1、PAGE 6 -慶陽市引種栽培柴胡含量研究進展賈佳琳孫花麗板小琪熊懿華張宏偉摘要：目的：通過高效液相色譜法（HPLC）測定柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的總含量，分析慶陽不同地域、不同生長年限對柴胡質量的影響。方法：收集慶陽市不同地域不同生長年限的栽培柴胡藥材20批次，根據(jù)中國藥典2022年版一部中柴胡方法測定柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量。結果：慶陽市內不同種植區(qū)域，套種品種對柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d總量影響不大，生長年限兩年半的柴胡含量明顯高于栽培一年半的柴胡。結論：為保證柴胡藥材的質量，建議藥農把柴胡的栽培年限提高到兩年半為宜，同時育種時應避免與其他品種柴胡及野生柴胡發(fā)生雜交，引起質量下

2、降。關鍵詞：柴胡;中藥材;高效液相色譜法【中圖分類號】R282.2【文獻標識碼】A【文章編號】2107-2306（2022）12-02ABSTRACT：OBJECTIVE：TodeterminethetotalcontentofthesaponinsaandsaponinsdinRadixBupleuribyHPLC，andtheinfluenceofqualitydifferenceandgrowthyearsofintroducedRadixbupleurumindifferentareasofQingyangwereanalyzed.METHODS：TwentybatchesofIntr

3、oducedRadixbupleurumwithdifferentgrowthyearswerecollectedfromdifferentareasofQingyang，andthecontentofsaponinsaandsaponinsdweredeterminedbyRadixbupleurummethodinChinesePharmacopoeia（2022edition）.RESULTS：InQingyang，differentplantingareasandinterplantingvarietieshadlittleeffectonthetotalcontentofSaponi

4、naandsaponind.ThecontentofRadixbupleurumgrownfortwoandahalfyearswassignificantlyhigherthanthatofRadixbupleurumgrownforoneandahalfyears.CONCLUSION：InordertoensurethequalityofRadixBupleuri，itissuggestedthatthegrowthyearsofRadixBupleurishouldbeincreasedtotwoandahalfyears.Atthesametime，thequalityofRadix

5、Bupleuritaxoclineshouldbeavoidedwhenbreeding.中國藥典2022年版收載柴胡為傘形科植物柴胡（BupleurumchinenseDC.北柴胡）、狹葉柴胡（BupleurumscorzonerifoliumWilld.南柴胡）的干燥根，性微寒，味苦，具有疏散退熱，疏肝解郁，升舉陽氣的作用。1柴胡始載于神農本草經，在我國已有兩千多年的藥用歷史。各地供以藥用的除南、北柴胡外還有同屬20余個品種。2根據(jù)研究報道，柴胡含有多種化學成分，包含皂苷、揮發(fā)油、植物甾醇、木脂素、香豆素和脂肪酸等，其中柴胡皂苷、揮發(fā)油為柴胡的主要活性成分，也是目前評價柴胡質量的主要指標成

6、分。3歷代記載柴胡的主要產區(qū)為陜西、河南，道地產區(qū)為陜西省榆林市。后柴胡產區(qū)逐漸擴大至華東、華北、江南一帶。因柴胡野生資源減少，20世紀80年代初國內已經開展野生變家種試驗，主要選用北柴胡B.chinense栽培，河北、甘肅、山西、陜西成為主要種植區(qū)，但各地柴胡質量差異較大。4甘肅省慶陽市位于甘肅省最東部，陜甘寧三省交匯處，柴胡很早就開始引種。目前慶陽市柴胡品種主要有北柴胡、藏柴胡、紅柴胡、黑柴胡，其中北柴胡種植面積最大。2022年以來，柴胡藥材價格不斷上漲，市場價格約每公斤100-120元。經濟效益明顯，種植量也日益增大，現(xiàn)慶陽市種植量可達到10萬畝，畝產60-80公斤，質量優(yōu)良。同時，慶陽

7、境內不同產地的柴胡之間，由于品種、產地、種植方式之間的差異，其質量參差不齊。因此，對慶陽市柴胡進行產量及質量評價，分析柴胡、藥材質量現(xiàn)狀，對指導慶陽市大面積種植，保障人民用藥安全具有非常重要的現(xiàn)實意義。1.儀器與材料安捷倫1260高效液相色譜儀，超聲波清洗儀（昆山KQ-600KDE）。乙腈（優(yōu)級純，德國默克、甲醇（色譜純，科密歐）、水為超純水（摩爾純水機制備）。柴胡皂苷a（批號：110777-202210;來源：中檢院;含量：93.2%）柴胡皂苷d（批號：110778-202212;來源：中檢院;含量：96.3%）。柴胡樣品20批次，收集于西峰、環(huán)縣、華池、鎮(zhèn)原、寧縣、合水、慶城、正寧，均為個

