1、- PAGE 89 -中國畜牧獸醫(yī)學會西南地區(qū)獸醫(yī)病理學分會第五次學術(shù)討論會論文集云南昆明目 錄 TOC o 1-1 h z u HYPERLINK l _Toc78429908 大腸桿菌對藏雞的致病性研究 PAGEREF _Toc78429908 h 1 HYPERLINK l _Toc78429909 山羊痘的病理形態(tài)學觀察 PAGEREF _Toc78429909 h 6 HYPERLINK l _Toc78429910 山羊痘病變的超微病理學觀察 PAGEREF _Toc78429910 h 11 HYPERLINK l _Toc78429911 貴州山羊痘的病原學研究與血清學檢測 P

2、AGEREF _Toc78429911 h 16 HYPERLINK l _Toc78429912 三種不同藥性中藥制劑對內(nèi)毒素性腎衰的防治作用及其機理的比較研究 PAGEREF _Toc78429912 h 22 HYPERLINK l _Toc78429913 奶牛類乙型肝炎組織病理學觀察 PAGEREF _Toc78429913 h 24 HYPERLINK l _Toc78429914 內(nèi)毒素介導的動物急性腎功能衰竭及其發(fā)生機理的實驗研究 PAGEREF _Toc78429914 h 26 HYPERLINK l _Toc78429915 內(nèi)毒素致兔紅細胞膜ATP酶活性改變及陽離子A的

3、保護作用 PAGEREF _Toc78429915 h 27 HYPERLINK l _Toc78429916 抗內(nèi)毒素治療研究進展 PAGEREF _Toc78429916 h 32 HYPERLINK l _Toc78429917 內(nèi)毒素的信號轉(zhuǎn)導 PAGEREF _Toc78429917 h 39 HYPERLINK l _Toc78429918 細胞凋亡信號轉(zhuǎn)導途徑及調(diào)控的研究進展 PAGEREF _Toc78429918 h 44 HYPERLINK l _Toc78429919 內(nèi)毒素信號轉(zhuǎn)導機制的研究進展 PAGEREF _Toc78429919 h 50 HYPERLINK l

4、 _Toc78429920 線粒體與細胞凋亡 PAGEREF _Toc78429920 h 57 HYPERLINK l _Toc78429921 針對內(nèi)毒素的治療策略 PAGEREF _Toc78429921 h 62 HYPERLINK l _Toc78429922 一種全新的感染機制Prion PAGEREF _Toc78429922 h 66 HYPERLINK l _Toc78429924 雜交瘤技術(shù)在病理學中的應(yīng)用 PAGEREF _Toc78429924 h 73 HYPERLINK l _Toc78429925 二重RT-PCR同時檢測VSV與BVDV 核酸 PAGEREF _

5、Toc78429925 h 76 HYPERLINK l _Toc78429926 電子顯微鏡在病理學中的應(yīng)用 PAGEREF _Toc78429926 h 81 HYPERLINK l _Toc78429927 電子顯微鏡技術(shù)在病理學的應(yīng)用 PAGEREF _Toc78429927 h 84大腸桿菌對藏雞的致病性研究紀素玲，強巴央宗，田發(fā)益，索朗斯珠，何瑪麗（西藏農(nóng)牧學院牧醫(yī)系，林芝，860000）摘 要 大腸桿菌病對藏雞危害比較嚴重，可發(fā)生任何日齡的藏雞，給西藏養(yǎng)雞業(yè)造成較大損失。該病的發(fā)生涉及很多因素，常見的因素有致病因子誘發(fā)，多種感染途徑感染和機體的抵抗力下降等。本文對藏雞大腸桿菌的致

6、病性及其感染機理進行探討，對藏雞大腸桿菌病提出更合理的防制措施。關(guān)鍵詞 藏雞；大腸桿菌；致病性；感染機理西藏目前約有藏雞30余萬只，由于藏雞的生產(chǎn)性能低，且善于飛行，大部分飼養(yǎng)戶已開始淘汰藏雞品種。藏雞肉品質(zhì)優(yōu)良，口味極佳，市場前景廣闊，但藏雞的分布范圍日益縮小、數(shù)量減少，各種疫病經(jīng)常發(fā)生，以致該品種面臨滅絕的危險。藏雞大桿菌病是由大腸埃布氏菌的某些血清型菌株引起的一類疾病，該病的臨床癥狀表現(xiàn)復雜多樣，其中最常見的呈急性敗血癥和卵巢性腹膜炎1，大腸桿菌的血清型眾多，西藏各地區(qū)流行的血清型不一。常見的01、02、078，但目前已報道的雞致病性大桿菌血清型有50多個，其中有12個優(yōu)勢致病血清型2常

7、易致病，最易發(fā)病于雛雞，但成年雞發(fā)病也較多。影響發(fā)病因素較多，如與致病因子的強弱、感染途徑、機體的抵抗力等因素都有很大關(guān)系。本文就對藏雞大腸桿菌的致病性及感染機理進行分析。藏雞大腸桿菌病的癥狀及剖檢變化1.1 急性病例無明顯癥狀而突然死亡，多數(shù)病雛臍孔紅腫并常破潰，糞便粘稠、黃白色、腥臭。全身衰弱、閉眼、昏睡、垂翅、不愿走動，采食減少或廢絕，一般出現(xiàn)癥狀后12天死亡。剖檢可見卵黃吸收不良，充滿黃綠色稀薄液體，膽囊腫大，質(zhì)地呈暗紅或士黃色，有點、斑條狀出血；小腸膨氣，粘膜充血，有出血點或出血斑。1.2 藏雞體溫升高43以上，精神萎靡，縮頭閉眼蹲于一邊，飲水增多，采食量大減。有的腹瀉，排綠色糞，有

8、的發(fā)病初期出現(xiàn)打噴嚏、咳嗽、喘噓等上呼吸道感染癥狀；隨后單側(cè)眼結(jié)膜充血，流漿液性眼淚，后期結(jié)膜腫脹，結(jié)膜嚴重充血，鼻孔流出大量鼻液。剖檢藏病雞常出現(xiàn)心包炎，肝周炎，腹膜炎，腺胃乳頭間及腺胃與食道，肌胃交界處有出血點；小腸粘膜炎性充血、出血，心包積液，心外膜有纖維蛋白覆蓋物，肝臟充血、腫大、易碎，肝被膜增厚；脾臟腫大，色灰暗；腎腫大；喉頭及氣管充血，內(nèi)有粘液；肺呈粉紅色或紫紅色，氣囊混濁，眼瞼內(nèi)有膿性分泌物，鼻內(nèi)有分泌物堵塞。大腸桿菌對藏雞的主要致病機理大量研究表明，藏雞大量桿菌病存在有多種致病因子，較為嚴重的有毒素、大腸桿菌素、外膜蛋白等，這些致病因子通過不同的機理導致大腸桿菌在機體特定部位異

