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文檔簡介

1、辣椒紅色素辣椒紅色素 (水溶、油溶 ) 是以辣椒為原料,承受科學方法提取、分別、精制而成的自然色素。主要成份為辣椒紅素和辣椒玉紅素辣椒紅素的分子式為C40H56O3,辣椒玉紅素分子式為 C40H56O4為深紅色油溶性液體, 色澤明媚,著色力強,耐光、熱、酸、堿,且不受金屬離子影響;溶于油脂和乙醇,亦可經(jīng)特別加工制成水溶性或水分散性色素。該產(chǎn)品富含 胡蘿卜素和維生素 C,具保健功能。廣泛應用于水產(chǎn)品、肉類、糕點、色拉、罐頭、飲料等各類食品和醫(yī)藥的著色。沒有辣味、色澤明媚、性能穩(wěn)定,耐熱性、抗光性良好,不受PH值變化的影響,對油脂產(chǎn)品染色力強。本產(chǎn)品經(jīng)反復除味、精制,雖有稍微的異味,添加在產(chǎn)品中,

2、沒有任何味道。試驗主要分為超聲提取辣椒紅素、柱層析提取辣椒紅素、薄層層析提取辣椒紅素三個板塊。超聲提取辣椒紅色素一試驗原理:2.旋轉蒸發(fā)儀的工作原理:通過電子把握,使燒瓶在最適合速度下,恒速旋轉以增大蒸 瓶內(nèi)溶液在負壓下在旋轉燒瓶內(nèi)進展加熱集中蒸發(fā)。1.是辣椒粉是片狀凹凸不平的纖維組織構造, 色素及其它脂溶性成分存在于纖維組織之內(nèi),,2.旋轉蒸發(fā)儀的工作原理:通過電子把握,使燒瓶在最適合速度下,恒速旋轉以增大蒸 瓶內(nèi)溶液在負壓下在旋轉燒瓶內(nèi)進展加熱集中蒸發(fā)。二試驗儀器與材料:材料:干紅辣椒;儀器:粉碎機,超聲波清洗器,旋蒸儀,冰箱,錐形瓶,小試管,漏斗,封口膜,濾紙,試管夾,量筒,電子天平;試

3、劑:石油醚,丙酮。三試驗步驟:干紅辣椒去籽粉碎辣椒粉1至2克150ml錐形瓶中70ml丙酮封口戳幾個小眼試管夾夾住超聲20min過濾旋蒸茄形瓶中加3至4ml石油醚標記冰箱儲存;四試驗說明:丙酮簡潔揮發(fā)且有毒害,試驗中留意避開吸入過多;超聲提取中應保證錐形瓶直立,切勿斜倒讓水流入;參加石油醚在茄形瓶后來回震蕩,盡量溶解附著在壁上的辣椒紅素;旋蒸的作用就是蒸去溶劑,比一般的方法效率高。 原理:一是靠減壓;二是靠旋轉時,使溶液形成液膜,擴大蒸發(fā)面。操作旋蒸儀中留意:在盛裝樣品的茄型瓶順當與旋蒸儀端口連接好后,應先開動旋轉按鈕檢查一下旋轉是否機敏,更重要是的看旋蒸樣品是否全部或大局部浸沒于水浴鍋的液面

4、內(nèi), 這樣才能保證旋蒸效率。在茄型瓶中盛裝的樣品最多不要超過75%,否則在減壓時會消滅倒吸。減壓過程中要調(diào)整好水浴鍋內(nèi)水的溫度,使其與你所旋蒸的樣品的沸點相適應, 這可以從回流管的回流液狀態(tài)看出,當回流液呈滴狀而非呈水流時最正確。在旋蒸接近完畢時,應先翻開通氣閥門,使旋蒸儀內(nèi)外氣壓全都,然后關閉旋轉開關,取下茄型瓶。柱層析分別辣椒紅色素一試驗原理:在吸附柱色譜中,吸附劑是固定相,洗脫劑是流淌相,相當于薄層色譜中的開放劑。吸附劑的根本原理與吸附薄層色譜一樣,也是基于各組分與吸附劑間存在的吸附強弱差異,通過使之在柱色譜上反復迸行吸附、解吸、再吸附、再解吸的過程而完成的。所不同的是,在進展柱色譜的過

