1、肌肉/神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病 臨床診斷中的應(yīng)用肌肉/神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病 臨床診斷中的應(yīng)用一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程三、各項染色檢測方法應(yīng)用四、骨骼肌疾病的基本病理變化 五、神經(jīng)活檢簡介一、肌肉活檢簡介肌肉活檢簡介肌肉疾病是以肌無力、肌萎縮為主要臨床表現(xiàn) 的一大類疾病，疾病譜廣泛，病因復(fù)雜，臨床 癥狀相似，缺乏較特異的臨床診斷依據(jù)，其診 斷或鑒別診斷一直是困擾臨床的重要難點。肌肉活檢通過結(jié)合鏡下形態(tài)、組織化學(xué)、免疫 組織化學(xué)及電鏡技術(shù)，開展肌肉疾病的病理分 析，獲得直觀診斷依據(jù)，在神經(jīng)肌肉疾病的診 斷治療中具有極其重要的臨床意義。肌肉活檢簡介肌肉疾病是以肌無力、肌萎縮為主要臨床表現(xiàn) 的

2、一大肌病病因及分類1、原發(fā)性肌肉損害遺傳學(xué)肌?。I養(yǎng)不良、先天性肌病等）炎性肌病（皮肌炎、多發(fā)性肌炎、包涵體肌炎等）2、繼發(fā)性肌肉損害神經(jīng)源性肌?。顾栊约∥s癥、肌萎縮側(cè)索硬化等）內(nèi)科疾病合并肌肉病變肌病病因及分類1、原發(fā)性肌肉損害肌病的分類肌營養(yǎng)不良炎癥性肌病代謝性肌病內(nèi)分泌性肌病先天性肌病線粒體肌病神經(jīng)源性萎縮其他肌病的分類肌營養(yǎng)不良肌肉活檢的適應(yīng)癥伴有肌肉無力、肌萎縮、肌張力減低，懷疑 有肌肉疾病的病人，都適合做肌肉活檢電生理檢測無法區(qū)別神經(jīng)源或肌源性損害肌源性損害的鑒別診斷懷疑溶酶體或自噬體病肌營養(yǎng)不良攜帶者臨床無癥狀的高CK血癥原發(fā)或繼發(fā)系統(tǒng)性血管炎肌肉活檢的適應(yīng)癥伴有肌肉無力、

3、肌萎縮、肌張力減低，懷疑 有肌肌肉活檢應(yīng)用的局限性肌肉活檢有創(chuàng)傷性，不宜重復(fù)；一些病例容易確定神經(jīng)源性或肌 源性損害，但難以明確病因，需 緊密聯(lián)系臨床；肌肉活檢應(yīng)用的局限性一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程三、各項染色檢測方法應(yīng)用四、骨骼肌疾病的基本病理變化五、神經(jīng)活檢簡介一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢取材部位選擇：應(yīng)當(dāng)選擇在輕至中度肌無力、肌萎縮的部位進(jìn)行， 嚴(yán)重?fù)p害的部位因肌纖維破壞嚴(yán)重，纖維脂肪組 織增生替代，可獲得的診斷有效信息少；常規(guī)推薦肱二頭肌、股四頭肌、腓腸肌等部位進(jìn) 行活檢；肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢取材部位選擇：肌肉活檢技術(shù)流程局麻藥物可引起肌纖

4、維的變性、壞死，局 麻藥物不能注入肌肉內(nèi)，注射皮下淺層；避免在肌電圖檢查部位進(jìn)行活檢。肌肉活檢技術(shù)流程局麻藥物可引起肌纖維的變性、壞死，局 麻藥物肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢方式：開放式活檢（主要采用）針刺活檢 （常用于幼兒或診療中重復(fù)活檢）肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢方式：常規(guī)標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)快速冷凍處理方法：液氮+異戊烷干冰+丙酮肌肉活檢技術(shù)流程常規(guī)標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)快速冷凍處理方法：肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢技術(shù)流程冷凍肌肉活檢標(biāo)本的保存標(biāo)本在-80度冰箱內(nèi)可長期保存，注意避免反復(fù)凍融標(biāo)本冷凍肌肉活檢標(biāo)本的保存標(biāo)本在-80度冰箱內(nèi)可長期保存，一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程三、各項染色檢測方法應(yīng)

