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1、精品資料實驗動物學(xué)習(xí)題與參考答案中南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2014一、判斷題 (正確者劃 “” ,錯誤者劃“” 。) TOC o 1-5 h z 凡用于科學(xué)實驗的動物稱實驗動物。( X)實驗動物都是哺乳動物。( X)實驗動物學(xué)是動物學(xué)的一門分支學(xué)科。( )實驗動物學(xué)是 20 世紀(jì) 50 年代形成的一門綜合性應(yīng)用性學(xué)科。( )近交系動物、免疫缺陷動物和悉生動物的培育成功為實驗動物學(xué)獨立于其他學(xué)科奠定了基礎(chǔ)。 ( )6.1907 年 Little 首次成功地培育出了世界上第一個近交系小鼠 DBA 。 ( X )動物在沒有腸道菌參與條件下不能生存。( X )全國第一次實驗動物工作會議于1982 年在云南西
2、雙版納召開。( )中國實驗動物學(xué)會成立于1987 年。 ( X )10.1988 年,我國第一部實驗動物管理法規(guī)實驗動物管理條例,經(jīng)國務(wù)院批準(zhǔn),由國家科委頒布實施。 ( )無胸腺裸鼠屬近交系動物。(X )悉生動物的內(nèi)臟器官都比普通動物小。()只有豚鼠體內(nèi)不能合成維生素C,故豚鼠成為目前唯一用于實驗性壞血栓病的動物。( X )封閉群動物不屬于同基因型動物,故其群體內(nèi)個體之間雜得不一樣。(X )大鼠比小鼠更容易攻擊人,同類之間的斗毆傾象也比小鼠嚴(yán)重, 故不可將多只雄鼠同籠飼養(yǎng)。( X )家兔屬于刺激性排卵動物,即雌免只有在交配后25 27 小時才排卵。( X )使用人類疾病的動物模型是將實驗動物應(yīng)
3、用動物實驗中去的最主要的方式。()下列實驗動物中,妊娠期最長的是家兔:大鼠、小鼠、豚鼠、家兔。(X )同一雜交群內(nèi)動物個體之間也可以進(jìn)行細(xì)胞、組織、器官和腫瘤的移植。( )在實驗動物的微生態(tài)模式中,無菌動物代表正常的健康無病模式。()在多基因性問題的研究中,雜交群動物比封閉群動物更能較好地代表自然群體的實際情況。( X )近交系,雜交群和突變系動物都屬于同基因型動物。()雜交群屬于同基因型動物。( )豚鼠是實驗動物中血清補體含量最多的動物。( )小鼠骨髓為紅髓,可終生造血。( )大鼠、家兔、豚鼠和小鼠中,妊娠期最長的動物是家兔。(X )清潔級動物是目前國際上通用的動物。(選擇基因型一致或相似的
4、實驗動物做實驗是保證實驗結(jié)果具有較好的再現(xiàn)性的重要措施。( )種是實驗動物遺傳學(xué)分類的基本單位。 (X ) TOC o 1-5 h z C57BL/6 是近交系小鼠的一種品種。(X )A/He(F87) 是指近交到 87 代由 Heston 培育的 A 品系的亞系。 ( )近交系小鼠由于飼養(yǎng)環(huán)境改變或某些技術(shù)性處理(如胚胎移植 )而發(fā)生某些生物學(xué)特性改變,由此改變的生物學(xué)特性都是可以遺傳的。(X )近交系小鼠的近交系數(shù)應(yīng)大于 98.6% 。 ( )同源突變近交系與同源導(dǎo)入近交系的不同之處在于與原來那株近交系相比較,前者 是一染色體片段的差異,后者是一個位點單個基因的差異。 (X當(dāng)同源突變近交系
5、和分離近交系相同位點的突變基因都為雜合狀態(tài)時,區(qū)別兩者的 方法看培育過程。( )重組近交系動物是由雜種 F1 代動物兄妹近交 20 代以上培育而成 (X )兩個不同的近交系動物雜交,可培育出兩個不同的雜種 F1 代動物。 ( )BALB/c 小鼠、 ICR 小鼠的基礎(chǔ)群飼養(yǎng)在同一房間內(nèi),由于飼養(yǎng)人員的管理失誤,導(dǎo)致 ALB/c 小鼠的遺傳組成改變,稱之為遺傳漂變。P27 ( ) )采用生化位點方法對近交系小鼠進(jìn)行遺傳監(jiān)測,應(yīng)當(dāng)采用不同的技術(shù)同時對各條染 色體上的多個基因位點進(jìn)行檢測。( X )對于近交系小鼠的遺傳監(jiān)測,僅采用毛色基因測試法,下頜骨形態(tài)分析法、同工酶 或異構(gòu)蛋白電泳分析 (X )
6、二、填空、實驗動物學(xué)研究的對象實驗動物、動物實驗。、生命科學(xué)研究必須具備的 4 個基本要素是 實驗動物、設(shè)備、信息、和 試劑 。、實驗動物滿足科學(xué)實驗應(yīng)具備的 4 個基本要求是:對實驗處理 表現(xiàn)出極高的敏感性; 對實驗處理的個體表現(xiàn)出極強的均一性; 模型性狀 具有遺傳上的穩(wěn)定性; 動物來源 具 有易獲得性。、根據(jù)我國實際,照微生物寄生蟲質(zhì)量控制,實驗動物被分為,分別是 普通動物、清潔動 物、 SPF 動物、悉生動物、無菌動物。、通常稱近交系動物為品系,稱封閉群動物為品種。、所謂實驗動物應(yīng)用的“3R ”原則, “3R ”即 代替 、減少 和優(yōu)化 。、根據(jù)基因組成特點,將實驗動物分為近交系 、突變
7、系 ,雜種 F1 代和封閉群等 4 類.。、藥物篩選實驗首選動物為 小鼠;過敏實驗首選動物為 豚鼠;發(fā)熱研究首選動物為 家兔; 實驗外科學(xué)首選動物為 犬;人類脊髓灰質(zhì)炎等病的研究最理想的實驗動物是非人靈長類動 物;做反射弧分析實驗常用實驗動物是 青蛙。、實驗動物常用給藥途徑有經(jīng)口給藥、注射給藥等。、實驗動物選擇遵循原則: 相似性原則 、差異性原則、易化性原則、相容或相匹配 原則、易獲得性原則、重復(fù)性和均一性原則、 .近交系動物具有純合性,同基因性,均一性,遺傳穩(wěn)定性,可分辨性,獨特性,分布 的廣泛性,背景資料可查性。、在選擇作為遺傳監(jiān)測對象的生物學(xué)特性時, 應(yīng)遵循四個原則, 即準(zhǔn)確、 有效、
8、簡便、 經(jīng) 濟(jì)。、隔離環(huán)境主要用于 無菌動物 和 悉生動物 的飼養(yǎng),、屏障環(huán)境是用來飼養(yǎng) 清潔級、 SPF 級 動物。、轉(zhuǎn)基因的方法: 顯微注射法、 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法、 胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法、 精子載體 法。、顯微注射技術(shù)制備轉(zhuǎn)基因動物的基本過程是 卵子在受精后,在卵子核內(nèi)注入外源性DNA 序列,植入小鼠體內(nèi)孕育。、鑒定和篩選所得的轉(zhuǎn)基因動物方法包括 Southern blotting(DNA 印跡雜交) 、Nouthern blotting(RNA 印跡雜交)和 特異性探針雜交法三、名詞解釋實驗動物: 是指經(jīng)人工飼養(yǎng)、對其攜帶的微生物、寄生蟲實行控制,遺傳背景明確或來源 清楚的,用于科學(xué)研究、教
