1、微生物實驗室生物安全管理手冊實驗室生物安全管理體系文件目錄序號名稱備注1實驗室人員和項目準入制度2人員培訓(xùn)考核制度3人員健康監(jiān)護制度4生物安全檢查制度5實驗室人員生物安全行為規(guī)范6事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度7實驗室生物危險標識使用規(guī)定8實驗室內(nèi)務(wù)管理制度9實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度10實驗室廢棄物管理制度11實驗室消毒隔離制度12實驗室應(yīng)急處置預(yù)案13實驗活動生物安全標準操作規(guī)程實驗室人員和項目準入制度目的規(guī)范生物安全二級實驗室的使用和管理，保證操作人員，實驗對象和環(huán)境安全，確保檢測結(jié)果準確可靠。適用范圍適用于檢驗科生物安全二級實驗室安全運轉(zhuǎn)及在此環(huán)境下的所有檢

2、測工作。職責(zé)進入生物安全二級實驗室從事檢測工作的所有人員嚴格按照本規(guī)定執(zhí)行。具體要求：概述本手冊規(guī)定的各項要求，首先是為了保證實驗室的安全運行，包括防止實驗室工作人員的感染、防止實驗室操作的病原微生物對環(huán)境的污染、防止檢測樣品的污染，保證實驗結(jié)果的準確可靠。本手冊規(guī)定的各項要求，同時也是為了保證實驗室的工作質(zhì)量，即：實驗產(chǎn)生的各項結(jié)果和數(shù)據(jù)，必須準確可靠：實驗室出具的檢驗報告，必須明確完整。實驗室操作規(guī)程開始工作前半小時。開啟實驗室主電源，使實驗室及生物安全柜投入運行。開啟順序：開啟屋頂風(fēng)機開啟全排風(fēng)開啟空調(diào)開啟安全柜打開房間紫外線燈。工作人員按照下列要求進行個人防護，才能進入實驗室區(qū)域：（1

3、）在更衣室中換穿工作服和工作鞋。（2）在清潔區(qū)內(nèi)，根據(jù)實驗要求做好防護。（3）實驗中需使用腐蝕性試劑時，在膠乳手套外加帶一次性塑料手套；需要進行可能造成污染材料飛濺的操作時，需加戴防護面罩。一切準備工作就緒后，才將標本和試劑從冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即歸位，使其在冰箱外停留的時間盡可能短。4.不打開容器的觀察允許在生物安全柜外進行，否則，必須在生物安全柜內(nèi)觀察結(jié)果。確保不含感染性的實驗材料，才可以從實驗室攜出。容器表面應(yīng)用75%乙醇消毒。每一實驗步驟完成后，均應(yīng)清理臺面。所有用過的試劑均應(yīng)歸還原位；使過的吸管等長形器材放入儲存污物的盒內(nèi)；鋒利品放入專用的污物盒；紙巾軟物品放入污

4、物袋；在臺面上噴灑75%乙醇，保持20分鐘，然后以紙巾擦干。實驗室的其他表面，也應(yīng)經(jīng)常用75%乙醇擦拭。放置污染物品的容器裝滿時，應(yīng)更換新的容器。實驗結(jié)束后，對用過的污染物品進行高壓消毒。工作完畢的更衣順序是，先用消毒液浸泡手套5分鐘，然后依次除去口罩、防護服、鞋套，放入高壓消毒袋內(nèi)，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。每次工作完畢，生物安全柜內(nèi)用75%酒精擦拭臺面，消毒液消毒地面，開啟紫外線燈照射1小時后，逐一關(guān)閉實驗室送風(fēng)和通風(fēng)設(shè)備關(guān)閉順序與開啟順序相反。實驗記錄與實驗報告在實驗室內(nèi)，實驗記錄應(yīng)使用鉛筆書寫。記錄內(nèi)容應(yīng)簡明扼要，包括實驗日期，實驗?zāi)康暮蛯嶒灥幕緱l件等提