9、常增殖，并可引起相應(yīng)的組織損傷，呈現(xiàn)出明顯不同的病理變化，病變較嚴重的是氣管氣囊、肺、脾、肝、腸等臟器。2.1 粘附作用定居因子;也稱粘附素，即大腸桿菌的菌毛。致病大腸桿菌須先粘附于宿主腸壁，以免被腸蠕動和腸分泌液清除。定居因子具有較強的免疫原性，能刺激機體產(chǎn)生特異性抗體。但在特定環(huán)境下可以致瀉，從而引起發(fā)病。2.2 毒素的致病作用以前人們認為藏雞大腸桿菌內(nèi)毒素與致病力無關(guān)，但最近實驗研究證實，藏雞大腸桿菌內(nèi)毒素對雞有一定的致病作用，可引起藏雞的組織細胞損傷及生物學效應(yīng)。如發(fā)熱、白細胞滲出及白細胞穿越內(nèi)皮細胞3等 。細菌內(nèi)毒素的主要成份為脂多糖（LPS）。LPS能夠激活體內(nèi)多種細胞成份合成和釋

10、放一系列炎性介質(zhì)，并使機體釋放這些內(nèi)源性生物活性因子表現(xiàn)出內(nèi)毒素的種種作用，藏雞大腸桿菌內(nèi)毒素主要是破壞腸粘膜屏障完整性，從而造成腸源性細菌感染。實驗證明，藏雞大腸桿菌內(nèi)毒素可增高小血管的通透性，從而引起藏雞的腸急性炎癥，甚至能引起雞急性死亡，并表現(xiàn)以出血和壞死為特征的出血性和壞死性炎癥，結(jié)果表明，大腸菌內(nèi)毒素對藏雞有不同程度的致病作用。一般情況下，腸毒素分為兩類，（1）不耐熱腸毒素：對熱不穩(wěn)定，65經(jīng)30分鐘即失活。為蛋白質(zhì)，分子量大，有免疫原性。由A、B兩個亞單位組成，可導致小腸液體過度分泌，超過腸道的吸收能力而出現(xiàn)腹瀉。（2）耐熱腸毒素：對熱穩(wěn)定，100經(jīng)20分鐘仍不被破壞，分子量小，免

11、疫原性弱。在空腸部分改變液體的運轉(zhuǎn)，使腸腔積液而引起腹瀉。2.3 外膜蛋白大腸桿菌的外膜蛋白也是一種致病因子，電泳時發(fā)現(xiàn)外膜蛋白約有4條帶組成，相對分子質(zhì)量在3040KD之間，認為大腸桿菌的外膜蛋白在菌株的致病作用中具有重要意義，并且其有一定的免疫抗原性4，可以加快巨噬細胞對抗原的攝取，激活淋巴細胞的增殖反應(yīng)，刺激機體體液免疫和細胞免疫，從而抵抗同源菌和異源菌的攻擊。大腸桿菌感染藏雞的主要途徑大腸桿菌分布廣泛，引起機體感染途徑有多種方式，致病機理也不盡相同，一般說來主要有以下幾種感染機理。3.1 條件性致病菌的感染作為藏雞機體正常菌群之一的大腸埃希氏桿菌在正常情況下，它的數(shù)量相對穩(wěn)定，而且對于

12、某些侵入的病原微生物具有拮抗作用5。但當機體受到外界刺激導致機體抵抗力下降或正常菌群失調(diào)時，如：支原體病、新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊炎等病毒，數(shù)量積累到一定程度時，強毒首先攻擊雞體，使雞體抵抗力下降；繼而強毒在雞體內(nèi)發(fā)作，出現(xiàn)典型癥狀。此時，環(huán)境中的大腸桿菌，或隨強毒之后進入雞體感染，或待雞體衰弱后進入雞體發(fā)病。這些構(gòu)成了機體內(nèi)大腸桿菌的條件致病菌6，有些血清型大腸桿菌可牢固地粘附于呼吸道、消化道的粘膜上皮上，短時間內(nèi)大量繁殖，并產(chǎn)生毒素，引起動物腹瀉，若侵入血液，則可引起全身敗血癥。此外，濫用抗生素，腸道條件致病菌可能在抗生素誘導下變成致病力很強的耐藥變異菌，引起新的傳染病

13、暴發(fā)流行。3.2 外源性大腸桿菌的感染消化道和呼吸道是外源性大腸桿菌侵入機體的門戶，同時這些部位又是條件性大腸桿菌定居的場所。大多數(shù)大腸桿菌是非致病性的，但血清型為O1、O2、O35、O78等這些大腸桿菌菌株具有較強的致病性。大腸桿菌從雞糞中飄逸出來，就有可能落在呼吸道粘膜上，借助菌毛粘附，得以在上皮“定居”，從而獲得入侵“通道”。首先從氣管開始，然后擴大到氣囊，并在感染部位定居和繁殖，繼而侵入其它組織引起敗血癥4或亞急性心包炎、肝周炎、氣囊炎等。經(jīng)致病性大腸桿菌污染的飼料和飲水可經(jīng)消化道感染，在消化道產(chǎn)生腸毒素，引起急性出血性腸炎。此外，長期飼喂大量含有抗生素的飼料，破壞了雞腸道的正常菌群，

14、此時若有外源性大腸桿菌侵入也會導致機體發(fā)病。3.3 腸道細菌引起內(nèi)源性感染腸道細菌是腸道內(nèi)的微生物及其產(chǎn)物穿過完整的腸壁到達相應(yīng)部位，大量的研究表明，腸道的主要致病性菌的侵入是大腸桿菌，引起腸道正常菌群改變（消化道微環(huán)境失調(diào)，生物屏障破壞，腸道致病菌增殖），使機體免疫防御功能削弱以及腸道生理功能紊亂，此時外環(huán)境及其它菌乘機侵入定植生長，同時引發(fā)多種疾病。大腸桿菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素誘導腸粘膜損傷從，可導致腸源性細菌全身播散，引起內(nèi)源性感染而發(fā)生敗血癥。藏雞對大腸桿菌感染的應(yīng)答感染病原菌對機體的致病物質(zhì)主要是通過不同的感染途徑對機體造成損害，機體通過非特異性及特異性免疫作用來消除病原菌及其毒性產(chǎn)物，以維

