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1、關(guān)于固定化酶總結(jié)第一張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2超聲對(duì)酶促反應(yīng)的影響(一)Stephen等研究了超聲對(duì)-淀粉酶,淀粉葡萄糖苷酶,蔗糖轉(zhuǎn)化酶酶促作用的影響。將底物和相應(yīng)的酶置于超聲水浴中反應(yīng)一定時(shí)間后,用DNS試劑與生成的還原糖反應(yīng),測(cè)定其吸光值。考察不同底物濃度與反應(yīng)速率之間的關(guān)系。以非超聲條件下的酶促反應(yīng)速率作為對(duì)照。第二張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3第三張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月4第四張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月5超聲增加-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶的酶促反應(yīng)速率。原因很可能是超聲提高了反應(yīng)溫度,使酶與底物分子更充分的混合,從而利于酶促反應(yīng)的
2、發(fā)生。蔗糖轉(zhuǎn)化酶在水解蔗糖的過程中有底物抑制作用,超聲能夠有效降低這種作用的影響。原因是超聲可能影響其底物分子和溶劑水分子的分子間作用。第五張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月6超聲對(duì)酶促反應(yīng)的影響(二)Kawasaki使用特定頻率的超聲波,通過調(diào)節(jié)多肽的動(dòng)力學(xué)控制酶促反應(yīng)。其研究考察了嗜熱菌蛋白酶和DNA聚合酶的酶促反應(yīng)。對(duì)于嗜熱菌蛋白酶,幾百kHz的超聲強(qiáng)度能夠促進(jìn)其酶促反應(yīng)。研究DNA聚合酶的反應(yīng)時(shí)使用了石英晶體微天平技術(shù)(它是一種非常靈敏的質(zhì)量檢測(cè)儀器,其測(cè)量精度可達(dá)納克級(jí),比靈敏度在微克級(jí)的電子微天平高100 倍,理論上可以測(cè)到的質(zhì)量變化相當(dāng)于單分子層或原子層的幾分之一。)監(jiān)測(cè)K
3、lenow片段連接到DNA模板后,模板質(zhì)量的變化,從而研究酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)。 第六張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月7研究固定化酶的酶促反應(yīng)Ghiaci等分別用鈉基膨潤(rùn)土和改性膨潤(rùn)土對(duì)堿性磷酸酯酶固定化,研究不同實(shí)驗(yàn)條件下固定化酶的反應(yīng)活性。研究充分考慮到酶濃度,pH,溫度,攪拌和變化的熱力學(xué)參數(shù)對(duì)酶促反應(yīng)的影響。酶促反應(yīng)在0.1M磷酸鹽緩沖液,pH7.0條件下最強(qiáng)。pH=10時(shí)達(dá)到最佳反應(yīng)狀態(tài)。4下磁力攪拌的最佳時(shí)間周期為2小時(shí)。 第七張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月8實(shí)驗(yàn)過程1 分別使用鈉基膨潤(rùn)土和改性膨潤(rùn)土固定化堿性磷酸酯酶。2 測(cè)定磷酸酯酶活性APhA 磷酸酯酶催化pNP
4、P磷酸對(duì)硝基苯酯生成 pNP 對(duì)硝基酚, 37下反應(yīng)1h后加入NaOH終止反應(yīng)。410nm下測(cè)定吸光值。3 測(cè)定動(dòng)力學(xué)參數(shù)。Km Vmax第八張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月9實(shí)驗(yàn)過程4 檢測(cè)穩(wěn)定性儲(chǔ)藏穩(wěn)定性: 4,50天;30,70天熱穩(wěn)定性: 25-80水解穩(wěn)定性: 鏈酶蛋白酶 37 0-6天5 研究pH值對(duì)酶促反應(yīng)的影響6 測(cè)定總蛋白含量:BSA法第九張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月10結(jié)果與討論X射線衍射SEM投射電鏡 觀察結(jié)構(gòu),孔徑比表面積,孔容量,孔徑后兩者影響酶促反應(yīng)??兹萘亢涂讖皆酱?,越利于酶的融入與固定化??兹萘亢涂讖叫。瑫?huì)限制傳質(zhì)和酶的透過,發(fā)生邊界吸收作用。Langmuir吸附等溫線:量化堿性磷酸酯酶與膨潤(rùn)土之間的作用。膨潤(rùn)土的固定化能力:APhA;Protein計(jì)算反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程 米氏方程第十張,PPT共十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月11結(jié)果與討論pH值對(duì)酶促反應(yīng)的影響磁力攪拌對(duì)酶促反應(yīng)的影響固定化酶與游離酶的
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