5、程中,混合樣品一般是加在色譜柱的頂端,流淌相從色譜柱頂端流經(jīng)色譜柱,并不斷地從柱中流出。由于混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強弱不同,因此各組分隨流淌相在柱中的移動速度也不同,最終導致各組分按挨次從色譜柱中流出。假設分步接收流出的洗脫液,便可到達混合物分別的目的。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出,與吸附作用較強的成分后流出。二試驗儀器與材料:器材:色譜柱,濾紙片,剪刀,燒杯,小試管,量筒; 試劑:柱層析硅膠,石油醚,丙酮;三試驗步驟:裝柱:柱層析硅膠一次參加色譜柱振動管壁使其均勻下沉外表敲平濾紙片蓋住外表沿管壁緩緩參加洗脫劑石油醚旋開活塞使洗脫劑緩緩滴出緩緩加 入石油醚使其均勻潤濕下沉在管內(nèi)

6、形成松緊適度的吸附層應保持有充分的洗脫劑留在吸附層的上面。樣品參加:下口流出石油醚上口有石油醚 0.51ml樣品;洗脫:上口馬上干時石油醚沖洗石油醚:丙酮=10:1的洗脫劑收集辣椒紅色素; 四試驗現(xiàn)象:結論:承受柱層析分別技術,選用吸附劑和混合洗脫液將辣椒色素中紅、橙、黃色素進一步過程中不再是一個平面地同步分別,且辣椒紅色素漸漸位于了最下端。五試驗說明:色譜法按固定的狀態(tài)可分為柱色譜、平板色譜和棒色譜三種而試驗室中最常用的是除了干法裝柱外,還有濕法裝柱:將吸附劑與洗脫劑混合,攪拌除去空氣泡,緩緩3.吸附劑,一般應滿足以下幾個根本要求 :3.吸附劑,一般應滿足以下幾個根本要求 :對樣品組分和洗脫

7、劑都不會發(fā)生任何化學反響,在洗脫劑中也不會溶解;顆粒外形均勻大小適當以保證洗脫劑能夠以肯定的流速(一般為1.5mLmin-1)通過色譜柱;材料易得,價格廉價而且是無色的,以便于觀看??捎糜谖絼┑奈镔|有氧化鋁、硅膠、聚酰胺、硅酸鎂、滑石粉、氧化鈣 (鎂)、淀粉、纖維素、蔗糖和活性炭等。4.樣品在色譜柱中的移動速度和分別效果取決于吸附劑對樣品各組分的吸附力量大小和洗脫劑對各組分的解吸力量大小,因此,吸附劑的選擇和洗脫劑的選擇經(jīng)常是結合起來進展的:首先,依據(jù)待分別物質的分子構造和性質,結合各種吸附劑的特性,初步選擇一種 吸附劑。然后依據(jù)吸附劑和待分別物質之間的吸附力大小, 選擇出認為適宜的洗脫劑。

8、還是更換吸附劑的種類,或是轉變洗脫劑的極性。直到確定出適宜的吸附劑和洗脫劑為止。物質與吸附劑之間的吸附力量大小既與吸附劑的活性有關,又與物質的分子極性有關。分子極性越強,吸附力量越大,分子中所含極性基團越多,極性基團越大,其吸 附力量也就越強。具有以下極性基團的化合物,其吸附力量按以下次序遞增:-Cl,-Br,-I-C=C-OCH3-CO2R-CO-CHO-SH-NH2-OH-COOH一試驗原理:薄層層析分別辣椒紅色素薄層色譜是一種微量、快速和簡便的色譜方法。薄層色譜可適用小量樣品幾到 幾十微克甚至 0.01g的分別:也可用于多達 500mg用于定性,定量的一種重要手段。特別適用于那些揮發(fā)性小