15、持機體的平衡和穩(wěn)定。機體抗感染過程的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸取決于機體的抵抗力的強弱，就大腸桿菌感染來說，存在兩個主要特征。4.1 胃腸道正常菌群的拮抗作用藏雞的外屏障之一是體內(nèi)的正常菌群，它們在某些特定部位定居繁殖，種類與數(shù)量其本穩(wěn)定，這些菌群對許多致病菌具有拮抗作用。如競爭靶器官，阻止定植和增殖以及產(chǎn)生某些化學物質(zhì)，如大腸菌素等，直接抑制病菌的生長。正常菌群的存在，對維持機體完整的抗感染免疫具有重要意義。當正常菌群與宿主之間的微生態(tài)平衡在某種條件下被破壞時，原來不致病的正常菌群可以變?yōu)橹虏【鴮е掳l(fā)病。4.2 粘膜免疫的抗感染作用粘膜免疫是在區(qū)別于全身免疫的局部免疫，以局部產(chǎn)生抗體為特征?？贵w在所有粘膜

16、表面的分泌物中具有相當高的濃度，是粘膜局部抗感染的重要因素。藏雞粘膜分泌的抗體可對細菌毒素發(fā)揮作用，促進巨噬細胞和消除病原，同時可與進入粘膜表面的藏雞致病性大腸桿菌等抗原結(jié)合，具有中和藏雞致病性大腸桿菌抗原的生物活性，使其不能對粘膜進行粘附而發(fā)揮抗粘附作用，同時增加粘液蛋白酶對藏雞致病性大腸桿菌與抗原的降解。此外，部分抗體進入血液，參與全身免疫。5 討論和建議5.1 藏雞是原始品種，長期適應(yīng)于野外生存，但近年來由于圈養(yǎng)或籠養(yǎng)，發(fā)病率較高。大腸桿菌本是雞腸道內(nèi)的正常菌群，這些細菌一般情況下并不引起疾病。當雞的機體在外誘因的作用下，如其它病原菌感染，配合飼料營養(yǎng)成份不全，雞舍潮濕，衛(wèi)生差，雞群擁擠

17、及體力衰竭時，大腸桿菌開始大量繁殖；當細菌不斷增加時，出現(xiàn)大腸桿菌病。同時，增殖的大腸桿菌改變了腸道內(nèi)的微環(huán)境，引起各種生理功能紊亂，治療不及時，可導致雞只死亡。5.2 由于菌株的血清型比較復雜，且易產(chǎn)生耐藥性，在治療該病時應(yīng)進行藥敏試驗，選擇高敏藥物。同進，大腸桿菌與霉形體、支原體等?；旌细腥?，治療時應(yīng)做全面治療。5.3 通過研究得出，藏雞大腸桿菌內(nèi)毒素經(jīng)皮內(nèi)注射時發(fā)現(xiàn)，藏雞大腸桿菌內(nèi)毒素可增高小血管的通透性，從而引起某些器官充血、出血的現(xiàn)象。根據(jù)這一研究結(jié)果，我們采用朱中武7等方法，給藏雞靜脈和腹腔注射途徑將致病性大腸桿菌內(nèi)毒素大劑量接種于產(chǎn)蛋藏雞，能引起藏雞急性死亡，并表現(xiàn)以出血、壞死為

18、特征的出性和壞死性炎癥。5.4 通過實驗研究表明，大腸埃希氏菌血清型繁雜，同場不同期的血清型不一，且不同血清型產(chǎn)生的抗體間很少有交叉保護作用。因此，在藥物防治難以控制的情況不，使用當?shù)胤蛛x出的大腸埃希氏菌菌株制苗，是一種經(jīng)濟有效的辦法，應(yīng)進行利用當?shù)夭煌逍偷木赀M行菌苗生產(chǎn)，也可以起到較好的預(yù)防效果。因此我們利用當?shù)夭仉u感染的特定埃希氏菌株的血清型，已制成了Al(OH)3膠體濃縮菌苗（單位體積內(nèi)的細菌含量1800億個/毫升），對藏雞進行了免疫試驗，取得了較好的預(yù)防效果。藏雞致病性大腸桿菌引起機體發(fā)病的致病因素，機體感染和抗感染的詳細機理，目前只能對它是個初步探討，隨著對藏雞大腸桿菌各種致病

19、因素和機體抗感染免疫的機制的研究，能夠?qū)Σ仉u大腸桿菌提出更為科學和合理的控制措施，在藏雞大腸桿菌病防制方面取得突破性的進展。注：需參考文獻可向作者聯(lián)系山羊痘的病理形態(tài)學觀察許樂仁1, 陰正興1，周碧君1，虞天德2，樂正中2（1貴州大學動物醫(yī)學系，貴陽，550025）（2貴州省獸疫防治站，貴陽，550003）摘 要 對發(fā)生在貴州省的山羊痘的進行了病理形態(tài)學觀察。山羊痘以全身皮膚，呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹為特征。皮膚疹最初為紅斑，紅斑腫脹隆起形成結(jié)節(jié)狀丘疹，然后丘疹發(fā)生凝固性壞死，脫落而形成痂皮。組織學檢查早期皮膚病變可見充血，水腫和多量的巨噬細胞和中性白細胞浸潤，隨著病變的發(fā)展可見更多的巨噬細

20、胞，淋巴細胞，漿細胞和一些體積較大的所謂“山羊痘細胞”出現(xiàn)。在真皮的病變細胞和山羊痘細胞中可見嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體。引起水腫和壞死的血管炎常伴有血栓和梗死。上皮的變化包括棘細胞增生，空泡變性，不全角化，過度角化和壞死等。其他器官的病變也有相似的細胞浸潤和血管炎變化。但發(fā)生在上呼吸道及上消化道時常出現(xiàn)潰瘍。關(guān)鍵詞 山羊痘；病理形態(tài)學山羊痘（goat pox）是由山羊痘病毒（goat poxvirus，GPV）引起的一種高度接觸性的地方流行性傳染病。其特征是在皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹，病羊發(fā)熱，眼、鼻分泌物顯著增多1-3。本病的發(fā)病率及死亡率較高，常給養(yǎng)羊業(yè)，特別是集約化山羊養(yǎng)殖業(yè)，帶來巨大

21、經(jīng)濟損失，并嚴重影響國際貿(mào)易。山羊痘在所有的動物痘病中是最為嚴重的一種，被國際獸疫局（OIE）列為A類重大傳染病，其動物和動物產(chǎn)品被嚴格限制進出口。本病的流行已有很長的歷史，現(xiàn)主要分布在北非和中非、印度次大陸和西南亞，特別是養(yǎng)羊業(yè)作為重要農(nóng)業(yè)經(jīng)濟結(jié)構(gòu)成分的地區(qū)。亞洲的印度、伊拉克、伊朗、科威特、黎巴嫩、斯里南卡、約旦、馬來西亞、尼伯爾、阿曼、巴基斯坦、卡塔爾、塔吉克斯坦、土耳其、也門、俄羅斯、蒙古、阿富汗、巴林、孟加拉、阿聯(lián)酉等國均有本病的流行，其中不少國家與我國接壤2，3。我國的黑龍江、遼寧、吉林、河北、河南、山西、寧夏、青海、甘肅、江西、福建、四川、云南等省均有本病的發(fā)生3-7。最近貴州省