5、用四、骨骼肌疾病的基本病理變化五、神經(jīng)活檢簡介一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目推薦常規(guī)檢測項目：一、組織化學(xué)及酶組織化學(xué)九項蘇木精-伊紅染色 （HE） Gomori三色染色（MGT）還原型輔酶I-四氮唑還原酶染色（NADH） 琥珀酸脫氫酶染色 （SDH）細(xì)胞色素C氧化酶染色（COX） S/C雙染腺苷三磷酸酶染色(ATPase) 糖原PAS染色(PAS)油紅O染色(ORO)肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目推薦常規(guī)檢測項目：1、蘇木精-伊紅染色（HE）HE染色顯示肌肉組織基本結(jié)構(gòu)及肌纖維內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征；肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目1、蘇木精-伊紅染色（HE）肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目肌

6、肉活檢常規(guī)染色檢測項目肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目2、Gomori三色染色（MGT）MGT染色對于辨別破碎紅纖維、脫髓鞘、桿狀體、 管聚集、鑲邊空泡等病理改變至關(guān)重要肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目2、Gomori三色染色（MGT）肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目3、還原型輔酶I-四氮唑還原酶染色（NADH ）NADH染色可顯示肌纖維分型、線粒體異常聚積、管聚 集、肌原纖維網(wǎng)異常、中央軸空及靶樣纖維等肌纖維 內(nèi)部結(jié)構(gòu)異常變化肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目3、還原型輔酶I-四氮唑還原酶染色（肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目4、琥珀酸脫氫酶染色（SDH）SDH染色可輔助判斷肌纖維分型、線粒體聚積的 RRF，

7、有助于線粒體肌病診斷肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目4、琥珀酸脫氫酶染色（SDH）肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目5、細(xì)胞色素C氧化酶酶 （COX）COX對檢測線粒體電子傳遞酶的異常是必不可少的。 酶活性消失多見于慢性進(jìn)行性眼外肌麻痹（CPEO）， 在強(qiáng)直性肌營養(yǎng)不良和慢性進(jìn)展的肌營養(yǎng)不良中也可 見該酶活性降低或消失。肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目5、細(xì)胞色素C氧化酶酶 （COX）肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目6、腺苷三磷酸酶染色( ATPase)ATPase染色是區(qū)分肌纖維類型的最佳方法，可 幫助判斷肌纖維類型的分布異常，一般進(jìn)行三 種pH值的染色（pH4.3，4.6，10.4）肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目6、腺苷三磷酸酶

8、染色( ATPase肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目7、糖原PAS染色(PAS)PAS染色可幫助診斷糖原貯積病肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目7、糖原PAS染色(PAS)肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目8、油紅O染色(ORO)ORO染色對脂質(zhì)貯積病的診斷具有關(guān)鍵作用肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目8、油紅O染色(ORO)肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目二、免疫組織化學(xué)檢測常用關(guān)鍵致病蛋白檢測包括如下幾類：肌膜相關(guān)蛋白如抗肌萎縮蛋白(Dystrophin)、肌聚糖蛋白(sarcoglycans)、 Dysferlin、Caveolin-3、層粘連蛋白2( Laminin2)、膠原蛋白 (Collagen)等；核膜蛋白如伊默菌素(Eme

9、rin)、核纖層蛋白A/C(Lamin A/C)等；肌原纖維和細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白如Myotilin、telethonin、伴肌動蛋白( nebulin)、結(jié)蛋白(desmin)等。肌肉活檢常規(guī)染色檢測項目二、免疫組織化學(xué)檢測Dystrophin可用于幫助診斷DMD和BMD；Sarcoglycans、Dysferlin、Caveolin-3等可 幫助鑒別肢帶型肌營養(yǎng)不良；Emerin、 Collagen 、 LaminA/C等可用于 鑒別診斷特殊類型的先天性肌營養(yǎng)不良等炎性肌病相關(guān)抗體：MHC-I、LCA等相關(guān)蛋白在診斷中的作用Dystrophin可用于幫助診斷DMD和BMD；相關(guān)蛋白在Dystr