9、學(xué)、生產(chǎn)、鑒定、及其他科學(xué)研究的動物。實驗用動物: 指一切用于科學(xué)實驗的動物。動物實驗: 為科研、教學(xué)、藥物檢定等目的,對實驗動物進(jìn)行物理、化學(xué)、生物 等因素 處理,觀察其反應(yīng),獲得實驗數(shù)據(jù),解決科研中問題的過程。實驗動物設(shè)施 :LAF : 是進(jìn)行實驗動物飼養(yǎng)、保種維持、生產(chǎn)、實驗研究、試驗等設(shè)施的 總稱。包括實驗動物繁育、生產(chǎn)設(shè)施和動物實驗設(shè)施。近交系動物: 是指至少經(jīng)過 20 以上連續(xù)全同胞或親子交配,品系內(nèi)所有個體都可追溯到其源于第 20 代或以后代鼠的一對共同祖先的動物群; 每個個體有 98.6 的遺傳位點是 純合的。近交系數(shù) :是指個體由于近交而造成的異質(zhì)基因減少,同質(zhì)基因或純合子的
10、百分?jǐn)?shù)。它反 映了動物在不同代次的純化程度。雜交優(yōu)勢 :雜種一代具有較強的生命力,對疾病的抵抗力強,壽命較長,容易飼養(yǎng),在很 大程度上克服了近交衰退現(xiàn)象的優(yōu)越性。信息素: Pheromone 是動物釋放的一種性信息素,由雄性包皮腺分泌,對動物的繁殖 有很大的影響。封閉群動物: 我國制定的標(biāo)準(zhǔn)作如下定義: 以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個實驗動物種群,在不從其外部引入新個體的條件下,長時期(一般為 5 年以上)與外界隔離, 其種群保持一定大小(一般不得少于 25 對),雌雄個體之間能夠隨機交配的動物群體,其 遺傳組成較接近于自然狀態(tài)下的動物群體結(jié)構(gòu)。稱為一個封閉群或叫遠(yuǎn)交群。無特定病原體動物
11、SPFA : 不攜帶主要人獸共患病原體和動物烈性傳染病的病原體; 有不攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究影響大的病原體;還不攜帶主要潛在感染或條件致病 菌。F1 動物 :指由不同品系或種群的近交品系動物之間進(jìn)行有計劃交配所獲得的第一代動 物,稱之為雜交群動物( Hybrid strain )或雜交一代動物,簡稱 F1 動物。重組近交系 : 指由兩個近交系雜交后, 經(jīng)連續(xù) 20 代以上兄妹交配培育成的近交系。亞系 指一個近交系內(nèi)各個分支的動物之間,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)或可能存在遺傳差異。同源突變近交系: 某個近交系在某位點上發(fā)生突變而分離出來的近交系,它和原近交系 的差異只是突變的位點上帶有不同的基因,而其它位點
12、上的基因完全相同。近交衰退: 有親緣關(guān)系的親本進(jìn)行交配 ,可使原本是雜交繁殖的生物增加純合性,從而提高基因的穩(wěn)定性,但往往伴同出現(xiàn)后代減少、后代弱小或后代不育的現(xiàn)象 .雜交 不同純合子之間的交配;產(chǎn)生一種基因型。遺傳概貌: 是指用各種方法和技術(shù)對各種品系的遺傳特征進(jìn)行檢驗后的數(shù)據(jù)匯總。誘發(fā)性疾病動物模型: 誘發(fā)性疾病動物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物 等致病因素的作用, 而發(fā)生類似某種人類疾病的功能、 代謝或形態(tài)性結(jié)構(gòu)方面的病變的動物 模型。人類疾病模型: 為闡明人類疾病的發(fā)生機制或建立治療方法而制作的、具有人類疾病 模擬表現(xiàn)的實驗動物,稱為人類疾病模型。隔離系統(tǒng) 以隔離器為主及其
13、它附屬裝置所組成的飼養(yǎng)系統(tǒng),隔離器是隔離微生物的飼 育無菌動物的裝置。實驗動物微生物與寄生蟲學(xué): 研究實驗動物的微生物、寄生蟲分類以及實驗動物與人 類的相互關(guān)系 , 對實驗動物的微生物與寄生蟲的質(zhì)量控制 , 以達(dá)到控制和消滅實驗動物疾 病的目的 .實驗動物環(huán)境: 指人工控制, 供實驗動物繁殖、 試驗和生長的特定場所及相關(guān)條件。實驗動物營養(yǎng)學(xué): 是研究飼料與實驗動物機體生長、發(fā)育、繁殖、健康及實驗結(jié)果關(guān) 系的分支學(xué)科 .實驗動物環(huán)境生態(tài)學(xué) 是研究實驗動物與受控生存環(huán)境相互關(guān)系的科學(xué)。實驗動物學(xué): LAS 是以實驗動物為主要研究對象,并將培育的實驗動物應(yīng)用于生命 科學(xué)的一門綜合性科學(xué)??寺游?指
14、動物通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性生殖(也稱無性繁殖 ) 以及由無性生殖形成的基因型幾乎完全相同的后代個體組成的群體。轉(zhuǎn)基因動物 是指將特定的外源基因?qū)雱游锸芫鸦蚺咛?,使之穩(wěn)定整合于動物的染 色體基因組并能遺傳給后代的一類動物。28. 嵌合體動物:只有部分組織細(xì)胞中整合有外源基因的動物。29. SCID 鼠:嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷小鼠 (Severe combined immunodeficient mice, SCID)為嚴(yán)重的免疫缺陷疾病,動物臨床表現(xiàn)為低 球蛋白血癥、低淋巴細(xì)胞血癥。30. 裸鼠: 裸小鼠 (Nude mice): 指先天無胸腺的小鼠 , 簡稱裸小鼠。 特點: 11 號染色體上的
