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1、高中生物選修三全套知識(shí)點(diǎn)填空高中生物選修三全套知識(shí)點(diǎn)填空56/56高中生物選修三全套知識(shí)點(diǎn)填空選修3易考知識(shí)點(diǎn)背誦專(zhuān)題1基因工程基因工程的看法基因工程的別名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對(duì)象基因操作水平DNA分子水平根本過(guò)程剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)結(jié)果產(chǎn)生人類(lèi)需要的基因產(chǎn)物特色打破種的界線(xiàn),定向改造生物實(shí)質(zhì)基因重組一基因工程的根本工具“分子手術(shù)刀限制性核酸內(nèi)切酶限制酶1根源:主假如從原核生物中分別純化出來(lái)的。2功能:能夠鑒識(shí)雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,而且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi),所以擁有特異性。3結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段尾端平常有兩種
2、形式:黏性尾端和平尾端?!胺肿涌p合針DNA連結(jié)酶兩種DNA連結(jié)酶EcoliDNA連結(jié)酶和T4-DNA連結(jié)酶的比較:同樣點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。差異:EcoliDNA連結(jié)酶根源于T4噬菌體,只好將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性尾端之間的磷酸二酯鍵連結(jié)起來(lái);而T4DNA連結(jié)酶能縫合兩種尾端,但連結(jié)平尾端的之間的效率較低。與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只好將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的尾端,形成磷酸二酯鍵。DNA連結(jié)酶是連結(jié)兩個(gè)DNA片段的尾端,形成磷酸二酯鍵。“分子運(yùn)輸車(chē)載體1載體具備的條件:能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)固保留。擁有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。擁有標(biāo)記基因,供重組DNA
3、的判斷和選擇。2最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、構(gòu)造簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體以外,并擁有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。3其余載體:噬菌體、動(dòng)植物病毒(二)基因工程的根本操作程序1第一步:目的基因的獲取目的基因是指:是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因2.獲取目的基因的方法基因文庫(kù)、人工合成、PCR技術(shù)原核基因采納直接分別獲取,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。4.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因1原理:DNA雙鏈復(fù)制2過(guò)程:第一步:加熱至9095DNA解鏈;第二步:冷卻到5560,引物聯(lián)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至7075,熱穩(wěn)固DNA聚合酶從引物初步互補(bǔ)鏈的
4、合成。第二步:重組DNA分子目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)固存在,而且能夠遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。構(gòu)成:目的基因啟動(dòng)子停止子標(biāo)記基因+復(fù)制原點(diǎn)1啟動(dòng)子:是一段有特別構(gòu)造的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶鑒識(shí)和聯(lián)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最后獲取所需的蛋白質(zhì)。2停止子:也是一段有特別構(gòu)造的DNA片段,位于基因的尾端。3標(biāo)記基因的作用:是為了判斷受體細(xì)胞中能否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞挑選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。第三步:轉(zhuǎn)變受體細(xì)胞轉(zhuǎn)變的看法:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),而且在受體細(xì)胞內(nèi)保持穩(wěn)固和表達(dá)的過(guò)程。常用的轉(zhuǎn)變方法:將目的基因?qū)?/p>
5、植物細(xì)胞:采納最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原由是生殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌,其轉(zhuǎn)變方法是:先用Ca2+辦理細(xì)胞,使其成為感覺(jué)態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感覺(jué)態(tài)細(xì)胞混淆,在必定的溫度下促使感覺(jué)態(tài)細(xì)胞汲取DNA分子,達(dá)成轉(zhuǎn)化過(guò)程。重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,挑選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依照是標(biāo)記基因能否表達(dá)。第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá)1.第一要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上能否插入了
6、目的基因,方法是采納DNA分子雜交技術(shù)。2其次還要檢測(cè)目的基因能否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采納用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3.最后檢測(cè)目的基因能否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原抗體雜交。有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的判斷。如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物能否出現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀。三基因工程的應(yīng)用植物基因工程:抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的質(zhì)量。動(dòng)物基因工程:提升動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改良畜產(chǎn)品質(zhì)量、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物?;蛑委煟喊颜5耐庠椿?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。四蛋白質(zhì)工程的看法蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的構(gòu)造規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)
