1、PAGE 10 -茶葉中高氯酸鹽檢測(cè)及污染情況分析葉少媚何國(guó)成張憶萍招鈺娟鄒學(xué)仁摘要：分析部分市售茶葉中高氯酸鹽含量的污染情況，為制定高氯酸鹽相關(guān)限量和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范我國(guó)茶葉生產(chǎn)、提高茶葉質(zhì)量以及加強(qiáng)茶葉行業(yè)監(jiān)管提供一定參考。隨機(jī)購(gòu)買市售不同地區(qū)和茶類的茶葉，采用ObeliscR色譜柱分離，高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，18O高氯酸鈉同位素內(nèi)標(biāo)法定量分析全國(guó)4個(gè)地區(qū)11個(gè)省份4種茶類的茶葉中高氯酸鹽污染情況。結(jié)果表明：全國(guó)4個(gè)行政區(qū)域4類茶葉合計(jì)88批次樣品中，有62批次檢出高氯酸鹽，檢出率為70.5%，所檢出樣品的高氯酸鹽含量為0.0381.750mgkg-1，平均檢出值為0.268mgkg-

2、1。華東、華南、華中地區(qū)合計(jì)有4批次茶葉高氯酸鹽含量0.75mgkg-1，占總批次的4.5%，涵蓋紅茶、綠茶、烏龍茶及黑茶，其中華南地區(qū)一批次綠茶高氯酸鹽含量最高，達(dá)1.75mgkg-1。綜上分析表明，部分市售茶葉中高氯酸鹽檢出率高，結(jié)合檢出含量的平均值、中位值、最小值和最大值綜合分析，綠茶受污染程度相對(duì)高于紅茶、烏龍茶及黑茶，而紅茶受污染程度相對(duì)其他茶類最低。若以歐盟擬定限量值0.75mgkg-1為參考，則茶類中綠茶安全風(fēng)險(xiǎn)較高，不同地區(qū)中華東、華中及華南地區(qū)茶葉中高氯酸鹽污染存在一定風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)引起相關(guān)部門重視。關(guān)鍵詞：茶葉;高氯酸鹽;高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法;污染中圖分類號(hào)：S571.1文獻(xiàn)標(biāo)

3、志碼：A文章編號(hào)：0253-2301（2022）03-0040-05DOI：10.13651/ki.fjnykj.2022.03.007DetectionofPerchlorateinTeaLeavesandAnalysisofthePollutionSituationYEShao-mei，HEGuo-cheng，ZHANGYi-ping，ZHAOYu-juan，ZOUXue-ren（ZhongshanQualitySafetyInspectionInstituteofAgriculturalProducts，Zhongshan，Guangdong528437，China）Abstract：I

4、nthispaper，thepollutionofperchloratecontentinsomecommerciallysoldteawasanalyzed，soastoprovidesomereferenceforestablishingthelimitanddetectionstandardsofperchlorate，standardizingtheteaproduction，improvingtheteaqualityandstrengtheningthesupervisionofteaindustryinChina.Theteasampleswithdifferentteatype

5、sfromdifferentregionswererandomlypurchasedfromthemarket，andthenseparatedbytheObeliscRchromatographiccolumnanddeterminedbyusingthehighperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry，thepollutionofperchloratein4kindsofteafrom4regionsand11provincesinChinawasquantitativelyanalyzedbyusingthe18Osod

6、iumperchlorateisotopeinternalstandardmethod.Theresultsshowedthattheperchloratewasdetectedin62batchesofthe88samplesfrom4kindsofteain4administrativeregionsofChina，withadetectionrateof70.5%.Thecontentofperchlorateinthesamplesrangedfrom0.038to1.750mgkg-1，withanaveragedetectionvalueof0.268mgkg-1.Therewer

7、e4batchesofteainEast，SouthandcentralChinawiththecontentofperchlorate0.75mgkg-1，accountingfor4.5%ofthetotalbatches，includingblacktea，greentea，oolongteaanddarkgreentea.Amongthem，theperchloratecontentofabatchofgreenteainSouthChinawasthehighest，reaching1.75mgkg-1.Theaboveanalysisshowedthatthedetectionra

8、teofperchlorateinsomecommerciallyavailabletealeaveswashigh.Combinedwiththeaverage，median，minimumandmaximumvaluesofthedetectedcontents，thepollutiondegreeofgreenteawashigherthanthatofblacktea，oolongteaanddarkgreentea，whilethepollutiondegreeofblackteawasthelowestcomparedwithotherkindsoftea.Ifthelimitva

