四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及機(jī)自信是向成功邁出的第一步四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及機(jī)四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及機(jī)自信是向成功邁出的第一步四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及

機(jī)制研究許穎智，張軍平，李明，彭立，李良軍，張光銀，楊萃，周亞男天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院研究背景WHO發(fā)達(dá)國家低、中等收入國家1000萬1900萬死于心血管疾病的患者數(shù)目500萬600萬2007年，271.6萬人死于CVD。每天有7420人死于CVD，11.6秒死亡1例。四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及機(jī)自信是四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及

機(jī)制研究許穎智，張軍平，李明，彭立，李良軍，張光銀，楊萃，周亞男天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響及

機(jī)制研研究背景WHO發(fā)達(dá)國家低、中等收入國家1000萬1900萬死于心血管疾病的患者數(shù)目500萬600萬2007年，271.6萬人死于CVD。每天有7420人死于CVD，11.6秒死亡1例。研究背景WHO發(fā)達(dá)國家低、中等收入國家1000萬190罪犯斑塊不在于斑塊大小而是斑塊結(jié)構(gòu)、成分斑塊破裂70%急性心臟事件的病理因素罪犯斑塊不在于斑塊大小而是斑塊結(jié)構(gòu)、成分斑塊破裂急性心臟事件易損斑塊形成過程及病理特征易損斑塊形成過程及病理特征thinfibrouscap(<65um)biglipidcoreinflammatoryneoangiogenesis易損斑塊形成過程及病理特征extracellularmatrixdegradationthinfibrouscap(<65um)bigl治療現(xiàn)狀調(diào)脂、抗血小板聚集、介入性冠狀動脈治療、冠狀動脈旁路移植術(shù)等血管再通治療但是每年仍有約兩千萬人死于急性心血管事件治療現(xiàn)狀調(diào)脂、抗血小板聚集、介入性冠狀動脈治療、冠狀動脈旁路亟待解決的問題怎樣穩(wěn)定易損斑塊，保護(hù)血管，是當(dāng)前研究的重點和難點圍繞機(jī)制，開發(fā)思路，深入研究，使中醫(yī)藥在AS治療彰顯優(yōu)勢中醫(yī)藥具有多靶點、多途徑的整體調(diào)節(jié)作用亟待解決的問題怎樣穩(wěn)定易損斑塊，保護(hù)血管，是當(dāng)前研究的重點和毒瘀滋陰解毒活血脂質(zhì)炎癥反應(yīng)血管新生痰瘀熱毒虛陰中醫(yī)AS病機(jī)認(rèn)識毒瘀滋陰解毒活血脂質(zhì)炎癥反應(yīng)痰瘀熱毒虛陰滋陰解毒活血－四妙勇安湯四妙勇安湯最早見于華佗《神醫(yī)秘傳》，曰:“內(nèi)服藥用金銀花三兩，玄參三兩，當(dāng)歸二兩，甘草一兩，水煎服。”清代醫(yī)家鮑相敖將此方命名為“四妙勇安湯”，收載于《驗方新編》中，具有清養(yǎng)結(jié)合、毒瘀并驅(qū)的功效，清解絡(luò)中之毒，化解絡(luò)中之瘀，滋養(yǎng)絡(luò)脈之體臨床應(yīng)用：周圍血管病、下肢閉塞性動脈粥樣硬化、冠心病作用機(jī)制：抗凝、抗氧化、促血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用動脈粥樣硬化？途徑？滋陰解毒活血－四妙勇安湯四妙勇安湯最早見于華佗《神醫(yī)秘傳》，

一、動脈粥樣硬化易損斑塊模型建立

一、動脈粥樣硬化易損斑塊1w4w經(jīng)股動脈球囊拉傷術(shù)開始予高脂飲食100g/d造模方法牛血清白蛋白250mg/kg2w

取材10w維持高脂飲食1w4w經(jīng)股動脈球囊拉傷術(shù)開始予高脂飲食100g/d造模方法經(jīng)股動脈球囊拉傷術(shù)左腎動脈左髂總動脈右腎動脈右髂總動脈主動脈弓球囊（壓力約為2個大氣壓）左股動脈備皮插管縫合經(jīng)股動脈球囊拉傷術(shù)左腎動脈左髂總動脈右腎動脈右髂總動脈主動脈評價指標(biāo)血脂病理形態(tài)纖維帽厚度脂池面積炎癥因子易損指數(shù)新生血管評價指標(biāo)血脂

