第一節(jié)革蘭氏陽(yáng)性球菌一葡萄球菌屬二鏈球菌屬一、葡萄球菌屬葡萄球菌分布廣泛。致病性葡萄球菌常引起各種化膿性疾患、敗血癥或膿毒敗血癥。當(dāng)污染食品時(shí)，可引起食物中毒。

1、一般特征圓形，直徑0.5-1.5um，排列葡萄串狀，革蘭氏陽(yáng)性。需氧或兼性厭氧，無(wú)運(yùn)動(dòng)力?？稍谄胀ㄅ囵B(yǎng)基、血瓊脂等生長(zhǎng)。致病性菌株多能產(chǎn)生黃色或檸檬色素。

2、分類葡萄球菌屬分為3種：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。3、金黃色葡萄球菌常見(jiàn)的致病菌多為金黃色葡萄球。

(1)培養(yǎng)及生化特性：在普通瓊脂平板形成濕潤(rùn)、光滑、隆起的圓形菌落，直徑1-2mm，有時(shí)可達(dá)4-5mm。菌落顏色依菌株而異，初呈灰白色，繼而為金黃色。在血液瓊脂平板形成的菌落較大，產(chǎn)溶血素的菌株多為病原菌，在菌落周?chē)尸F(xiàn)明顯的β溶血。

(2)抗原及變異：葡萄球菌細(xì)胞壁上的抗原構(gòu)造比較復(fù)雜，含有多糖及蛋白質(zhì)兩類抗原。

多糖抗原具有型特異性。蛋白抗原人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A(SPA)，來(lái)自動(dòng)物源菌株則少見(jiàn)。SPA能與人、猴豬、犬及幾乎所有哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白的Fc端結(jié)合，結(jié)合后的IgG仍能與相應(yīng)抗原特異性反應(yīng)。用于免疫學(xué)及診斷技術(shù)（協(xié)同凝集試驗(yàn)）。SPA與IgG結(jié)合形成的復(fù)合物在機(jī)體內(nèi)具有生物學(xué)作用（趨化性、抵抗吞噬、損傷血小板等）。(3)抵抗力及藥物敏感性在無(wú)芽孢菌中，葡萄球菌的抵抗力較強(qiáng)。在干燥的膿汁或血液中可存養(yǎng)2-3個(gè)月，80℃30min才能殺死。對(duì)龍膽紫、洗必泰、消毒凈、新潔爾滅、度米芬等敏感。對(duì)磺胺類、青霉素、金霉素、紅霉素、新霉素等抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。

(4)致病性及毒力因子金色葡萄球菌可產(chǎn)生多種毒素和酶，故致病性強(qiáng)。常引起化膿性疾?。▌?chuàng)傷感染、膿腫、乳腺炎、敗血癥、膿毒敗血癥等）及毒素性疾?。ū黄咸亚蚓廴镜氖澄锘蝻暳峡梢鹑嘶騽?dòng)物的食物中毒性疾?。?。毒力因子：

葡萄球菌蛋白A、莢膜、毒素及酶。

α毒素

α溶血素，與牛羊的壞疽性乳腺炎有關(guān)，它還導(dǎo)致白細(xì)胞等崩解。α毒素是不耐熱的蛋白質(zhì)，對(duì)多種哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞有溶血作用，而從動(dòng)物分離的菌株常見(jiàn)β溶血素。

腸毒素引致人類食物中毒，表現(xiàn)嘔吐、腹瀉。腸毒素是結(jié)構(gòu)相似的一組蛋白質(zhì)，耐熱抗酸，能經(jīng)受100℃30min或胃蛋白酶的水解。

凝固酶多數(shù)致病株能同時(shí)產(chǎn)生兩種凝固酶，一種分泌于菌體外（游離凝固酶）。另一種結(jié)合在菌體表面（結(jié)合凝固酶），它們能使含有抗凝劑的家兔或人的血漿凝固，稱為凝固酶。凝固酶耐熱，經(jīng)100℃30min或高壓滅菌僅降低少量活性。凝固酶有助致病菌株抵御宿主體內(nèi)吞噬細(xì)胞和殺菌物質(zhì)的作用，同時(shí)也使感染局限化。檢測(cè)葡萄球菌的凝固酶是鑒別菌株的重要指標(biāo)，致病株多數(shù)為凝固酶陽(yáng)性。另外還有耐熱核酸酶、溶纖維蛋白酶、透明質(zhì)酸酶，又稱為擴(kuò)散因子。二鏈球菌屬鏈球菌種類多、分布廣。有些可致人或動(dòng)物的各種化膿性疾病、肺炎、乳腺炎、敗血癥等。

