié)果建立疫苗成品的抗原（細(xì)菌或病毒）含量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)符合抗原（細(xì)菌或病毒）含量標(biāo)準(zhǔn)的疫苗，就無(wú)需對(duì)每批疫苗進(jìn)行免疫攻毒效力檢驗(yàn)。最小免疫劑量的試驗(yàn)方法如下：用不同劑量的疫苗分別接種動(dòng)物，經(jīng)一定時(shí)間后進(jìn)行攻毒或采用已經(jīng)證明與免疫攻毒方法具有平行關(guān)系的替代方法進(jìn)行免疫效力試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)出使動(dòng)物獲得較好保護(hù)力（通常應(yīng)達(dá)到80%100%）的最低的疫苗接種量，就是最小免疫劑量。如果疫苗使用對(duì)

29、象包括多種動(dòng)物或多種日齡動(dòng)物，則應(yīng)針對(duì)各種或各日齡段靶動(dòng)物測(cè)定最小免疫劑量。4.3 免疫產(chǎn)生期及免疫持續(xù)期試驗(yàn)4.3.1 基本試驗(yàn)方法 用實(shí)驗(yàn)室制品接種一定數(shù)量的動(dòng)物。接種后，每隔一定時(shí)間，用攻毒用強(qiáng)毒對(duì)一定數(shù)量的免疫動(dòng)物和未接種的對(duì)照動(dòng)物同時(shí)進(jìn)行攻毒或采用已經(jīng)確認(rèn)與攻毒保護(hù)率具有平行關(guān)系的血清學(xué)方法測(cè)定抗體水平，觀察其產(chǎn)生免疫力的時(shí)間、免疫力達(dá)到高峰期的時(shí)間及高峰期持續(xù)時(shí)間。以接種后最早出現(xiàn)良好免疫力的時(shí)間為該制品的免疫產(chǎn)生期，以接種后保持良好免疫力的最長(zhǎng)時(shí)間為免疫持續(xù)期。4.3.2 如果沒(méi)有推薦進(jìn)行一次以上的疫苗接種，或只推薦進(jìn)行一次接種，則意味著疫苗接種后可以獲得終身保護(hù)。由于動(dòng)物的生命期因品種、類別不同以及地區(qū)性因素的影響而有所不同，因此，對(duì)所提出的免疫期應(yīng)詳細(xì)陳述，并提交充分的數(shù)據(jù)。4.3.3 如果是季節(jié)性疾病，只要能夠證明疫苗的免疫力能持續(xù)到接種后的一年中疾病的自然發(fā)生期末。不論是否進(jìn)行加強(qiáng)免疫接種，均應(yīng)提出在此后一年（或幾年）的發(fā)病季節(jié)中的免疫力情況。4.3.4免疫期試驗(yàn)應(yīng)在嚴(yán)格控制的實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行。若因免疫期過(guò)長(zhǎng)、人工飼養(yǎng)對(duì)實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物影響過(guò)大等原因?qū)е乱延袑?shí)驗(yàn)室條件不足以滿足整個(gè)免疫期內(nèi)的試驗(yàn)，則可在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行免疫期驗(yàn)證。在進(jìn)行臨床免疫期試驗(yàn)的過(guò)程中，應(yīng)確保疫苗接種的靶動(dòng)物不發(fā)生并發(fā)性感染，有必要設(shè)同池未接種的靶動(dòng)物作對(duì)照（哨兵動(dòng)物），以監(jiān)視動(dòng)物是