15、裸基因 (nu) 發(fā)生突變 , 導(dǎo)致出現(xiàn)裸體異常狀態(tài)。31. 滲漏現(xiàn)象:少數(shù) SCID 小鼠的免疫功能可出現(xiàn)極小程度的恢復(fù),把這種現(xiàn)象稱為滲漏現(xiàn)象四、簡述題簡述實驗動物一般具有三大特點: 答: . 遺傳學(xué)上要求必須經(jīng)人工培育,遺傳學(xué)背景明確,來源清楚。 . 對其攜帶的微生物、寄生蟲實行人工控制,所有實驗動物的微生物、寄生蟲都是在 人工嚴(yán)格監(jiān)控之下繁育的。 . 所有實驗動物的主要目的都是為了科學(xué)試驗。簡述實驗動物必須具備滿足科學(xué)實驗的四項基本要求:答: .對實驗處理表現(xiàn)出極高敏感性 .對實驗處理的個體反應(yīng)表現(xiàn)出極強的均一性 .模型性狀具有遺傳上的穩(wěn)定性 .動物來源具有易獲得性。簡述“ 3R ”
16、principle :3R 原則答:、 Replacement :指用低等級的動物代替高等級的動物,或不用活的脊椎動 物 進(jìn)行實驗,而采用其他方法搭到與動物實驗相同的目的。、 Reduction :如某一研究方案中必須使用實驗動物,又沒有可行的替代方法時,應(yīng)把使用動物的數(shù)量降低到實現(xiàn)科研目的所需最小量。、 Refinement :通過改善動物設(shè)施、飼養(yǎng)管理和實驗條件,精選實驗動物、技術(shù)路線和實驗手段,優(yōu)化實驗操作技術(shù)等方法,盡量減少實驗過程對動 物機體的損傷,減輕 動物遭受的痛苦和應(yīng)激反應(yīng),使動物實驗得出科學(xué)的結(jié)果。簡述實驗動物在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用與意義答: . 生物醫(yī)學(xué):提供動物模型通過在實驗動物
17、身上研究各種人類疾病和生命現(xiàn)象, 進(jìn)而推用到人類, 因此,實驗動物 是人類的替難者。在醫(yī)學(xué)研究中的作用無可替代。. 制藥和藥學(xué)研究:藥物安全評價和療效評估藥品的安全性評價、 藥效學(xué)、藥動力學(xué)、藥理學(xué)實驗、臨床前期實驗包括急性毒性試驗、 亞急性和慢性試驗、三致試驗( 長期毒性試驗和突變、致畸、致癌試驗的方法)等。. 生物制品:提供生物制劑和制品生物制品生產(chǎn)的原料(如血清)生物制品的安全性、有效性評價。醫(yī)學(xué)教育教學(xué)實驗。意義:是人類的替難者;縮短實驗期限;研究疾病全過程。簡述近交系遺傳組成特性. 近交系動物中任何一個基因位點上的純合率高達(dá)99% 以上;. 同一品系內(nèi)每只動物的個體在遺傳上都是同源的
18、、基因型完全一致;. 表型一致性,由于基因型相同,近交系內(nèi)個體之間的表型極為一致;. 在遺傳上具有高度的穩(wěn)定性,通過嚴(yán)格遺傳控制,其遺傳特征可以世代相傳;. 每個近交系的遺傳特征具有可分辨性;. 各個近交系都具有獨自的遺傳組成和生物學(xué)特性,品系與品系之間差異較大。簡述近交系實驗動物的特點 實驗結(jié)果比較準(zhǔn)確,可以避免遺傳組成不同或個體差異太大等所引起的誤差。實驗結(jié)果的平均性較一致,因為近交系動物個體之間極為一致,對實驗反應(yīng)一致, 每次實驗結(jié)果誤差較少。因此每組僅用較少數(shù)的動物,即能看出顯著性來。實驗結(jié)果的重復(fù)性較大, 因此,一次實驗結(jié)果即具有實際意義, 可以減少重復(fù)實驗, 縮短實驗時間。易于獲得
19、預(yù)期結(jié)果,近交系動物遺傳背景明確,對每個品系的生物學(xué)特性、生理學(xué) 特點、易感病原等都有有完整的背景材料。近交衰退,生活力弱,對生產(chǎn)環(huán)境要求高、產(chǎn)仔少、營養(yǎng)要求高。簡述封閉群特點及常見的遠(yuǎn)交群動物: 繁殖率高、生活力強、胎間隔短、飼養(yǎng)繁殖時無需詳細(xì)記錄譜系、生產(chǎn)快、生產(chǎn)成本低,適 于大量繁殖。 因而廣泛用于預(yù)試驗、 學(xué)生教學(xué)和一般實驗中; 其遺傳組成具有類似于人類的 群體遺傳異質(zhì)性而廣泛用于毒性實驗和藥物安全性評價當(dāng)中。常見的遠(yuǎn)交群動物有: KM 小鼠、 NIH 小鼠、 ICR 小鼠; Wistar 大鼠、 SD 大鼠; Dunkin Harley 豚鼠和 New Zealand 兔、大耳白兔等
20、。簡述作為實驗動物的 “品系”、 “品種”應(yīng)具備以下條件: .相似的外貌特征:如毛色、形態(tài)、大小等。 .獨特的生物學(xué)特性:是一個品系、品種存在的基礎(chǔ)。.穩(wěn)定的遺傳性能:即在品系、品種自群繁殖時,能將其特性穩(wěn)定地傳給下一代。 .具有共同的遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)。簡述實驗動物遺傳同源性及遺傳特征: 在近交系中(突變系),所有動物可追溯到原始的一對共同祖先。遺傳同源性使近交系有 3 個重要特征: 品系內(nèi)個體間可接受組織移植, 品系內(nèi)單個個體的監(jiān)測可得知品系整體基因類型, 從一個群體內(nèi)可分離出遺傳上相同的亞群體 。什么叫 SPF 級動物?寫出英文全稱及其在醫(yī)學(xué)中的作用。 答:無特定病原體動物( Sp
21、ecific pathogen free animal ,簡稱 SPF 動物 ) 指不攜 帶特定病原體(細(xì)菌、病毒、寄生蟲) ,但帶有未知的微生物群的動物。作用如下: .血清、疫苗的制造:用無病的動物組織、臟器來生產(chǎn)各種疫苗和細(xì)菌病毒性診斷血 清。 .生物學(xué)鑒定;用于鑒定破傷風(fēng)毒素、結(jié)核菌素、狂犬病疫苗等。精品資料精品資料 .實驗外科學(xué)的短期或長期研究:例如一些放射實驗、燒傷實驗等。 .其他研究工作:如藥理學(xué)、毒理學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、傳染病學(xué)等簡述實驗動物的環(huán)境因素主要包括那些方面?包括 自然因素:氣候因素:溫度、濕度、氣流、風(fēng)速、換氣次數(shù)、壓強梯度;理化因素:氧氣、二氧化碳、粉塵、光照、噪音、臭