1、分類按溶血性分為α、β、γ3類。

α型溶血鏈球菌在菌落周?chē)纬刹煌该鞯牟菥G色溶血環(huán)，紅細(xì)胞未完全溶解，血紅蛋白變成綠色。此菌致病力不強(qiáng)，多為條件性菌。

β型溶血鏈球菌菌落周?chē)纬赏耆该鞯娜苎h(huán)，紅細(xì)胞完全溶解。這類菌致病力強(qiáng)，常引起人及動(dòng)物各種疾病。鏈球菌

細(xì)胞壁脂磷壁酸(LFA)與菌體吸附于宿主黏膜有關(guān)。其莢膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用。

5、抵抗力本屬細(xì)菌的抵抗力不強(qiáng)。對(duì)青霉素、磺胺類藥物敏感，易產(chǎn)生耐藥性。

6、免疫性鏈球菌的抗原結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，機(jī)體感染后有多種抗體產(chǎn)生，已知抗M蛋白的抗體具有保護(hù)作用，M蛋白有多種抗原型，各型間缺乏有效的交叉保護(hù)。我國(guó)研制的豬、羊鏈球菌疫苗有較好的免疫效果。7、微生物學(xué)診斷病料（膿汁、乳汁、血液、組織）涂片染色鏡檢，見(jiàn)革蘭氏陽(yáng)性、具莢膜、成對(duì)或鏈狀排列的球菌，可作初步診斷。確診需用血液瓊脂平板分離培養(yǎng)，觀察菌落、溶血等特征，并進(jìn)行生理生化試驗(yàn)。用群、型特異性血清作血清學(xué)試驗(yàn)，對(duì)病原菌定群或定型。

8、主要致病菌

無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌：三種鏈球菌是牛、山羊和綿羊的急性、慢性乳腺炎的病原菌之一，其中最常見(jiàn)的是無(wú)乳鏈球菌。

馬鏈球菌獸疫亞種(舊稱獸疫鏈球菌)：可致多種家畜的炎癥及敗血病，包括馬創(chuàng)傷感染、敗血癥、子宮炎、流產(chǎn)、駒臍帶炎；牛乳腺炎、子宮炎；豬敗血癥、關(guān)節(jié)炎；羊敗血癥、心包炎、胸膜炎、肺炎；雞敗血癥等。

馬鏈球菌馬亞種(舊稱馬腺疫鏈球菌)：是引起馬腺疫的病原體。感染馬下頜淋巴結(jié)形成膿灶。

肺炎鏈球菌(又名肺炎球菌、肺炎雙球菌)：常引起人大葉性肺炎或腦膜炎，亦可致幼畜肺炎或敗血癥。

豬鏈球菌：是豬鏈球菌病的重要致病菌，并可感染人而致死。第二節(jié)革蘭氏陰性桿菌一、埃希氏菌屬二、沙門(mén)氏菌屬三、巴氏桿菌屬四、假單胞菌屬五、布氏桿菌屬一、埃希氏菌屬本屬現(xiàn)有5個(gè)種，其中最重要的種是大腸埃希菌(E.coli)，俗稱大腸桿菌，下分血清型。本菌系人和溫血?jiǎng)游锬c道內(nèi)正常菌群成員之一。大腸桿菌常被用作糞便直接或間接污染的檢測(cè)指標(biāo)。本菌還是分子生物學(xué)和基因工程中重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象。大腸桿菌的形態(tài)大腸桿菌的形態(tài)H抗原：是一類不耐熱的鞭毛蛋白抗原，加熱至80℃或經(jīng)乙醇處理后即破壞其抗原性。每一有動(dòng)力的菌株僅含有一種H抗原。大腸桿菌抗原可用O：K：H排列表示其血清型。如O8:K23(L):H19，表示該菌具有O抗原8，L型K抗原23，H抗原為19。

4、致病性條件性大腸桿菌、病原性大腸桿菌。與動(dòng)物疾病有關(guān)的病原性大腸桿菌可分為五類：

產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)、產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌(SLTEC)、腸致病性大腸桿菌(EPEC)、敗血性大腸桿菌(SEPEC)及尿道致病性大腸桿菌(UPEC)。(1)產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)

