1、關(guān)于大腸埃希菌第一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一.引起疾病癥狀 案例：大腸艾希氏菌引起食物中毒，在國內(nèi)已有報道，現(xiàn)將2004年5月的一起由該菌引發(fā)的案例報道如下。2004年5月30日，某鄉(xiāng)鎮(zhèn)干部于伊斯蘭餐廳就餐，隨后該餐廳又接待了一對新人的婚宴。17:00點發(fā)現(xiàn)首例病情，18:00病人增多。31日23時停。潛伏期最短3h,最長33h,平均18h。主要癥狀為發(fā)熱37.538.5。腹痛，腹瀉，頭痛，惡心，嘔吐。腹瀉呈水瀉便，一般2-3次，最多9次。經(jīng)抗菌素治療2-3天痊愈，無死亡。第二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月大腸艾希氏菌O157 大腸埃希菌(大腸艾希氏菌O157),

2、通常稱為大腸桿菌,是腸道中大量存在的共生微生物.大腸艾希氏菌O157是腸出血性大腸艾希氏菌的一個主要血清群,嚴重危害人類身體健康.該菌能引起人的出血性腹瀉和腸炎,并發(fā)溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等,嚴重的可致人死亡.目前,多個國家已將“O157”列為必須報告的傳染病,予以高度重視.為防止大腸艾希氏菌O157感染事件的發(fā)生,我國于1997年5月建立了全國性的監(jiān)測網(wǎng)絡(luò),2000年衛(wèi)生部將大腸艾希氏菌 O157列為重點監(jiān)測對象.大腸桿菌（Escherichia coli,E.coli） 革蘭氏陰性短桿菌,大小0.513微米.周身鞭毛,能運動,無芽.能發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,是人和動物腸道

3、中的正常棲居菌.大腸埃希菌的致病物質(zhì)之一是血漿凝固酶. 第三張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月腸桿菌科 志賀氏菌屬 檸檬酸菌屬耶爾森氏菌屬 變形桿菌屬 沙雷氏菌屬 摩根菌屬克雷伯氏菌屬 腸桿菌屬沙門氏菌屬 大腸埃希菌蟑螂埃希菌弗格森埃希菌赫爾曼埃希菌傷口埃希菌科與醫(yī)學有關(guān)的屬種埃希氏菌屬 腸桿菌科 (Enterobacteriaceae)1. 致病菌：如沙門菌，志賀菌、鼠疫耶爾森菌；2. 機會致病菌：大腸埃希菌、奇異變形桿菌等；3. 由常居菌轉(zhuǎn)變而來的致病菌：如引起胃腸炎的 大腸埃希菌。 一大群寄居在人和動物腸道中生物學性狀近似、革蘭氏陰性、遺傳學上有親緣關(guān)系的腸道桿菌。現(xiàn)已知有44個

4、菌屬，170多個菌種，包括三大類別：第四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月腸桿菌科的共同特征 1. 革蘭陰性桿菌，無芽孢，少數(shù)有莢膜或微莢膜 (K或vi抗原）； 2. 多數(shù)菌種（除志賀菌和克雷伯菌）有鞭毛和菌毛； 3. 營養(yǎng)要求一般，需氧或兼性厭氧； 4. 觸酶陽性，還原亞硝酸鹽；發(fā)酵乳糖的為非病原 菌,不發(fā)酵乳糖的是病原菌（志賀菌,沙門菌）； 5. 易變異，可通過突變和“可移動遺傳原件”的轉(zhuǎn)移 而致變異； 6. 菌體抗原、鞭毛抗原及莢膜抗原是血清學分型、 鑒定的依據(jù)。第五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月主要內(nèi)容一、概述二、生物學性狀第六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年

5、6月概述 大腸埃希氏菌 （Escherichia coli) 俗稱大腸桿菌， 為德國科學家 Escherich首先 發(fā)現(xiàn)（1885年）。艾舍里希第七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月正常情況下 安分守己 競爭性抵御致病菌 幫助合成維生素K2 機體免疫力降低、腸道長期缺乏刺激 興風作浪 腸道以外 例如膽囊、尿道、膀胱、闌尾 互利共生大部分大腸桿菌是機會致病菌感染第八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月生物學性狀形態(tài)特征1、G- 短直桿菌，大小0.40.723m， 兩端鈍圓，無芽胞。第九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、多數(shù)有周身鞭毛，可運動，但也有無鞭毛或又失去鞭毛無動

6、力變異株。3、有菌毛 普通菌毛 性菌毛 有些菌株還有致病性菌毛，菌毛與致病力相關(guān)。第十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4、除少數(shù)菌株外，通常無可見莢 膜，但常有微莢膜（0.2m以下）。第十一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求不高 兼性厭氧 S型菌落普通瓊脂： 生長良好圓形凸起、半透明、光滑、濕潤、灰白色菌落，直徑約23mm第十二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 麥康凱瓊脂： 紅色菌落 伊紅美藍瓊脂： 紫黑色菌落 血平板： 一些致病性菌株 常溶血第十三張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月生化特性 能發(fā)酵多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。 多數(shù)菌株發(fā)酵乳糖； 約