22、氣、消毒劑;生物因素:同種生物、異種生物;居住因素:籠具、給食器、墊料、供水器;營養(yǎng)因素:飼飲、料水; 人為因素:設(shè)施、設(shè)備、程序制度與試驗方法。簡述溫度對實驗動物的影響 環(huán)境溫度可影響動物的生殖機能。 環(huán)境溫度可影響動物機體的抵抗力。 環(huán)境溫度可影響動物的臟器重量。 環(huán)境溫度可影響動物的新陳代謝。 環(huán)境溫度可影響動物的實驗反應(yīng)性。簡述實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化的意義 :實驗動物標(biāo)準(zhǔn)化包括實驗動物生產(chǎn)條件、動物質(zhì)量(微生物質(zhì)量及遺傳學(xué)質(zhì)量控制)和動物實驗條件的標(biāo)準(zhǔn)化。并對應(yīng)三種合格證。生物醫(yī)學(xué)實驗研究的四個基本條件: Animal , Equipment , Information , Reagent ,
23、簡稱 AEIR 四要素。實驗動物質(zhì)量往往成為制約性 要素,影響實驗的質(zhì)量和水平。 使用標(biāo)準(zhǔn)的實驗動物并在標(biāo)準(zhǔn)的環(huán)境條件下進(jìn)行實驗是保證醫(yī) 學(xué)生物學(xué)研究質(zhì)量的重要條件。實驗動物的品系、品種應(yīng)具備以下條件: .相似的外貌特征:如毛色、形態(tài)、大小等。 .獨特的生物學(xué)特性:是一個品系、品種存在的基礎(chǔ)。 .穩(wěn)定的遺傳性能:即在品系、品種自群繁殖時,能將其特性穩(wěn)定地傳給下一代。 .具有共同的遺傳來源和一定的遺傳結(jié)構(gòu)。實驗動物選擇的基本原則:、相似性原則、特殊性(易化)原則、標(biāo)準(zhǔn)化原則、規(guī)格化原則、經(jīng)濟(jì)性原則簡述純合裸基因的小鼠 (nu/nu) 臨床表現(xiàn)為 2 個主要缺陷特征: 毛發(fā)缺乏呈裸體外表; 僅有胸
24、腺上皮,使 T 淋巴細(xì)胞不能正常分化,導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能低下。 B 細(xì)胞功能正常,NK 細(xì)胞活力增強。 繁育能力差,乳腺發(fā)育缺損,以雄性純合子與雌性雜合子繁育。 T 細(xì) 胞缺陷可通過移植成熟 T 細(xì)胞、胸腺細(xì)胞得到恢復(fù)。轉(zhuǎn)基因動物與克隆動物的區(qū)別: 前者是將外源基因通過不同的方式引入受體細(xì)胞,隨受體細(xì)胞經(jīng)分化發(fā)育成為動物個體?;蚴侨斯ず铣傻?。后者是供體細(xì)胞的細(xì)胞核與受體去核的細(xì)胞融合,移植到母體內(nèi)發(fā)育成為動物個體?;蚴枪w細(xì)胞核中包含的全部基因。簡述動物克隆技術(shù)的基本方法: “核移植”是克隆動物的基本方法。 將身體某一部位的 細(xì)胞核取出(如耳上皮或乳 腺細(xì)胞的細(xì)胞核) ,移植到去掉核的卵細(xì)胞
25、中,再移植到雌性動 物的子宮中孕育成與核供體動物在遺傳上完全相同個體。簡述實驗動物學(xué)的基本內(nèi)容、實驗動物的標(biāo)準(zhǔn)化: 、研究實驗動物品系培育和遺傳學(xué)控制; 、研究實驗動物解剖和生物學(xué)特點; 、研究環(huán)境條件、飼料、墊料對實驗動物的影響; 、研究實驗動物微生物、寄生蟲控制及疫病防治。動物實驗的標(biāo)準(zhǔn)化:、研究人類疾病動物模型或模型動物;、研究動物實驗的基本條件、方法、技術(shù)。20. 簡述我國主要的實驗動物法規(guī)條例:實驗動物管理條例藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)定實驗動物質(zhì)量管理辦法實驗動物許可證管理辦法(試行 ) ;新的實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn); 關(guān)于善待實 驗動物的指導(dǎo)性意見實驗動物學(xué)發(fā)展的突破性進(jìn)展。實驗動物管理
26、條例,第一部。我國現(xiàn)行的實驗動物管理制度。實驗動物許可證管理辦法(試行 ) ;新的實驗動物國家標(biāo)準(zhǔn)。21. 簡述人類疾病動物模型基本概念:人類疾病動物模型、誘發(fā)性動物模型人類疾病動物模型: 指為闡明人類疾病的發(fā)生機制和建立治療方法而制作的,具有人類疾病模擬表現(xiàn)的實驗動物。誘發(fā)性動物模型: 通過人為方式使實驗動物受到物理、化學(xué)、生物等致病因素的 作用,而發(fā)生類似某些人類疾病的動物模型,也叫實驗性動物模型。人類疾病動物模型的設(shè)計原則.相似性、 .重復(fù)性、 .可靠性、 .適用性和可控性、 .易行性和經(jīng)濟(jì)性;22. 簡述人類疾病動物模型的分類:按產(chǎn)生原因分類: 誘發(fā)性動物模型和自發(fā)性動物模型;抗疾病型
27、動物模型 (東方田鼠) ,生物醫(yī)學(xué)動物模型。按系統(tǒng)范圍分類:疾病的基本病理過程動物模型和各系統(tǒng)疾病動物模型。按模型種類分類:整體動物模型、離體器官和組織模型、細(xì)胞株模型和數(shù)學(xué)模型按中醫(yī)藥體系分類:五臟證候動物模型、氣血津液證候動物模型、六淫動物模 型、七 情證侯動物模型等。23. 簡述良好動物模型的標(biāo)準(zhǔn):答: 容易獲得;遺傳、微生物、寄生蟲和飼養(yǎng)條件等背景清楚;便于實驗操作;壽命長; 重現(xiàn)性好;一種疾病有兩種以上動物模型,以利比較研究。24. 簡述皮膚反應(yīng)實驗: 答:家兔皮膚對刺激反應(yīng)敏感,其反應(yīng)近似于人,常選用家兔皮膚進(jìn)行毒物對皮膚局部 作用的研究;兔耳(特別是兔耳內(nèi)側(cè))可進(jìn)行實驗性芥子氣皮
28、膚損傷和凍傷、燙傷的研究, 化妝品對皮膚影響的研究等。25 簡述微生物、寄生蟲潛在感染對實驗動物的影響 答:寄生蟲感染對實驗的干擾 .掠奪宿主的營養(yǎng), .體表寄生蟲對宿主的干擾,.對宿主產(chǎn)生機械損傷,。產(chǎn)生毒性作用三、問答題1. 悉生動物和 SPF 動物有何區(qū)別?答:悉生動物又稱已知菌動物, 是指在隔離系統(tǒng)飼育的, 經(jīng)檢測其體內(nèi)外僅有經(jīng)人工有 計劃接種的已知微生物或寄生蟲的動物。 這類動物是向無菌動物接種一種或幾種已知菌而獲 得的。SPF 動物是指在屏蔽系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)飼育的,經(jīng)檢測體內(nèi)外無質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的特定病原微 生物和寄生從存在, 但可帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。 實際上是無傳染病的健
