1、不同炮制方法對(duì)大黃遺傳毒性減毒效果的影響摘要：目的 探析不同炮制方法對(duì)大黃遺傳毒性減毒效果的影響。方法 對(duì) 200g 生大黃中藥材分別按四種不同的中藥炮制方式進(jìn)行炮制。然后，對(duì)炮制后的藥材建立AMES實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)其效果，結(jié)果均進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理來(lái)比較差異。結(jié)果 生大黃不管是在代謝活化還是非代謝活化條件下，對(duì)于菌株 TA97、 TA102 的致突變性均為陽(yáng)性；除醋蒸炮制法所制得的大黃樣品在代謝非活化條件下呈陽(yáng)性以外，清蒸炮制法以及醋蒸炮制法所制得的樣品對(duì)所有菌株的致突變性均呈陰性；但是不管是在代謝活化還是非代謝活化條件下，清炒炮制法、醋炒炮制法所制得的大黃樣品對(duì)所有菌株的致突變性均呈陰性。結(jié)論 生大

2、黃具有相應(yīng)的遺傳毒性，不同炮制方法對(duì)大黃遺傳毒性減毒效果的影響不同，其中清蒸炮制法和醋蒸炮制法均具有有效的減毒效果，而清炒炮制法以及醋炒炮制法并無(wú)明顯的減毒效果。關(guān)鍵詞：炮制方法；生大黃；遺傳毒性；減毒效果；影響大黃具有瀉火、解毒等作用，其主要成分是蒽醌類衍生物。生大黃中的蒽醌類衍生物可以游離狀態(tài)存在，也可以結(jié)合狀態(tài)存在1 。以往研究表明，生大黃除了具有其藥理作用外，還具有不可避免的毒性作用，如大劑量的生大黃可降低大鼠的懷孕率、甚至可升高死胎率2 。近年來(lái)的研究結(jié)果均提示，生大黃除具有相應(yīng)的臨床藥理作用外，還具有較為嚴(yán)重的遺傳毒性3 。這種毒性可使小鼠致癌，也有可能對(duì)人體具有某種不可避免的毒副

3、作用。因此，尋找一種能有效降低生大黃的遺傳毒性的炮制方法顯得尤為重要。 本研究對(duì) 200g生大黃中藥材分別清炒炮制法、醋炒炮制法、清蒸炮制法以及醋蒸炮制法等四種炮制方法進(jìn)行炮制，以尋找一種能有效降低生大黃的遺傳毒性的炮制方法。資料與方法實(shí)驗(yàn)材料 將同一批次的 200g 生大黃中藥材平均分為四組，分別按清炒炮制法、醋炒炮制法、清蒸炮制法以及醋蒸炮制法進(jìn)行炮制。其中實(shí)驗(yàn)中所用的主要試劑包括二甲基亞砜（ DMSO ） 、敵克松、甲基磺酸甲酯以及溴化乙錠等。實(shí)驗(yàn)所用菌株為組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門菌 TA97 、TA100 、 TA98 和 TA102 均符合實(shí)驗(yàn)要求。大黃炮制方法平均分為四份的生大黃

4、 （各 50g）， 分別按清炒炮制法、醋炒炮制法、清蒸炮制法以及醋蒸炮制法進(jìn)行炮制。其中清炒炮制法是指首先將50g 生大黃用中火力翻炒至生大黃表面呈焦黃色， 然后取出并于室溫放涼， 備用；清蒸炮制法是指首先將50g 生大黃加熱蒸透40min 左右，然后取出并將其置于室溫放涼，備用；醋炒炮制法是指首先在50g 生生大黃中加入 9g 醋，將其攪拌均勻，待9g 醋及 50g生大黃的混合物悶透后，將其放入鍋中翻炒至大黃表面呈焦黃色，然后取出并于室溫放涼，備用；醋蒸炮制法指首先在50g 生生大黃中加入 9g 醋， 將其攪拌均勻后， 將 9g 醋及 50g 生大黃的混合物放入鍋中加熱蒸透30min 左右，