9、lueof0.75mgkg-1proposedbytheEuropeanUnionwastakenasthereference，thesafetyriskofgreenteawashigher，andtherewascertainriskofperchloratepollutioninthetealeavesindifferentregionsofEast，centralandSouthChina，whichshouldbepaidattentiontobyrelevantdepartments.Keywords：Tea;Perchlorate;High-performanceliquidch

10、romatography-tandemmassspectrometry;Pollution茶葉是我國(guó)傳統(tǒng)的經(jīng)濟(jì)作物之一，也是我國(guó)重要的出口農(nóng)產(chǎn)品之一。近年來(lái)，我國(guó)出口歐盟的茶葉被曝檢出高含量高氯酸鹽1，該事件引起了社會(huì)對(duì)茶葉質(zhì)量安全問(wèn)題，特別是茶葉中高氯酸鹽污染問(wèn)題的關(guān)注。高氯酸鹽是一種極易溶于水的持久性污染物2，可用于火箭與導(dǎo)彈推進(jìn)劑、汽車安全氣囊、紡織工業(yè)和煙花爆竹等領(lǐng)域3-4。高氯酸鹽經(jīng)食物鏈進(jìn)入人體，可干擾甲狀腺功能、新陳代謝，影響人體生長(zhǎng)發(fā)育5-6。茶葉中高氯酸鹽污染的來(lái)源可能是茶樹生長(zhǎng)的環(huán)境以及生長(zhǎng)過(guò)程中使用的灌溉水、化學(xué)投入品、土壤7和加工過(guò)程中使用的包裝材料、含氯消毒劑8等。目

11、前，我國(guó)尚未對(duì)茶葉中高氯酸鹽最大殘留限量作出規(guī)定，針對(duì)高氯酸鹽的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)只有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T4089-2022出口食品中高氯酸鹽的檢測(cè)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法，但該檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍并未涉及茶葉。國(guó)內(nèi)對(duì)茶葉中高氯酸鹽含量的研究成果主要集中在檢測(cè)方法上，包括離子色譜法（IC）9、離子色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（IC-MS/MS）8，10、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）11-14。而對(duì)于我國(guó)不同地區(qū)和茶類中高氯酸鹽污染情況分析的文獻(xiàn)較少，其中張書芬等15僅對(duì)寧波的綠茶和紅茶、劉麗等7僅對(duì)宜昌32批次茶葉（不分茶類）、張南等16僅對(duì)安徽東南部和西部?jī)傻夭枞~主產(chǎn)區(qū)50份茶葉（不分茶類）樣品進(jìn)行分析;華永有

12、等17、鄧家軍等18和吳微等1則對(duì)全國(guó)17個(gè)省份的6種茶葉中高氯酸鹽污染情況進(jìn)行了范圍相對(duì)廣泛的分析。本研究對(duì)隨機(jī)購(gòu)買的市售茶葉進(jìn)行檢測(cè)，使用ObeliscR色譜柱分離，高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，18O高氯酸鈉同位素內(nèi)標(biāo)法定量，分析全國(guó)4個(gè)地區(qū)11個(gè)省份4種茶類的茶葉中高氯酸鹽污染情況，以期為茶葉中高氯酸鹽的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、污染源控制和出臺(tái)限量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)參考。1材料與方法1.1儀器與試劑1290-6495A高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（美國(guó)，安捷倫公司）;A11Basic研磨機(jī)（德國(guó)，IKA公司）;SW22水浴振蕩器（德國(guó)，JULABO公司）;MilliporeMili-Q純水機(jī)（美國(guó)，密理博公司）

13、;vortex2漩渦振蕩器（德國(guó)，IKA公司）;SB25-12DTD超聲波清洗器（寧波新芝生物科技股份有限公司）;3-18KS高速離心機(jī)（德國(guó)，SIGMA公司）;KS-501振蕩器（德國(guó)，IKA公司）。高氯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000gmL-1，美國(guó)，o2si公司），18O高氯酸鈉同位素內(nèi)標(biāo)（100gmL-1，美國(guó)，CIL公司），甲酸銨（色譜純，美國(guó)，F(xiàn)luka公司），正己烷（分析純，廣州化學(xué)試劑廠），乙腈（質(zhì)譜純，美國(guó)，F(xiàn)isher公司）。試驗(yàn)用水為超純水。1.2供試樣品隨機(jī)購(gòu)買市售茶葉88批次，茶葉樣品主要產(chǎn)地見表1。1.3試驗(yàn)方法1.3.1樣品前處理方法稱取0.50g試樣于50mL離心管中，加