7、,經(jīng)過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。基因工程在原那么上只好生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄翻譯蛋白質(zhì)的改造大改:設(shè)計(jì)并制造自然界中不存在的嶄新蛋白質(zhì),使之擁有特定的氨基酸序列、空間構(gòu)造和預(yù)期功能中改:在蛋白質(zhì)分子中代替某一個(gè)肽段或一個(gè)特定的構(gòu)造域小改:經(jīng)過(guò)基因工程中的定點(diǎn)誘變技術(shù),有目的改造蛋白質(zhì)分子中某活性部位1個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基,以改良蛋白質(zhì)的性質(zhì)和功能定點(diǎn)誘變技術(shù)是改變蛋白質(zhì)構(gòu)造的核心之一PCR技術(shù)是基因定點(diǎn)誘變的常用方法蛋白質(zhì)工程與基因工程的關(guān)系蛋白質(zhì)工程基因工程實(shí)質(zhì)經(jīng)過(guò)改造基因,以定向改造天然將目的基因從供體轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞,
8、蛋白質(zhì),甚至創(chuàng)辦自然界不存在并在受體細(xì)胞中表達(dá)的蛋白質(zhì)結(jié)果合成自然界不存在的蛋白質(zhì)只好生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)3聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上,延長(zhǎng)出的第二代基因工程專(zhuān)題2細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程一植物組織培養(yǎng)技術(shù)1、理論基礎(chǔ)原理:細(xì)胞全能性細(xì)胞擁有全能性的原由:每個(gè)細(xì)胞都含有該物種的全套遺傳物質(zhì)全能性表達(dá)的難易程度:受精卵、生殖細(xì)胞、干細(xì)胞、體細(xì)胞;植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞,請(qǐng)排序受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞2、過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞又稱(chēng)外植體愈傷組織胚狀體試管苗植物體愈傷組織的特色:一團(tuán)沒(méi)有特定構(gòu)造和功能不處于旺盛分裂狀態(tài)的薄壁細(xì)胞脫分化:已經(jīng)分化的植物細(xì)胞形成愈傷組
9、織的過(guò)程再分化:愈傷組織生長(zhǎng)一段時(shí)間后,再移植到新的培養(yǎng)基上連續(xù)培養(yǎng),從頭引誘分化形成根和芽等器官的過(guò)程。3、用途:微型生殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)。植物生殖微型生殖:能夠高效迅速地實(shí)現(xiàn)種苗的大批生殖作物脫毒:采納莖尖組織培養(yǎng)來(lái)除掉病毒由于植物分生區(qū)周邊的病毒很少或沒(méi)有人工種子:以植物組織培養(yǎng)獲取的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為資料,經(jīng)人工薄膜包裝獲取的種子。長(zhǎng)處:完整保持優(yōu)異品種的遺傳特征,不受季節(jié)的限制;方便存儲(chǔ)和運(yùn)輸人工種子的構(gòu)造包含:人工種皮、胚狀體和人工胚乳。作物新品種培養(yǎng)單倍體育種:過(guò)程:植株AaBb經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂獲取花粉AB、Ab、aB、ab四各樣
10、類(lèi);對(duì)花粉進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)技術(shù)是植物組織培養(yǎng);獲取單倍體植株;對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行秋水仙素辦理;獲取了正常的純合二倍體植株AABB、AAbb、aaBB、aabb四各樣類(lèi)。4長(zhǎng)處:明顯縮短育種年限二植物細(xì)胞培養(yǎng):經(jīng)過(guò)能夠產(chǎn)生對(duì)人們有益的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠產(chǎn)生大批的次級(jí)代謝產(chǎn)物。注意:1、原理:細(xì)胞增殖2、大規(guī)模獲取細(xì)胞產(chǎn)品應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)到愈傷組織階段三植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1、過(guò)程:2、植物引誘交融的方法:物理法包含離心、振動(dòng)、電刺激等。化學(xué)法一般是用聚乙二醇作為引誘劑。3注意:a生理基礎(chǔ):細(xì)胞膜流動(dòng)性,植物細(xì)胞全能性b植物細(xì)胞交融前需用纖維素酶和果膠酶除掉細(xì)胞壁3意義:戰(zhàn)勝了
11、遠(yuǎn)緣雜交不親和的阻礙。二、動(dòng)物細(xì)胞工程一般包含動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、體細(xì)胞克隆、細(xì)胞交融、單克隆抗體的制備等技術(shù)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1看法:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中拿出有關(guān)的組織,將它分別成單個(gè)細(xì)胞,而后放在適合的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和生殖。2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織剪碎用胰蛋白酶辦理分別成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞從頭用胰蛋白酶或膠原蛋白酶辦理分別成單個(gè)細(xì)胞連續(xù)傳代培養(yǎng)。3細(xì)胞貼壁和接觸克制:懸液中分其余細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不停增加,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面互相克制時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂
12、增殖,這類(lèi)現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸克制。4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件5無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌辦理。平常還要在培養(yǎng)液中增加必定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。其余,應(yīng)按期改換培養(yǎng)液,防范代謝產(chǎn)物累積對(duì)細(xì)胞自己造成危害。營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。平常需參加血清、血漿等天然成分。溫度:適合溫度:哺乳動(dòng)物多是36.50.5;pH:7.27.4。氣體環(huán)境:95%空氣5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必要的,CO2的主要作用是保持培養(yǎng)液pH。5動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各樣細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)的主要
13、差異動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程需要用胰蛋白酶等是組織塊中的細(xì)胞分別二動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1、哺乳動(dòng)物核移植能夠分為胚胎細(xì)胞核移植比較簡(jiǎn)單和體細(xì)胞核移植比較難。2、采納去核卵(母)細(xì)胞的原由:卵(母)細(xì)胞比較大,簡(jiǎn)單操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。3、體細(xì)胞核移植的大概過(guò)程是:右圖注意:(1)a細(xì)胞核移植b胚胎移植(2)原理:細(xì)胞核全能性克隆羊性別:白面綿羊3、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加快牲口遺傳改良進(jìn)度,促使良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)目;生產(chǎn)寶貴的醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體;用于組織器官的移植等。4、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺點(diǎn)等。