5、示記憶的內(nèi)容，并較詳細地記載觀察到的實際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結(jié)果。要求字跡應(yīng)清晰，數(shù)字成行成列，以避免錄入錯誤。將上述記錄在紙張上的實驗記錄應(yīng)用80福爾馬林，密閉熏蒸消毒6小時后方可帶出實驗室。或閣著實驗室玻璃窗由清潔區(qū)工作人員抄錄一份。實驗記錄必須在實驗結(jié)束后24小時內(nèi)錄入計算機。記錄準確的實驗報告和錄入時間。再按照由實驗室?guī)С龅臅鴮懹涗洠瑴蚀_地記載實驗結(jié)果和數(shù)據(jù)。錄入后，書寫記錄保存1周，以備查驗。實驗記錄錄入后，一般不得修改。因數(shù)據(jù)記錄錯誤，錄入錯誤，或?qū)嶋H觀察到的實驗結(jié)果改變，必須更改記錄時，不要刪除已經(jīng)錄入的描述和數(shù)據(jù)，而應(yīng)錄入新的描寫和數(shù)據(jù)，并注明更改原因。每月一次，將上月計算機的實驗記錄做

6、出備份，備份的實驗記錄不得修改。實驗室負責(zé)人應(yīng)定期檢查實驗記錄，核對備份與原始的實驗記錄，對記錄中的缺陷提出修改意見。實驗記錄保存一年。已使用的實驗記錄（出具報告，發(fā)表論文，或以其他方式引用），在使用后再保存一年。如無特殊必要，備份的實驗記錄一般永久保存。在需要出具正式實驗報告的場合，報告由實驗者填寫署名，交實驗室負責(zé)人記錄核對后簽字，再由單位簽發(fā)人簽字并加蓋公章發(fā)出。標本保管規(guī)則根據(jù)標本的性質(zhì)、目的進行保存，每分標本分兩份，一份檢測時使用，另一份備用標本因各種原因損失時，啟用后備標本，并重新備份。確定不用的標本，采用高壓滅菌后焚燒的方式銷毀。實驗室裝備保養(yǎng)實驗室的定期保養(yǎng)按照提供實驗室設(shè)備廠

7、商的規(guī)定進行，主要是對機械和電器部分進行維護。實驗室內(nèi)的儀器設(shè)備的保養(yǎng)由實驗室工作人員進行。維護有專業(yè)人員進行。生物安全柜的濾器必須按說明書規(guī)定的時間定期由專業(yè)人員更換，其它儀器設(shè)備也應(yīng)根據(jù)實際需要清潔保養(yǎng)。儀器設(shè)備需要更新，需要離開實驗室進行維修，或損壞需要更換，以及必須臨時進入實驗室使用，使用完畢后必須撤出實驗室的貴重儀器，在撤出實驗室之前必須以恰當(dāng)?shù)姆绞絿栏裣?，方可處理或重新投入使用。意外情況處理發(fā)生可疑的實驗室感染事故時，應(yīng)對被感染的人員進行隔離觀察。如果判定為法定的傳染病感染，應(yīng)按傳染病防治法的規(guī)定報告，同時給予有效的隔離治療一、人員培訓(xùn)考核制度目的規(guī)范實驗室相關(guān)人員的培訓(xùn)考核適用

8、范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員培訓(xùn)考核制度3.1.實驗室工作人員的培訓(xùn)新工作人員進入實驗室前，必須經(jīng)過培訓(xùn)，取得進入實驗室工作的資格。培訓(xùn)由實驗室負責(zé)人組織進行，并指定熟悉實驗室工作的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括：（1）相關(guān)檢驗的國家診斷標準、處理原則以及本手冊內(nèi)容。（2）實驗室所有設(shè)備的使用方法。（3）個人防護方法。（4）實驗室基本技術(shù)。（5）實驗室消毒凈化的方法。3.2.實驗室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過培訓(xùn)后，由實驗室負責(zé)人組織考核。通過考核后，還須與有資格的工作人員一同工作3個月，才能獲得獨立進行實驗室操作的正式資格。三、人員健康監(jiān)護制度目的規(guī)范實驗室相關(guān)人員的健康監(jiān)護

