生化實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)的變性、凝固及沉淀反應(yīng)性質(zhì)_第1頁(yè)
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1、蛋白質(zhì)的變性、凝固 及沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)一1實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x驗(yàn)證關(guān)于蛋白質(zhì)的相關(guān)理論學(xué)會(huì)分析蛋白質(zhì)的基本實(shí)驗(yàn)方法討論蛋白質(zhì)分析在科研和臨床工作中的意義血清、尿液中蛋白質(zhì)分析與疾病診斷2 蛋白質(zhì)的變性在某些物理和化學(xué)因素作用下,蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的改變和生物學(xué)活性的喪失。基本概念3 蛋白質(zhì)的變性現(xiàn)象本質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)不變二硫鍵和非共價(jià)鍵被破壞4 蛋白質(zhì)的變性引起蛋白質(zhì)變性的理化因素加熱乙醇等有機(jī)溶劑強(qiáng)酸、強(qiáng)堿重金屬鹽生物堿試劑5 蛋白質(zhì)的變性學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)變性的意義利用消滅病原微生物蛋白質(zhì)制劑的保存保護(hù)體內(nèi)蛋白質(zhì)避免6變性的可逆性 可逆變性:除去變性因素,蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)可以恢復(fù)原狀。 不可逆變性:除去變性因素,蛋白質(zhì)

2、空間結(jié)構(gòu)不能恢復(fù)原狀。 一般輕度變性是可逆,過(guò)度變性是不可逆。 蛋白質(zhì)的變性7 蛋白質(zhì)的沉淀破壞蛋白質(zhì)的水化層和電荷,使蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象基本概念蛋白質(zhì)沉淀是一種現(xiàn)象維持蛋白溶液穩(wěn)定的因素:疏水領(lǐng)域顆粒表面水化膜膠粒表面同種電荷8 蛋白質(zhì)的沉淀可逆沉淀不可逆沉淀結(jié)構(gòu)和性質(zhì)都不變適當(dāng)條件下可重新溶解是分離和純化的基本方法結(jié)構(gòu)和性質(zhì)都發(fā)生變化沉淀不再溶解于水9 蛋白質(zhì)的沉淀與變性變性蛋白易于沉淀沉淀蛋白不一定變性10 蛋白質(zhì)的凝固接近于等電點(diǎn)附近的蛋白質(zhì)溶液加熱,可使蛋白質(zhì)發(fā)生凝固基本概念不可逆變性狀態(tài)11 蛋白質(zhì)的凝固臨床應(yīng)用實(shí)例水/無(wú)機(jī)鹽/尿素水/無(wú)機(jī)鹽/尿素/蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)變性凝固加熱醋酸法12變性、沉淀、凝固之間關(guān)系變性屬于蛋白質(zhì)本質(zhì)的變化,沉淀和凝固屬于一種現(xiàn)象變性不一定沉淀,變性蛋白質(zhì)只在等電點(diǎn)附近才沉淀,沉淀的變性蛋白質(zhì)也不一定凝固13注意事項(xiàng)逐滴加入,仔細(xì)觀察酒精燈使用前注意酒精量的多少,加熱時(shí)試管口不可對(duì)人,不用時(shí)熄滅酒精燈加熱時(shí),要進(jìn)行晃動(dòng),避免局部高溫,引起試管炸裂用過(guò)的槍頭、濾紙放于污物缸苦味酸屬危險(xiǎn)試劑用過(guò)的試管仔細(xì)清洗14老年癡呆者腦血管中產(chǎn)生大量難溶性蛋白的誘因討論:蛋白變性與疾病15思考題蛋白質(zhì)變性、沉

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