1、測定蔬菜有機磷農(nóng)藥干擾因素農(nóng)科論文測定蔬菜有機磷農(nóng)藥干擾因素農(nóng)科論文隨著我國農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展,有機合成農(nóng)藥被廣泛使用于蔬菜種植 業(yè),其中有機磷農(nóng)藥用量占65%1 o我國非常重視有機磷農(nóng)藥的用 量限值與檢測方法,制定了多項有機磷農(nóng)藥的檢測標(biāo)準(zhǔn)24。衛(wèi)生 系統(tǒng)最常用的有機磷檢測方法是GB/T5009. 20-2003食品中有機磷 農(nóng)藥殘留量的測定3,該法適用范圍廣,簡單有效,但在實際的檢 測工作中，有些看似簡單的操作步驟，會影響測定結(jié)果，出現(xiàn)測定誤差。 本文針對國標(biāo)中第二法的測定進行了實驗和方法改進的研究,對一些 影響測定結(jié)果的因素進行探討，以期提高蔬菜中有機磷農(nóng)藥的檢測水 平和工作效率。1材料與方

2、法1.1儀器與試劑HP-6890A氣相色譜儀,火焰光度檢測器（FPD）, 1701毛細管柱 （30mX0. 32mmX0. 25 Um）,安譜氮吹儀（DC-12,上海安譜科學(xué)儀器有 限公司）。1. 2試劑敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、久效磷、甲 基毒死蚓、樂果、毒死岬、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶 液（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所研制，均為100ug/ml）;丙酮、乙脂、 甲苯、二氯甲烷（色譜純,Fisher公司）、無水硫酸鈉、活性炭（廣州 化學(xué)試劑廠）。1. 3色譜條件進樣口溫度：230,檢測器:250,柱流量:3. Oml/min,進樣 量：1 U 1,升溫程序:80保持

3、lmin,以8ml/min的速率升至220,保 持4min,以20ml/min的速率升至230C,保持5min。1.4樣品處理1. 4. 1國標(biāo)第二法（GB/T5009. 20-2003）將蔬菜切碎混勻，稱取 10. 0g樣品于具塞錐形瓶中，加入30gl00g無水硫酸鈉（視樣品水分 含量），劇烈振蕩后有固體無水硫酸鈉存在,說明所加無水硫酸鈉已足 量,加入0. 2g0. 8g活性炭,充分?jǐn)噭?加入70. 0ml二氯甲烷,振蕩 30min,經(jīng)濾紙過濾。取35ml濾液于室溫下自然揮發(fā)至近干,用二氯 甲烷多次研洗殘渣,定容至2. 0ml,供氣相色譜測定。1. 4. 2實驗改進方法將蔬菜置通風(fēng)處晾2h,

4、切碎混勻,稱取10. 0g 樣品于具塞錐形瓶中，加入30gl00g無水硫酸鈉（視樣品水分含量）， 劇烈振蕩后,移入玻璃研缽中,將結(jié)塊的樣品研磨,并同時補加無水硫 酸鈉至有固體無水硫酸鈉存在粉末狀，說明所加無水硫酸鈉已足量。 將研磨均勻的樣品轉(zhuǎn)入具塞錐形瓶中，加入0. 2g0. 8g活性炭,充分 搖勻，加入70. 0ml二氯甲烷,振蕩30min,經(jīng)濾紙過濾。取35ml濾液 在氮吹儀中揮發(fā)至近干,用二氯甲烷多次研洗殘渣,定容至2. 0ml,供 氣相色譜測定。2結(jié)果與討論提取與凈化方法的影響不同階段加標(biāo)對回收率的影響在工作中，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)采用紙 片法定性為陽性的蔬菜樣品,應(yīng)用5009. 20第二法進行有

5、機磷農(nóng)藥的 測定,結(jié)果為陰性。對樣品進行加標(biāo)回收實驗,發(fā)現(xiàn)前處理方法的回 收率很低,為了查找影響回收率的具體實驗步驟,本文在前處理不同 階段進行加標(biāo)，測定回收率，以期找到提高回收率的解決方法。實驗 分別以敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、久效磷、 甲基毒死岬、樂果、毒死岬、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷12種 有機磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)進行加標(biāo)。以敵敵畏加標(biāo)測定結(jié)果為例,加標(biāo)結(jié) 果如表1所示。表1結(jié)果顯示:直接在蔬菜上加入標(biāo)準(zhǔn)品，回收率最 低;蔬菜切碎后,加標(biāo)回收率大概在70%左右;在加入無水硫酸鈉及活 性炭后加標(biāo)，回收率在85%左右;樣品震蕩后加標(biāo)，回收率在100%左右; 而將樣品過濾后,

6、濃縮前加標(biāo)，回收率僅為25%O由以上結(jié)果可見,直 接加標(biāo)于蔬菜上，回收率較低,蔬菜切碎后加標(biāo),可明顯提高回收率， 但提取效率也低于80%o其原因可能是加入無水硫酸鈉后，硫酸鈉吸 水后易凝結(jié)成塊,包裹在樣品表面,致使待測的敵敵畏不易被二氯甲 烷提取,而且加入作為脫色劑的活性炭，也會吸附少量的被測物質(zhì)。 所以在加入無水硫酸鈉及活性炭后加標(biāo),敵敵畏損耗少，易于被二氯 甲烷提取，回收率可達85%左右;樣品在震蕩后加標(biāo)，回收率可達100%。 但較為奇怪的實驗結(jié)果是在過濾完畢,濃縮前加標(biāo)，回收率僅為25%, 這一原因有待繼續(xù)研究。其它十一種有機磷農(nóng)藥的加標(biāo)回收率情況 與敵敵畏相似。由實驗結(jié)果可見,加入無水