9、適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員健康監(jiān)護制度3.1工作人員從事工作前必須進行HIV抗體和甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒標記物的檢測，每半年進行一次HIV抗體復(fù)檢，并保留血樣一年以上。工作人員應(yīng)每年進行一次體檢，并將可能涉及生物安全危害的體檢結(jié)果存檔，以便判斷生物安全危害是否發(fā)生。實驗室應(yīng)建立人員健康監(jiān)護檔案，檔案內(nèi)容包括既往病史、檢測結(jié)果、免疫接種史等，以便對從事涉及生物安全危害人員的健康狀況進行跟蹤。實驗室工作人員的適合工作狀態(tài)實驗室工作人員必須在身體狀況良好的情況下，才能進入實驗室工作。出現(xiàn)下列情況，不應(yīng)進入實驗室：身體出現(xiàn)開放性損傷；患發(fā)熱性疾病：感冒、上呼吸道感染；其他導(dǎo)致

10、抵抗力下降的狀況：妊娠、在實驗室內(nèi)連續(xù)工作4小時以上或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。四、生物安全檢查制度目的規(guī)范實驗室生物安全，保證設(shè)備正常運行。適用范圍適用于生物安全涉及的儀器設(shè)備（比如生物安全柜等）3、生物安全檢查制度實驗室內(nèi)，每2個月以細菌培養(yǎng)的方式進行安全性檢測。生物安全柜內(nèi)放置平板培養(yǎng)基2個，實驗室4角和中間各放置1個，半污染區(qū)放置2個。將平皿敞開5分鐘，然后蓋上，每平板菌落數(shù)平均不得超過2個，超過標準，需要對實驗室或污染部位進行甲醛熏蒸消毒。五、實驗室人員生物安全行為規(guī)范目的規(guī)范實驗室人員的生物安全行為規(guī)范適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3生物安全組織管理與行為規(guī)范組織框架圖單位

11、法人或授權(quán)負責(zé)人I實驗室負責(zé)人I生物安全員I實驗室工作人員各類人員相應(yīng)行為規(guī)范（1）負責(zé)組織生物安全實驗室的立項、選址，施工隊的資質(zhì)驗證。（2）負責(zé)成立生物安全委員會負責(zé)生物安全，制定管理制度，監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行情況。（3）負責(zé)組織對造成外環(huán)境污染、實驗室污染、人身傷害事故的調(diào)查與處理。（1）組織制定安全手冊、操作規(guī)程等文件。（2）按照上述文件要求組織實驗室的各項工作，保證實驗室運行的安全和實驗室工作質(zhì)量的準確可靠。（3）組織進入生物安全二級實驗室的人員進行業(yè)務(wù)培訓(xùn)，保證工作人員熟知微生物的操作規(guī)程和技術(shù)，掌握實驗室設(shè)備的特殊要求并熟練操作，對培訓(xùn)的結(jié)果進行考核，決定進入實驗室工作人

12、員的資格。（1）對技術(shù)方法、化學(xué)品、材料與設(shè)備定期進行內(nèi)部安全檢查，確保其符合國家和地方的有關(guān)安全與衛(wèi)生政策與標準。一旦發(fā)現(xiàn)不安全因素，立即停止工作并上報實驗室負責(zé)人。（2）與有關(guān)人員討論研究安全政策的問題。（3）確認所有工作人員都具有進入實驗室工作的資格。（4）為所有人員提供連續(xù)性的安全要教育與指導(dǎo)。（5）針對操作程序、技術(shù)方法和各種條件要求的變更，以及新設(shè)備的引進，為全體工作人員提供最新的安全文獻和信息資料。（6）定期檢查實驗室的各項技術(shù)參數(shù)，組織對實驗室裝備的常規(guī)保養(yǎng)。（7）所有可能涉及潛在傳染性或有毒物質(zhì)泄露的意外事件與事故，即使沒有人員受傷或暴露，也要予以調(diào)查，并向?qū)嶒炇邑撠?zé)人員和安