7、半數(shù)菌株不分解蔗糖； 含酚紅指示劑，酸性呈黃色，堿性呈紅色第十四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月I M Vi C 實驗現(xiàn)象為 “ ” 凡此實驗有上述結(jié)果的，判為典型的大腸埃希菌第十五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月吲哚試驗（I）甲基紅試驗（M）細菌分解色氨酸產(chǎn)生吲哚,與二甲基氨基笨甲醛生成玫瑰吲哚，顯紅色。 細菌分解葡萄糖，產(chǎn)酸， 使甲基紅指示劑顯紅色。第十六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月VP反應(yīng)枸櫞酸鹽利用細菌分解葡萄糖，產(chǎn)生丙酮酸，脫羧生成乙酰甲基甲醇,進而氧化生成二乙酰，與胍基生成紅色化合物。細菌分解檸檬酸鹽生成碳酸鹽，進而氨鹽分目錄：解，產(chǎn)生氨，培養(yǎng)基變

8、堿，顯深藍色。VP試驗（V）枸櫞酸鹽試驗（C）第十七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月抗原結(jié)構(gòu)及分類O抗原：即菌體抗原，化學本質(zhì)為多糖-磷脂-蛋白質(zhì)復合物。耐熱121 2h不破壞其抗原性。每個菌株只含有一種O抗原，其種類以阿拉伯數(shù)字表示；可用抗O單因子血清通過凝集試驗鑒定。K抗原：即莢膜抗原；個別位于菌毛中。不耐熱。O不凝集性：具有K抗原的菌株不會被其相應(yīng)的抗O血清凝集。H抗原： 即鞭毛抗原；不耐熱，80可破壞其抗原性。1個菌株僅有1種H抗原。第十八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 該菌對熱的抵抗力較其他腸道桿菌強，55經(jīng)60分鐘或60加熱15分鐘仍有部分細菌存活。在自然界的

9、水中可存活數(shù)周至數(shù)月，在溫度較低的糞便中存活更久。膽鹽、煌綠等對大腸桿菌有抑制作用。對磺胺類、鏈霉素、氯霉素等敏感，但易耐藥，是由帶有R因子的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移而獲得的。抵抗力第十九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月大腸艾希氏菌的鑒定1.樣品來源：從本市批發(fā)部、超市、另售點等12家供貨單位共采取雞翅、雞腿、雞胸、雞尖、雞爪、整雞及鴨頭、鴨掌等9個凍離類產(chǎn)品計20件樣品。2.檢驗項目：致瀉性大腸艾希氏菌 3.檢驗方法： 3.1增菌和分離培養(yǎng)：以無菌手續(xù)稱取檢驗25g，加在225mL營養(yǎng)肉湯中，以均質(zhì)器打碎1min或用乳缽加滅菌砂磨碎。取出適量，接種乳糖膽鹽培養(yǎng)基，以測定大腸菌群MPN，其余的移入5

10、00mL廣口瓶內(nèi)，于361培養(yǎng)6h。挑取1環(huán)，接種于1管30mL腸道菌增菌肉湯內(nèi)，于42培養(yǎng)18h。第二十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3.2分離：將乳糖發(fā)酵陽性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍瓊脂平板；污染嚴重的檢樣，可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱或伊紅美藍平板，于361培養(yǎng)1824h，觀察菌落。不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落，同時也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。3.3.1假定試驗：挑取經(jīng)生化試驗證實為大腸埃希氏菌的瓊脂培養(yǎng)物，用致病性大腸埃希氏菌、侵襲性大腸埃希氏菌和產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌多價O血清和出血性大腸埃希氏菌O157血清做玻片凝集試驗。當與某一種多價O

11、血清凝集時，再與該多價血清所包含的單價O血清做試驗。如與某一個單價O血清呈現(xiàn)強凝集反應(yīng)，即為假定試驗陽性。 3.3血清學鑒定： 3.3.2證實試驗：制備O抗原懸液，稀釋至與Mac Farland3號比濁管相當?shù)臐舛?。原效價為1：1601：320的O血清，用0.5%鹽水稀釋至1：40。稀釋血清與抗原懸液在10mm75mm試管內(nèi)等量混合，做單管凝集試驗。混勻后放于50水浴箱內(nèi)，經(jīng)16h后觀察結(jié)果。如出現(xiàn)凝集，可證實為該O抗原。將培養(yǎng)后的三糖鐵瓊脂斜面上生長的菌落用侵襲性、產(chǎn)毒性大腸艾希氏菌診斷血清做玻片凝集試驗。第二十一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3.4 生化試驗：自鑒別平板上直接挑取數(shù)個菌落分別接種三糖鐵瓊脂(TSI)或克氏