14、三動(dòng)物細(xì)胞交融1、動(dòng)物細(xì)胞交融與植物原生質(zhì)體交融的原理根真同樣,引誘動(dòng)物細(xì)胞交融的方法與植物原生質(zhì)體交融的方法近似,常用的引誘要素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。62、動(dòng)物細(xì)胞交融的意義:戰(zhàn)勝了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培養(yǎng)的重要手段。3、動(dòng)物細(xì)胞交融與植物體細(xì)胞雜交的比較:要點(diǎn)記憶細(xì)胞工程植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞交融理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性交融前辦理酶解法去除細(xì)胞壁纖維素酶、注射特定抗原,免疫辦理正常小鼠果膠酶引誘手段物理法:離心、振動(dòng)、電激物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇PEG化學(xué)法:聚乙二醇生物法:滅活的病
15、毒滅活的仙臺(tái)病毒引誘過(guò)程第一步:原生質(zhì)體的制備酶解正常小鼠免疫辦理動(dòng)物細(xì)胞的融法合物、化、生法雜交瘤細(xì)胞的第二步:原生質(zhì)體交融物、化挑選與培養(yǎng)專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)法胞培養(yǎng)單克隆抗體的提純第三步:雜種細(xì)胞的挑選和培養(yǎng)第四步:雜栽種株的引誘與判斷用途和意義戰(zhàn)勝遠(yuǎn)緣雜交的不親和阻礙,大制備單克隆抗體大擴(kuò)展雜交的親本組合范圍診療、治療、預(yù)防疾病,例應(yīng)用:白菜-甘藍(lán)等雜栽種株如“生物導(dǎo)彈治療癌癥單克隆抗體1a.抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分別出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。b.B淋巴細(xì)胞特色:能夠產(chǎn)生抗體,但不可以無(wú)窮增殖;骨髓瘤細(xì)胞特色:能無(wú)窮增殖,但不可以產(chǎn)生抗體。2單克隆抗體
16、的制備過(guò)程:抗原注入小鼠體內(nèi)分別骨髓瘤細(xì)胞淋巴細(xì)胞細(xì)胞交融雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)選擇培養(yǎng)細(xì)胞7注入小鼠培養(yǎng)基體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)從腹水提取從培養(yǎng)液提取3雜交瘤細(xì)胞的特色:既能大批生殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一的特異性抗體。4單克隆抗體的長(zhǎng)處:特異性強(qiáng),敏捷度高,并能大批制備。5單克隆抗體的作用:作為診療試劑:正確鑒識(shí)各樣抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟必定抗原發(fā)生特異性聯(lián)合,擁有正確、高效、簡(jiǎn)單、迅速的長(zhǎng)處。用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈連接上抗癌藥物的單克隆抗體,也有少許用于治療其余疾病。增補(bǔ):淋巴因子中的攪亂素是治療病毒的殊效藥,平常只好從體內(nèi)獲取,且數(shù)目特別的少,為了在體外獲取大批的
17、攪亂素,我們能夠用鼠的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞與其骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行交融,從而從小鼠的腹水中或從培養(yǎng)液中提取。攪亂素是由效應(yīng)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,所以在進(jìn)行細(xì)胞交融時(shí),采納的是效應(yīng)T淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞。專(zhuān)題3胚胎工程一生殖細(xì)胞的發(fā)生和受精作用精子與卵細(xì)胞的發(fā)生過(guò)程1精子的發(fā)生:精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂;變形過(guò)程中,細(xì)胞核為精子頭的主要局部,高爾基體發(fā)育為頂體,中心體演變?yōu)榫拥奈玻€(xiàn)粒體在尾基部形成線(xiàn)粒體鞘膜,其余物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至零落。線(xiàn)粒體為精子運(yùn)動(dòng)供給能量2卵子的發(fā)生:卵原細(xì)胞演變?yōu)槌跫?jí)卵母細(xì)胞被卵泡細(xì)胞包圍,減一分裂在排卵前后達(dá)成,形成次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精;減二分裂
18、是在受精過(guò)程中達(dá)成的。3精子與卵細(xì)胞發(fā)生過(guò)程比較工程精子的發(fā)生過(guò)程卵子的發(fā)生過(guò)程發(fā)生場(chǎng)所8發(fā)生時(shí)間發(fā)生過(guò)程能否連續(xù)核物質(zhì)含量能否變形結(jié)果細(xì)胞質(zhì)分裂受精作用:1受精場(chǎng)所:是母體的輸卵管上段2受精前的準(zhǔn)備精子獲能在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi);卵子的準(zhǔn)備排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到減數(shù)第二次分裂中期才具備受精能力;3受精過(guò)程卵子四周的構(gòu)造由外到內(nèi):放射冠、透明帶、卵黃膜,a頂體反應(yīng):精子開(kāi)釋頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì),穿越放射冠。b透明帶反應(yīng):頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精子涉及卵黃膜的瞬時(shí)阻擋今后精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)它是防范多精子入卵受精的第一道屏障;c卵黃膜的關(guān)閉作用:精子外膜和卵黃
19、膜交融,精子入卵后,卵黃膜會(huì)拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過(guò)程它是防范多精子入卵受精的第二道屏障;精子尾部零落,原有核膜破碎形成雄原核,同時(shí)卵子達(dá)成減二分裂,形成雌原核注意:受精標(biāo)記是第二極體的形成;受精達(dá)成標(biāo)記是雌雄原核交融成合子二動(dòng)物胚胎發(fā)育的根本過(guò)程胚胎發(fā)育是指受精卵發(fā)育成_的過(guò)程胚胎發(fā)育的各個(gè)階段的特色:1卵裂期:特色:細(xì)胞有絲分裂,細(xì)胞數(shù)目不停增加,但胚胎的整體體積其實(shí)不增加。2桑椹胚:特色:胚胎細(xì)胞數(shù)目抵達(dá)32個(gè)左右時(shí),胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑椹。是全能細(xì)胞。3囊胚:特色:細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)分化該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高。齊集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞群稱(chēng)為內(nèi)細(xì)胞團(tuán),未來(lái)發(fā)育成胎兒的各樣組織
