1、精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)南京中醫(yī)藥大學藥學院畢業(yè)設計（論文）開題報告課 題 名 稱：玉竹質量控制的方法學研究學 生 姓 名： xxxxxxxxxxxxxxx 學 號： xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 指 導 教 師： xxxxxxxxxxxxxxxxxxx 所 在 學 院： 藥學院 xxxxxxxxx 專 業(yè) 名 稱： 中藥資源與開發(fā) x 實 習 單 位： xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx大學藥學院2011年3月15日說 明1根據教育部對畢

2、業(yè)設計（論文）的評估標準，學生必須撰寫畢業(yè)設計（論文）開題報告，由指導教師簽署意見、教研室或實習單位審查，學院教學院長批準后實施。2開題報告是畢業(yè)設計（論文）答辯委員會對學生答辯資格審查的依據材料之一。學生應當在畢業(yè)設計（論文）工作前期內完成，開題報告不合格者不得參加答辯。3畢業(yè)設計開題報告各項內容要實事求是，逐條認真填寫。其中的文字表達要明確、嚴謹，語言通順，外來語要同時用原文和中文表達。第一次出現縮寫詞，須注出全稱。4本報告中，由學生本人撰寫的對課題和研究工作的分析及描述，應不少于2000字，沒有經過整理歸納，缺乏個人見解僅僅從網上下載材料拼湊而成的開題報告按不合格論。5開題報告檢查原則上

3、在畢業(yè)實習開始后8周內完成，各教研室或實習單位完成畢業(yè)設計開題檢查后，應寫一份開題情況總結報告報藥學院。南京中醫(yī)藥大學本科畢業(yè)設計(論文)開題報告學生姓名姚曉學號專業(yè)/年級/班級中藥資源與開發(fā)/07年級/1班指導教師姓名xxx職稱主任藥師所在單位或部門質量部指導教師姓名職稱所在單位或部門課題來源企業(yè)自建課題類型基礎研究課題名稱玉竹質量控制的方法學研究畢業(yè)設計（論文）的內容和意義一研究內容:以指紋圖譜為手段研究玉竹變化明顯的有效成分、指標性成分、炮制后產生的新成分的含量變化等。通過TLC和HPLC等分析比較玉竹不同產地化學成分的變化情況，包括量變和質變，尋找控制其質量變化明顯的特征性成分、成分群

4、或炮制后新產生的成分,然后對生、制玉竹中具有一定特異性的主要化學成分、藥效成分或炮制后新產生的成分進行分離和結構鑒定，得到單體化合物，作為玉竹分析用或鑒別用對照品。二研究意義玉竹為百合科植物玉竹Polygonatum odoratum(Mill) Druce的干燥根莖，為湖南省道地藥材,又名尾參,玉參,萎蕤,鈴鐺菜,地管子,甜根草。玉竹味甘，微寒，歸肺、胃經。具有養(yǎng)陰潤燥,生津止渴等功效, 用于肺胃陰傷,燥熱咳嗽,咽干口渴,內熱消渴?，F代研究表明,玉竹具有擴張冠脈、降血脂、降血糖和增強免疫力等作用,在保健食品中得到廣泛的應用。臨床需炮制后方可藥用。炮制方法主要有清蒸、蜜蒸、酒蒸、清炒、蜜炒等幾

5、種.。玉竹根莖中主要含有甾體皂苷、多糖、黃酮及其糖苷以及多種蒽醌類化合物。對于玉竹藥材質量的控制,主要是利用薄層-分光光度法測定玉竹中甾體皂苷成分含量;分光光度法測定其多糖含量,中國藥典2010年版規(guī)定玉竹的多糖含量以葡萄糖(C6Y12O6)計不低于60%。這些分析方法。都是控制玉竹某類總含量,一方面不能全面反映藥材的質量,另一方面這些分析方法受到的干擾因素比較多,選擇性、專屬性、靈敏度、重復性和準確度差。紋圖譜具有專屬、快速、簡便的特點，同時能容納多個樣品，及呈現多種信息，有分離和鑒別的雙重作用，特別適合鑒別成分復雜的中藥飲片。本課題以指紋圖譜為手段研究不同產地批次玉竹變化明顯的有效成分、指

6、標性成分、炮制后產生的新成分的含量變化等，從而為制定其質量標準提供依據。研究方案和技術路線 一研究方案1.玉竹，經HPLC跟蹤檢測的方法和化學提取、分離及結構鑒定炮制后產生的新的成分，該成分含量的高低可以明顯地指示玉竹的質量，可作為玉竹飲片的含量測定的指標成分，并建立以該成分為對照品的玉竹飲片HPLC含量測定的方法。2玉竹，經TLC檢測的方法和化學提取、分離及結構鑒定炮制后產生的新的成分，該成分含量的高低可以明顯地指示玉竹的質量，可作為玉竹飲片的含量測定的指標成分，并建立以該成分為對照品的玉竹飲片TLC含量測定的方法。技術路線查文獻HPLC研究TLC研究相關成分 提取方法 考察流動相檢測波長提