10、ophinopathyDystrophin-CDystrophin-NDystrophin-RodNormalDystrophinopathyDystrophin-CDyDysferlinNormalDysferlinDysferlinNormalDysferlin電鏡其他酶組織化學(xué)非特異酯酶染色(NSE)、堿性磷酸酶染色(AKP) 、酸性磷酸酶染色(ACP)、乙酰膽堿酯酶染色（AChE)等肌肉活檢檢測項目電鏡肌肉活檢檢測項目電鏡對肌病超微結(jié)構(gòu)的觀察肌肉活檢檢測項目電鏡對肌病超微結(jié)構(gòu)的觀察肌肉活檢檢測項目電鏡對肌病超微結(jié)構(gòu)的觀察肌肉活檢檢測項目電鏡對肌病超微結(jié)構(gòu)的觀察肌肉活檢檢測項目電鏡對肌病

11、超微結(jié)構(gòu)的觀察肌肉活檢檢測項目電鏡對肌病超微結(jié)構(gòu)的觀察肌肉活檢檢測項目肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程 三、各項染色檢測方法四、骨骼肌疾病的基本病理變化五、神經(jīng)活檢簡介一、肌肉活檢簡介四、骨骼肌疾病的基本病理變化正常肌纖維組織結(jié)構(gòu)HE-Sarcoglycan正常肌纖維組織結(jié)構(gòu)HE-Sarcoglycan正常肌纖維ATPase Ph4.6NADH正常肌纖維ATPase Ph4.6NADH肌纖維大小形態(tài)的改變：萎縮、肥大、內(nèi)核纖維及核鏈肌纖維分布的異常：同型肌纖維群組化改變肌纖維成群萎縮（小群或大群） 肌束周肌纖維萎縮某一型肌纖維占優(yōu)勢骨骼肌疾病的基

12、本病理變化肌纖維大小形態(tài)的改變：骨骼肌疾病的基本病理變化肌纖維的壞死和再生肌纖維的壞死 吞噬作用肌纖維的再生肌纖維的裂解骨骼肌疾病的基本病理變化肌纖維的壞死和再生骨骼肌疾病的基本病理變化單個肌纖維結(jié)構(gòu)的變化靶纖維 中央核心蟲噬狀纖維 環(huán)狀纖維 胞漿小體 線粒體聚集骨骼肌疾病的基本病理變化單個肌纖維結(jié)構(gòu)的變化靶纖維 中央核心骨骼肌疾病的基本病理變化間質(zhì)炎細(xì)胞反應(yīng)及纖維增生改變某些肌病中肌纖維間質(zhì)中可見淋 巴細(xì)胞、組織細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤 及間質(zhì)纖維化骨骼肌疾病的基本病理變化間質(zhì)炎細(xì)胞反應(yīng)及纖維增生改變某些肌病中肌纖維間質(zhì)中可見淋 巴肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病

13、臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)

14、活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件骨骼肌疾病的基本病理變化骨骼肌疾病的基本病理變化臨床-病理-基因檢測相結(jié)合神經(jīng)肌肉疾病診斷臨床-病理-基因檢測相結(jié)合神經(jīng)肌肉疾病診斷一、肌肉活檢簡介二、肌肉活檢技術(shù)流程 三、各項染色檢測方法四、骨骼肌疾病的基本病理變化 五、神經(jīng)活檢簡介一、肌肉活檢簡介神經(jīng)