22、的一些地區(qū)也相繼發(fā)生山羊痘的流行1。山羊痘在我國的廣泛流行，給我國養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展帶來極大的損失。特別是給我國西部山區(qū)近年來蓬勃興起的山羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展帶來了很大的威脅。根據(jù)本病典型的流行病學、臨床病理學特征，血清學檢測和病原鑒定，山羊痘的診斷并不困難。山羊痘的皮膚痘疹是該病最顯著和最有證病意義的病變。國內(nèi)外文獻雖然已有一些有關(guān)山羊痘病理形態(tài)學的描述，但有關(guān)本病的組織病理學資料多不夠詳盡。本文對發(fā)生在貴州省的山羊痘病變進行了比較詳細的大體形態(tài)和組織病理學觀察。1 材料與方法1.1 貴州省山羊痘的流行與診斷近年來，貴州省八個縣市的一些山羊飼養(yǎng)場相繼發(fā)生一種以全身皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹的傳染病

23、。病羊發(fā)熱，體溫升高41-42，眼、鼻粘液膿性分泌物顯著增多（圖1）。成年羊發(fā)病率高達66.4%（2,940/4,429），病死率達63.4%（1,863/2,940），羔羊病死率達100%。不同性別、年齡、品種的山羊都可受感染。懷孕母羊多流產(chǎn)或產(chǎn)弱羔1。通過流行病學調(diào)查，典型的臨床癥狀和病理組織學特征，以透射電鏡在病變細胞觀察到大量典型的痘病毒顆粒（圖2）,確診為山羊痘。感染雞胚絨毛尿囊膜的接種部位上出現(xiàn)灰白色大小不等的痘斑，絨毛尿囊膜顯著增厚，胚體嚴重出血。接種BHK21單層細胞出現(xiàn)明顯的細胞病變且這種現(xiàn)象可被山羊痘參考血清所抑制。血清學檢測結(jié)果表明，病羊痘疹材料中山羊痘抗原陽性率為66.

24、7%（12/18），血清樣品中山羊痘抗體陽性率為47.5%（18/38）。也完全支持山羊痘的診斷1。1.2 病理形態(tài)學觀察1.2.1 大體病變觀察 對貴州省八個縣市發(fā)生山羊痘的飼養(yǎng)場中的共100多只病羊進行了臨床檢查及體表皮膚病變觀察。并對10只病死羊進行了尸體剖解以檢查內(nèi)臟器官的病變。1.2.2 病理組織學觀察從10只尸體剖解的病死羊中采集不同部位，不同形態(tài)的皮膚病變的組織，肺，氣管，瘤胃等有肉眼病變的組織，以及肝，脾，腎，心，淋巴結(jié)等材料。 另從4只病羊采集皮膚活檢材料。10%中性緩沖福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色供組織學檢查。2 結(jié)果2.1 大體病變皮膚 根據(jù)對100多只病羊進

25、行的臨床檢查及體表病變觀察，患病山羊發(fā)熱后1d左右，山羊皮膚，特別是尾內(nèi)側(cè)皮膚可見直徑23cm紅斑，后再經(jīng)24h后，紅斑腫脹形成半球形隆起的硬的丘疹，有時幾個丘疹互相融合成片狀突起。丘疹可見于全身皮膚，特別是頭、頸、腋窩、腹股溝、會陰、眼、陰莖、包皮等被毛稀疏或無毛的皮膚（圖3，4）。尸檢可見丘疹病變累及皮膚全層。口腔，陰道和鼻的外粘膜上也可見丘疹形成。但這些部位粘膜上的丘疹可迅速潰破（圖5）。耐過本病急性期的動物,痘疹可發(fā)生凝固性壞死而形成痂皮，從丘疹到痂形成約為5-10d，而痂皮形成后可持續(xù)30-50d后，然后開始脫落遺留一個紅斑此后顏色變淡形成一個白色的痕跡。本病的病程從第一批患羊出現(xiàn)癥

26、狀到皮膚病變消失約為2個月左右。呼吸道 氣管及支氣管粘膜顯著地充血水腫、可見水泡樣大小不等的痘疹及潰瘍形成，粘膜表面有多量的粘液性分泌物附著。肺表面及切面可見黃豆大小結(jié)節(jié)或白色斑塊狀病灶呈島狀分布，有時可見多個病灶融合成一片，以肺的尖葉，心葉及膈葉的前部比較顯著（圖6）。肺門淋巴結(jié)不同程度腫脹，切面多汁，部分周邊出血的病變。消化道 口腔內(nèi)齒齦、舌面、硬顎、咽喉粘膜分布大小不等、圓形或橢圓形丘狀隆起痘疹，有的破潰、出血、化膿，形成臍狀凹陷的潰瘍灶（圖5）。瘤胃和真胃的粘膜和漿膜面可見黃豆大小，質(zhì)地堅硬的痘疹，與皮膚的痘疹十分相似。十二指腸及部分小腸有不同程度的充血及出血現(xiàn)象，呈卡他性出血性腸炎的

27、病變。其它 淋巴結(jié)腫脹，切面多汁。脾稍腫脹。肝，心，腎等實質(zhì)器官未見明顯的肉眼病變。2.2 組織學病變皮膚 鏡下可見病變早期皮膚呈現(xiàn)上皮組織輕度增生，皮下組織中小血管充血，水腫和多量的巨噬細胞和中性白細胞浸潤，偶爾可見少量嗜酸性白細胞；隨著病變的發(fā)展皮膚痘疹形成，上皮組織顯著增生，特別是棘細胞增生變厚，表層細胞出現(xiàn)不全角化，過度角化和壞死脫落，形成無結(jié)構(gòu)的壞死痂皮。棘細胞層常可見嚴重的空泡變性，細胞高度腫賬，胞漿內(nèi)有大量空泡形成導致胞漿空疏，胞核邊移，狀似氣球，甚至崩解壞死（圖7）。此時在病變部皮下結(jié)締組織中，毛囊周圍及肌間可見更多的巨噬細胞，淋巴細胞，漿細胞浸潤和一些所謂“山羊痘細胞”(go

28、at pox cell) 出現(xiàn)。山羊痘細胞體積較大，形態(tài)不規(guī)則，甚至帶星狀胞突（圖810）。在真皮的病變細胞和山羊痘細胞中可見嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體（圖10）。引起水腫和壞死的血管炎常伴有血栓形成和梗死。血管周圍常常有大量炎癥細胞浸潤集聚而形成“袖套”現(xiàn)象（圖8，11）。呼吸道 氣管及支氣管粘膜上皮增生，杯狀細胞增多（圖12）。氣管粘膜發(fā)生痘疹和潰瘍的病灶可見上皮細胞高度增生而顯著增厚，可達5-10倍。其間可見大量小的壞死灶形成（圖13）。粘膜表面的粘液性分泌物中含有多量脫落壞死的上皮細胞及變性壞死的炎癥細胞。粘膜下結(jié)締組織顯著充血，出血和多量的巨噬細胞和中性白細胞浸潤（圖12，13）。肺組織可見

