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1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)四小鼠精子畸形試驗(yàn)第一張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月目的 精子畸形試驗(yàn)是檢測受試化學(xué)毒物能否破壞哺乳動物精子正常形態(tài)的實(shí)驗(yàn)方法。通過該實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)和掌握小鼠精子畸形試驗(yàn)的原理和步驟。第二張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月原理小鼠精子畸形受基因控制,具有高度遺傳性,許多常染色體及X、Y性染色體基因直接或間接地決定精子形態(tài)。精子的畸形主要是指形態(tài)的異常,是決定精子形成的基因發(fā)生突變的結(jié)果。因此形態(tài)的改變提示有關(guān)基因及其蛋白質(zhì)產(chǎn)物的改變。第三張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月器材和試劑器材: 眼科剪、眼科鑷、小平皿、顯微鏡、擦鏡紙、帶橡皮頭吸管、載玻片、玻璃染缸試劑 生理
2、鹽水、甲醇(分析純)、環(huán)磷酰胺第四張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月操作步驟動物 雄性小鼠68 周齡,體重2030g藥物 環(huán)磷酰胺劑量 環(huán)磷酰胺40mg/kg腹腔注射,每天 1次,連續(xù)5天第五張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月制 片在第1次染毒后第45周,小鼠脫頸椎處死,剪開腹腔,分離并摘取雙側(cè)附睪,將附睪放入有約1mL生理鹽水的小平皿中。第六張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月制 片用眼科剪將附睪縱向剪12刀,用吸管將懸浮液輕輕吹打5-6次,靜置3-5min;用4層擦鏡紙過濾除組織碎片,用膠頭滴管吸取精子懸液,滴一滴于清潔載玻片上,均勻推片;待玻片晾干后用甲醇固定5分鐘,干燥
3、。第七張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月先用低倍鏡粗檢,找到背景清晰、精子重疊較少的部位,用高倍鏡檢查精子形態(tài)。每只小鼠檢查精子1000條。精子畸形:主要在頭部,其次為尾部?;晤愋涂煞譃闊o鉤、香蕉形、雙頭、胖頭、無定形、尾折疊、雙尾等。分別記錄異常類型和數(shù)量,以便統(tǒng)計精子畸形率及精子畸形類型的構(gòu)成比。鏡 檢第八張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月注意事項(xiàng)判斷雙頭、雙尾畸形時,要注意與兩條精子的部分重疊相鑒別,判斷無定形時要與人為剪碎及折疊相鑒別。使用的小鼠要健康,以免感染、體溫增高等可能導(dǎo)致精子畸形率增高,造成假陽性結(jié)果。 第九張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果分析與評價計算精子畸形發(fā)生率,與陰性對照組比較,畸形率至少為陰性對照組的2倍或2倍以上;或經(jīng)統(tǒng)計有顯著性差異(P0.01),并有劑量反應(yīng)關(guān)系。一般陰性對照組的精子異常率為0.83.4。第十張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月正常和畸形精子形狀第十一張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月40
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