13、全委員會報告調(diào)查結(jié)果和提出建議。（8）當(dāng)任何實驗室工作人員的疾病或缺勤與工作有關(guān)，并被記錄為可能的實驗室獲得性感染時，協(xié)助隨訪調(diào)查其疾病或缺勤情況。（9）確保在發(fā)生傳染性物質(zhì)濺灑其他事件時，監(jiān)督消毒凈化程序得到正確執(zhí)行；并對這類意外事件和事故進行詳細的書面記錄。（10）確保任何需要修理和維護的儀器設(shè)備在消毒與凈化之后方可運出實驗室。生物安全員由主管檢驗師以上的人員承擔(dān)，必須具備如下資質(zhì)：具有實際工作的經(jīng)驗；對操作的微生物有全面、完整的了解；具有組織實驗室工作的能力；對工作有高度的責(zé)任心。（1）生物安全二級實驗室，只允許進行實驗室目的規(guī)定的操作，與此無關(guān)的活動一律不得進行。（2）必須按規(guī)定進行個

14、人防護，方得進入實驗室。（3）保持實驗室環(huán)境的整潔，每項工作完成之后，必須清理和清潔臺面，離開實驗室（4）注意個人的健康狀況，出現(xiàn)身體不適情況，應(yīng)及時向?qū)嶒炇邑撠?zé)人報告。（5）實驗室內(nèi)禁止飲食、吸煙、訪客和喧嘩。實驗室工作人員的技術(shù)要求（1）必須了解實驗室安全原理，熟悉本手冊的各項規(guī)定，熟記緊急情況下的正確應(yīng)對措施。（2）掌握病原微生物操作的基本要求，正確、安全地實用標本，避免污染，以獲得準確、可靠的實驗結(jié)果。（3）必須熟悉相關(guān)實驗的國家標準，能夠完成標準所規(guī)定的任務(wù)。（4）一旦發(fā)生意外，立即向生物安全員匯報。4、個人防護程序個人防護用品的使用要求個人防護用品的穿戴順序個人防護用品脫卸順序六、

15、事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度1、目的糾正檢驗工作中的差錯，及時處理責(zé)任事故，吸取事故的教訓(xùn)，確保檢驗設(shè)備和人員的安全。2、范圍適用于檢驗工作中出現(xiàn)的事故分析報告、調(diào)查和處理。3、職責(zé)事故責(zé)任部門負責(zé)人填寫事故報告單，報告事故發(fā)生的原因及采取的措施。業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和有關(guān)科室負責(zé)人協(xié)助中心負責(zé)人做好事故的調(diào)查處理工作。4、工作程序事故分類凡違反各項規(guī)定所造成的事故均為責(zé)任事故，按其經(jīng)濟損失和人身傷害和大小分為以下幾種：大小事故界限表損失情況小事故一般事故大事故重大事故經(jīng)濟損失W100元1001000元100010000元$10000元人身傷亡一人受傷，休工W3日一人受傷，休工3日以上兩人受

16、傷或一人受傷，休工1-6個月三人以上受傷，休工一年以上，或一人致殘或死亡。事故的處理事故發(fā)生后，應(yīng)立即采取有效措施，防止事態(tài)擴大，搶救受傷人員和儀器設(shè)備報告上級領(lǐng)導(dǎo)。事故發(fā)生3日內(nèi)，事故責(zé)任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓(xùn)、責(zé)任，并由發(fā)生事故科室填寫事故報告單，報業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科。事故發(fā)生后5日內(nèi)，由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科協(xié)助中心負責(zé)人主持召開事故分析會，對事故進行分析并對事故責(zé)任人作出處理。事故責(zé)任科室采取糾正措施，防止類似事故再發(fā)生。重大事故發(fā)生后一周內(nèi)，由檢驗科負責(zé)人向上級主管部門送交事故處理專題報告。事故報告處理單等記錄材料由業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科歸檔保存。大事故和重大事故記入事故

17、責(zé)任人技術(shù)檔案。七、實驗室生物危險標識使用規(guī)定目的規(guī)范生物安全二級實驗室的使用和管理。適用范圍適用于生物安全二級實驗室。具體要求：在具有生物安全二級實驗室門口加貼專門的生物安全警示標識，以避免無關(guān)人員進入相關(guān)區(qū)域，造成感染的危險。在有可能對人員造成威脅的生物標本儲存處加貼生物安全警示標識，以防無關(guān)人員將危險標本帶入安全區(qū)域?qū)θ藛T造成威脅。八、實驗室內(nèi)務(wù)管理制度目的確保生物安全二級實驗室的正常運行、實驗人員、物品和環(huán)境的安全適應(yīng)范圍適應(yīng)于生物安全二級實驗室。職責(zé)進入生物安全二級實驗室工作的所有工作人員嚴格遵照本管理制度執(zhí)行。基本制度在主實驗室設(shè)置清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)。入口處貼有醒目的生物危險