29、充血、滲出及凝固性壞死，病灶周有明顯的炎癥反應(yīng)帶，且可見肺小葉間隔增寬。一個典型的病變是肺泡上皮細胞化生為立方的和矮柱狀的細胞，狀似腺瘤樣改變（圖14）。肺泡膈毛細血管充血并可見巨噬細胞和中性白細胞浸潤。肺泡腔中見有淡紅色的漿液性滲出物，含有多量脫落壞死的上皮細胞及變性壞死的炎癥細胞（圖14）。部分病例同時可見明顯的化膿性肺炎改變，在細支氣管和肺泡中見有大量變性壞死的中性白細胞。消化道 口腔粘膜及舌面的發(fā)生痘疹和潰瘍的病灶的組織病理學形態(tài)與氣管粘膜病變的性質(zhì)十分相似。而發(fā)生在瘤胃和真胃的痘疹，其組織病理學形態(tài)則與皮膚的痘疹病變十分相似。其它 脾和淋巴結(jié)的皮質(zhì)區(qū)淋巴細胞減少，生發(fā)中心缺乏。肝，心

30、，腎等實質(zhì)器官未見明顯的有意義的組織病理學改變。3 討論山羊痘在世界上的流行已有100多年以上的歷史，對山羊痘的病理形態(tài)學已有一些經(jīng)典的描述1，2。可能是由于典型的流行病學和臨床特征，以及多種血清學試驗的特異性，山羊痘的診斷似乎并不困難。不少研究集中到山羊痘的病原學及預(yù)防學，而有關(guān)病理形態(tài)學資料多不夠詳盡。本病在我國的不少地區(qū)也有暴發(fā)流行的報告，但缺乏比較詳盡的組織病理學資料4-7。通過對貴州省的山羊痘的病理形態(tài)學觀察,與經(jīng)典的描述相似的是2，3，8，9，發(fā)生在貴州省的山羊痘也是以全身皮膚，呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹為特征。皮膚由最初的紅斑到腫脹隆起形成結(jié)節(jié)狀丘疹，丘疹發(fā)生凝固性壞死到脫落而形

31、成痂皮。皮膚的結(jié)節(jié)狀丘疹質(zhì)地堅硬，符合結(jié)節(jié)型（nodular form）山羊痘的所謂石頭痘（stone pox）的描述,但我們未能在皮膚上發(fā)現(xiàn)丘疹-水泡型 (papulo- vesicular form) 病變。皮膚組織學檢查可見早期的充血，水腫和多量的巨噬細胞和中性白細胞浸潤發(fā)展到更多的巨噬細胞，淋巴細胞，漿細胞和一些體積較大的所謂“山羊痘細胞”(goat pox cells) 出現(xiàn)。這些所謂“山羊痘細胞”應(yīng)該是吞噬了大量山羊痘病毒的巨噬細胞。在真皮的病變細胞和痘細胞中可見嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體則是很有證病意義的。值得注意的是山羊痘病毒的感染明顯的血管病變，供應(yīng)丘疹的血管出現(xiàn)血栓而引起局部的水腫

32、和壞死。導致丘疹上皮出現(xiàn)包括棘細胞增生，空泡變性，不全角化，過度角化和凝固性壞死等變化。包括呼吸道及消化道在內(nèi)的其他器官的病變也有相似的細胞浸潤和血管炎變化。發(fā)生在瘤胃和真胃的痘疹仍然是類似發(fā)生在皮膚的結(jié)節(jié)型的所謂石頭痘。但發(fā)生在上呼吸道及上消化道時常發(fā)生潰瘍。丘疹-水泡型病變主要發(fā)生在口腔，舌和氣管粘膜，可能與上呼吸道及上消化道的解剖生理學特點有關(guān)，或許也可能與山羊痘病毒的毒株有關(guān)。山羊痘病羊的淋巴器官的變化與Saha(1991)報道的一致10，但淋巴里組織中淋巴細胞的減少與山羊痘病變發(fā)生發(fā)展的關(guān)系還不很清楚。山羊痘的肺炎病變似乎很有意義，肺上皮細胞化生為立方的和矮柱狀的細胞而狀似腺瘤樣改變

33、。有報告山羊痘類似的肺炎病變11，有認為是扁平的I型肺上皮細胞化生為立方的II型肺上皮細胞。但缺乏有力的證據(jù)，進一步研究仍然是必要的。山羊痘嚴重的全身皮膚，呼吸道及消化道病變，以及病變部顯著的炎癥細胞浸潤和血管炎變化，提示了山羊痘病毒感染后可能導致病毒血癥，侵犯血管內(nèi)皮細胞，誘發(fā)血栓形成。感染的上皮細胞和吞噬了病毒的巨噬細胞可能出現(xiàn)嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體并發(fā)生變性壞死。供應(yīng)丘疹的血管出現(xiàn)血管炎，血栓和梗死無疑是而丘疹部出現(xiàn)變性和壞死的病理學基礎(chǔ)。MORPHOPATHOLOGICAL OBSERVATION OF GOAT POXXU Le-ren 1, YIN Zheng-xing1，ZHOU B

34、i-jun1，YU Tia-de1, LE zhen-zhong1（1 Department of Animal Medicine, Guizhou University, 550025 Guiyang2 Station for Animal Epidemic Prevention of Guizhou Provence,550003, Guiyang）Abstract Lesions of goat pox in Guizhou were observed morphopathologically. Goat pox is characterized by pox lesions on th

35、e skin, respiratory tract and gastro- intestinal tract. Cutaneous eruption beginning with macules and papules give rise to nodules, followed by coagulation necrosis and sloughing of nodules leaves a scar. On histological examination the early stage skin lesions are congestion, oedema and a massive c

36、ellular infiltrate by macrophages, neutrophils and as the lesion progresses, by more macrophages, lymphocytes and plasmas and some large cells so called “goat pox cells”. Intracytoplasmic inclusion bodies are present in infected cells of the dermis and these pox cells. Vasculitis is accompanied by t

37、hrombosis and infarction, causing oedema and necrosis. Epidermal changes consist of acanthosis, vacuolar degeneration, parakeratosis，hyperkeratosis and necrosis. Changes in other organs are similar, with a predominant cellular infiltration and vasculitis. But lesions in the upper respiratory tract a