29、康動 物。SPF 動物和悉生動物的區(qū)別是: SPF 動物體內(nèi)外排除哪些微生物和寄生蟲是已知的,悉生 動物體內(nèi)外攜帶哪些微生物是已知的。2 、以常用實驗動物家兔為例,簡要說明它們在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。發(fā)熱研究及熱原試驗 家兔的體溫變化靈敏,易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng),發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定。因 此,常選用家兔進(jìn)行這方面的研究。免疫學(xué)研究 家兔常用來制備高效價和特異性強的免疫血清。 免疫學(xué)研究中常用的各種 血清,大多數(shù)是采用家兔來制備的。以屏障系統(tǒng)小動物為例,闡述動物試驗設(shè)施環(huán)境指標(biāo):溫度: 2025 日溫差: 34 相對濕度:4070%換氣次數(shù):1020次/h氣流速度:0.10.2m/s壓強梯度:2050Pa
30、 空氣潔凈度: 10,000 級落下細(xì)菌數(shù): 3 個/皿氨濃度: 14 mg/m3噪聲: 60dB照度:(工作) 150300lx(小動物) 1520 lx ,(大動物)100200 lx晝夜明暗交替時間: 12/12或 10/14小時生物醫(yī)學(xué)研究中,實驗動物選擇遵循哪些原則,并舉例說明。實驗動物選擇遵循原則: 相似性原則結(jié)構(gòu)、功能及代謝的相似性:一般來說,實驗動物進(jìn)化層次愈高,其功能、結(jié)構(gòu)愈復(fù)雜, 反應(yīng)也愈接近人類。猴、猩猩、狒狒、長臂猿等靈長類動物是最類似人的實驗動物。它們是 研究人類脊髓灰質(zhì)炎、腦炎、痢疾、肝炎、麻疹等傳染病的理想動物,也是放射醫(yī)學(xué)、牙科 學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、營養(yǎng)學(xué)的良好
31、動物模型。獼猴生殖生理和人非常相似,是人類生殖課 題研究的首選動物。. 年齡的近似性:選擇實驗動物時必須了解有關(guān)動物的壽命并安排與人的某年齡時期相對 應(yīng)的動物進(jìn)行實驗研究,如犬齡 1 年相當(dāng)于人齡 15 年,犬齡 2 年相當(dāng)于人齡 24 年。. 群體分布的相似性:以群體為對象的研究課題,要選擇群體基因型、表型分布與人相似 的實驗動物。 如藥物安全性評價、 藥物篩選時, 應(yīng)考慮人類與實驗動物群體在代謝類型上的 差異。通常以封閉群模擬自然群體基因型動物作為實驗研究對象。. 生態(tài)或健康狀況的近似性:在人的生命過程研究中,尋找與人類生態(tài)情況相似的替代模型非常重要。 在實驗動物的遺傳背景、 營養(yǎng)及環(huán)境背
32、景標(biāo)準(zhǔn)化后, 其生態(tài)和健康狀況對實 驗的影響就顯得至關(guān)重要。現(xiàn)有的GF (無菌動物)、 SPF 、CL (清潔動物)和CV(普通動物)及動物分別代表著不同的微生態(tài)模式,具有不同的特點,適用于不同的研究。在選擇 時應(yīng)結(jié)合課題目的、研究方法、實施條件及經(jīng)費等作綜合考慮,然后做出正 確選擇。.疾病特點的相似性:許多自發(fā)或誘發(fā)性疾病模型能局部或全部的反映出與人類相似的疾病過程及臨床表現(xiàn)。可根據(jù)研究目的,選擇合適的疾病動物模型進(jìn)行實驗研究。.操作實感的相似性:為臨床操作打基礎(chǔ)的動物實驗,應(yīng)選用與臨床操作較接近的動物。如模擬人類心臟移植,練習(xí)手術(shù)操作的動物實驗,可選擇豬器官作實驗材料,因為豬的 心臟形態(tài)和
33、大小與人很接近;練習(xí)胃腸吻合術(shù)、脾切除術(shù)等可用犬作實驗材料。 、差異性原則: 各種實驗動物在基因型、組織型、代謝型、易感性等特點上的差別也實驗可比性內(nèi)容。當(dāng)研 究過程中要求以這種差異為指標(biāo)或特殊條件時, 選用不同種系實驗動物的某些特殊反應(yīng), 更 適合于不同研究目的的需求。如家兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)是分別存在、獨立行走的,而人、豬、犬、貓 等減壓神經(jīng)并不單獨行走, 如果要觀察減壓神經(jīng)對心臟的作用, 選擇家兔更合適; 家兔的胸 腔結(jié)構(gòu)與其他動物不同,很適合做開胸和心臟實驗。 、易化性原則:利用果蠅盡量選用結(jié)構(gòu)簡單又能反映研究指標(biāo)的動物。 如選擇兩棲類進(jìn)行神經(jīng)反射弧試驗。 壽命短 (1
34、2d) ,染色體數(shù)目少( 2n=8 )等特點,成功地進(jìn)行遺傳學(xué)研究,并確定了染色體的 連鎖互換定律。 、相容或相匹配原則: 在設(shè)計動物實驗時,所選用的動物質(zhì)量等級要與實驗設(shè)計、實驗條件、實驗者的技術(shù)、方法 及試劑性能等相匹配。如果將經(jīng)過微生物控制的 SPF 動物或無菌動物購回后,飼養(yǎng)在普通 環(huán)境中進(jìn)行實驗,無疑也是對實驗動物資源的一種浪費。 、可獲性 ( 或易獲得性 )原則:在不影響實驗質(zhì)量的前提下, 選用最易獲得、 最經(jīng)濟(jì)、 最易飼養(yǎng)的動物是實驗研究時必須堅 持的原則。如實驗大鼠、小鼠是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用量最多,用途最廣的實驗動物。 、重復(fù)性和均一性原則: 重復(fù)性和均一性是實驗結(jié)果可靠、 穩(wěn)定