20、。而9滋潤(rùn)層細(xì)胞未來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán);胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔注:囊胚的擴(kuò)大會(huì)以致透明帶的破碎,胚胎伸展出來(lái),這一過(guò)程叫孵化4原腸胚:特色:有了三胚層的分化,擁有原腸腔。(三)胚胎工程的應(yīng)用胚胎工程指對(duì)動(dòng)物初期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和辦理技術(shù),由體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎切割技術(shù)、胚胎冷凍保留技術(shù)和性別控制技術(shù)等構(gòu)成的現(xiàn)代生物技術(shù)。體外受精和胚胎的初期培養(yǎng)(1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):主要方法:用促性腺激素辦理,使其排出更多的卵子,而后,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞;第三種方法是借助超聲波探測(cè)儀、腹腔鏡等直接從活體動(dòng)物的
21、卵巢中汲取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后,才能與獲能的精子受精。(2)精子的采集和獲能:在體外受精前,要對(duì)精子進(jìn)行獲能辦理。(3)受精:獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐羞_(dá)成受精過(guò)程。(4)胚胎的初期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精情況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需增加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分,以及血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適合的階段時(shí),可將其拿出向受體移植或冷凍保留。不一樣動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不一樣。(牛、羊一般要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段才能進(jìn)行移植,小鼠、家兔
22、等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在更早的階段移植,人的體外受精胚胎可在816個(gè)細(xì)胞階段移植。)胚胎移植胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的初期胚胎,或許經(jīng)過(guò)體外受精及其余方式獲取的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)同樣的其余雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之連續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。此中供給胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體,接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“受體。供體為優(yōu)異品種,作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常有或存量大的品種。地位:如轉(zhuǎn)基因、核移植,或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎,都一定經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲取后輩,是胚胎工程的最后一道“工序。胚胎移植的意義:大大縮短了供體自己的生殖周期,充發(fā)散揮雌性?xún)?yōu)異個(gè)體的生殖能力。生理學(xué)基礎(chǔ):動(dòng)物發(fā)情排卵后,同種動(dòng)物的供、受
23、體生殖器官的生理變化是同樣的。這就為供體的胚胎移入受體供給了同樣的生理環(huán)境。初期胚胎在一準(zhǔn)時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的采集供給了可能。受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排擠反應(yīng)。這為胚胎在受體的存活供給了可能。10供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但供體胚胎的遺傳特征在孕育過(guò)程中不受影響。根本程序主要包含:對(duì)供、受體的選擇和辦理。選擇遺傳特征和生產(chǎn)性能優(yōu)異的供體,有健康的體質(zhì)和正常生殖能力的受體,供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情辦理,用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵辦理。配種或人工授精。對(duì)胚胎的采集、檢查、培養(yǎng)或保留。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子
24、宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)(也叫沖卵)。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入196的液氮中保留。對(duì)胚胎進(jìn)行移植。移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行能否妊娠的檢查。3.胚胎切割(1)看法:是指采納機(jī)械方法將初期胚胎切割2等份、4等份等,經(jīng)移植獲取同卵雙胎或多胎的技術(shù)。(2)意義:來(lái)自同一胚胎的后輩擁有同樣的遺傳物質(zhì),屬于無(wú)性生殖。資料:發(fā)育優(yōu)異,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。桑椹胚至囊胚的發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞開(kāi)始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎切割。操作過(guò)程:對(duì)囊胚階段的胚胎切割時(shí),要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均平切割,否那么會(huì)影響切割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。四胚胎干細(xì)胞及其應(yīng)用干細(xì)胞分類(lèi)
25、(1).依照分化潛能的大小分_(例_)、_例_、_例_。11(2).按根源分_、_。胚胎干細(xì)胞、哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞,根源于初期胚胎或從原始性腺中分別出來(lái)。、擁有胚胎細(xì)胞的特征,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯;在功能上,擁有發(fā)育的全能性,可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,能夠增殖而不發(fā)生分化,可進(jìn)行冷凍保留,也可進(jìn)行遺傳改造。、胚胎干細(xì)胞的主要用途是:認(rèn)識(shí)可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律;是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想資料,在培養(yǎng)液中參加分化引誘因,如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí),就能夠引誘ES細(xì)胞向不一樣種類(lèi)的組織細(xì)胞分化,這為揭示細(xì)胞分