38、nd upper gastrointestinal tract are usully characterized by ulceration.Key words goat pox; morphpathology注：1、基金項目：2003年貴州省科技廳年度攻關(guān)項目（黔科合農(nóng)社字20NGY8007號）。2001年貴州省省長專項基金。作者簡介：許樂仁（1944-），男，山東日照人，教授。研究方向：動物病理學與動物細胞生物學。Email: HYPERLINK mailto:xuleren xuleren2、需圖版和參考文獻可向作者聯(lián)系。山羊痘病變的超微病理學觀察許樂仁，周碧君，陰正興，何光志，劉忠偉

39、（貴州大學動物醫(yī)學系，貴陽, 550025）摘 要 對發(fā)生在貴州省的山羊痘病變進行了電鏡觀察。在感染的皮膚和肺上皮細胞的胞漿內(nèi)發(fā)現(xiàn)有大量不同成熟階段的典型的山羊痘病毒顆粒。病毒顆粒也可見于巨噬細胞,成纖維細胞，血管內(nèi)皮細胞的胞漿內(nèi)，甚至少量在血管腔內(nèi)。受感染的細胞除可見胞漿內(nèi)散在的病毒顆?；蛐纬刹《景w外，通?？梢娂毎[，線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體擴張。一個有趣的發(fā)現(xiàn)是，有髓神經(jīng)纖維也被病毒和被感染的巨噬細胞所波及，并可見節(jié)段性脫髓鞘以及軸索和神經(jīng)膜細胞的變性。在山羊痘痘疹材料感染雞胚絨毛尿囊膜痘斑的上皮細胞和成纖維細胞中也可見成熟和不成熟的的病毒顆粒。關(guān)鍵詞 山羊痘；超微病理學山

40、羊痘（goat pox）是由山羊痘病毒（goat poxvirus，GPV）引起的一種高度接觸性的地方流行性傳染病。其特征是在皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹。本病的流行已有很長的歷史，現(xiàn)主要分布在北非和中非、印度次大陸和西南亞1。與我國鄰近的不少國家和我國的一些地區(qū)均有本病的發(fā)生2。最近貴州省的少數(shù)地區(qū)也發(fā)生了山羊痘的流行3。根據(jù)典型的流行病學、臨床及病理學特征，病原學和血清學檢測，山羊痘的診斷并不困難。國內(nèi)外文獻雖然不少有關(guān)山羊痘病理形態(tài)學的描述1-4，但有關(guān)本病的超微病理學研究卻比較少。本文對發(fā)生在貴州省的山羊痘病變進行了比較詳細的透射電鏡觀察。1 材料與方法1.1 貴州省山羊痘的流行與

41、診斷貴州省八個縣市的一些山羊飼養(yǎng)場相繼發(fā)生一種以全身皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹的傳染病。病羊發(fā)熱，眼、鼻粘液膿性分泌物顯著增多。發(fā)病率和死亡率很高3。組織學檢查可見皮膚和粘膜的痘疹病灶上皮組織明顯增生，細胞呈空泡變性及凝固性壞死，并可見嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體。病變部組織有血管炎改變并巨噬細胞和中性白細胞等炎癥細胞浸潤。肺上皮細胞化生為立方狀細胞而似腺瘤樣改變4。感染雞胚絨毛尿囊膜的接種部位上出現(xiàn)灰白色大小不等的痘斑，絨毛尿囊膜顯著增厚，胚體嚴重出血。接種BHK21單層細胞出現(xiàn)明顯的細胞病變且這種現(xiàn)象可被山羊痘參考血清所抑制。血清學檢測結(jié)果表明，病羊痘疹材料中山羊痘抗原陽性率為66.7%，血清

42、樣品中山羊痘抗體陽性率為47.5%3。結(jié)合本病典型的流行病學及臨床表現(xiàn)，確診為山羊痘。1.2 透射電鏡技術(shù)從4只病羊皮膚，口鼻粘膜，肺臟和瘤胃病變部多點采集材料，組織塊修切至1 mm3大小。并從接種感染山羊痘痘疹材料的雞胚絨毛尿囊膜采集出現(xiàn)的灰白色的痘斑。材料先后經(jīng)3%戊二醛和1%鋨酸固定，丙酮系列脫水，環(huán)氧樹脂618包埋，瑞士產(chǎn)LKB-5型超薄切片機切片，硝酸鉛和醋酸鉛染色，日本產(chǎn)JEOL- 2000EX透射電鏡觀察。2 結(jié)果2.1 病毒的形態(tài)特征在所檢查材料的多種細胞中，特別是在痘疹皮膚的上皮細胞的胞漿內(nèi)發(fā)現(xiàn)有大量不同繁殖階段的典型的山羊痘病毒顆粒。初期的病毒顆粒呈卵圓形，長徑大約為250

43、-350nm,外膜完整或不完整，呈C形狀或花瓣狀；中期的病毒顆粒形狀和大小與初期病毒相似，只是在中央或偏中央部位可見致密的類核體； 而成熟的病毒顆粒致密，多呈卵圓形，大小約為（150-180 nm）（220-280 nm），病毒顆粒中央可見兩面凹陷呈啞鈴形的核酸芯髓和兩個側(cè)小體。 2.2 鱗狀上皮組織的變化皮膚和瘤胃的鱗狀上皮細胞明顯水腫，胞漿稀疏。線粒體腫脹變圓，基質(zhì)電子密度降低，嵴變短或斷裂變成小泡，有的線粒體明顯腫脹形成泡狀物。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，可見小管泡狀增生。高爾基氏復合體擴張，甚至破裂解體。胞漿內(nèi)有大量散在的多為卵圓形的成熟病毒顆粒。有的細胞中可見到病毒包涵體形成，包涵體內(nèi)的病毒漿中有大

44、量成熟的和部分不成熟的病毒顆粒積聚。個別細胞的胞漿內(nèi)可見角質(zhì)絲。皮下組織可見巨噬細胞和中性白細胞浸潤。巨噬細胞的線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，胞漿內(nèi)可見數(shù)量不等的病毒顆粒，病毒顆粒也見于溶酶體內(nèi)。有時可見細胞的裂解和細菌的并發(fā)感染。2.3 肺上皮細胞的變化肺上皮細胞水腫，胞漿稀疏, 線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張。胞漿內(nèi)散在大量卵圓形的成熟的或不成熟的病毒顆粒。肺上皮細胞具有型肺泡細胞特征性的板層小體（lamella body）樣結(jié)構(gòu)，其內(nèi)稀疏的無結(jié)構(gòu)基質(zhì)中有泡狀或管狀物及正在形成的病毒顆粒。有的細胞可見核內(nèi)假包涵體。2.4 毛細血管內(nèi)皮細胞的變化毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹，線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張。胞漿內(nèi)可見少量

