1、緒論問題并不可怕，有問題說明還有很多地方，我們沒有注意。提示我們加快改變，防止更大的問題出現(xiàn)。1以前事故列表2問題的區(qū)分種母室問題總的可以分為三類：1.污染類：由于污染菌接觸發(fā)酵液所致；2.菌種質(zhì)量類：沒有按照標準操作導致菌種質(zhì)量受到影響；3.制度規(guī)范類：沒有按照制度辦事；3污染類問題發(fā)生原因steamsteamsteamCWCWsteam另外，JAR有5個直接開口：1.空氣系統(tǒng)；2.取樣口系統(tǒng)；3.排氣系統(tǒng)；4.上蓋系統(tǒng)；5.測量系統(tǒng)JAR本身的密閉性能：如JACKET、視窗、視鏡等4steamsteamsteamCWCWsteam在接種和殺菌過程中，不出現(xiàn)問題的話。加上上面所說的完美完成的

2、話，沒有污染發(fā)生。5steamsteamCWCWJACKET主要用于溫度控制，內(nèi)部流動的介質(zhì)為動力部門提供的冷卻水或者冷凍水。冷卻水和冷凍水在動力部門只是通過冷卻塔或者冷凍機將自然界中常溫水降溫到1025左右?？梢钥闯銎渲泻写罅康奈廴炯毦?。一旦JACKET泄露，污染菌會通過JAR壁進入罐中污染。污染菌為球菌桿菌，顏色發(fā)暗；泄露原因：1）生產(chǎn)廠家制作過程中問題；2）蒸汽反復殺菌并進行冷卻導致；3）反復檢查操作機械性損傷；檢查方式：1）JACKET通蒸汽升溫，通入冷卻水，3KG/CM2空氣加壓，檢查有無水珠；2）JAR中加水，JACKET通3KG/CM2空氣，檢查有無氣泡產(chǎn)生；6 視窗視鏡是為了

3、在培養(yǎng)過程中觀察方便而增加的附屬裝置。在帶來方便的同時也同樣帶來很多問題。一不小心便會污染。 根據(jù)以往經(jīng)驗，由于視窗視鏡導致污染很少或者幾乎沒有，但是需要注意以下事情： 1）材質(zhì)為鋼化玻璃，不要驟冷驟熱； 2）安裝要平衡用力，否則可能受力不均勻而折斷； 3）時常檢查螺帽有無松動，防止泄露； 7steamsteam空氣系統(tǒng)問題產(chǎn)生原因分析：1）渾濁氣體沒有過濾充分：過濾器本身問題、安裝問題、殺菌問題；2）空氣過濾充分以后再次污染：設備（管道、法蘭、閥門）本身問題、操作失誤、外部非人為因素變動情況；3）NH3管理不善；4）清洗以及殺菌；8排氣系統(tǒng)問題產(chǎn)生原因分析：1）外部氣體進入；2）由于發(fā)酵液回

4、流將污染菌帶入；3）管道本身存在泄露；4）清洗以及殺菌；5）操作失誤；9取樣口系統(tǒng)問題產(chǎn)生原因分析：1）操作失誤；2）閥門、管道等設備本身問題；3）移送管道問題；4）移送問題；5）移送管道殺菌問題10 由于上蓋而產(chǎn)生的問題好象幾乎沒有，個人認為出現(xiàn)問題時，比較隱蔽。即使有問題發(fā)生也很少注意到是由于上蓋的密封性能、操作失誤等原因引起的。上蓋產(chǎn)生問題原因分析：1）本身問題：0-RING、墊片問題；2）殺菌不充分，與發(fā)酵液接觸；11 測量系統(tǒng)包含：PH電極、DO電極以及預留口（盲塞）等等；由于結(jié)構(gòu)比較復雜，又于發(fā)酵液直接接觸，在安裝殺菌日常維護等過程中應當特別小心。防止出現(xiàn)問題。 PH電極、DO電極

5、通過0-RING與螺帽與JAR連接在一起。他們的狀態(tài)直接關(guān)系到污染：因此注意檢查，保持本身的清潔。注意對其進行維護防止在培養(yǎng)過程中因功能失效從而導致培養(yǎng)失敗。12菌種質(zhì)量類問題 菌種在培養(yǎng)過程中受到培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件、條件控制等方面的影響。假若影響不十分劇烈，外觀無法判斷。因此只能從開始源頭捉起，防止此類事故發(fā)生。131）培養(yǎng)基：培養(yǎng)基成分是菌種生存的基礎(chǔ)。在好的培養(yǎng)基中菌種才能正常生長，從而提高產(chǎn)品的質(zhì)量和數(shù)量。調(diào)制培養(yǎng)基的過程中注意成分的分子式、含量，防止多加、少加、漏加、錯加。溶液長時間的放置會出現(xiàn)沉淀，添加之前注意溶解。MIX由于對于熱不穩(wěn)定，在調(diào)制或者溶解的過程中防止成分破壞；溶解

6、溫度控制在60以內(nèi)，加熱時間不要太長。假若MIX中沉淀多的話，重新調(diào)制使用。按照培養(yǎng)基成分表進行調(diào)制的過程中，注意將實際稱量值進行記錄。一旦發(fā)生問題有記錄可以參考。不要稱量完畢之后重新進行記錄，有可能導致漏加或者量有問題。由于A/F直接影響到裝液系數(shù)，假若忘記加可能導致FOAM多，培養(yǎng)過程生長很慢或者增加污染機會；142）培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件：PH、溫度、RPM、VVM、內(nèi)壓等PH：由于PH受到溫度的影響較大，因此校正過程中首先保證溫度的恒定；PH過高過低對于菌種的影響最大。以前PH出現(xiàn)的問題最多：包括接種之前PH的調(diào)整，培養(yǎng)過程中PH變化甚至PH電極毀壞等等。PH是非常重要的測量和控制參數(shù)，因

7、此在校正或者調(diào)整的過程中都要小心緩慢進行，不可匆忙操作；PH電極反應遲鈍，不準確的情況需要及時進行更換；注意PH電極的維護，維持PH電極的清潔；使用完畢之后將電極放入保護液中進行儲存保管；PH電極線要保持干燥，否則可能導致測量數(shù)據(jù)不準或者不能進行校正的情況；15溫度：所有的溫度事故都是溫度升高；溫度升高的原因；a.蒸汽管道管理不善：蒸汽通入正在培養(yǎng)的罐中或者夾套使培養(yǎng)終止；b.冷卻水停止或供應不足；發(fā)酵熱影響使溫度升高；c.冷卻水停止蒸汽回流： JAR由于沒有冷卻水的回流管道,利用PURGE管道進行排水往往出現(xiàn)此中問題:注意管理好PURGE管道中的V/V防止出現(xiàn)事故,通常閥門處于關(guān)閉狀態(tài),在殺菌之前進行打開PURGE;JAR由于冷凝水多的緣故也將蒸汽的PURGE管道與空氣的PURGE管道連接到一起,因此在對空氣進行PURGE的過程中注意不要使蒸汽回流;VVM：由于通氣量相對比較穩(wěn)定，注意維持流量計潔凈，特別是FOAM比較多的時候，一定要進行清洗；RPM：由于JAR的轉(zhuǎn)速是可以調(diào)整的，目前由于轉(zhuǎn)速達不到，只能維持盡可能大的速度。但是要定期進行校正；內(nèi)壓；對于JAR來說，只要加入A/F，壓力維持沒有問題；16制度規(guī)范類菌種