5、然后取出并將其置于室溫放涼，備用。AMES 實(shí)驗(yàn) 采用文獻(xiàn)中所用的標(biāo)準(zhǔn)平皿摻入法 4 ， 按生大黃濃度梯度分別為0.05mg/表面皿、0.10mg/表面皿、0.50mg/表面皿、2.50mg/表面皿、5.00mg/表面皿對(duì)突變性進(jìn) 行檢測(cè)。其中分別按清炒炮制法、醋炒炮制法、清蒸炮制法 以及醋蒸炮制法進(jìn)行炮制四份生大黃均采用毒性最強(qiáng)的5.00mg/表面皿的生大黃濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；代謝活化組以20ug/表面皿的 2-AF 作為陽(yáng)性對(duì)照， TA100 非代謝活化以 50pg/ 表面皿的疊氮鈉作為陽(yáng)性對(duì)照，其它菌株的非代謝活化時(shí)均以50ug/表面皿的Dexon作為陽(yáng)性對(duì)照，以 0.1ml/表面皿的 二甲基

6、亞砜（ DMSO ）作為陰性對(duì)照。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件 SPSS17.0統(tǒng)計(jì)件進(jìn)行 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用（xs）表示，組間的均值比較采用多因素方差分析中兩兩比較方法LSD 檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果均以 P0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果生大黃不管是在代謝活化還是非代謝活化條件下，對(duì)于菌株 TA97、 TA102 的致突變性均為陽(yáng)性；除醋蒸炮制法所制得的大黃樣品在代謝非活化條件下呈陽(yáng)性以外，清蒸炮制法以及醋蒸炮制法所制得的樣品對(duì)于 AMES 實(shí)驗(yàn)中所有菌株的致突變性均呈陰性；但是不管是在代謝活化還是非代謝活化條件下，清炒炮制法、醋炒炮制法所制得的大黃樣品對(duì)于 AMES 實(shí)驗(yàn)

7、中所有菌株的致突變性均呈陰性。見(jiàn)表1。討論大黃一般比較安全，但是大劑量的生大黃會(huì)導(dǎo)致中毒，因此還具有一定的毒副作用。以往研究表明，生大黃若進(jìn)行炮制后再應(yīng)用于臨床，不僅能降低其毒副作用，還能提高其臨床應(yīng)用療效5 。 雖然炮制能使生大黃的臨床應(yīng)用達(dá)到減毒增效的目的，但是炮制方法種類繁多。因此，尋找一種能有效降低生大黃的遺傳毒性的炮制方法顯得尤為重要。本研究結(jié)果提示，生大黃不管是在代謝活化還是非代謝活化條件下，對(duì)于菌株TA97、 TA102 的致突變性均為陽(yáng)性；除醋蒸炮制法所制得的大黃樣品在代謝非活化條件下呈陽(yáng)性以外，清蒸炮制法以及醋蒸炮制法所制得的樣品對(duì)于 AMES 實(shí)驗(yàn)中所有菌株的致突變性均呈陰

8、性；但是不管是在代謝活化還是非代謝活化條件下，清炒炮制法、醋炒炮制法所制得的大黃樣品對(duì)于 AMES 實(shí)驗(yàn)中所有菌株的致突變性均呈陰性。綜上所述，不同炮制方法對(duì)大黃遺傳毒性減毒效果的影響不同，清蒸炮制法和醋蒸炮制法均具有有效的減毒效果。參考文獻(xiàn)：天師， 王玉剛， 柴玉爽，等 .正品及偽品大黃藥效與毒性的比較研究J. 世界科學(xué)技術(shù)- 中醫(yī)藥現(xiàn)代化， 2012 ， 14（ 4 ） ：1863-1870.2馬德君，馮磊，蔣紅云，等.5種藥劑對(duì)大型潘的急性活動(dòng)抑制毒性研究J. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2012， 40（ 17） ： 9331.胡曉丞， 李亞洲， 佟繼銘，等 .大黃提取物對(duì)成年大鼠睪丸的毒性作用 J. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)， 2012 ， 26（ 5） ： 658-663.高建波，劉