14、入內(nèi)標(biāo)（4gmL-1）100L，加入20mL高純水，漩渦混勻。在恒溫水浴振蕩器45振蕩2h，超聲30min后高速離心。吸取5mL上清液到另一離心管中，加3mL正己烷，搖床振蕩15min，高速離心，取2mL水相提取液到PRiMEHLB凈化柱中（下接濾膜），加壓使流速2秒1滴，棄初始液0.3mL，收集于2mL棕色樣品瓶?jī)?nèi)，待測(cè)定。同時(shí)做試劑空白。1.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制用高純水逐級(jí)稀釋高氯酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000gmL-1），最終配制成高氯酸根濃度分別為0、1、5、20、100、200ngmL-1的標(biāo)準(zhǔn)工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。18O高氯酸鈉同位素內(nèi)標(biāo)最終質(zhì)量濃度為20ngmL-1。1.3.3儀器條件色譜條件

15、：SielcObeliscR色譜柱（2.1100mm，5m）;流動(dòng)相A為10mmolL-1甲酸銨（含0.1%甲酸），B為90%乙腈（含0.1%甲酸）;等度洗脫，A+B=15%+85%;流速0.3mLmin-1;柱溫25;進(jìn)樣量1L;運(yùn)行時(shí)間8min針-1。質(zhì)譜條件：電噴霧電離源（ESI），負(fù)離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）采集模式;干燥氣溫度200;干燥氣流速14Lmin-1;鞘氣溫度250;鞘氣流速11Lmin-1;霧化器壓力40psi。高氯酸鹽的質(zhì)譜條件見表2。1.4數(shù)據(jù)處理計(jì)算公式：X=（C-C0）Vm10-3其中：X表示茶葉中高氯酸根含量，mgkg-1;C表示經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的溶液中高氯酸根濃度

16、，ngmL-1;C0表示基質(zhì)空白溶液中高氯酸根濃度，ngmL-1;V表示溶劑提取體積，mL;m表示茶葉的質(zhì)量，g。2結(jié)果與分析2.1茶葉中高氯酸鹽含量檢測(cè)結(jié)果分析采用ObeliscR分離技術(shù)LC-MS/MS法對(duì)全國(guó)4個(gè)行政區(qū)域4類茶葉合計(jì)88批次的高氯酸鹽進(jìn)行測(cè)定，其中：華東地區(qū)（安徽、福建、江蘇、浙江）17批次、華中地區(qū)（湖北、湖南）8批次、華南地區(qū)（廣東、廣西）46批次、西南地區(qū)（貴州、四川、云南）17批次，檢出結(jié)果見表3。在88批次茶葉樣品中，檢出高氯酸鹽62批次，檢出率70.5%，所檢出樣品的高氯酸鹽含量為0.0381.75mgkg-1，平均檢出值為0.268mgkg-1。其中有4批次

17、高氯酸鹽含量0.75mgkg-1，占總批次的4.5%。2.2不同地區(qū)和茶類的高氯酸鹽含量檢出情況2.2.1不同地區(qū)茶葉高氯酸鹽含量檢出情況華中地區(qū)的茶葉樣品中高氯酸鹽檢出率和檢出樣品平均值均明顯高于其他地區(qū)，若以歐盟擬定高氯酸鹽限量值0.75mgkg-1為判定標(biāo)準(zhǔn)，其中有1批次湖南黑茶高氯酸鹽含量0.75mgkg-1。西南地區(qū)的茶葉中高氯酸鹽檢出率和檢出樣品平均值均最低，且沒(méi)有樣品含量超過(guò)0.75mgkg-1。華東地區(qū)和華南地區(qū)均有茶葉樣品的高氯酸鹽含量0.75mgkg-1，分別為福建的烏龍茶、廣東的紅茶和綠茶，且廣東1批次的綠茶中高氯酸鹽含量高達(dá)1.75mgkg-1，為此次試驗(yàn)所有樣品中最高

18、。2.2.2不同茶類高氯酸鹽含量檢出情況綠茶的高氯酸鹽檢出率最高，黑茶最低，但黑茶檢出濃度相對(duì)其他茶類均值較高。4種茶類檢出的高氯酸鹽含量最大值由高至低依次為綠茶、烏龍茶、黑茶和紅茶，且含量均0.75mgkg-1。結(jié)合平均值、中位數(shù)、最小值和最大值綜合分析認(rèn)為，紅茶檢出率雖高于黑茶和烏龍茶，但大部分檢出數(shù)值處于較低水平，安全風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較低。綠茶檢出率為4種茶類中最高，且檢出含量范圍均高于其他茶類，檢出最大值遠(yuǎn)超其他3種茶，為此次試驗(yàn)數(shù)據(jù)最大檢出值，安全風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高。3討論與結(jié)論我國(guó)為茶葉生產(chǎn)、銷售和消費(fèi)大國(guó)，目前國(guó)內(nèi)對(duì)茶葉中高氯酸鹽含量的研究成果主要集中在檢測(cè)方法上，關(guān)于我國(guó)不同地區(qū)和茶類中高氯

