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文檔簡介
1、實驗七植物可溶性糖的測定1實驗原理 糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再與蒽酮作用生成綠色絡(luò)合物,顏色的深淺與糖含量有關(guān),在650nm波長下OD值與糖含量成正比,由于蒽酮試劑與糖反應(yīng)的呈色強(qiáng)度隨時間變化,故必須在反應(yīng)后立即在同一時間內(nèi)比色。2實驗器材 實驗儀器 : 分光光度計 恒溫水浴鍋 分析天平 刻度試管 漏斗 3恒溫水浴鍋4分光光度計5分析天平6實驗試劑乙醚醋酸鉛草酸納粉末7實驗材料青菜梗8實驗步驟1 可熔性糖的提?。悍Q取5克新鮮青菜梗于研缽中,加乙醚少許,磨成勻漿,倒入燒杯中,水洗滌,再加蒸餾水30-40ml,然后水浴加熱70-80攝氏度,半小時冷卻后逐滴加入飽和中性醋酸鉛,以除去蛋白質(zhì),直至
2、加液時不再出現(xiàn)白色沉淀為止,然后將此混合液連同殘渣一并倒入100ml容量瓶中,充分振蕩定容,過濾,于事先放有少量草酸鈉粉末的三角瓶中,所得的透明液體即為可溶性糖提取液。9實驗步驟2 顯色及比色:吸取上述糖提取液1ml,加入5ml蒽酮試劑混合,沸水浴煮10min,取出冷卻,在625nm處測OD值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上取得提取液中糖的含量。3 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:取標(biāo)準(zhǔn)糖溶液將其稀釋成一系列0、20、40、60、80毫克每摩爾的不同濃度的溶液,按上述方法分別測其OD值,然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。10計算:設(shè)V為植物樣品稀釋后的體積 C為提取液的含糖量 W為植物樣重 可溶性糖%=CV/W1011實驗結(jié)果OD=0.7450.745=0.0039.X-0.0096 X=196可溶性糖=19600/5106100% =0.392%12注意事項1 定量實驗,且涉及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制,分光光度計的使用,因此溶液配制、材料選取等方面必須精確、仔細(xì)一減少誤差。2 實驗組、對照組
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