26、化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理供給了有效的手段;能夠用于治療人類(lèi)的某些惡疾,如帕金森綜合癥、少年糖尿病等;利用能夠被引誘分化形成新的組織細(xì)胞的特征,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能;跟著組織工程技術(shù)的睜開(kāi),經(jīng)過(guò)ES細(xì)胞體外引誘分化,定向培養(yǎng)出人造組織器官,用于器官移植,解決供體器官缺少和器官移植后免疫排擠的問(wèn)題。專(zhuān)題四生態(tài)工程一、生態(tài)工程的看法生態(tài)工程是指應(yīng)用生態(tài)系統(tǒng)中物種共生與物質(zhì)循環(huán)再生原理、構(gòu)造與功能相協(xié)調(diào)原那么,聯(lián)合系統(tǒng)分析的最優(yōu)化方法而設(shè)計(jì)的促使物質(zhì)被分層多級(jí)利用的生產(chǎn)工藝系統(tǒng)。二、生態(tài)工程的根根源理生態(tài)工程的設(shè)計(jì)所依照的是生態(tài)學(xué)和工程學(xué)原理1、生態(tài)學(xué)原理1物種共生原理:自
27、然界任何一種生物都不可以走開(kāi)其余生物而獨(dú)自生計(jì)和繁衍,存在著共生、競(jìng)爭(zhēng)等關(guān)系,這構(gòu)成了生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)理和反應(yīng)系統(tǒng)。2生態(tài)位原理:生態(tài)系統(tǒng)中各樣生物都據(jù)有必定的生態(tài)位,依照此原理,可建立一個(gè)擁有多層次、多種群的穩(wěn)固而高效的生態(tài)系統(tǒng)。3食品鏈原理:食品鏈/食品網(wǎng)是實(shí)現(xiàn)生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)循環(huán)、能量流動(dòng)和信息傳達(dá)的基礎(chǔ),物種間的食品關(guān)系是生態(tài)工程設(shè)計(jì)的重要要素。4物種多樣性原理:生態(tài)系統(tǒng)中生物多樣性越高,抵擋力穩(wěn)固性越陷越高,生態(tài)系統(tǒng)就越穩(wěn)固。如“三北防范林蟲(chóng)害、珊瑚礁區(qū)的活力2、工程學(xué)原理1物質(zhì)循環(huán)再生原理:物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中周而復(fù)始,分層分級(jí)利用。我國(guó)古代的“無(wú)荒棄物農(nóng)業(yè)利用采集到的全部可能的有機(jī)物
28、質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)肥料,12改良了土壤構(gòu)造,培養(yǎng)了土壤微生物,實(shí)現(xiàn)了N、P、K等元素的循環(huán)利用。2協(xié)調(diào)與均衡原理:要辦理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與均衡,生態(tài)系統(tǒng)中的生物數(shù)目不可以超出環(huán)境承載力環(huán)境容納量的限度。太湖等水體富營(yíng)養(yǎng)化,以致水葫蘆和藻類(lèi)瘋長(zhǎng)現(xiàn)象;西北衰落的楊樹(shù)和旺盛的當(dāng)?shù)貥?shù)種間的大反差。3整體性原理:生態(tài)工程建設(shè),不僅要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律,還要考慮到社會(huì)和經(jīng)濟(jì)等系統(tǒng)的影響力。只有應(yīng)用整體性原理,才能一致協(xié)調(diào)目前與長(zhǎng)遠(yuǎn)、局部與整體、開(kāi)發(fā)與環(huán)境建設(shè)之間的關(guān)系,保障生態(tài)系統(tǒng)的均衡與穩(wěn)固。三、生態(tài)工程建設(shè)的根本過(guò)程生態(tài)工程建設(shè)的核心環(huán)節(jié)是技術(shù)設(shè)計(jì).生態(tài)工程設(shè)計(jì)的方法及實(shí)例1食品鏈網(wǎng)的“相接,如稻田養(yǎng)
29、魚(yú)農(nóng)業(yè)生態(tài)工程。2食品鏈網(wǎng)的“加環(huán),如玉米芯的充分利用。3.生態(tài)工程在設(shè)計(jì)時(shí)要考慮到有益于人和自然雙方面,突出低耗費(fèi)、多效益、可連續(xù)的特色。二、我國(guó)生態(tài)工程建設(shè)的實(shí)例治污生態(tài)工程1內(nèi)容:主要波及固體、液體、有機(jī)廢物的辦理,生態(tài)肥料的研制與試用,湖區(qū)污染的生態(tài)治理,塑料的再生利用。2實(shí)例“人工濕地生態(tài)工程:1濕地的重要特色之一是生物多樣性豐富,濕地生態(tài)系統(tǒng)擁有較強(qiáng)的功能,被譽(yù)為“地球之腎。2“人工濕地的凈化作用是經(jīng)過(guò)濕地環(huán)境中所發(fā)生的物理、化學(xué)和生物作用的綜合效應(yīng)實(shí)現(xiàn)的,由不一樣種類(lèi)的水生植物和微生物的共同作用來(lái)達(dá)成。3水生植物可汲取、轉(zhuǎn)變污水中的N、P等物質(zhì),還可以促使細(xì)菌等微生物對(duì)污水的辦理
30、和凈化。【拓展】人工濕地是一個(gè)綜合的生態(tài)系統(tǒng),它應(yīng)用生態(tài)系統(tǒng)中物種共生、物質(zhì)循環(huán)再生原理,構(gòu)造與功能協(xié)調(diào)原那么,在促使廢水中污染物質(zhì)良性循環(huán)的前提下,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防范環(huán)境的再污染,獲取污水辦理與資源化的最正確效益。生態(tài)恢復(fù)工程1生態(tài)恢復(fù)工程的第一步是恢復(fù)植被.2實(shí)例礦山荒棄地生態(tài)恢復(fù)工程:在礦區(qū)荒棄地的生態(tài)修復(fù)中,植被要注意選擇生長(zhǎng)快和抗逆性強(qiáng)的樹(shù)種,優(yōu)先選擇負(fù)擔(dān)樹(shù)種,盡量選擇適應(yīng)性強(qiáng)的鄉(xiāng)土樹(shù)種和前鋒樹(shù)種,注意樹(shù)種的多功能效益。西部的生態(tài)治理水土流失是西部生態(tài)問(wèn)題中最實(shí)質(zhì)、最突出的矛盾。生態(tài)農(nóng)業(yè)工程生態(tài)農(nóng)業(yè)以保持生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)均衡為主導(dǎo)思想,促使物質(zhì)在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)和重13復(fù)使用,以最
31、少的投入獲取最大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益。填空選修3易考知識(shí)點(diǎn)背誦專(zhuān)題1基因工程基因工程的看法P9基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平根本過(guò)程結(jié)果特色長(zhǎng)處實(shí)質(zhì)原理一基因工程的根本工具1.“分子手術(shù)刀-_1根源:主假如從_中分別純化出來(lái)的。2功能:能夠鑒識(shí)雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,而且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的_斷開(kāi),所以擁有_。3結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段尾端平常有兩種形式:_和_。2.“分子縫合針_14兩種DNA連結(jié)酶EcoliDNA連結(jié)酶和T4-DNA連結(jié)酶的比較:同樣點(diǎn):都縫合_。差異:EcoliDNA連結(jié)酶根源于T4噬菌體,只好將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末
32、端之間的磷酸二酯鍵連結(jié)起來(lái);而T4DNA連結(jié)酶能縫合兩種尾端,但連結(jié)平尾端的之間的效率較低。與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只好將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的尾端,形成磷酸二酯鍵。DNA連結(jié)酶是連結(jié)兩個(gè)DNA片段的尾端,形成磷酸二酯鍵。3.“分子運(yùn)輸車(chē)_1載體具備的條件:。_2最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、構(gòu)造簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體以外,并擁有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。3其余常有載體_(二)基因工程的根本操作程序第一步:_1.目的基因是指:。獲取目的基因的方法_原核基因采納直接分別獲取,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。4.PC