35、的重要保證。 若實驗結(jié)果不能再現(xiàn)或不穩(wěn)定, 則不能 被公認(rèn)。 生物醫(yī)學(xué)實驗應(yīng)選用標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物, 只有選用標(biāo)準(zhǔn)化的實驗動物, 才能排除因遺 傳上的不均質(zhì)引起的個體反應(yīng)差異, 排除動物所攜帶微生物、 寄生蟲和潛在疾病對實驗結(jié)果 的影響, 獲得可靠的實驗結(jié)果, 并便于在國際上與同類研究進(jìn)行比較和交流。在標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物中,近交系 Fl 代動物、突變系動物均有很好的遺傳均質(zhì)性,個體差異小,而 SPF 動 物 則是排除了一切疾病影響的健康動物。 醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中應(yīng)杜絕使用隨意交配而來的雜種動物 和未經(jīng)任何微生物控制的非標(biāo)準(zhǔn) 動物。闡述目前國內(nèi)外根據(jù)隔離的要求分為 A1-A4 四個級別: A1 級:進(jìn)行普通
36、微生物實驗的動物實驗室,對工作人員進(jìn)出要求不嚴(yán)。 A2 級:禁止非工作人員進(jìn)入實驗區(qū)。 可能發(fā)生氣溶膠擴(kuò)散的實驗在 級生物安全柜 中進(jìn)行。 A3 級:禁止非工作人員進(jìn)入設(shè)施內(nèi)。由雙重密封門或氣閘室( 緩沖隔離室 ) 將核心區(qū)與外部實驗區(qū)隔離。外部空氣通過高效過濾器送入室內(nèi),向外排出的空氣亦需經(jīng)高 效過濾器過濾。 A4 級:采用獨立的建筑物內(nèi)用隔離區(qū)和外部隔斷的構(gòu)造。 根據(jù)相應(yīng)的隔離等級使室內(nèi)保持負(fù)壓。在密封型 (即 級) 生物安全柜內(nèi)進(jìn)行實驗,非本區(qū)工作人員禁止入內(nèi)。試述理想的分子標(biāo)記必須達(dá)到以下幾個要求:( 1 )具有高的多態(tài)性;( 2 )共顯性遺傳即利用分子標(biāo)記可鑒別二倍體中雜合和純合基因
37、型;( 3 )能明確辨別等位基因;( 4 )遍布整個基因組;( 5 )除特殊位點的標(biāo)記外要求分子標(biāo)記均勻分布于整個基因組( 6 )選擇中性即無基因多效性;( 7 )檢測手段簡單快速如實驗程序易自動化;8 )開發(fā)成本和使用成本盡量低廉;9 )在實驗室內(nèi)和實驗室間重復(fù)性好(便于數(shù)據(jù)交換)試述常用實驗動物的小鼠的應(yīng)用領(lǐng)域:藥理學(xué)和毒理學(xué)實驗:藥品篩選。 藥物安全性評價試驗。 急性、亞急性、慢 性毒性實驗 三致實驗 半數(shù)致死量的測定 (毒性實驗 ) 藥物的實驗治療 藥效學(xué)評價試驗。 生物制品的生產(chǎn)和檢定。免疫學(xué)的研究 制備單克隆抗體 BALB/c 小鼠 動物模型 免疫缺陷小鼠 免疫功能病毒、細(xì)菌和寄生
38、蟲學(xué)研究 病毒、 提供傳染性疾病的小鼠模型。腫瘤學(xué)的研究 自發(fā)性腫瘤、 誘發(fā)性腫瘤 抗癌藥物的篩選, 腫瘤發(fā)生的病 因、發(fā)病機制、轉(zhuǎn)移機制和 實驗性的治療等。 人癌細(xì)胞移植 建立人類的腫瘤模型、 腫瘤遺傳學(xué)研究 原病毒基因組學(xué)說和癌基因假說。遺傳病、遺傳學(xué)的研究 遺傳病、 小鼠有許多個突變品系,不但可以作為疾病的動 物模型,還可作為遺傳學(xué)和基 因治療的動物模型。 (重組近交系和同源近交系)老年病學(xué)的研究 小鼠晚年時老年病多, 腫瘤發(fā)病率高, 是研究老年病的良好材料。其它疾病研究 神經(jīng)系統(tǒng)疾病 呼吸系統(tǒng)疾病 消化系統(tǒng)疾病 計劃生育試述常用實驗動物大鼠的應(yīng)用范圍是生物醫(yī)學(xué)中常用的動物 大鼠在實驗動
39、物中的用量僅次于小鼠,占第二位。內(nèi)分泌研究 垂體 -腎上腺系統(tǒng)的研究腎上腺和卵巢等內(nèi)分泌腺切除手術(shù)。肝膽研究: 無膽囊,膽管相對較粗大,可采用膽總管插管收集膽汁進(jìn)行消化功能 的研究。營養(yǎng)和代謝性疾病的研究藥物學(xué)和毒理學(xué)的研究: 藥物安全性評價試驗:藥物亞急性毒性試驗、慢性毒性 試驗、致畸試驗、藥物 毒性作用機制研究、某些藥物不良反應(yīng)研究等等。 大鼠血壓和血管 阻力對藥物的反應(yīng)敏感,適合作心血管藥物的篩選。常用的有 高血壓大鼠。但對許多藥物 易產(chǎn)生耐藥性。如強心甙的作用較貓敏感性低 671 倍。腫瘤學(xué)的研究: 可用于自發(fā)性和誘發(fā)性腫瘤模型研究。大鼠對化學(xué)致癌物敏感, 可誘發(fā)形成肺 癌、肝癌、食管
40、癌。如肝癌的形成可通過化學(xué)藥物、真菌毒素、乙型或丙型 肝炎 病毒感染誘發(fā)。呼吸系統(tǒng)疾病的研究: 用于慢性支氣管炎、肺病的研究。行為學(xué)研究 迷宮試驗 獎勵與懲罰試驗 成癮性藥物的行為學(xué)研究 高級神經(jīng)活動研 究按微生物控制程度可將實驗動物分為哪幾級 ?他們各自特點?答:可將實驗動物分為四類:動物的體表、體內(nèi)不攜帶任無菌動物 (Germfree animal, GF) 指用現(xiàn)有的實驗手段檢測,何微生物和寄生蟲的實驗動物。特點:. 在動物體內(nèi)外任何部位均檢不出任何細(xì)菌、真菌、原蟲、內(nèi)外寄生蟲。. 無菌動物必須是生來就無菌的動物。. 消化系統(tǒng):盲腸肥大;腸道肌層薄,腸絨毛變細(xì)變短;肝 .循環(huán)系統(tǒng):心臟變
41、?。话准?xì)胞數(shù)變少,且數(shù)量波動范圍小;臟變小;無二級濾泡;異性抗體。 免疫應(yīng)答速度慢,過敏反應(yīng)、對異體移植物的排斥反應(yīng)以及自身 免疫現(xiàn)象消失或減弱 .免疫系統(tǒng):胸腺,淋巴組織,網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)發(fā)育不良。脾臟小, .免疫功能: 血清中 IgG 、IgM 水平低,幾乎不存在丙種球蛋白和特?zé)o菌大、小鼠能力也強于普通 .生長率: 不同種屬不同; 無菌鳥類生長率高于同種普通鳥;與普通鼠差不多;無菌豚鼠和無菌兔比普 通的慢; .生殖:無菌大、小鼠略高于普通大小鼠;豚鼠和兔繁殖能力比普通級低。 .代謝和營養(yǎng):無菌動物血中含氮量少,腸管對水的吸收率低,代謝周期比普通動物長;體內(nèi)不能合成維生素 B 和 K ,易產(chǎn)生這