19、酸鹽污染情況分析較少，而我國(guó)制定茶葉中高氯酸鹽限量標(biāo)準(zhǔn)必然需要相關(guān)數(shù)據(jù)支持。根據(jù)我國(guó)茶葉生產(chǎn)及銷售實(shí)際情況，本研究對(duì)華東、華中、華南和西南地區(qū)共計(jì)11省份的綠茶、紅茶、黑茶和烏龍茶合計(jì)88批次樣品的高氯酸鹽含量進(jìn)行檢測(cè)，并參考?xì)W盟限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，為進(jìn)一步開展全國(guó)性茶葉中高氯酸鹽污染情況調(diào)查提供參考。鑒于茶葉基質(zhì)復(fù)雜，為達(dá)到更好的分離效果，本研究采用PRiMEHLB凈化柱進(jìn)行前處理并結(jié)合ObeliscR色譜柱進(jìn)行基質(zhì)分離，能有效降低茶葉中復(fù)雜的基質(zhì)效應(yīng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾，且能夠使色譜中的保留時(shí)間增加至4.9min，得到更好的峰型，并排除假陽(yáng)性峰干擾。因此，本試驗(yàn)方法針對(duì)性強(qiáng)，干擾小，所測(cè)定的數(shù)據(jù)

20、準(zhǔn)確有效且具有代表性。本研究結(jié)果表明，我國(guó)茶葉普遍存在高氯酸鹽污染，但不同地區(qū)和茶類污染程度不同。按地區(qū)劃分，西南地區(qū)的茶葉中高氯酸鹽污染情況較輕;按茶類劃分，紅茶的高氯酸鹽污染安全風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較低。若以歐盟擬定的茶葉中高氯酸鹽限量0.75mgkg-1為參考值，4個(gè)行政區(qū)域共計(jì)4批次茶葉樣品高氯酸鹽含量均超過(guò)該限量，范圍涵蓋華東、華中和華南地區(qū)，占總批次的4.5%，廣東一批次綠茶高氯酸鹽含量高達(dá)1.75mgkg-1，應(yīng)引起相關(guān)部門重視。高氯酸鹽是一種新型污染物19，越來(lái)越受公眾關(guān)注。隨著人們對(duì)高氯酸鹽污染現(xiàn)狀、污染源、分布規(guī)律、危害等認(rèn)識(shí)的加深和檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，可以考慮制定適合的高氯酸鹽相關(guān)標(biāo)

21、準(zhǔn)，特別是茶葉中高氯酸鹽的限量和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，以規(guī)范我國(guó)茶葉生產(chǎn)，提高茶葉質(zhì)量，增強(qiáng)出口茶葉的競(jìng)爭(zhēng)力。參考文獻(xiàn)：1吳微，馮德建，許洋，等.茶葉中高氯酸鹽的污染情況及健康風(fēng)險(xiǎn)初步評(píng)估J.食品工業(yè)科技，2022，41（4）：173-178.2尹鵬，張永瑞，楊曉東，等.茶葉中蒽醌和高氯酸鹽的研究進(jìn)展J.包裝與食品機(jī)械，2022，38（2）：59-62.3鄭雯靜，聞自強(qiáng)，沈昊宇，等.高氯酸鹽的來(lái)源、危害及其檢測(cè)方法研究進(jìn)展J.環(huán)境科學(xué)與技術(shù)，2022，41（S1）：103-108.4田一媚，宮智勇.食品中高氯酸鹽的污染現(xiàn)狀及毒理作用研究進(jìn)展J.食品科學(xué)，2022，41（5）：276-281.5蔡亞岐，史亞利，張萍，等.高氯酸鹽的環(huán)境污染問(wèn)題J.化學(xué)進(jìn)展，2022，18（11）：1554-1564.6寧鈞宇，肖文，魏洪鑫，等.高氯酸鹽的危害評(píng)估J.毒理學(xué)雜志，2022，35（3）：198-206，214.7劉麗，彭西甜，彭茂民，等.宜昌茶葉中高氯酸鹽污染現(xiàn)狀分析J.農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技，2022，30（23）：35-37.8孫文閃，諸駿杰，余鵬飛，等.分散固相萃取凈化離子色譜串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定茶葉中高氯酸鹽J.食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)