18、標志。非實驗室有關(guān)人員和物品不得進入。實驗室內(nèi)不得進食和飲水，或者進行其他與實驗無關(guān)的活動。實驗室工作人員、外來合作者、進修和學(xué)習(xí)人員在進入實驗室及其崗位之前必須經(jīng)過實驗室負責(zé)人的批準。實驗過程中，嚴格按有關(guān)操作程序操作，降低剪除和氣溶膠的產(chǎn)生。用移液器吸取液體，嚴禁口吸。實驗室的工作人員必須是經(jīng)受過專業(yè)培訓(xùn)的技術(shù)人員。在獨立進行工作前還需在中高級實驗室技術(shù)人員指導(dǎo)下進行上崗培訓(xùn)，達到合格標準，方可開始工作。實驗室的工作人員必須被告知實驗室工作的潛在危險并接受實驗室安全教育，自愿從事實驗室工作。實驗室的工作人員必須遵守實驗室的所有制度、規(guī)定和操作規(guī)程。實驗室的工作人員在開始工作前必須留本底血清

19、進行有關(guān)的檢測，以后定期復(fù)檢。如有疫苗必須進行免疫注射。所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室前必須經(jīng)可行的消毒方法進行消毒。工作前應(yīng)消毒，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒。實驗室特殊管理制度進行感染性實驗室時，應(yīng)禁止他人進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責(zé)人同意方可入內(nèi)，免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的人員不許進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責(zé)同意方可入內(nèi)。實驗室人員進入實驗室前必須進行有效的培養(yǎng)和模擬訓(xùn)練。掌握預(yù)防暴露和暴露后的消毒處理程序。實驗室人員應(yīng)接受必要的免疫接種和相應(yīng)的抗體水品測定。實驗室事故處理：工作人員在操作過程中發(fā)生意外，如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標本濺及體表和口鼻眼內(nèi)、衣物污染實驗臺面等均視為安

20、全事故，應(yīng)視事故類型的不同情況，立即進行緊急處理。具體措施按實驗室應(yīng)急處置預(yù)案執(zhí)行。填寫意外情況登記與處理記錄表，并按規(guī)定報告給有關(guān)部門。處特殊情況外，禁止在實驗室內(nèi)使用銳器。剩余的標本應(yīng)密封后置于適當(dāng)條件下保存。實驗過程中應(yīng)使用鑒定合格的二級生物安全柜。實驗設(shè)備在運出修理或維修前必須嚴格消毒，方可運出。九、實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度目的規(guī)范實驗室菌（毒）種和生物樣本的保管和檔案管理適用范圍實驗室菌（毒）種和生物樣本的處理和檔案管理3、實驗室菌（毒）種和生物樣本的保管按國家規(guī)定可以保存的菌（毒）種，由指定的專人負責(zé)登記、保存和管理。按期傳代、鑒定，必須在無菌室或接種罩內(nèi)進

21、行，并做好有關(guān)記錄。在保存過程中發(fā)現(xiàn)菌（毒）種變異或死亡，應(yīng)及時上報科長和中心主任。本區(qū)檢出的地方菌（毒）株應(yīng)及時上報，因工作需要暫時保留的菌（毒）株也應(yīng)按上級規(guī)定的時間進行銷毀處理。新發(fā)現(xiàn)的菌（毒）株，要做好原始記錄，并上報主管部門復(fù)核確認。菌（毒）種必須每種設(shè)一記錄卡，其內(nèi)容包括：名稱、編號、來源、分離日期、引進日期、鑒定日期、鑒定結(jié)果、鑒定者、審核者、傳代情況、所用培養(yǎng)基、保存方法、溫度、使用轉(zhuǎn)移及銷毀情況、保存者、部門負責(zé)人等。向上級主管部門申請索取菌（毒）種和向下級有關(guān)部門發(fā)放菌（毒）種時，應(yīng)有2人參加辦理，嚴格執(zhí)行國家有關(guān)規(guī)定，手續(xù)要完備，并認真做好記錄備查。一、二類菌（毒）種，應(yīng)