33、R技術(shù)擴(kuò)增目的基因1原理:DNA雙鏈復(fù)制2過(guò)程:第一步:加熱至9095DNA解鏈;第二步:冷卻到5560,引物聯(lián)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至7075,熱穩(wěn)固DNA聚合酶從引物初步互補(bǔ)鏈的合成。第二步:_目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)固存在,而且能夠遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。構(gòu)成:_1啟動(dòng)子:是一段有特別構(gòu)造的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶鑒識(shí)和聯(lián)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最后獲取所需的蛋白質(zhì)。2停止子:也是一段有特別構(gòu)造的DNA片段,位于基因的尾端。3標(biāo)記基因的作用:是為了判斷受體細(xì)胞中_,從而將含有目的基因的細(xì)胞挑選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是_。第三步
34、_轉(zhuǎn)變的看法:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),而且在受體細(xì)胞內(nèi)保持穩(wěn)固和表達(dá)的過(guò)程。152.常用的轉(zhuǎn)變方法:_,其次還有基因槍法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采納最多的方法是和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是_。此方法的受體細(xì)胞多為_(kāi)2.目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原由是生殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少,最常用的原核細(xì)胞是_,其轉(zhuǎn)變方法是:先用Ca2+辦理細(xì)胞,使其成為感覺(jué)態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感覺(jué)態(tài)細(xì)胞混淆,在必定的溫度下促使感覺(jué)態(tài)細(xì)胞汲取DNA分子,達(dá)成轉(zhuǎn)變過(guò)程。重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,挑選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依照是標(biāo)記基因能
35、否表達(dá)。第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá)第一要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上能否插入了目的基因,方法是采納DNA分子雜交技術(shù)。其次還要檢測(cè)目的基因能否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,方法是采納用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。最后檢測(cè)目的基因能否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原抗體雜交。有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的判斷。如轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)植物能否出現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀。三基因工程的應(yīng)用植物基因工程:_動(dòng)物基因工程:_基因治療:看法_基因檢測(cè)原理_作用_四蛋白質(zhì)工程的看法蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的構(gòu)造規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),經(jīng)過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新
36、的蛋白質(zhì),以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求?;蚬こ淘谠敲瓷现缓蒙a(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)16轉(zhuǎn)錄翻譯蛋白質(zhì)的改造_:設(shè)計(jì)并制造自然界中不存在的嶄新蛋白質(zhì),使之擁有特定的氨基酸序列、空間構(gòu)造和預(yù)期功能_:在蛋白質(zhì)分子中代替某一個(gè)肽段或一個(gè)特定的構(gòu)造域_:經(jīng)過(guò)基因工程中的定點(diǎn)誘變技術(shù),有目的改造蛋白質(zhì)分子中某活性部位的1個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基,以改良蛋白質(zhì)的性質(zhì)和功能_是改變蛋白質(zhì)構(gòu)造的核心之一_是基因定點(diǎn)誘變的常用方法蛋白質(zhì)工程與基因工程的關(guān)系蛋白質(zhì)工程基因工程實(shí)質(zhì)結(jié)果聯(lián)系專(zhuān)題2細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程一植物組織培養(yǎng)技術(shù)1、理論基礎(chǔ)原理:_細(xì)胞擁有全能性的原由:_全能性表達(dá)的難易程度:受精卵、生殖細(xì)胞
37、、干細(xì)胞、體細(xì)胞;植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞,請(qǐng)排序;_172、過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞又稱(chēng)_愈傷組織胚狀體試管苗植物體愈傷組織的特色:_脫分化:_再分化_3、用途:微型生殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)。植物生殖微型生殖:能夠高效迅速地實(shí)現(xiàn)種苗的大批生殖作物脫毒:采納莖尖組織培養(yǎng)來(lái)除掉病毒由于植物分生區(qū)周邊的病毒很少或沒(méi)有人工種子:以植物組織培養(yǎng)獲取的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為資料,經(jīng)人工薄膜包裝獲取的種子。長(zhǎng)處:完整保持優(yōu)異品種的遺傳特征,不受季節(jié)的限制;方便存儲(chǔ)和運(yùn)輸人工種子的構(gòu)造包含:_、_和_。作物新品種培養(yǎng)單倍體育種:過(guò)程:植株AaBb經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂獲
38、取花粉AB、Ab、aB、ab四各樣類(lèi);對(duì)花粉進(jìn)行_技術(shù)是植物組織培養(yǎng);獲取單倍體植株;對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行_辦理;獲取了正常的_植株AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類(lèi)型。b長(zhǎng)處:_二植物細(xì)胞培養(yǎng):經(jīng)過(guò)能夠產(chǎn)生對(duì)人們有益的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠產(chǎn)生大批的_產(chǎn)物。注意:1、原理:_2、大規(guī)模獲取細(xì)胞產(chǎn)品應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)到_階段三植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1、過(guò)程:182、植物引誘交融的方法:物理法包含離心、振動(dòng)、電刺激等。化學(xué)法一般是用_作為引誘劑。3注意:a生理基礎(chǔ):_,_b植物細(xì)胞交融前需用_和_除掉細(xì)胞壁3意義:_二、動(dòng)物細(xì)胞工程一般包含等技術(shù)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1看法:動(dòng)物細(xì)胞
