實驗十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性測定_第1頁
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實驗十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性測定_第3頁
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1、實驗十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定(精)實驗十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定(精)3/3實驗十保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定(精)實驗十保健食品中超氧化物歧化酶（SOD）活性的測定一、實驗原理依據(jù)GB/T5009.171-2003，將25時控制鄰苯三酚自氧化速率50%所需的SOD定義為一個活力單位。在堿性條件下，鄰苯三酚會發(fā)生自氧化，可依據(jù)SOD控制鄰苯三酚自氧化能力測定SOD活力。二、實驗試劑A液：pH8.20的0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液（內(nèi)含1mmol/LEDTA2Na）。稱取1.2114g三羥甲基氨基甲烷和37.2mgEDTA

2、2Na溶于鹽酸溶液中，用蒸餾水定溶至100ml。B液：4.5mmol/L鄰苯三酚鹽酸溶液。稱取鄰苯三酚56.7mg溶于少許10mmol/L鹽酸溶液，并定容至100ml。鹽酸溶液：10mmol/L蒸餾水：二重石英蒸餾水三、實驗儀器紫外-可見分光光度計精巧酸度計（0.01pH）離心計10ml比色管10ml離心管玻璃乳缽。四、測定步驟取茶葉樣品1.00g置于研缽中，加入9.0ml蒸餾水研磨5分鐘，移入10ml離心管。用少許蒸餾水沖刷研缽，洗液并入離心管中，加蒸餾水至刻度，經(jīng)4000r/min離心15分鐘，取上清液測定。在25左右，于10ml比色管中挨次加入A液2.35ml，蒸餾水2.00ml，B液0

3、.15ml。加入B液立刻混淆并傾入比色皿，分別測定在325nm波長條件下初始時和1Min后吸光度值，兩者之差為鄰苯三酚自氧化速率A325（min-1）為0.060。在25左右，于10ml比色管中挨次加入20.0ul樣液或酶液，A液2.35ml，蒸餾水2.00ml，B液0.15ml。加入B液立刻混淆并傾入比色皿，分別測定在325nm波長條件下初始時和1分鐘后吸光度值，兩者之差為樣液或酶液控制鄰苯三酚自氧化速率A325（min-1）。加入樣液或酶液的量使控制鄰苯三酚自氧化速率為1/2A325（min-1），即0.030。五、計算SOD活力gA325A1325A325100%4.5DV150%Vm式中：V加入樣液或酶液的體積，mlA325鄰苯三酚自氧化速率A325樣液或酶液控制鄰苯

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