ETEC系一類致人和幼畜(初生仔豬黃痢、犢牛、羔羊及斷奶仔豬腹瀉)腹瀉的最常見(jiàn)的病原性大腸桿菌。

其毒力因子：主要由黏附素性菌毛和腸毒素兩類構(gòu)成。初生幼畜被ETEC感染后常因劇烈水樣腹瀉和迅速脫水死亡，發(fā)病率和死亡率均很高。黏附性菌毛：能黏附于宿主的小腸上皮細(xì)胞，故又稱其為黏附素或定居因子，對(duì)其抗原稱作黏附素抗原或定居因子抗原。

腸毒素：是ETEC在體內(nèi)或體外生長(zhǎng)時(shí)產(chǎn)生并分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素?？煞譃椴荒蜔崮c毒素(LT)和耐熱腸毒素(ST)二種?？墒鼓c細(xì)胞分泌機(jī)能亢進(jìn)，引起水樣腹瀉和迅速脫水。

LT對(duì)熱敏感，有抗原性，65℃30min可滅活。ST耐熱，無(wú)抗原性，耐100℃加熱30min不失活，能抵抗多種蛋白酶作用。(2)產(chǎn)類志賀毒素大腸桿菌(SLTEC)

系一飛在體內(nèi)或體外生長(zhǎng)時(shí)可產(chǎn)生類志賀毒素(SLT)的病原性大腸桿菌。

在動(dòng)物SLTEC可致豬的水腫病，以頭部、腸系膜和胃壁漿液性水腫為特征，常伴有共濟(jì)失調(diào)、麻痹或驚厥等神經(jīng)癥狀，發(fā)病率較低但致死率很高。發(fā)現(xiàn)SLTEC與犢牛出血性結(jié)腸炎有關(guān)，在致幼兔腹瀉的大腸桿菌菌株中也查到SLT。

其毒力因子包括粘附性菌毛和致水腫病2型類志賀毒素。

粘附性菌毛：F18菌毛是豬水腫病的SLTEC菌株的一個(gè)重要的毒力因子，它有助于細(xì)菌在豬腸黏膜上皮細(xì)胞定居和繁殖。豬水腫病眼瞼水腫、充血前肢呈跪爬姿勢(shì)5、微生物學(xué)診斷

(1)采病料分離培養(yǎng)：敗血癥病例采集內(nèi)臟組織(肝脾腎等)，對(duì)幼畜腹瀉及豬水腫病病例應(yīng)取其各段小腸內(nèi)容物或黏膜刮取物以及相應(yīng)腸段的腸系膜淋巴結(jié)，分別在麥康凱平板和血平板上劃線分離培養(yǎng)。

(2)可疑菌落生化鑒定：挑取麥康凱平板上的紅色菌落或血平板上呈β溶血(仔豬黃痢與水腫病菌株)的典型菌落幾個(gè)，分別轉(zhuǎn)種三糖鐵（TSI）培養(yǎng)基和普通瓊脂斜面做初步生化鑒定和純培養(yǎng)。(3)純培養(yǎng)物抗原鑒定：將TSI瓊脂反應(yīng)模式符合埃希氏菌屬的生長(zhǎng)物或其相應(yīng)的普通斜面純培養(yǎng)物做O、K抗原鑒定。

(4)檢測(cè)毒力因子確定其屬于何類致病性大腸桿菌。二、沙門(mén)氏菌屬沙門(mén)氏菌屬是一群革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，通常都以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)。在三糖鐵瓊脂上常產(chǎn)生H2S，大多沙門(mén)氏菌不發(fā)酵乳糖。絕大多數(shù)沙門(mén)氏菌對(duì)人和動(dòng)物有致病性，能引起人和動(dòng)物的多種不同臨床表現(xiàn)的沙門(mén)氏菌病，并為人類食物中毒的主要病原之一，在醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)和公共衛(wèi)生上均十分重要。沙門(mén)氏菌血清復(fù)雜，有2500種以上。幾乎包括所有對(duì)人和動(dòng)物致病的血清型菌株。1、形態(tài)及染色特性形態(tài)染色特性與同科其他菌屬相似，呈桿狀，0.7-1.5umX2.0-5.0um，革蘭氏陰性。除雞白痢沙門(mén)氏菌和雞傷寒沙門(mén)氏菌無(wú)鞭毛不運(yùn)動(dòng)外，其余均有周生鞭毛可運(yùn)動(dòng)，大多數(shù)有菌毛。

2、培養(yǎng)及生化特性本屬大多數(shù)細(xì)菌的培養(yǎng)特性與埃希氏菌屬相似。沙門(mén)氏菌在肉湯瓊脂上生長(zhǎng)貧瘠，形成較小的菌落。在腸道菌鑒別或選擇性培養(yǎng)基上，大多數(shù)菌株因不發(fā)酵乳糖而形成無(wú)色菌落。腸炎沙門(mén)氏菌(SEMx40,020)電鏡照片3、抗原及變異