39、培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中拿出有關(guān)的組織,將它分別成單個(gè)細(xì)胞,而后放在適合的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和生殖。2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織剪碎用_處理分別成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行_培養(yǎng)貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞從頭用胰蛋白酶或膠原蛋白酶辦理分別成單個(gè)細(xì)胞連續(xù)_培養(yǎng)。3細(xì)胞貼壁和接觸克制:懸液中分其余細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不停增加,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面互相克制時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這類(lèi)現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)。4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌辦理。平常還要在培養(yǎng)液中增加必定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。其余,應(yīng)按
40、期改換培養(yǎng)液,防范代謝產(chǎn)物累積對(duì)細(xì)胞自己造成危害。營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。平常需參加血清、血漿等天然成分。溫度:適合溫度:哺乳動(dòng)物多是36.50.5;pH:7.27.4。氣體環(huán)境:95%空氣5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必要的,CO2的主要作用是保持培養(yǎng)液pH。5動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各樣細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)的主要區(qū)_二動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物191、哺乳動(dòng)物核移植能夠分為胚胎細(xì)胞核移植比較簡(jiǎn)單和體細(xì)胞核移植比較難。2、采納去核卵(母)細(xì)胞的原由:卵(母)細(xì)胞比較大,簡(jiǎn)單操作;卵(
41、母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。3、體細(xì)胞核移植的大概過(guò)程是:右圖注意:(1)a_b_(2)原理:_全能性克隆羊性別:_3、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:加快牲口遺傳改良進(jìn)度,促使良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)目;生產(chǎn)寶貴的醫(yī)用蛋白;作為異種移植的供體;用于組織器官的移植等。4、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺點(diǎn)等。三動(dòng)物細(xì)胞交融1、動(dòng)物細(xì)胞交融與植物原生質(zhì)體交融的原理根真同樣,引誘動(dòng)物細(xì)胞交融的方法與植物原生質(zhì)體交融的方法近似,常用的引誘要素_等。2、動(dòng)物細(xì)胞交融的意義:戰(zhàn)勝了_,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培養(yǎng)的重要手段。3、動(dòng)物細(xì)胞交融與
42、植物體細(xì)胞雜交的比較:要點(diǎn)記憶細(xì)胞工程植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞交融理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性動(dòng)性交融前辦理酶解法去除細(xì)胞壁纖維素注射特定抗原,免疫辦理正常小鼠酶、果膠酶引誘手段物理法:離心、振動(dòng)、電激物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇PEG化學(xué)法:聚乙二醇生物法:滅活的病毒滅活的仙臺(tái)病毒20引誘過(guò)程第一步:原生質(zhì)體的制備正常小鼠免疫辦理酶解法第二步:原生質(zhì)體交融動(dòng)物細(xì)胞的交融物、化法物、化、生法第三步:雜種細(xì)胞的挑選和雜交瘤細(xì)胞的挑選與培養(yǎng)培養(yǎng)第四步:雜栽種株的引誘與專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)判斷單克隆抗體的提純用途和意義戰(zhàn)勝遠(yuǎn)緣雜交的不親和障制備單克隆抗體礙,
43、大大擴(kuò)展雜交的親本組診療、治療、預(yù)防疾病,比方合范圍“生物導(dǎo)彈治療癌癥應(yīng)用:白菜-甘藍(lán)等雜栽種株單克隆抗體1a.抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種_。從血清中分別出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。b.B淋巴細(xì)胞特色:能夠產(chǎn)生_,但不可以無(wú)窮增殖;骨髓瘤細(xì)胞特色:能_,但不可以產(chǎn)生抗體。2單克隆抗體的制備過(guò)程:抗原注入小鼠體內(nèi)分別骨髓瘤細(xì)胞淋巴細(xì)胞細(xì)胞交融雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)選擇培養(yǎng)細(xì)胞注入小鼠培養(yǎng)基體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)從腹水提取從培養(yǎng)液提取單克隆抗體213雜交瘤細(xì)胞的特色:既能大批_,又能產(chǎn)生_。4單克隆抗體的長(zhǎng)處:。5單克隆抗體的作用:作為診療試劑:正確鑒識(shí)各樣抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟必定抗原發(fā)生特異
44、性聯(lián)合,擁有正確、高效、簡(jiǎn)單、迅速的長(zhǎng)處。用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈_,也有少許用于治療其余疾病。增補(bǔ):淋巴因子中的攪亂素是治療病毒的殊效藥,平常只好從體內(nèi)獲取,且數(shù)目特別的少,為了在體外獲取大批的攪亂素,我們能夠用鼠的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞與其骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行交融,從而從小鼠的腹水中或從培養(yǎng)液中提取。攪亂素是由效應(yīng)T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,所以在進(jìn)行細(xì)胞交融時(shí),采納的是效應(yīng)T淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞。專(zhuān)題3胚胎工程一生殖細(xì)胞的發(fā)生和受精作用精子與卵細(xì)胞的發(fā)生過(guò)程1精子的發(fā)生:精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂;變形過(guò)程中,細(xì)胞核為精子頭的主要局部,高爾基體發(fā)育為頂體,中心體演