15、活檢簡介神經(jīng)活檢簡介周圍神經(jīng)疾病指原發(fā)于周圍神經(jīng)系統(tǒng)結(jié) 構(gòu)或者功能損害的疾病，與營養(yǎng)代謝、 血管炎、腫瘤、遺傳、免疫、外傷或機(jī) 械壓迫等多種原因相關(guān)。周圍神經(jīng)疾病指原發(fā)于周圍神經(jīng)系統(tǒng)結(jié) 構(gòu)或者功能損害的疾病，與神經(jīng)活檢簡介神經(jīng)活檢通常采用腓腸神經(jīng)活檢方法, 結(jié)合組織化學(xué)及電鏡技術(shù)，獲取診斷 依據(jù)腓腸神經(jīng)活檢具有創(chuàng)傷性，造成局部皮 膚感覺減退或缺失，應(yīng)用范圍有限神經(jīng)活檢簡介神經(jīng)活檢通常采用腓腸神經(jīng)活檢方法, 結(jié)合組織化學(xué)1、活檢結(jié)論有決定性意義；2、結(jié)論雖不能確診, 但具有鑒別診斷意義；3、是結(jié)論無助于病因診斷, 但可提供神經(jīng)損 害程度等方面的評價。神經(jīng)活檢診斷價值評價1、活檢結(jié)論有決定性意義；

16、神經(jīng)活檢診斷價值評價神經(jīng)活檢的應(yīng)用范圍在經(jīng)過全面的臨床、電生理、實驗室 檢查后仍不能確定診斷的周圍神經(jīng)病， 可考慮進(jìn)行神經(jīng)活檢輔助診斷；可進(jìn)行周圍神經(jīng)活檢的疾病包括遺傳性運動感覺性周圍神經(jīng)病、遺傳性感覺自主性周 圍神經(jīng)病、結(jié)締組織病繼發(fā)的周圍神經(jīng)病、感染性疾 病、淀粉樣變性、結(jié)節(jié)病性神經(jīng)病、巨軸索神經(jīng)病、 中毒性神經(jīng)病及代謝性疾病等等。神經(jīng)活檢的應(yīng)用范圍在經(jīng)過全面的臨床、電生理、實驗室 檢查后仍常規(guī)組織病理蘇木素-伊紅染色（HE）特殊組織化學(xué)染色砂羅鉻花青 、PAS、剛果紅、甲苯胺藍(lán)免疫組織化學(xué)技術(shù)CD8、CD20、CD163、NF、MBP透射電鏡技術(shù)神經(jīng)活檢相關(guān)技術(shù)方法常規(guī)組織病理蘇木素-伊

17、紅染色（HE）神經(jīng)活檢相關(guān)技術(shù)方法診斷神經(jīng)肌肉疾病的主要手段；觀察神經(jīng)纖維基本組織結(jié)構(gòu)及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征常規(guī)組織病理蘇木素-伊紅染色（HE）診斷神經(jīng)肌肉疾病的主要手段；常規(guī)組織病理蘇木素-伊紅染色（特殊組織化學(xué)染色砂羅鉻花青、PAS、剛果紅、甲苯胺藍(lán)觀察神經(jīng)纖維組織結(jié)構(gòu)特征及相關(guān)物質(zhì)的 異常沉積；特殊組織化學(xué)染色砂羅鉻花青、PAS、剛果紅、甲苯胺藍(lán)免疫組織化學(xué)技術(shù)CD8、CD20、CD163、NF、MBP輔助觀察炎性反應(yīng)改變及有髓神經(jīng)纖 維髓鞘變化。免疫組織化學(xué)技術(shù)CD8、CD20、CD163、NF、MBP透射電鏡技術(shù)觀察神經(jīng)纖維的超微結(jié)構(gòu)和各種特殊 成分，對超微結(jié)構(gòu)的形態(tài)變化提供直觀依據(jù)透射電鏡技術(shù)觀察神經(jīng)纖維的超微結(jié)構(gòu)和各種特殊 成分，對超微結(jié)周圍神經(jīng)活檢可以判定神經(jīng)損傷位于軸 索、髓鞘或間質(zhì), 為臨床定性診斷或鑒 別診斷提供相關(guān)依據(jù)及診斷思路。周圍神經(jīng)活檢可以判定神經(jīng)損傷位于軸 索、髓鞘或間質(zhì), 為臨床肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在神經(jīng)肌肉病臨床診斷中的應(yīng)用課件肌肉神經(jīng)活檢在