8、子藥材，所有柴胡品種均經張宏偉主管中藥師會同何登文主任藥師鑒定，具體情況見表1。2.方法與結果2.1對照品的制備分別精密稱取柴胡皂苷a對照品0.01031g、0.00859g置20ml容量瓶中加甲醇定容至刻度，搖勻。分別精密稱取柴胡皂苷d對照品0.01181g、0.01035g置20ml容量瓶中加甲醇定容至刻度，搖勻。2.2供試品的制備取藥材粉末（過四號篩）約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入含5%濃氨試液的甲醇溶液25ml，密塞，30水溫超聲處理（300W，40KHz）30分鐘，濾過，用甲醇20ml，分兩次洗滌容器及濾渣，洗液與濾液合并，回收溶劑至干。殘渣加甲醇溶解，轉移至5ml量瓶中

9、，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品。2.3色譜條件色譜柱：安捷倫C18柱（4.6mm250mm，5m）;流動相：乙腈、水，梯度洗脫;流速1.0ml/min;檢測波長210nm;柱溫35。2.4標準曲線的制備分別精密量取柴胡皂苷a（0.4804mg/ml）、柴胡皂苷d（0.5687mg/ml）對照品溶液2l、5l、10l、15l、20l注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以峰面積為縱坐標，單體皂苷量為橫坐標繪制標準曲線，得線性回歸方程。柴胡皂苷a的線性回歸方程為Y=6417.53X-2.24，R2=0.9997，在0.969.61g范圍內線性關系良好;柴胡皂苷d的線性回歸方

10、程為Y=6705.34X+0.36，R2=0.9992，在1.1411.37g范圍內線性關系良好。3.方法學考察3.1精密度實驗分別精密吸取胡皂苷a（0.4804mg/ml）、柴胡皂苷d（0.5687mg/ml）對照品溶液品10l，重復進樣5次，測定峰面積，兩種皂苷峰面積RSD均小于2%，結果表明色譜系統(tǒng)精密度良好。3.2重現(xiàn)性實驗精密稱取柴胡樣品粉末約0.5g，平行制備5份樣品溶液，進樣量10l，測定柴胡皂苷a、d的含量，兩種成分的RSD均小于2%，表明方法重現(xiàn)性良好。3.3穩(wěn)定性實驗取供試品溶液（序號6），按0、2、4、6、8、10、12小時進樣，測定樣品溶液中柴胡皂苷a、d在12小時內的

11、峰面積變化，結果兩種成分的RSD均小于2%。表明樣品在12小時內穩(wěn)定性良好。3.4加樣回收率實驗取已知含量的柴胡樣品（序號6，柴胡皂苷a含量0.77%，柴胡皂苷d含量0.91%）5份，分別加入柴胡皂苷a（0.4804mg/ml）對照品4ml和柴胡皂苷d（0.5687mg/ml）對照品4ml，進樣量10l，測定柴胡皂苷a和d含量，結果平均加樣回收率分別為100.6%和98.7%，RSD分別為1.20%，1.87%。4.樣品測定按照樣品溶液的制備方法分別制備不同樣品溶液，進樣量10l注入高效液相色譜儀。測定結果見表1，對照品色譜圖見圖1，供試品色譜圖見圖2。實驗結果表明，在同等栽培年限下，北柴胡所

12、含柴胡皂苷a和d的總量為最高。且慶陽市所產栽培北柴胡外皮紅棕色，個大、氣香，外觀質量較其他栽培柴胡品種良好，產量也較為理想。栽培品不僅銷往全國各地，而且銷往國外，顯示了極好的推廣前景。5.討論栽培柴胡顯示了極好的藥用和商品前景。今后，應進一步考察各種生態(tài)因素對標示成分含量的影響，并觀察3代以后柴胡的質量變化，制定出相應的藥材質量標準。同時，還要考察栽培北柴胡與其他柴胡品種雜交引起的質量降低情況，以便引導藥農在留種時，避免把北柴胡和其他品種栽培柴胡、野生柴胡的雜交種子當作種子種植的情況發(fā)生。6.結論慶陽市境內不同分布區(qū)域對含量的影響亦不大，各種套種農作物對含量的影響不大，經過研究栽培年限兩年半的柴胡，皂苷含量明顯高于栽培年限一年半的柴胡。為保證柴胡藥材的質量，建議藥農把柴胡的栽培年限提高到兩年半為宜。國家藥典委員會.中華人民共和國藥典S.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2022，293.潘勝利，李穎，戴克敏，云南省柴胡屬藥用植物的分類及其化學成分的研究J.上海第一醫(yī)學院學報，1984，11（1）：1.趙香妍，劉長