45、病毒顆粒，偶爾也可見少量病毒顆粒存在于血管腔內(nèi)。2.5 有髓神經(jīng)纖維的變化有髓神經(jīng)纖維可見軸索變性呈空泡狀，其內(nèi)神經(jīng)微絲和微管等細胞器結(jié)構(gòu)模糊。髓鞘板層結(jié)構(gòu)模糊，并可見節(jié)段性脫髓鞘(segmental demyelination)現(xiàn)象。神經(jīng)膜細胞腫脹，胞漿稀疏，線粒體腫脹，溶酶體增多。胞漿中有少量病毒顆粒，也可見成熟的病毒顆粒游離于神經(jīng)膜細胞外。 神經(jīng)外膜和神經(jīng)內(nèi)膜之間見有巨噬細胞浸潤，其內(nèi)見有大量病毒顆粒散在。2.6 感染雞胚絨毛尿囊膜痘斑的變化雞胚上皮細胞明顯水腫，胞漿稀疏，胞漿內(nèi)散在卵圓形的成熟病毒顆粒。線粒體腫脹變成圓形，基質(zhì)電子密度降低，嵴變短或斷裂變成小泡，有的線粒體明顯腫脹形成泡

46、狀物，甚至退變的膜性結(jié)構(gòu)形成皺紋紙樣結(jié)構(gòu)或髓鞘樣結(jié)構(gòu)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，可見小管泡狀增生。高爾基氏復合體的扁平囊、大泡及小泡擴張，甚至破裂解體。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體中可見不成熟的病毒顆粒，這些病毒顆粒似乎可以從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體突出而直接進入胞漿并形成有囊膜的成熟病毒顆粒。有的細胞內(nèi)可見較豐富的張力絲束。雞胚成纖維細胞胞核的核周隙不規(guī)則增寬。線粒體不同程度腫脹。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不規(guī)則擴張，有時可見小管泡狀增生。胞漿稀疏，胞漿內(nèi)有成熟和不成熟的病毒顆粒。細胞外膠原原纖維間質(zhì)中也可見成熟的病毒顆粒。3 討論山羊痘病毒（goat poxvirus，GPV）在分類上屬痘病毒科（poxviridae）的羊痘病毒屬

47、（Capripoxvirus）。是可以在宿主細胞胞漿中增殖的DNA病毒。山羊痘病毒在易感山羊群中主要通過呼吸道傳播，也可能通過皮膚粘膜損傷而感染5,6。但無論通過何種途徑侵入機體，均可引起病毒血癥并在其皮膚和粘膜上皮細胞繁殖從而引起一系列的炎癥過程和特異性的痘疹病變。除皮膚和粘膜上皮細胞的病變外，病毒也可見于巨噬細胞和成纖維細胞等其他細胞的胞漿中7。有關(guān)山羊痘組織病理學變化已有不少經(jīng)典的描述1,2,7。最近作者等（2004）也對貴州省發(fā)生的山羊痘進行了比較詳細的病理形態(tài)學觀察4。本研究對山羊痘病變進行的透射電鏡觀察有助于為組織病理學變化的發(fā)生提供有力的超微病理學基礎(chǔ)，并有助于認識山羊痘病毒感染

48、與山羊痘病變發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。皮膚、呼吸道及消化道粘膜出現(xiàn)痘疹和病變部上皮組織明顯增生，細胞呈空泡變性，凝固性壞死及嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體的出現(xiàn)是山羊痘最顯著和最有證病意義的病變1-4。在透射電鏡觀察下，上皮細胞的明顯水腫而胞漿稀疏，線粒體腫脹變成圓形或形成泡狀物，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體擴張甚至破裂解體以及胞漿內(nèi)大量山羊痘病毒顆粒的存在是光鏡下上皮細胞空泡變性和壞死性變化的亞微基礎(chǔ)。上皮細胞中的嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體在電鏡觀察下是病毒漿中含有大量成熟的和部分不成熟的病毒顆粒積聚，很顯然包涵體是痘病毒繁殖復制和積聚的重要場所,這與Murry (1973)的報告一致 7。大量病毒在胞漿內(nèi)的繁殖與破壞無疑是

49、導致和加重細胞變性與壞死的重要因素。山羊痘病毒不但在皮膚粘膜上皮細胞和肺上皮細胞大量繁殖，而且也可見于巨噬細胞，成纖維細胞，血管內(nèi)皮細胞的胞漿內(nèi)，甚至少量在血管腔內(nèi)。巨噬細胞在病變部組織中的浸潤顯然是在山羊痘的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮其強大吞噬功能。光鏡下體積較大，形態(tài)不規(guī)則的所謂“山羊痘細胞”(goat pox cell)實際上主要是吞噬了大量痘病毒顆粒后發(fā)生變性而體積增大的巨噬細胞4,7。至于光鏡下肺上皮細胞呈立方狀而似腺瘤樣的改變4，本研究在電鏡下證實是型肺泡細胞(typealveolar cell)的增生。型肺泡細胞具有潛在的增生能力8，但其山羊痘病毒感染時出現(xiàn)這種腺瘤樣增生的意義有待進一步闡明

50、。山羊痘病毒侵犯血管內(nèi)皮細胞并出現(xiàn)在血管腔內(nèi)是山羊痘病變部的血管炎變化和導致病毒血癥的超微病理學基礎(chǔ)和直接的證據(jù)。而血管炎時血管內(nèi)皮細胞的損傷性變化是山羊痘病變部血栓形成和梗死，并進一步導致痘疹病變部細胞變性和發(fā)生凝固性壞死的重要病理學基礎(chǔ)4。至于山羊痘病毒侵犯成纖維細胞的意義還不是很清楚。雖然山羊痘病毒是親上皮細胞性的，但進一步的檢查還很有可能發(fā)現(xiàn)山羊痘病毒的其他類型的宿主細胞。有關(guān)痘病毒在細胞內(nèi)的復制繁殖過程已有不少研究5-8。一般認為痘病毒在細胞漿內(nèi)復制組裝先形成無結(jié)構(gòu)的病毒漿，而后在病毒漿內(nèi)出現(xiàn)不同繁殖期的病毒顆粒。本研究也在感染的細胞中觀察到了不同繁殖期的山羊痘病毒顆粒。如前所述，胞

51、漿內(nèi)包涵體內(nèi)積聚了大量成熟的和部分不成熟的病毒顆粒，很顯然包涵體是痘病毒繁殖、復制、成熟和積聚的重要場所。但本研究在感染細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體中也見到的不少病毒顆粒且多處于不成熟階段，而胞漿內(nèi)散在的卻多為成熟的病毒顆粒。而且似乎可見到病毒直接從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體突入胞漿形成成熟病毒顆粒的現(xiàn)象。因此很有可能是，大多數(shù)病毒是在胞漿內(nèi)或病毒包涵體內(nèi)復制、組裝、繁殖并成熟，通過細胞裂解釋放出無囊膜的病毒顆粒。而胞漿內(nèi)有的病毒則可移至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基氏復合體，在其內(nèi)繁殖成熟并獲得囊膜，通過胞吐或細胞表面微絨毛釋放出有囊膜的病毒顆粒。但不排除這些有囊膜的病毒顆粒有直接進入胞漿而后再通過細胞裂解釋放