實驗結(jié)果

1.復(fù)合造模對血脂及ox-LDL影響造模后TC、LDL-C、ox-LDL成增高趨勢。實驗結(jié)果

1.復(fù)合造模對血脂及o2.復(fù)合造模對血清炎癥因子水平影響與對照組比較*P<0.01造模因素干預(yù)后，血清炎癥因子明顯增高，CRP明顯增高2.復(fù)合造模對血清炎癥因子水平影響與對照組比較*P<0.03.復(fù)合造模對內(nèi)膜的影響MZHE染色(100倍)造模因素干預(yù)后，內(nèi)膜明顯增厚，纖維帽變薄,形成AS斑塊

3.復(fù)合造模對內(nèi)膜的影響MZHE染色(100倍)造模因素干預(yù)4.復(fù)合造模對脂核、易損指數(shù)影響與對照組比較*P<0.01VI=(ELA+CD68)/(CA+SMA)造模因素干預(yù)后，脂核增大，細(xì)胞外脂質(zhì)增加，炎癥細(xì)胞增多，平滑肌細(xì)胞減少，膠原纖維增多；易損指數(shù)增大4.復(fù)合造模對脂核、易損指數(shù)影響與對照組比較*P<0.ZMZMZMZM造模因素干預(yù)后，脂核增大，細(xì)胞外脂質(zhì)增加，炎癥細(xì)胞增多，平滑肌細(xì)胞減少，膠原纖維增多；易損指數(shù)增大。Masson染色(100倍)油紅O染色(400倍)CD68免疫組化染色(DAB顯色，400倍)

α-SMA免疫組化染色(DAB顯色，400倍)5.復(fù)合造模對脂核、易損指數(shù)影響ZMZMZMZM造模因素干預(yù)后，脂核增大，細(xì)胞外脂質(zhì)6.復(fù)合造模對斑塊內(nèi)CD31及VEGF表達(dá)的影響CD31造模因素干預(yù)后，斑塊內(nèi)可見內(nèi)皮細(xì)胞組成的連續(xù)或不連續(xù)的小管腔,CD31和VEGF表達(dá)呈強(qiáng)陽性。VEGF免疫組化染色(DAB顯色，400倍)ZMZM6.復(fù)合造模對斑塊內(nèi)CD31及VEGF表達(dá)的影響CD31小結(jié)本實驗?zāi)M人AS發(fā)病機(jī)制綜合多種因素，以高脂飼喂疊加免疫生物損傷和內(nèi)皮損傷的復(fù)合因素制作模型，更接近于人體AS的發(fā)生發(fā)展過程通過對家兔血脂、血清炎癥標(biāo)志物及斑塊的病理形態(tài)、脂質(zhì)成分、炎癥反應(yīng)、血管新生、膠原含量、易損指數(shù)等的綜合分析，證實建模成功可操作性、重復(fù)性、穩(wěn)定性、易于評價小結(jié)本實驗?zāi)M人AS發(fā)病機(jī)制綜合多種因素，以高脂

二、四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響二、四妙勇安湯對動脈粥樣硬化易損研究方法易損斑塊動物模型建立成功后，以辛伐他?。?mg/kg)作為陽性對照，觀察四妙勇安湯對模型病理形態(tài)、易損指數(shù)、斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)的影響，明確其穩(wěn)定斑塊的作用機(jī)制。研究方法易損斑塊動物模型建立成功后，以辛伐他汀（斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量1α-SMA，MMP-9，NF-κB