45、變?yōu)榫拥奈?,線(xiàn)粒體在尾基部形成線(xiàn)粒體鞘膜,其余物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至零落。線(xiàn)粒體為精子運(yùn)動(dòng)供給能量2卵子的發(fā)生:卵原細(xì)胞演變?yōu)槌跫?jí)卵母細(xì)胞被卵泡細(xì)胞包圍,減一分裂在_,形成次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精;減二分裂是在_過(guò)程中達(dá)成的。3精子與卵細(xì)胞發(fā)生過(guò)程比較工程精子的發(fā)生過(guò)程卵子的發(fā)生過(guò)程發(fā)生場(chǎng)所發(fā)生時(shí)間發(fā)生過(guò)程能否連續(xù)核物質(zhì)含量22能否變形結(jié)果細(xì)胞質(zhì)分裂受精作用:1受精場(chǎng)所:是母體的_2受精前的準(zhǔn)備精子獲能在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi);卵子的準(zhǔn)備排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一步成熟到_才具備受精能力;3受精過(guò)程卵子四周的構(gòu)造由外到內(nèi):放射冠、透明帶、卵黃膜,a頂體反應(yīng):精子開(kāi)釋頂體酶溶解卵丘細(xì)
46、胞之間的物質(zhì),穿越放射冠。B_:頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精子涉及卵黃膜的瞬間阻擋今后精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)它是防范多精子入卵受精的第一道屏障;C:精子外膜和卵黃膜交融,精子入卵后,卵黃膜會(huì)拒絕其余精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過(guò)程它是防范多精子入卵受精的第二道屏障;精子尾部零落,原有核膜破碎形成雄原核,同時(shí)卵子達(dá)成減二分裂,形成雌原核注意:受精標(biāo)記是_的形成;受精達(dá)成標(biāo)記_二動(dòng)物胚胎發(fā)育的根本過(guò)程胚胎發(fā)育是指受精卵發(fā)育成_的過(guò)程胚胎發(fā)育的各個(gè)階段的特色:1卵裂期:特色:細(xì)胞進(jìn)行_分裂,細(xì)胞數(shù)目不停增加,但胚胎的整體體積其實(shí)不增加。2桑椹胚:特色:胚胎細(xì)胞數(shù)目抵達(dá)32個(gè)左右時(shí),胚胎形成致密的細(xì)
47、胞團(tuán),形似桑椹,是_細(xì)胞。3囊胚:特色:細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)分化該時(shí)期細(xì)胞的全能性仍比較高。齊集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞群稱(chēng)為_(kāi),未來(lái)發(fā)育成胎兒的各樣組織。而滋潤(rùn)層細(xì)胞未來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán);胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)注:囊胚的擴(kuò)大會(huì)以致透明帶的破碎,胚胎伸展出來(lái),這一過(guò)程叫孵化4原腸胚:特色:有了_的分化,擁有原腸腔。(三)胚胎工程的應(yīng)用胚胎工程指對(duì)動(dòng)物初期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和辦理技術(shù),由_、_、_、胚胎冷凍保留技術(shù)和_技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。體外受精和胚胎的初期培養(yǎng)(1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng):23主要方法:用_辦理,使其排出更多的卵子,而后,從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種
48、方法:從剛屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞;第三種方法是借助超聲波探測(cè)儀、腹腔鏡等直接從活體動(dòng)物的卵巢中汲取卵母細(xì)胞。采集的卵母細(xì)胞,都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后,才能與獲能的精子受精。(2)精子的采集和獲能:在體外受精前,要對(duì)精子進(jìn)行_辦理。(3)受精:獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐羞_(dá)成受精過(guò)程。(4)胚胎的初期培養(yǎng):精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精情況和受精卵的發(fā)育能力。培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需增加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分,以及血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到適合的階段時(shí),可將其拿出向受體移植或冷凍保留。
49、不一樣動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不一樣。(牛、羊一般要培養(yǎng)到_或_階段才能進(jìn)行移植,小鼠、家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在更早的階段移植,人的體外受精胚胎可在816個(gè)細(xì)胞階段移植。)胚胎移植胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的初期胚胎,或許經(jīng)過(guò)體外受精及其余方式獲取的胚胎,移植到_其余_動(dòng)物的體內(nèi),使之連續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。此中供給胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“_,接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“_。供體優(yōu)異品種,作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常有或存量大的品種。地位:如轉(zhuǎn)基因、核移植,或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎,都一定經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲取后輩,是胚胎工程的最后一道“工序。胚胎移植的意義:大大縮短了供體自己的生殖周期,充發(fā)散揮雌性?xún)?yōu)異個(gè)
50、體的生殖能力。生理學(xué)基礎(chǔ):動(dòng)物發(fā)情排卵后,同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是同樣的。這就為供體的胚胎移入受體供給了同樣的生理環(huán)境。初期胚胎在一準(zhǔn)時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的采集供給了可能。受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生_。這為胚胎在受體的存活提供了可能。供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但供體胚胎的遺傳特征在孕育過(guò)程中不受影響。根本程序主要包含:24對(duì)供、受體的選擇和辦理。選擇遺傳特征和生產(chǎn)性能優(yōu)異的供體,有健康的體質(zhì)和正常生殖能力的受體,供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行_,用促性腺激素對(duì)供體母牛做_辦理。配種或人工授精。對(duì)胚胎的采集、檢查、培養(yǎng)或保留。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(lái)(也叫沖卵)。對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到_階段。直接向受體移植或放入196的液氮中保留。對(duì)胚胎進(jìn)行移植。移植后的檢查。對(duì)受體母牛進(jìn)行能否妊娠的檢查。胚胎切割看法:是指采納機(jī)械方法將_切割2等份、4等份等,經(jīng)移植獲取同卵雙胎或多胎的技術(shù)。(2)意義:來(lái)自同一胚胎的后輩擁有同樣的遺傳物質(zhì),屬于_生殖。資料:發(fā)育優(yōu)異,形態(tài)正常的
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