7、取次數、時間溶劑 優(yōu)化，確定實驗條件 建立指紋圖譜結果 中藥質量控制 研究進度2011年1月-2月完成玉竹中化學成分及其炮制方法的文獻檢索；制定實驗方案，書寫開題報告。2011年2月-4月 按照既定實驗方案進行實驗研究。2011年4月-5月整理實驗資料，撰寫結題報告；完成畢業(yè)論文特色與創(chuàng)新 為尋找其合理的玉竹質量控制方法,為制定質量標準提供依據。以相關成分為對照品，通過TLC、HPLC等技術，研究藥材的內在質量，盡可能增加新成分的含量測定或鑒別項目，最終完成指紋圖譜對中藥的質量控制。指導教師意 見指導教師簽名： 年 月 日教研室或實習單位意 見負責人簽名： 年 月 日學院意見 教學院長簽名：

8、年 月 日文獻綜述玉竹研究進展摘要： 對近年來玉竹及其制劑中相關鑒別方法進行系統(tǒng)整理，總結出系統(tǒng)的檢測方法，為保證玉竹的品質，確保療效的穩(wěn)定奠定基礎。關鍵詞：玉竹；TLC；HPLC；圖譜玉竹為百合科植物玉竹Polygonatum odoratum(Mill) Druce的干燥根莖，為湖南省道地藥材。玉竹味甘，微寒，歸肺、胃經。具有養(yǎng)陰潤燥,生津止渴等功效, 用于肺胃陰傷,燥熱咳嗽,咽干口渴,內熱消渴【1】。從玉竹中已經分離鑒定了甾體皂苷、黃酮、生物堿、多糖、甾醇、鞣質、黏液質和強心苷等多類成分，其中多糖、黃酮是玉竹中主要有效成分，現代藥理實驗研究證明其具有增強耐缺氧、抗衰老、抗氧化、降血糖、抗

9、腫瘤和提高免疫力等作用2 迄今為止，對玉竹及其制劑中的相關成分的測定，一般有紫外分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法、IR光譜法及氣相色譜-質譜聯(lián)用技術等。在目前水平條件下，單一指標性成分的量測定往往難以反映中藥整體質量，而指紋圖譜具有整體性、系統(tǒng)性、全面性的特點，能較全面的反映中藥品質，現已成為中藥質量評價和控制研究的熱點之一。本文對玉竹的TLC、HPLC研究進展進行了整理，希望能夠以此為基礎，探索新方法、新途徑，從而為從整體上控制玉竹藥材質量提供科學依據。1 玉竹的化學成分1.1 多糖類在玉竹化學成分的研究方面，Tomoda等從玉竹中分離到玉竹粘多糖，由D-果糖，D一甘露糖，D一葡萄糖及

10、半乳糖醛酸所組成，摩爾比為6:3:1:1.5【3】。Tomoda等分離得到玉竹果聚糖A、B、c、D，糖的組成為果糖與葡萄糖，其組成比為:97.5:2.6;96.2:3.8;95.3:4.8;90.4:9.6【4】 丁登峰等采用熱水提取,乙醇多次沉淀獲得玉竹多糖【5】。根莖中還含有4種玉竹果聚糖(Polygonatum-fructan O-A，B，C，D)，它們分別是（Tomoda et al.1973）：（1）玉竹果聚糖甲（Polygonatum-fructan O-A）分子量4940，果糖：葡萄糖為97.5%：2.6%；（2）玉竹果聚糖乙（Polygonatum-fructan O-B）分子

11、量4320，果糖：葡萄糖為96.2%：3.8%；（3）玉竹果聚糖丙（Polygonatum-fructan O-C）分子量3120，果糖：葡萄糖為95.3%：4.8%；（4）玉竹果聚糖?。≒olygonatum-fructan O-D）分子量1750，果糖：葡萄糖為90.4%：9.6%；謝建軍等（2009）優(yōu)化了玉竹多糖提取工藝，結果發(fā)現影響多糖提取率的的最主要因素是醇沉濃度，通過對比不同處理方法的多糖含量，確定最佳提取條件為：90溫度下，生藥與提取溶液的比例130，提取3h，最后在90%乙醇濃度下進行醇沉。楊輝等（2006）在多糖含量測定引入蒽酮-硫酸比色法，豐富了玉竹多糖的含量測定方法【5