22、派專人向提供單位領(lǐng)取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄必須持有郵寄單位證明，并按照菌（毒）種郵寄與包裝的有關(guān)規(guī)定辦理。未經(jīng)上級批準，任何單位及個人不得以工作之便，進行國際間各類菌（毒）種交流，做好菌（毒）種安全防范工作。4、檔案管理制度4.1、非實驗室人員不得隨意查看實驗室記錄4.2、實驗室人員負責(zé)妥善保存各種樣品登記本、報告單及實驗室原始記錄，不得擅自修改和銷毀4.3、專人負責(zé)保管感染者檔案4.4、未經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)批準不得向無關(guān)人員或單位提供任何實驗室及感染者信息4.5、HIV抗體初篩實驗室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，須進一步確認，確認前不得出具陽性報告及告知受檢者本人或有關(guān)單位十、實驗室廢棄物管理制

23、度目的規(guī)范廢棄物處理適用范圍尖銳器具和其他廢棄物的處理。具體方法：尖銳器具的處理廢棄物的處理十一、實驗室消毒隔離制度目的規(guī)范微生物實驗室和生物安全二級實驗室的消毒隔離工作。適用范圍微生物實驗室和生物安全二級實驗室。職責(zé)所有工作人員都必須遵從本規(guī)程。具體步驟實驗室基本要求消毒方法C高壓消毒30分鐘。其他器材方入有效氯為2000mg/L的含氯消毒液內(nèi)浸泡1小時以上。處理時應(yīng)避免皮膚損傷。C高壓消毒30分鐘。防護鏡浸泡在75%乙醇或有效氯為1000mg/L的含氯消毒劑中,作用30-60分鐘。21.5W，距紫外燈1米處照射強度$70W/m2。C高壓消毒30分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。實驗室

24、高壓消毒安全操作使用前應(yīng)了解并掌握高壓鍋的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用而導(dǎo)致的災(zāi)難性后果。按照操作規(guī)程使用高壓鍋“編集”鍵，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需溫度，然后按“實行”鍵，把所設(shè)溫度存進程序?！熬幖辨I，然后按上下鍵調(diào)節(jié)到滅菌所需時間，然后按“實行”鍵，把所設(shè)時間存進程序。實行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時“滅菌”燈閃爍。高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時不得離開崗位；在日常使用過程中，必須嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，并按照規(guī)定進行設(shè)備的維護。每1年保養(yǎng)一次，每月檢測一次消毒效果。高壓鍋的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后，高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。定期檢查高壓鍋，以確保其正常工作，防

25、止意外事故發(fā)生，保證消毒滅局效果。高壓滅菌安全操作步驟C30分鐘，時間和溫度不得超過設(shè)定值，否則滅菌袋會融化，清理困難。十二、實驗室應(yīng)急處置預(yù)案1目的規(guī)范緊急情況的處理工作。2適用范圍微生物實驗室和微生物安全二級實驗室。3職責(zé)遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規(guī)程處理。4具體要求：造成或可能造成實驗室污染，但未造成人身傷害的實驗室事故，由實驗室負責(zé)人處理。例如實驗過程中，由于標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應(yīng)立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡30分鐘后，對污染的物品進行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級實驗室意外情況登記與處理記錄表，實驗室負責(zé)人應(yīng)指導(dǎo)

26、這些處理行動，并檢查處理效果。在沒有強毒微生物時，再實驗室內(nèi)受到意外傷害，例如割傷、燒傷、燙傷等，由實驗室負責(zé)人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復(fù)沖洗。有在同一實驗室內(nèi)工作人員或派人迅速著裝進入實驗室，清除造成傷害的原因，清理實驗材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實驗室。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責(zé)人。對其進行恰當(dāng)而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復(fù)之前，不得重新進入實驗室工作。實驗室在經(jīng)過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。傷害事故可能導(dǎo)致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜

27、暴露等途徑接觸到感染性液體，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎傷口。在操作過程中發(fā)生培養(yǎng)物、污染材料濺落身體表面等情況，首先使用噴淋裝置，盡快將污染物沖洗掉，然后再進行局部處理。暴露的粘膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實驗室負責(zé)人應(yīng)向上級部門報告，對受傷害者進行隔離觀察，同時根據(jù)情況預(yù)防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價和處理方案。實驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關(guān)閉實驗室，疏散現(xiàn)場的所有人員，對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。立即通知實驗室負責(zé)人及生物安全員。至少在1小時

28、內(nèi)，任何人員不得進入現(xiàn)場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內(nèi)的警示標志。在生物安全員的監(jiān)督下進行消毒、凈化處理；執(zhí)行這項工作時應(yīng)當(dāng)穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。實驗室負責(zé)人員除立即采取對應(yīng)措施外，應(yīng)向上級部門報告，填寫意外情況登記與處理記錄表。培養(yǎng)物等傳染性物質(zhì)的破碎被傳染性物質(zhì)物質(zhì)污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置30分鐘。其后即可清除掉，玻璃碎片應(yīng)當(dāng)用鑷子清理。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。破碎物品清理時如果使用了簸箕，應(yīng)將其進行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡24小時。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應(yīng)

29、佩戴手套。如果實驗室的紀錄表格、其他印刷品或書面材料遭到污染，在妥善轉(zhuǎn)抄后或烤后，應(yīng)當(dāng)將其棄入污染廢棄物容器。試管破碎于密閉式安全離心杯中所有密閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發(fā)生了破損，應(yīng)當(dāng)將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。蓄意破壞堅固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入，都是合適的防范措施。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報告實驗室負責(zé)人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進行處理，并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。十三、實驗活動生物安全標準操作規(guī)程（一）艾滋病初篩檢測實驗操作規(guī)程目的保證艾滋病病毒抗體ELISA實驗的準確性。適用范圍艾滋病病毒抗體ELISA實驗。具體要求樣品采

30、集樣品采集安試劑盒要求采集。采血時注意安全，用一次性注射器謹慎操作，防止發(fā)生刺傷和造成外界污染。血樣如即時用可存于普通冰箱，如要長期保存，分離血清置于-20C及以下。同時做好記錄。樣品運送樣品轉(zhuǎn)送，除特殊需要外，必須是血清或血漿，置于帶有蓋帽的試管內(nèi)，或?qū)⑺芰显嚬苡镁凭珶舴馑?，防止樣品流出。試管上標明姓名、時間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì)以免碰碎，容器外標有HIV檢測專用字樣和生物危害標志。路途較遠或氣候炎熱時容器應(yīng)置于4C以下運送。這樣同時附送檢單。樣品登記和處理C冰箱中，如要貯存，置于-20C冰箱。實驗準備加樣和稀釋根據(jù)樣品數(shù)

31、量將合適數(shù)量的酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上的酶標板條必須保持完整不足部分可用廢棄的微孔添充，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質(zhì)控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴格按照試劑盒說明書規(guī)定的操作，一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準確，小心不要使吸頭碰著酶標板空上是包被抗原。為保證加樣的準確，最好使用多孔道加樣器，使用時注意防止吸頭間的交叉污染。3.6溫育貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時間進行溫育，最好選擇濕育方法。3.7洗板開啟洗板機前，先檢查洗板機廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗

32、液瓶。按照試劑盒的要求，選擇、修改洗扳方式、洗滌次數(shù)和浸泡時間，根據(jù)所用酶標板的條數(shù)確定洗板道數(shù)，根據(jù)酶標板的位置調(diào)節(jié)洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結(jié)束后用蒸餾水沖洗管道。3.8加酶結(jié)合物對于二步法ELISA實驗需加酶結(jié)合物，按試劑盒要求完成。加底物洗好板后應(yīng)立即加底物，需加自配的底物應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。終止反應(yīng)在規(guī)定的時間內(nèi)用試劑盒中的或根據(jù)要求自行配置的終止液終止反應(yīng)。酶標儀讀物按照試劑盒的要求選擇濾光片，確定空白孔位置，選擇合適達的打印報告格式，讀數(shù)并打印結(jié)果。所用儀器在使用后及時填寫使用記錄。結(jié)果判斷計算10%的標本為灰色帶反應(yīng)。陽性及灰色反應(yīng)區(qū)標本，用原有的試劑盒另一種試劑重復(fù)試驗。結(jié)果登記