42、兩種維生素的缺乏癥。 .抗輻射能力:無菌動物抗輻射能力強,抗實驗性燙傷和抗休克死亡 動物。.壽命: 無菌動物的壽命普遍長于普通動物。悉生動物 (Gnotobiotic animal, GN) 又稱已知菌動物,指動物體內(nèi)帶有明確的微生物種 類的動物。特點: .微生物特點:體內(nèi)攜帶有已知微生物 .來源:無菌動物植入微生物 .飼養(yǎng)管理:必須飼養(yǎng)在溫濕度恒定的空氣凈化的隔離系統(tǒng)中,實行嚴(yán)格的微生物控制。 .GN 動物是動物與微生物的共生復(fù)合體。腸道存在能合成維生素和氨基酸的細(xì)菌, 不會出現(xiàn)維生素缺乏癥。生活力、抵抗力明顯增強,易于飼養(yǎng)。無特定病原體動物 ( Specific pathogen free
43、 animal,簡稱 SPF 動物 )指不攜帶特定病原體(細(xì)菌、病毒、寄生蟲) ,但帶有未知的微生物群的動物。特點: .微生物特點: SPF 動物除一、二級動物應(yīng)排除的病原體外,不攜帶主 要潛在感染 或條件致病和對研究實驗干擾大的病原。小鼠病原菌應(yīng)排除 16 種,病毒 11 種;大鼠病 原菌應(yīng)排除 16 種,病毒 7 種。.來源: SPF 動物來源于無菌動物或剖腹產(chǎn)動物。 .飼養(yǎng)管理: SPF 動物必須飼養(yǎng)在溫濕度恒定的空氣凈化的屏障系統(tǒng)中,實行嚴(yán)的微生物控制 .與悉生動物比較相同點: 1)體內(nèi)無病原微生物,實驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 2 )帶有非致病的其他微生物。 不同點: 1)悉生動物帶有的微生物
44、是已知的,SPF 動物所帶微生物情況不清楚。 2)悉生動物飼養(yǎng)在隔離環(huán)境中, SPF 動物飼養(yǎng)在屏障環(huán)境內(nèi)。清潔動物 (Clean animal, CL) 微生物控制級別介于 SPF 動物和普通動物之間 的 動物特點:. 微生物特點:清潔級動物比普通級動物要求排除的微生物和寄生蟲多, 但比 SPF 動物少。清潔級動物除肉眼觀察無病外,尸體解剖時,主要臟 器、組織無論是肉眼觀看還 是病理組織切片均應(yīng)無病變。血清病毒抗體 檢測可檢測出一定滴度的抗體。小鼠病原菌應(yīng) 排除 10 種,病毒 5 種; 大鼠病原菌應(yīng)排除 10 種,病毒 2 種。 .來源:清潔動物來源于SPF 動物、無菌動物、悉生動物或剖腹
45、產(chǎn)動物。.飼養(yǎng)管理:清潔級動物飼養(yǎng)于溫濕度恒定的空氣凈化的屏障系統(tǒng)中。其所用的飼料、墊料、飲用水、籠器具等都經(jīng)過消毒滅菌處理。 等進(jìn)入動物室進(jìn)行操作。普通動物 (Conventional animal, CV)體。特點:工作人員需換滅菌工作服、鞋、帽、口罩不攜帶人獸共患病和動物烈性傳染病 的病原染病的病原。是 .微生物學(xué)特點:要求不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動物烈性傳微生物控制要求最低。 .飼養(yǎng)管理:飼養(yǎng)于開放系統(tǒng)。但仍然對溫度,濕度,飼料,墊料,飲水,衛(wèi)生等有一定控制。狀,臟器無眼觀 .生理學(xué)特點:外觀健康,飲食排泄正常,無異常分泌物,無臨床癥病灶。比較潔凈動物和普通動物的特點答: .潔凈
46、動物通常是指來源于剖腹產(chǎn)、實行嚴(yán)格的微生物控制、飼養(yǎng)于空氣凈化系統(tǒng) 設(shè)施內(nèi)的動物,包括清潔動物、 SPF 動物、悉生動物和無菌動物。潔凈動物與普通動物 相比,在很多方面均存在一定差異。 .潔凈動物與普通動物相比,在血液學(xué)、血液生化指標(biāo)及主要臟器系數(shù)方面均產(chǎn)生一定變化。如清潔級大鼠與普通大鼠相比,白細(xì)胞較少,其中中性粒細(xì)胞 少,淋巴細(xì)胞相對 增加;血清堿性磷酸酶、膽紅素、膽固醇值較高;尿素氮、 肌酐值比較低;空腸淋巴結(jié)、 脾臟較輕;肺、腎組織形態(tài)比普通大鼠健康。、小鼠的給藥途徑有那些?答:灌胃( ig ):左手將動物固定后,右手持裝有灌胃針頭的注射器,自口角進(jìn)針,沿 上腭向 鼠口腔的后下方插入食
47、管。 皮下注射( sc ) : 常在背部皮下注射。一手固定動物, 另一只手注射給藥。腹腔注射 (ip): 左手固定動物, 右手持注射器, 從下腹部外側(cè), 呈 45度角刺入腹腔,進(jìn)針約3 5mm , : 肌內(nèi)注射( im ) 多注射后肢股部肌肉。如一人單獨操作,以左手拇指和食指抓住小鼠頭部皮膚,小指、無名指和掌部夾住鼠尾及一側(cè)后肢,右手持注射器刺入后肢肌肉給藥尾靜脈注射 ( iv ):將動物固定, 鼠尾巴露在外面, 用 70 75 的酒精棉球擦尾部,或?qū)?鼠尾浸入 45 50 溫水中。待尾部左右靜脈擴(kuò)張后,左手拉 著尾,右手進(jìn)針、小鼠的捉持、固定及灌胃給藥。( 1 )小鼠的捉持:捉拿時可先用右手
48、抓住并提起鼠尾,置于實驗臺或鼠籠上,并稍向后拉; 答: 用左手的拇指和食指抓住小鼠兩耳后頸背部的皮膚,將鼠置于左手心中,拉直 后肢, 以無名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。( 2 )大鼠的捉持:大鼠的捉拿時,可戴上手套。實驗者可用右手捉住鼠尾,放在實驗臺或 鼠籠上,并稍向后拉; 左手掌面向鼠背, 食指和中指壓住鼠的頭頂, 拇指和無名指分 別 從鼠的兩腋下插入,將鼠的兩前肢卡?。换蜃Ьo鼠后頸及后背皮膚即可。( 3)灌胃( ig ):左手將動物固定后,右手持裝有灌胃針頭的注射器,自口角進(jìn)針,沿上腭 向鼠口腔的后下方插入食管。、大鼠的給藥方法有那些答:灌胃( ig ):左手將動物固定后,右手持裝
49、有灌胃針頭的注射器,自口角進(jìn)針,沿 上腭向鼠 口腔的后下方插入食管。 皮下注射( sc ) : 常在背部皮下注射。一手固定動物, 另一只手注射給藥。腹腔注射 (ip): 左手固定動物, 右手持注射器, 從下腹部外側(cè), 呈 45度角刺入腹腔,進(jìn)針約3 5mm , : 肌內(nèi)注射( im ) 多注射后肢股部肌肉。如一人單獨操作,以左手拇指和食指抓住小鼠頭部皮膚,小指、無名指和掌部夾住鼠尾及一側(cè)后肢,右手持注射器刺入后肢肌肉給藥尾靜脈注射 ( iv ):將動物固定, 鼠尾巴露在外面, 用 70 75 的酒精棉球擦尾部,或?qū)⑹笾?,右手進(jìn)針尾浸入 45 50 溫水中。待尾部左右靜脈擴(kuò)張后,左手拉、血清和