12、】。1.2 氨基酸據研究,玉竹含有多種氨基酸,如：天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸等。其中含有人體必需氨基酸7種,即賴氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸,其中，包含人體半必需氨基酸2種,即精氨酸和組氨酸。玉竹中總氨基酸的含量為11.22% 12.20%,游離氨基酸160.87220.23mol.g-1,其中,必需氨基酸的含量為3.54%3.87%,半必需氨基酸含量為1.25% 1.7%,不同干燥方法其含量存在差異【6】。1.3 微量元素玉竹含有多種微量元素。據測定,玉竹中含

13、有Cu、Zn、Fe、Mg、Mn、Cd、Ca、P、Na等, Ca、Mg、P、Cu等的含量豐富,這些微量元素在人體新陳代謝中起著非常重要的作用。Fe、Zn、Mn、Cu等元素對生物體內的免疫系統(tǒng)起著重要的調節(jié)作用, Ca是構成骨骼和牙齒的主要成分【7,8】。1.4 甾體皂苷玉竹含鈴蘭苦苷(convallamarin)、鈴蘭苷(convallarin) 【9】。25 (R,S)-螺甾-5-烯-3, 14-二醇-3-O-D-吡喃葡萄糖基 (12)-D-吡喃葡萄糖基(13)-D-吡喃葡萄糖基(14)-D-吡喃半乳糖苷。25 (R,S)-螺甾-5-烯-3-醇-3-O-D-吡喃葡萄糖基(12)-D-吡喃葡萄糖

14、基(13)-D-吡喃葡萄糖基(14)-D-吡喃半乳糖苷【10】。含有黃精C、POD,黃精螺甾醇(polyspirostanol) Poa、黃精螺甾醇苷( polyspirostanoside) POb, POe, PO1, PO2， PO3, PO4, PO5, PO6, PO7, PO8及PO9等甾族化合物。22-羥基-25 (R,S)-呋甾-5-烯-12-酮-3, 22, 26-三醇-26-O-D-吡喃葡萄糖苷等【11】。1.5 黃酮類已知含白屈菜酸(chelidonic acid)、氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸和山柰酚阿拉伯糖苷(kaempferol arabinoside);另外從日本變種香玉

15、竹(polygonatum odoratum var. pluriforum)的葉中分得了黃精素(polygonatum)、牡荊素-2-O-槐糖苷及牡荊素(vitexin)、牡荊素-2-O-葡萄糖苷等。對玉竹揮發(fā)油化學成分作了研究,采用GC-MS的方法,確定了32種化合物【12】。彭秧錫等將反相高效液相色譜法用于玉竹中黃酮類化合物槲皮素的分離與測定【13】。1.6 揮發(fā)油黎勇等人用GC-MS的方法對玉竹揮發(fā)油化學成分進行分析,共檢出40種成分,占總檢出88.84%,并確定了32種化合物,主要成分為不飽和烯烴 (37.05% ),除此之外還含有一些醇、醛、酸、酯及烷烴【14】。1.7 其他成分玉

16、竹還含有淀粉、蛋白質、生物堿、維生素、鞣質、粘質和二肽成分【15】。漿果中含有鈴蘭苦苷及鈴蘭苷,可溶性蛋白質3.07% 4.36%【16】。嫩苗鮮品中含胡蘿卜素、維生素B2、維生素C等?？扇苄蕴呛?3.26% 46.29%,淀粉8.07% 15.78%,水溶性多糖11.08% 12.64%【17】,不同干燥方法含量略有不同。2 不同炮制方法對玉竹質量的影響中國歷代典籍記載的玉竹炮制方法主要有清蒸、蜜蒸、酒蒸、清炒、蜜炒等幾種，陳勝璜等實驗結果表明【1】，玉竹經上述方法處理后，以水溶性浸出物為考察指標，發(fā)現蜜蒸品含量最高，清炒品含量最低；以醇溶性浸出物為指標進行評價，結果與水溶性浸出物基本相同

17、。將多糖、水溶性浸出物及醇溶性浸出物三者進行綜合比較，無論是蜜炒還是清炒，三項指標的和均較蜜蒸或清蒸要低得多，故玉竹的炮制最好采用蒸法，可根據臨床應用的需要分別選取蜜蒸、酒蒸或清蒸玉竹。3質量標準中含量的研究目前玉竹的質量標準,中國藥典2010版中規(guī)定,玉竹中玉竹多糖的含量6.0%為質量指標【18】。湖南產玉竹中的玉竹多糖含量有的高達8.0%。對不同種玉竹中的總甾體皂苷的含量測定范圍在0.1%0.4%。薯蕷皂苷元的含量范圍在0.02%0.07%【19】。王曉丹等采用原子吸收分光光度法,對佳木斯地產玉竹中的8種微量元素進行了測定【20】。對玉竹藥材的質量檢測表明,水分13.0%,總灰分7.0%,

