1、ICS 67.050B20 備案號：DB12天 津 市 地 方 標 準DB12/T 6502016轉基因植物及其產品成分篩查Cry1 Ab/Cry1 Ac 試紙條法Screening method for genetically modified plantCrylAb/CrylAc test strip2016-11-01 實施2016-09-27 發(fā)布天津市市場和質量監(jiān)督管理委員會發(fā)布DB12/T 6502016 本標準按照GB/T 1. 12009給出的規(guī)則起草。本標準由天津市農村工作委員會提出o本標準起草單位：天津市農業(yè)質量標準與檢測技術研究所、中國農業(yè)科學院生物技術研究所、天 津市東

2、麗區(qū)產品質量監(jiān)督檢驗所。本標準主要起草人：蘭青闊、李亮、黃鳳軍、劉雪巖、趙新、宛煜嵩、易萌、陳銳、徐石勇。 本標準2016年9月首次發(fā)布。轉基因植物及其產品成分篩查Cry1 Ab/Cry1 Ac 試紙條法1范圍本標準規(guī)定了轉基因植物及其產品成分GylAb/CrylAc試紙條法的術語和定義、檢測方法、結果判 斷。本標準適用于表達CrylAb/CrylAc蛋白的轉基因大豆MON87701,轉基因玉米MON810, Btll、 Btl76,轉基因水稻TT51-1、克螟稻、科豐六號，轉基因棉花MON531、MON15985等主要植物及其初 級加工產品中CiylAb/CrylAc蛋白的試紙條篩查。2規(guī)范

3、性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理轉基因快速檢測試紙應用雙抗體夾心免疫層析的原理，樣本中的抗原在側向移動的過程中與標記的 特異性單克隆抗體1結合，形成抗原-抗體復合物，繼續(xù)向前方流動和NC膜檢測線上特異性單克隆抗體2 結合形成雙抗體夾心復合物，并顯色。如果樣本中轉基因作物含量大于5%,控制線（Control Line,簡 稱C）和檢測線（Test Line,簡稱T）顯色，結果為陽性；反之，控制線（C）顯色，檢

4、測線（T）不顯 色，結果為陰性。4儀器設備及試劑1儀器設備勻漿器；天平；移液槍；振蕩器；離心管等。4.2試劑提取緩沖液；實驗用水為重蒸餡水或符合GB/T 6682規(guī)定的一級水等。5方法步驟5.1樣品的采集和預處理使用離心管蓋夾取或者打孔的方式，采集植物新鮮組織樣品生長點附近約3 cm幼嫩組織100 mg-200 mg,置于2 mL離心管中。作物籽?？墒褂描F鉗夾碎，取較碎部分置于2 mL離心管中。2樣品研磨加1 mL純水或提取緩沖液于離心管中，使用一次性研磨杵手工研磨或電鉆研磨，確保上層液體體 積應至少占總體積三分之一。對于混合樣品，應稱重后使用大容量研磨儀器研磨至100目大小粉末，然后加入水或提取緩沖液。5. 3渦旋震蕩在振蕩器上用力震蕩30 s-1 min,確保樣品充分混勻。5.4試紙條檢測震蕩后，靜置1 min待固體物質沉淀分層，盡快從包裝中取出試紙條，按照箭頭方向插入離心管， 開始計時。5.5讀取結果5-10 min底色褪去后，將試紙條水平放置于觀察者正面讀取結果。5. 6結果判斷測試結果分為陰性、陽性和無效三種。陰性（一）：控制線C顯色，檢測線T不顯色；陽性（+