52、的可能性。雖然有囊膜的和無囊膜的痘病毒顆粒均具有感染性，但一般認為有囊膜的病毒似乎更易侵入宿主細胞并在宿主體內(nèi)傳播擴散5,6。痘病毒侵犯有髓神經(jīng)纖維是本研究中一個偶然但有趣的發(fā)現(xiàn)。游離的成熟病毒顆粒和被病毒感染的巨噬細胞出現(xiàn)在神經(jīng)外膜和神經(jīng)內(nèi)膜之間，有髓神經(jīng)纖維發(fā)生節(jié)段性脫髓鞘并可見軸索和神經(jīng)膜細胞的變性，神經(jīng)膜細胞胞漿中見有少量病毒顆粒。其病理生物學意義有待進一步的研究與證實。山羊痘痘疹材料感染雞胚絨毛尿囊膜的接種部位出現(xiàn)的灰白色痘斑在透射電鏡觀察下發(fā)現(xiàn)了痘病毒的存在。在雞胚上皮細胞和成纖維細胞中，成熟和不成熟的病毒顆粒廣泛見于細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基氏復合體中和散在于胞漿內(nèi)，成熟的病毒顆粒也見

53、于細胞外間質(zhì)中。感染的細胞也發(fā)生水腫變性。進一步證實了雞胚絨毛尿囊膜的接種和痘斑的出現(xiàn)是山羊痘診斷可靠方法之一 1-3。ULTRA-STRUCTURAL PATHOLOGICAL OBSERVATION ON THE LESIONS OF GOAT POXXU Le-ren , ZHOU Bi-jun, YIN Zheng-xing, HO Guangzi, LIU Zhongwi （Department of Animal Medicine, Guizhou University, 550025 Guiyang）Abstract The lesions of goat pox in Guiz

54、hou Province were observed under electronic microscopy. Numerous typical goat poxvirus in different mature stages were found in the cytoplasma of the affected epithelial cells in skin and lung, and some also could be found in the cytoplasma of macrophages, fibroblastic cells and vascular endothelial

55、 cells with a few within the blood vessels. Beside the virus diffused or restricted as a virus inclusion body in the cytoplasm the affected cells are usually swelling with enlarge of mitochondrion, endoplasmic reticulum and Golgi complex, An interesting finding is that myelinated nerve fibers were a

56、lso involved by the virus and affected macrophages and demyelination with degeneration of axon and Schwann cells were noted. The typical matured or maturing virus particles were also found in the epithelial cells and the fibroblastic cells in the affected chorioallantoic membrane of chick embryo.Key

57、 words Goat pox; ultra-structural pathology致謝 重慶第三軍醫(yī)大學中心實驗室協(xié)助進行透射電鏡觀察，特此感謝。注：需參考文獻可向作者聯(lián)系貴州山羊痘的病原學研究與血清學檢測周碧君1 ，何光志1，虞天德2，許樂仁1( 1.貴州大學動物科學學院，貴州 貴陽，550025；2.貴州省獸防站，貴州 貴陽，550003)摘 要 2002年10月以來,貴州省8個養(yǎng)羊場相繼發(fā)生一種以皮膚、呼吸道和消化道粘膜出現(xiàn)痘疹的傳染病。通過電鏡觀察在痘疹材料中發(fā)現(xiàn)大量典型的痘病毒粒子；感染雞胚后絨毛尿囊膜增厚、充血和出現(xiàn)痘斑;接種BHK21單層細胞引起明顯的細胞病變效應(yīng)，而且這種現(xiàn)

58、象能夠被山羊痘參考血清所抑制。血清學檢測結(jié)果表明，患病羊痘疹材料中山羊痘抗原的陽性率為66.7%；血清樣本中山羊痘抗體的陽性率為47.4%。根據(jù)對本次疫病的病原學研究和血清學檢測，可以確診貴州省發(fā)生了山羊痘暴發(fā)流行。關(guān)鍵詞 山羊痘；電鏡觀察；絨毛尿囊膜；細胞病變效應(yīng)；血清學檢測山羊痘（goat pox）是由山羊痘病毒屬（capripoxvirus）、山羊痘病毒（goat poxvirus，GPV）引起的一種呈地方流行、高度接觸性傳染病，1997年OIE將其列為A類動物傳染病。本病一年四季均可發(fā)生，但春秋常見，不分性別、年齡、品種，主要流行于北非、中東、歐洲、亞洲及澳大利亞1。近年來，我國福建2

59、、陜西3、南京4、江蘇5等地均有暴發(fā)流行，貴州省屬首次發(fā)生6。自2002年10月以來，在貴州省修文、鎮(zhèn)遠、銅仁和遵義等8個地（縣）養(yǎng)羊較為集中的鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）相繼暴發(fā)流行一種全身皮膚及部分粘膜出現(xiàn)痘疹的傳染病，患病羊主要表現(xiàn)發(fā)熱、體溫升高4142，食欲減退乃至廢絕，精神萎頓，眼結(jié)膜潮紅、流淚，鼻和眼流膿性分泌物。大部分病羊在眼、唇、鼻、頰，腹部和尾內(nèi)側(cè)無毛處出現(xiàn)大小不等的紅疹，嚴重時病變波及全身皮膚和部分內(nèi)臟器官。14d后形成小的丘疹突出于皮膚和內(nèi)臟器官表面，逐漸擴大為灰白色石頭樣的硬結(jié)節(jié)。在舌面和氣管粘膜形成丘疹水皰型，水皰破潰后形成痂塊，最后痂塊脫落遺留白色的痕跡。在疫區(qū)隨機剖檢10只病羊：皮膚

60、痘疹（10/10）、瘤胃痘疹（4/10），氣管和支氣管有黃豆大小卵圓形水皰（4/10），肺部可見融合的實變區(qū)和大量分布于肺表面的硬結(jié)節(jié)（6/10）。多數(shù)養(yǎng)殖場是從外地引種或購進山羊混群后，陸續(xù)發(fā)病并很快蔓延至全群，發(fā)病率和死亡率較高。對8個疫區(qū)4429只山羊調(diào)查，成年羊發(fā)病率66.39%（2940/4429），死亡率42.06%（1863/4429），羔羊發(fā)病率和死亡率達100%，懷孕母羊大多流產(chǎn)或產(chǎn)弱羔。 根據(jù)本次疫病的流行病學、臨床癥狀和剖檢病變特征，作出懷疑山羊痘的假定性診斷。通過電鏡超薄切片觀察、雞胚絨毛尿囊膜接種和細胞病變效應(yīng)測定，對本次疫病進行了病原學研究；同時自行研制山羊痘沉淀抗