234評價指標(biāo)膠原含量（CA）內(nèi)中膜及纖維帽厚度斑塊內(nèi)1α-SMA，MMP-9，234評價指標(biāo)膠原含量1.四妙勇安湯對主動脈內(nèi)膜及纖維帽的影響與正常組比較P<0.01,與模型組比較×P<0.05,#P<0.01。ZMXS模型組：內(nèi)膜明顯增厚;“纖維帽”較薄;內(nèi)皮部分脫落，大量脂質(zhì)沉積，泡沫細(xì)胞及炎性細(xì)胞浸潤;中膜平滑肌減少，彈力板不連續(xù)，彈力纖維斷裂溶解給藥組：內(nèi)膜增厚，有少量泡沫細(xì)胞形成，內(nèi)皮完整，中膜平滑肌增殖，彈力板尚完整HE染色100倍1.四妙勇安湯對主動脈內(nèi)膜及纖維帽的影響與正常組比較P<0.2.四妙勇安湯對斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量的影響模型組ELA,LNA/PA,CD68高于正常組，四妙勇安湯可降低易損指數(shù)，降低LCA/PA、ELA、CD68陽性面積百分比。與正常組比較，*P<0.01；與模型組比較，×P<0.05,#P<0.01ELA(油紅“O”染色)40×CD68免疫組化染色（DAB顯色）40×正常組模型組辛伐組四妙組2.四妙勇安湯對斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量的影響模型組ELA,LNA/P

CA(Masson染色)40×

α-SMA免疫組化染色（DAB顯色）40×

3.四妙勇安湯對斑塊內(nèi)CA、α-SMA的影響組別nCAα-SMA正常組100.68±0.2916.7±7.80模型組89.89±1.48*3.69±1.51*辛伐組1018.67±3.60*▲9.03±3.80△四妙組1018.29±4.37*▲16.50±3.23▲注：與正常組比較*P<0.01,與模型組比較△P<0.05,▲P<0.01模型組斑塊內(nèi)CA高于正常組,α-SMA低于正常組，四妙勇安湯可升高斑塊內(nèi)CA、α-SMA陽性面積百分比。CA(Masson染色)α-SMA免疫組化染色3.四妙勇安4.四妙勇安湯對斑塊內(nèi)MMP-9,NF-κB的影響與正常組比較P<0.01,與模型組比較×P<0.05,#P<0.01。模型組斑塊內(nèi)MMP-9,NF-κB蛋白表達(dá)明顯增高，四妙勇安湯能夠抑制MMP-9,NF-κB蛋白表達(dá)4.四妙勇安湯對斑塊內(nèi)MMP-9,NF-κB的影響與正常組討論運用復(fù)合因素造模方法建立兔AS斑塊模型，并從血脂、血清炎癥標(biāo)志物、主動脈病理形態(tài)、纖維帽厚度、斑塊內(nèi)炎癥反應(yīng)、脂質(zhì)成分、血管新生、膠原含量、易損指數(shù)等方面綜合分析，證實建模成功依照動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定“陰虛毒瘀”的中醫(yī)病機(jī)。運用具有滋陰活血解毒之功效的四妙勇安湯對動脈粥樣硬化模型兔進(jìn)行干預(yù)，明確其穩(wěn)定AS易損斑塊的作用機(jī)理討論運用復(fù)合因素造模方法建立兔AS斑塊模型，并從血脂、血四妙勇安湯可延緩血管壁的病變進(jìn)展，降低內(nèi)膜厚度及脂核面積、增加纖維帽厚度抑制降低斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量、使具有收縮功能的平滑肌增多、增加膠原含量，從而降低易損指數(shù)，使斑塊趨于穩(wěn)定狀態(tài)討論四妙勇安湯可延緩血管壁的病變進(jìn)展，降低內(nèi)膜厚度及脂核面積、增討論抑制斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)降解抑制MMP-9表達(dá)可能與NF-κB細(xì)胞信號通路有關(guān)是否還涉及到其它信號通路及通路的上下游基因的初步表達(dá)情況如何還需要進(jìn)一步探討討論抑制斑塊內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)降解謝謝！謝謝！謝謝！21、要知道對好事的稱頌過于夸大，也會招來人們的反感輕蔑和嫉妒。——培根

22、