7、硫酸鈉是影響提取效率的 關(guān)鍵因素,減少樣品表面水分,防止無水硫酸鈉和樣品結(jié)塊,可有效提 高樣品提取效率。實驗采用了以下方法，獲得較為滿意的結(jié)果:在 取樣前,將蔬菜樣品晾曬一段時間，盡量減少菜葉表面的水分,但晾曬 時間不能太久，過量失水將影響檢測結(jié)果;樣品加入無水硫酸鈉劇 烈震蕩后,將樣品轉(zhuǎn)移至研缽,在研缽中將結(jié)塊的樣品研磨,并補加無 水硫酸鈉至樣品呈均勻狀,再用二氯甲烷進行提取,可使有機磷農(nóng)藥 的回收率達到95%左右。1. 2自然揮干的影響在實驗中，取35ml過濾的二氯甲烷,在室 溫下自然揮干,二氯甲烷在揮發(fā)過程中,有降溫效果,蒸發(fā)皿的外層凝 結(jié)大量的水珠,在濃縮后的樣品中也會有少量水分,定容

8、后,水層明 顯。實驗采用以下方法,可有效防止水分的凝結(jié),減低對有機磷農(nóng)藥 測定的干擾:采用氮吹或旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)法,防止水分的凝結(jié),但該法 較為繁瑣、耗時長;采用離心法，當(dāng)樣品自然蒸干后,定容于5ml的 玻璃離心管中，采用3000r/min在高速離心機上進行離心，使水層和 二氯甲烷分層,吸取二氯甲烷層進行分析。3活性炭用量對脫色效果的影響在樣品前處理過程中，加入 活性炭進行脫色。試驗考察活性炭用量對蔬菜樣品脫色效果的影響， 結(jié)果顯示:菜葉顏色越深（如油麥菜、芥藍、菜心、地瓜葉等），需要 加入較大量的活性炭,脫色效果隨著活性炭量增加而增強，但用量超 過1. 0g,脫色效果無明顯變化,且過量的活性炭也

9、會降低有機磷農(nóng)藥 的回收率。菜葉顏色較淺綠色的蔬菜（如生菜、空心菜等），加入0. 5g活性炭即可達到脫色的效果;菜葉顏色淺的蔬菜(如白菜)只需 加入0. 3g活性炭即可獲得較好的脫色效果。2. 2標(biāo)準(zhǔn)溶液的有效性有機磷農(nóng)藥的物理化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，易揮發(fā)，配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定 性受溫度、光照、溶劑種類和存儲時間的影響較大。陸繼偉5等研 究了 50種農(nóng)藥的穩(wěn)定性,楊麗莉6等研究了敵敵畏、馬拉硫磷、對 硫磷和甲基對硫磷四種有機磷農(nóng)藥的穩(wěn)定性，但都不完全包含本實驗 中12種有機磷農(nóng)藥。木實驗考察了敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、 甲拌磷、氧化樂果、久效磷、甲基毒死婢、樂果、毒死婢、甲基對 硫磷、馬拉硫磷、對硫

10、磷的穩(wěn)定性及其影響因素。2. 2.1溶劑的影響實驗考察了丙酮、二氯甲烷、甲苯和乙月青對12 種有機磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)使用液的影響.標(biāo)準(zhǔn)儲備液均為100 u g/ml, 溶劑為丙酮;混合標(biāo)準(zhǔn)使用液的濃度為1. 0 U g/ml,不同溶劑對12種 有機磷農(nóng)藥穩(wěn)定結(jié)果的影響由穩(wěn)定至不穩(wěn)定的順序為：甲苯乙騰二 氯甲烷丙酮。根據(jù)溶劑的理化性質(zhì)推測其原因：甲苯沸點較高,不易 揮發(fā),極性小,對有機磷農(nóng)藥溶解性好,較為穩(wěn)定；乙騰穩(wěn)定性好，但極 性強,對農(nóng)藥的穩(wěn)定性有影響。二氯甲烷和丙酮的沸點較低,20C時 蒸汽壓較大，易揮發(fā),導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性降低,但二氯甲烷較丙酮的 穩(wěn)定性好。2. 2. 2存儲時間和存儲條件的影響實驗分別考察了存儲時間和光 照對不同濃度有機磷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的影響。高濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液為 50 U g/ml,中等濃度混標(biāo)濃度為5 U g/ml,低濃度混標(biāo)濃度為 0. 5 U g/mlo結(jié)果表明：高濃度混標(biāo)液一個月內(nèi)反復(fù)測定的峰面積無 明顯變化,一個月后,濃度增高,并有部分物質(zhì)分解,放置兩個月后，12 種有機磷農(nóng)藥己經(jīng)無法分離;對中等濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,在5日內(nèi) 可保持穩(wěn)定;低濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,第二日濃度就發(fā)生明顯變化,須 臨用前配制。放置于密閉、冷臧(-4)、避光條件下，能有效延長中 等濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的有效期,可達10日；但