18、水溶性浸出物50%,雜質(泥、沙等)3%。3.1玉竹中相關成分的TLC研究進展楊先國等對玉竹的黃酮類成分進行薄層色譜指紋圖譜研究采用薄層色譜法,甲苯-醋酸乙酯-甲酸(541)為展開劑,氨水熏蒸顯色,用R=500 nm,S=280nm雙波長掃描。建立了由10個特征熒光斑點構成的玉竹黃酮類成分的薄層指紋圖譜?！?1】3.2玉竹中相關成分的HPLC研究進展3.21成分HPLC研究王強等采用水提醇沉法從玉竹中提取總多糖，通過DEAE-纖維素離子交換層析和Sepharose CL-6B分子篩層析分離純化得到一種中性多糖，應用UV光譜分析了中性多糖的純度，凝膠過濾法測定了其分子質量，IR光譜和HPLC色譜

19、對其結構和單糖組成進行初步分析，表明其平均分子質量為1.21106D，主要由甘露糖和葡萄糖組成，其物質的量比為5:1，同時含有少量半乳糖。楊先國、劉塔斯等采用HPLC法測定了玉竹中的玉竹酮，含量范圍在0.04%-0.55%?！?1】3.22指紋圖譜研究劉塔斯等用隨機擴增多態(tài)性DNA(RAPD)技術進行基因組DNA多態(tài)性分析得到指紋圖譜。隨著中藥研究的現代化，中藥的質量研究逐漸從單一有效成分或指標成分的定性定量分析轉向有效成分群體分析，因此，積雪草藥材的質量控制，除要建立有效成分的含量測定方法，制定含量限度外，建立有效成分群的指紋圖譜分析方法，更有利于全面掌握藥材質量10。中藥指紋圖譜是綜合的、

20、可量化的鑒別手段，是當前符合中藥特色的，評價中藥產品質量的最終標準是安全與有效，所以還應與藥效相結合，將中藥色譜指紋圖譜中化學成分的變化和中藥藥效結果從數量上聯(lián)系起來，建立起中藥的“譜效學”，最終完成指紋圖譜對中藥的質量控制。參考文獻1 陳勝璜,蔣孟良,周日寶. 不同炮制方法對玉竹質量的影響.湖南中醫(yī)藥大學學報,2007, 27(3): 18-19.2王強，李盛鈺，楊帆，等玉竹中性多糖的分離純化及單糖組成分析. 食品科學, 2010,31(15):100-1023 Tomoda M,Yoshida,Tanaka H,et al.II. Isolation and character-izati

21、on of a mucous polysaccharide, odoratan, from Polygonatumodoratum var japonicum rhizomes J. Chemical & Pharmaceu-tical Bulletin, 1971, 19 (10): 2173-217.4 Tomoda M, Satoh N; Sugiyama A. Isolation and characteriza-tion of fructans from Polygonatum odoratum var. japonicum J. Chemical & Pharmaceutical

22、Bulletin, 1973, 21 (8): 1806-1810.5丁登峰,向大雄,劉韶,等. 玉竹多糖的提取及其對鏈脲佐菌素誘導糖尿病大鼠血糖的影響.中南藥學,2005,3,(4):222-2246張永清,丁少純.干燥方法對玉竹藥材質量的影響 J.基層中藥雜志, 1998, 12(4): 14- 16.7徐踐,馬萱,李聰曉,等.功能型山野菜玉竹 J.蔬菜, 2003, (8): 29- 308王曉丹,宗希明,吳洪斌,等.佳木斯白頭翁、玉竹、扁蓄、長白沙參、綿馬貫眾、關卷術中微量元素的測定 J.佳木斯醫(yī)學院學報, 1997, 20(4): 5.9中國醫(yī)學科學院藥物研究所.中草藥有效成分的研究

23、(第一分冊) M.北京:人民衛(wèi)生出版社, 1972: 44310 Lin HW, Han GY, Liao SX, Studies on the Active Constitu-ents of the Chinese Traditional Medicine Polygonatum odora-tum (Mill.) Druce J. Acta pharmaceutica Sinica, 1994, 29 (3): 215-222.11 Qin HL, Li ZH, Wang P. A new furostanol glycoside fromPolygonatum odoratum J. Chinese Chemical Letters, 2003, 14 (12), 1259-1260.12 Li Y, Sun ZZ,