33、和報告將試驗結(jié)果登記在記錄本和標本試劑記錄本上，將OD值打印結(jié)果貼在原始記錄表上，檢查原始記錄表是否填寫完整，操作者，復(fù)核者簽字。陰性結(jié)果出具HIV抗體篩查報告陰性，陽性或疑問結(jié)果填寫HIV抗體篩查陽性送檢單，由專入送疾控中心進行確認。3.15標本留存轉(zhuǎn)送陰性標本收集血清冷凍保存一年。并填寫陰性血清保存記錄表，陽性標本收集血清封口包好，冷藏運送送確認實驗室。支持性文件全國艾滋病監(jiān)測工作規(guī)范艾滋病實驗室安全操作及防護措施（二）、結(jié)核桿菌實驗室生物安全規(guī)程1.實驗室管理制度（1）實驗室入口處必須貼上生物危險標志，注明危險因子，生物安全級別，試驗室負責(zé)人和相關(guān)負責(zé)人姓名和電話。（2）實驗室應(yīng)有明顯的

34、區(qū)域劃分，清潔區(qū)，辦污染區(qū)和污染區(qū)。（3）無論進入實驗室時間長短，必須填寫工作日志。要嚴格遵守實驗室的一切操作規(guī)程。（4）進行結(jié)核菌操作時，需有兩名工作人員同時進入實驗室，盡量避免單獨工作。（5）在對大批量的痰標本和菌株進行分離培養(yǎng)和藥敏試驗前，英語中心新主任和實驗室主任討論，必要時加強預(yù)防措施。（6）試驗室人員應(yīng)做結(jié)核菌素試驗，試驗結(jié)果為陰性時，應(yīng)接種卡介苗，并做好登記記錄。（7）外來進修，參觀人員必須學(xué)習(xí)實驗室的一切規(guī)章制度和有關(guān)操作規(guī)程，經(jīng)試驗室主任批準方可進入實驗室。2.標本采集人員安全要求（1）標本采集人員的防護：痰標本有病人自行留取，采集咽拭子等特殊標本，采集人員應(yīng)穿防護服，戴一次

35、性口罩，帽子，戴醫(yī)用手術(shù)手套。（2）采集標本污染器材的處理：采集標本的痰盒，試管等污染器材均需高壓滅菌處理。標本運送安全要求痰標本需留置在特制的痰盒內(nèi)（直徑4cm，高2cm的光口蓋密閉的塑料盒），并放置在專用的痰標本運送箱內(nèi),運送過程中切勿倒置,嚴防痰液外溢。由有專人送至痰檢實驗室,標本送達后痰標本運送箱及時用乙醇或是碳酸等化學(xué)消毒劑或高壓的辦法徹底消毒。實驗操作安全要求（1）結(jié)核病細菌學(xué)實驗室要求結(jié)核病細菌學(xué)實驗室應(yīng)為生物安全III級實驗室，用于臨床診斷，教學(xué)，屬中度危險.應(yīng)具備安全設(shè)備,緩沖間實驗室條件應(yīng)滿足工作任務(wù)的要求,有完善的試驗設(shè)施,試驗室的環(huán)境應(yīng)清潔，衛(wèi)生，安靜，無污染，試驗室內(nèi)的管線設(shè)置應(yīng)整齊，要有安全管理措施和報警，應(yīng)積及急救設(shè)施，房間數(shù)量不少于七間，包括實驗室準備室，培養(yǎng)機制備室，顯微鏡檢查室，圖片檢查室，接種室，培養(yǎng)室高壓消毒室等。具備完善的質(zhì)量保證體系中應(yīng)有明確的分級責(zé)任制度，以確保檢驗的工作質(zhì)量，保證檢驗，復(fù)核，科研結(jié)果等各項報告的準確可靠性。（2）