1、熒光顯微鏡操作手冊O(shè)lympus BX51物鏡： 4 0.16 （無DIC） 100.40 200.75 401.00 oil 1001.40 oil 熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： 1. WU 藍 2. WIB 綠（長通）3. WIBA 綠（帶通）4. WIG 紅5. CFP 青6. YFP 黃操作步驟：（注意：樣品須在低倍鏡下放置和取下）DIC觀察：打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好將起偏器、檢偏器、DIC棱鏡推入光路，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”位置，DIC棱鏡應(yīng)與相應(yīng)的物鏡倍數(shù)相匹配先選用低倍物鏡（“10”）調(diào)節(jié)透射光的強度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野換到高倍鏡頭，觀察樣品DI

2、C觀察時，光路選擇拉桿拉到中間位置，既可觀察，也可拍照 熒光觀察：打開明場電源開關(guān)打開汞燈電源開關(guān)將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好檢偏器、DIC棱鏡在光路外將熒光光路shutter打開（“”為開，“”為關(guān)），需保護樣品時關(guān)閉shutter光路選擇拉桿推至最里邊根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強度從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，依次換到高倍鏡頭，觀察樣品拍照時光路選擇拉桿完全拉出普通明場觀察：打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好起偏器、檢偏器、DIC棱鏡在光路外，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”位置，DIC棱鏡撥到明場（BF

3、）位置先選用低倍物鏡（“4”）調(diào)節(jié)透射光的強度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野依次換到高倍鏡頭，觀察樣品光路選擇拉桿拉到中間位置既可觀察，也可拍照關(guān)機：關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）將透射光調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況Olympus IX71物鏡： 物鏡倍數(shù) 相差環(huán)4 0.13 PHL 100.30 PH1 200.45 PH1 400.60 PH2 601.35 oil （無相差）

4、熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： 1. WU 藍 2. WIB 綠（長通）3. WIBA 綠（帶通）4. WIGA 紅5. CFP6. YFP操作步驟： 相差觀察：打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）將樣品置于載物臺上將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置從低倍鏡開始觀察，調(diào)節(jié)到與鏡頭相匹配的相差環(huán)，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到 “1”的位置調(diào)節(jié)透射光光強，調(diào)節(jié)焦距，找到預(yù)觀察視野依次換到高倍鏡，（注意調(diào)節(jié)相差環(huán)）觀察樣品拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機位置 熒光觀察：打開明場電源開關(guān)打開汞燈開關(guān)將樣品置于載物臺上將熒光光路shutter打開（“”為開，“”為關(guān)），需保護樣品時關(guān)閉shutter將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置根據(jù)樣品的標(biāo)記

5、情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強度從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，依次換到高倍鏡頭，觀察樣品拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機位置普通明場觀察：打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)）將樣品置于載物臺上將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置從低倍鏡開始觀察，相差環(huán)撥到明場（BF）位置，熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置調(diào)節(jié)透射光光強，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野依次換到高倍鏡，觀察樣品拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機位置關(guān)機： 1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）2. 將透射光強調(diào)到最小，透射光選擇按鈕按出3. 關(guān)閉明場電源開關(guān)4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低

6、倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件6. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）7. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況Olympus SZX16物鏡： 1變倍： 0.711.5熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤： UV 藍 GFPHQ 綠 RFP2 紅 操作步驟： 明場觀察：將樣品置于載物臺上推入光路選擇拉桿，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到空位選擇合適的光源冷光源觀察 使用不透明的底板（黑或白），打開環(huán)形光電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)），調(diào)節(jié)光強度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品底光源觀察 使用透明玻璃底板，打開底座電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)），將LBD

7、濾片推入光路，調(diào)節(jié)反光鏡方向、對比度和光強度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品拍照時將光路選擇拉桿拉出熒光觀察：將樣品置于載物臺上一般選擇黑色不透明底板打開汞燈電源開關(guān)熒光光路擋板推出根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比觀察樣品拍照時將光路選擇拉桿拉出關(guān)機：關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）將明場光強調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)取出樣品，將變倍比調(diào)到最小確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況軟 件 應(yīng) 用雙擊打開DP Controlle

8、r軟件點擊預(yù)覽鍵，選擇image size(一般1360 X 1024)、objective、ISO sensitivity(明場拍照選擇ISO200，熒光拍照選擇ISO400)、exposure mode(一般選擇manual)，調(diào)節(jié)exposure time調(diào)節(jié)黑/白平衡（明場拍照用白平衡，熒光拍照用黑平衡）。點擊color面板，點擊one touch 在圖片背景位置選個小框，軟件自動做好平衡若需添加標(biāo)尺，點擊scale面板，選中show scale，選擇標(biāo)尺顯示模式和長度，選中free size，改變標(biāo)尺長度若需調(diào)整圖象色階，點擊level面板，拖動小滑塊調(diào)整色階，可以改變圖象對比度點擊capture面板，還可再次調(diào)節(jié)曝光時間、圖象亮度及對比度。點擊拍照鍵，獲取圖象此時彈出DP manager軟件，選擇保存圖象格式保存圖象到硬盤上若需將不同通道圖象合成，可點擊DP manager軟件中imageimage composition，選擇需合成圖片的名稱，點擊apply，merging image生成，保存合成圖象若需拍攝Timelapse,點擊Timelapse/Movie面板，選擇拍攝模式，選擇拍攝時間、間隔時間等參數(shù)，再點擊capture面