沙門(mén)氏菌具有O、H、K和菌毛四種抗原。O和H抗原是其主要抗原，構(gòu)成沙門(mén)氏菌血清型抗原。

O抗原是耐熱多糖抗原，100℃2.5h不被破壞。一個(gè)菌體可有幾種O抗原成分，以數(shù)字表示。將有共同O抗原(群因子)的血清型菌歸為一群，以大寫(xiě)英文字母表示A-F。

H抗原是鞭毛抗原，有63種，不耐熱，60℃30-60min破壞。H抗原可分為第1相和第2相兩種。

K抗原是部分沙門(mén)氏菌表面包膜抗原，又稱為Vi抗原，不耐熱，60℃1h破壞。

本菌屬至少已有2500個(gè)血清型。對(duì)人和動(dòng)物致病的血清型絕大多數(shù)屬于A-F群，在疾病中經(jīng)常出現(xiàn)的卻不足50種。4、致病性本屬菌均有致病性，具有極其廣泛的動(dòng)物宿主。感染動(dòng)物后常導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病，并成為人類沙門(mén)氏菌病的傳染源之一。因此，沙門(mén)氏菌病是一種重要的人畜共患病。發(fā)病：本菌最常侵害幼、青年動(dòng)物，使之發(fā)生敗血癥、胃腸炎及其他組織局部炎癥。

對(duì)成年動(dòng)物則引起散發(fā)性或局限性沙門(mén)氏菌病，發(fā)生敗血癥的懷孕母畜可表現(xiàn)流產(chǎn)，在一定條件下亦引起流行性暴發(fā)。傳播：沙門(mén)氏菌常在動(dòng)物與動(dòng)物、動(dòng)物與人、人與人之間通過(guò)直接或間接的途徑傳·播，沒(méi)有中間宿主。主要傳染途徑是消化道。許多環(huán)境條件，如衛(wèi)生不良、過(guò)度擁擠、氣候惡鄉(xiāng)等均可增加易感動(dòng)物發(fā)病。

第一群：具有高度專嗜性沙門(mén)氏菌，它們只對(duì)人或某種動(dòng)物產(chǎn)生特定的疾病，例如雞白痢和雞傷寒沙門(mén)氏菌僅使雞和火雞發(fā)病，馬流產(chǎn)、牛流產(chǎn)和羊流產(chǎn)等沙門(mén)氏菌只引起相應(yīng)動(dòng)物的疫?。回i傷寒沙門(mén)氏菌僅侵害豬。第二群：是在一定程度適應(yīng)于特定動(dòng)物的偏嗜性沙門(mén)氏菌，如豬霍亂和都柏林沙門(mén)氏菌，分別是豬和牛羊的致病菌。第三群：是泛嗜性沙門(mén)氏菌，它們有廣泛宿主譜，能引起人和各種動(dòng)物的沙門(mén)氏菌病，具有重要的公共衛(wèi)生意義，如鼠傷寒和腸炎沙門(mén)氏菌等。5、致病性類型根據(jù)對(duì)宿主嗜性不同，可將沙門(mén)氏菌分成三群。雞白痢仔豬副傷寒

耳朵、鼻端等肢體末梢皮膚淤血，呈紫紅色。6、毒力因子沙門(mén)氏菌毒力因子有多種，主要有脂多糖(LPS)、腸毒素、細(xì)胞毒素及毒力基因等。

7、免疫性體液抗體與細(xì)胞免疫在抗沙門(mén)氏菌感染中都很重要。認(rèn)為細(xì)胞免疫在抗沙門(mén)氏菌感染中具有重要作用。

8、微生物學(xué)診斷

對(duì)未污染病料，直接接種普通瓊脂、血瓊脂或鑒別培養(yǎng)基平板分離細(xì)菌；對(duì)污染材料如飲水、糞便、飼料、腸內(nèi)容物和已敗壞組織等，常需要增菌培養(yǎng)基增菌后再行分離。

增菌培養(yǎng)基：最常用的有亮綠-膽鹽-四硫磺酸鈉肉湯、四硫磺酸鹽增菌液、亞硒酸鹽增菌液以及亮綠-胱氨酸-亞硒酸氫鈉增菌液等。這些培養(yǎng)基能抑制其他雜菌生長(zhǎng)而有利于沙門(mén)氏菌大量繁殖。鑒別培養(yǎng)基：麥康凱、伊紅美藍(lán)、SS、去氧膽鹽鈉-枸櫞酸鹽等瓊脂，絕大多數(shù)沙門(mén)氏菌因不發(fā)酵乳糖，故在這類平板上其菌落顏色與大腸桿菌不同?？梢澡b別。生化試驗(yàn)：挑可疑菌落分別接種三糖鐵(TSI)瓊脂和尿素瓊脂等培養(yǎng)，觀察其生化特性。

