雙重或多重免疫組化標(biāo)記雙重或多重免疫組化標(biāo)記第六章雙重或多重免疫組化標(biāo)記(p111)第六章基本原理雙重或多重標(biāo)記是利用免疫學(xué)和細(xì)胞化學(xué)原理,在同一張切片上同時(shí)采用或先后采用不同顏色的熒光色素或酶促產(chǎn)物,或采用不同直徑大小顆粒膠體金來(lái)原位示蹤組織或細(xì)胞內(nèi)不同抗原大分子物質(zhì)的項(xiàng)標(biāo)記染色技術(shù)?；驹碛捎诖隧?xiàng)技術(shù)可在同一張切片上同時(shí)顯示兩種或兩種以上不同抗原成分(定性、定位、定量),因而使組織內(nèi)不同抗原成分相互間功能關(guān)系的觀察更加直觀,操作需遵循的原則和要求基本上與單標(biāo)免疫組化方法雷同,但差異是流程長(zhǎng),脫片機(jī)率更高,前后重染色試劑間有交叉干擾等由于此項(xiàng)技術(shù)可在同一張切片上同時(shí)zz雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件二、技術(shù)類型)雙重或多重免疫熒光標(biāo)記染色采用呈現(xiàn)不同顏色的熒光色素配伍,分別標(biāo)記不同的抗體,再通過(guò)各自與同切片上的相應(yīng)抗原特異性結(jié)合而加以區(qū)別顯示所建立起來(lái)的雙重或多重免疫組化染色技術(shù)。二、技術(shù)類型熒光素配伍:異硫氰酸熒光素(FITC)—翠綠色,常與羅丹明(RB200或異硫氰酸四甲基羅丹明(TRITO)配伍,后者呈紅色方法敏感、特異,需選用各自特定的激發(fā)濾光片分別觀察或二次曝光顯影,樣本不能長(zhǎng)期保存,組織結(jié)構(gòu)背景不清晰熒光素配伍:異硫氰酸熒光素技術(shù)類型有直接法和間接法之分。前者特異、快速,后者敏感、多用所用抗體試劑可為異種動(dòng)物抗體,也可為同種動(dòng)物抗體異種動(dòng)物抗體?；旌蠎?yīng)用,操作步驟少,脫片率相對(duì)較低。技術(shù)類型有直接法和間接法之分。前同種動(dòng)物抗體多分別應(yīng)用,操作步驟加倍,脫片機(jī)率相對(duì)較高,前后重免疫熒光標(biāo)記交叉重疊機(jī)會(huì)多,需用酸性洗脫或多聚甲醛蒸氣處理。同種動(dòng)物抗體多分別應(yīng)用,操作步驟操作舉例:垂體腺瘤-ACTH與GH雙重免疫熒光標(biāo)記染色(間接法)(1)石蠟切片,厚5μm,常規(guī)二甲苯脫蠟,梯度酒精水化,入PBS(pH7.4,0.01mo/L)操作舉例:垂體腺瘤-ACTH與GH雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件雙重或多重免疫組化標(biāo)記共44張課件END16、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。——華盛頓

17、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息?！_素·貝克

18、最大的挑戰(zhàn)和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——馬云

19、自己活著，就是