50、血漿有何不同?它們?nèi)绾沃苽??但含有游離的 Ca2 血漿的制備新血清的制備新鮮全血離心后答:血漿是由抗凝的血液中分離出來的液體,其中含有纖維蛋白原,不含游離的 Ca2血清是由凝固的血中分離出來的液體, 不含纖維蛋白原,鮮全血中加入抗凝劑為抗凝血由抗凝血離心后的上清液是血漿的上清液為血清、常用的麻醉藥物有那些?請舉出三種麻醉藥及其用法答:揮發(fā)性麻醉劑如乙醚、氯仿非揮發(fā)性麻醉劑1 戊巴比妥鈉:戊巴比妥鈉麻醉時間不很長,一般可持續(xù)3 5 小時,十分符合一般實驗要求。所以是最常用的麻醉劑3 水合氯醛:其麻醉量與中噴妥鈉 :麻醉誘導(dǎo)和蘇醒時間短,一次用藥僅可維持?jǐn)?shù)分鐘毒量很接近,故安全圍小 。水合氯醛的常
51、用濃度 1。 4 氨基甲酸乙酯烏拉坦:此藥是比 溫和的麻醉藥,安全度大。烏拉坦常用濃度 2025。、實驗動物為何需要標(biāo)記?如何標(biāo)記?試舉例說明。答:大鼠和小鼠的編號一般都用不同顏料涂染皮毛的方法來標(biāo)記, 常用的涂染化學(xué)品如 下涂染 黃色用 3 5 苦味酸溶液涂紅色用 0.5 品紅溶液等。前者最常用。在動物固定的 不同部 位涂上苦味酸斑點表示不同號碼。一般習(xí)慣在左前腿上為1,腰部為 2 ,在左后腿上為 3,在 頭部為 4,在正中為 5,在尾基部位 6,在右前腿為 7,在右側(cè)腰部為 8 , 在右后腿上為 9,不 涂染鼠為 10 。如果試驗時動物編號超過 10 ,可在動物同一部位上再 涂染另一種涂染
52、劑。、小鼠采血可采用那些途徑和方法?答:眶靜脈叢(竇)采血、眶動脈和眶靜脈取血、尾靜脈采血、大血管采血、小鼠和大鼠的雌雄如何鑒別? 答:哺乳類動物性別依據(jù)動物的肛門與外生殖器陰莖或陰道之間的距離加以區(qū)分。 雄性 要比 雌性的距離更長。、小鼠的處死方法有那些?答:頸椎脫臼法、斷頭法、擊打法、家兔的給藥方法有那些?請演示一下家兔的靜脈給藥。答:灌胃、皮下、肌內(nèi)及腹腔注射、靜脈注射。靜脈注射:將家兔置固定箱內(nèi),拔去耳 克外緣 的毛,選擇一條比較明顯的耳緣靜脈,用酒精棉球涂擦皮膚,使血管暴露。用左手 拇指和中 指捏住兔的耳尖,以食指墊在兔耳擬進(jìn)針部位的下面,右手持注射器,從近耳尖 處將針頭刺 入血管。
53、推注時如有阻力,局部出現(xiàn)腫脹,表明針頭不在血管內(nèi),應(yīng)立即拔針 重新穿刺、如果你需要做一個藥物的藥理試驗,你如何確定用藥的劑量?答: 1 先用小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量,然后用小于中毒量的劑量,或取致死 量 1 l01 5。 2 化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥物,特別是結(jié)構(gòu)和作用都相似 的藥物劑量。 3 已有臨床經(jīng)驗的藥物(中藥或西藥)可按臨床劑量推算。 4 確定動物給藥 劑量時,要考慮給藥動物的年齡大小和體質(zhì)強弱。 5 確定動物給藥劑量時,要考慮因給藥途 徑不同,所用劑量也不同, 以口服量為 l00 時,灌腸量應(yīng)為 100 200 ,皮下注射量 30 50 ,肌肉注射量為25 30
54、,靜脈注射量為25 。 6 確定劑量后,可根據(jù)與實驗結(jié)果調(diào)整劑量、營養(yǎng)因素對動物實驗結(jié)果的影響 非營養(yǎng)研究時的影響 .對動物采食量的影響 .對動物生長發(fā)育的影響 .對動物生理生化指標(biāo)的影響 . 對動物免疫功能的影響 .對動物疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的影響 .對動物麻醉反應(yīng)的影響 .飼料中其它因素的影響營養(yǎng)研究時的影響 . 動物早期的營養(yǎng)狀況對營養(yǎng)研究的影響 . 動物實驗時的營養(yǎng)對所研究營養(yǎng)問題的影響 . 動物日糧對營養(yǎng)研究的影響、試述近交系:系統(tǒng)雜交動物和封閉群小鼠的遺傳特點與應(yīng)用 .近交系:特點:基因純合性,遺傳穩(wěn)定性,遺傳同源性,表型一致性,獨特性,可分變性, 分 布廣泛性,資料可查性。 .
55、系統(tǒng)雜交動物:特點: 、雜交優(yōu)勢,克服了近交引起的近交衰退。、遺傳與表型上的均質(zhì)性;具有相同的基因型。、分布廣泛。應(yīng)用: 、干細(xì)胞研究。 、移植免疫研究。 、細(xì)胞動力學(xué)研究。 、單抗研究。 .封閉群動物:特點: 、一定的雜合性:不引入新的基因,又不使群體內(nèi)基因丟失。 、相對的穩(wěn)定性:群體在一定范圍內(nèi)保持相對穩(wěn)定的遺傳特征。 、個體差異取決于祖代動物。、較強的繁殖力、抗病力。 、群體易保存有模型價值的突變基因。應(yīng)用: 、類似人群體遺傳的異質(zhì)性組成,在藥物篩選、毒性試驗方面有不可替代 的 作用。、可大量供應(yīng),用于預(yù)試驗、教學(xué)。、攜帶突變基因,評估群體對自發(fā)或誘發(fā)突變的遺傳負(fù)荷能力。22 、先天性免
56、疫缺陷動物分幾種,其特點和應(yīng)用:、 T 淋巴細(xì)胞功能缺陷 :裸鼠。特點: 11 號染色體上的裸基因突變,出現(xiàn)裸體異 常狀態(tài);毛發(fā)缺乏呈裸體; T 淋巴 細(xì)胞不能正常分化導(dǎo)致免疫功能低下; B 細(xì)胞正常;繁殖能力差。應(yīng)用:腫瘤學(xué),微生物學(xué),免疫學(xué),寄生蟲學(xué)。 。特點: X 染色體、 B 淋巴細(xì)胞功能缺陷動物 :性連鎖性免疫缺陷小鼠( XID )基因缺陷導(dǎo)致;血清中 分泌免疫球蛋白 IgG 和 IgM 缺失,細(xì)胞免疫功能正常。與人的 Bruton 氏丙種球膽白缺乏癥相似;移植正常鼠的骨髓過來可恢復(fù)免疫 應(yīng)用: 研究 B 細(xì)胞的發(fā)生、功能、異質(zhì)性。、 NK 細(xì)胞功能缺陷動物 : Beige 小鼠: 13 號染色體 bg 隱性基因突變, NK 細(xì)胞 缺乏。特點:影響 T 細(xì)胞功能,溶酶體功能缺陷。應(yīng)用 :色素缺乏易感性增 高癥。、嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷小鼠( SCID ) :位于第 16 號染色體的 scid 單個隱性基因
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