9、的化合物,以及在高溫下 易發(fā)生化學變化而不能用氣相色譜分析的物質。薄層色譜常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固液吸附色譜。樣品在薄層板上的吸附 劑固定相和溶劑移動相之間進展分別。由于各種化合物的吸附力量各不一樣,在開放劑上移時,它們進展不同程度的解吸,從而到達分別的目的。由于小試管里提取的不是單一色素,包括辣椒紅素、類胡蘿卜素、辣素等。各色素的極性不同,吸附力量不一樣,在開放劑上移動,進展不同程度的解析,依據(jù)原點至主斑點中心及開放劑前沿的距離,計算比移值 Rf;化合物的吸附力量與它們的極性成正比,具有較大極性的化合物吸附較強,因此Rf值較小。在給定的條件下吸附劑、開放劑、板層厚度等 ,化合物移

10、動的距離和開放劑移動的距離之比是肯定的,即 Rf值是化合物的物理常數(shù),其大小只與化合物本身的構造有關,因此可以依據(jù) Rf值鑒別化合物。溶質最高濃度中心至原點中心的距離Rf溶劑前沿至原點中心的距離二試驗儀器與材料: 尺子;試劑:羧甲基纖維素鈉,石油醚,丙酮,乙醇,薄層層析硅膠;三試驗步驟:鋪板:10克薄層層析硅膠于研缽35ml羧甲基纖維素鈉調(diào)成均勻糊狀涂在載玻片上上下稍微顛動制成薄厚均勻、外表光滑平坦的薄層板室溫放置 0.5h烘箱1100.5h取出冷卻枯燥器;點樣:距一端 5mm處輕輕劃一橫線作為起始線毛細管吸取樣品在起始線上留神點樣;開放:廣口瓶內(nèi)依次參加少量石油醚:丙酮 20:1,10:1,

11、1001和石油醚:乙醇10:1的開放劑點好試樣的薄層板放入 (點樣的位置必需在開放劑液面之上) 開放劑上升到薄層的前沿或多組分已明顯分開取出薄層板放平用鉛筆劃溶劑前沿的位置 ;計算Rf值:準確地找出原點,溶劑前沿以及樣品開放后斑點的中心,分別測量溶劑前沿和樣點在薄層板上移動的距離,求出其 Rf值。四試驗現(xiàn)象:柱層析分別后的辣椒紅色素石油醚:丙酮=100:120:110 :1石油醚:乙醇 =10:1所以,辣椒紅色素的 Rf=2.3/6.4=0.36類胡蘿卜素的 Rf=2.5/6.4=0.39辣素的Rf=5.5/6.4=0.86未經(jīng)柱層析分別后的辣椒紅色素石油醚:乙醇=10:1石油醚:丙酮 =10

12、:1結論:通過柱層析分別后所得的色素明顯種類少了,于是在薄層層析中能分別出的色素帶少了;從這四種開放劑的效果看,石油醚:丙酮 =10:1的開放劑效果最好。五、試驗說明:試驗留意事項:研磨要細、調(diào)和均勻,鋪板要留意避開氣泡、厚薄均勻;硅膠和羧甲基纖維素鈉的比例要適宜 :2.5-4.5 最正確.依據(jù)自己點樣的粘稠度調(diào)整;鋪板時手要平穩(wěn),否則簡潔不均勻。室內(nèi)溫度不能太潮濕;活化不充分的話板易裂且斑點無法分開;如需重復點樣,則應待前次點樣的溶劑揮發(fā)前方可重點,以防樣點過大,造成拖尾、集中等現(xiàn)象,影響分別效果;假設在同一塊板上點幾個樣,樣品點間距離為 5mm以上。點樣時幾個樣點要在一條2mm);薄層板侵入開放劑不能超過點樣線, 否則樣品不在薄板上分別而直接溶入開放劑;點樣完畢待樣點枯燥后,方可進展開放。點樣要輕,不行刺破薄層。在條件完全全都的狀況,純碎的化合物在薄層色譜中呈現(xiàn)肯定的移動距離,稱Rf 值, 所以利用薄層色譜法可以鑒定化合物的純度或確定兩種性質相像的化合物是否為同一物質。但影響比移值的因素很多,如薄層的厚度,吸附劑顆粒的大小,酸堿性,活性等級,外界溫度和開放劑純度、組成、揮發(fā)性等。所以,要獲得重現(xiàn)的比移值就比較困難。為此,在測定某一試樣時,最好用樣品進展比照。薄層色譜用途在于

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