血清型分型：鑒定分離菌株的血清型，可應(yīng)用分群抗O血清(A-F群)作凝集試驗(yàn)，以鑒定其群別。也可用直接凝集、免疫熒光、ELISA、PCR等方法鑒定。9、防制目前的疫苗多限于預(yù)防各種家畜特有的沙門(mén)氏菌病，例如豬副傷寒、馬流產(chǎn)以及牛、羊的都柏林等沙門(mén)氏菌的滅活菌苗。三、巴氏桿菌屬本屬細(xì)菌已報(bào)道有20多種，多殺性巴氏桿菌是本屬中最重要的畜禽致病菌。

多殺性巴氏桿菌，是引起多種畜禽巴氏桿菌病(亦稱出血性敗血癥)的病原體，主要使動(dòng)物發(fā)生出血性敗血病或傳染性肺炎。

1、形態(tài)及染色為球桿狀或短桿狀菌，兩端鈍圓，大小為0.25~0.4umХ0.5~2.5um。單個(gè)存在，有時(shí)成雙排列。

病料涂片用瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí)，可見(jiàn)典型的兩極著色，即菌體兩端染色深中間淺，無(wú)鞭毛，不形成芽孢，新分離的強(qiáng)毒菌株有莢膜。革蘭氏染色陰性。2、培養(yǎng)及生化特性

需氧或兼性厭氧菌。對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較嚴(yán)格。在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)貧瘠，在麥康凱培養(yǎng)上不生長(zhǎng)。在加有血液、血清或微量血紅素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好。最適溫度為37℃，pH7.2-7.4。在血清瓊脂乎板上培養(yǎng)24h，可長(zhǎng)成淡灰白色、閃光的露珠狀小菌落。在血瓊脂平板上，長(zhǎng)成水滴樣小菌落，無(wú)溶血現(xiàn)象。

3、血清型

本菌主要以其菌體抗原和莢膜抗原區(qū)分血清型，前者有6個(gè)型，后者分為16個(gè)型。我國(guó)分離的禽多殺性巴氏桿菌以5:A為多，其次為8:A。4、抵抗力本菌抵抗力不強(qiáng)。在陽(yáng)光中暴曬1min，或在56℃15min或℃60℃10min，可被殺死。廄肥中可存活1個(gè)月，埋入地下的病死雞尸，經(jīng)4個(gè)月仍殘留活菌。在空氣干燥中2-3d可死亡。對(duì)青霉素、鏈霉素、磺胺類及許多新的抗菌藥物敏感。凍干菌種在低溫中可保存長(zhǎng)達(dá)26年。5、致病性與免疫性本菌是多種動(dòng)物的重要病原菌，對(duì)雞、鴨、鵝、野禽，豬、牛、羊、馬、兔等都可致病，急性型呈出血性敗血癥，迅速死亡；亞急性型呈出血性炎癥見(jiàn)于黏膜關(guān)節(jié)等部位；慢性型呈萎縮性鼻炎(豬、羊)、關(guān)節(jié)炎及局部化膿性炎癥等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠極易感染。常?？梢鹎莼魜y、豬肺疫等疫病。

D血清型的某些菌株能產(chǎn)生一種耐熱的外毒素，用此毒素接種豬可復(fù)制典型的豬萎縮性鼻炎(AR)，證明AR由產(chǎn)毒素的本菌與波氏桿菌混合感染所致，本菌起主導(dǎo)作用。

殺禽亞種的致病力與其內(nèi)毒素有關(guān)，可致禽霍亂，表現(xiàn)出血性敗血癥狀。動(dòng)物患病痊愈后，可獲得較強(qiáng)的免疫；已研制出多種滅活、弱毒菌苗。高免血清具有良好的預(yù)防和治療作用。6、微生物學(xué)診斷

(1)顯微鏡檢查：采取滲出液、心血、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓等新鮮病料涂片或觸片，以堿性美藍(lán)液或瑞氏染色液染色，顯微鏡檢查，如發(fā)現(xiàn)典型的兩極著色的短桿菌，結(jié)合流行病學(xué)及剖檢，可作初步診斷。(2)分離培養(yǎng)：用血瓊脂平板和麥康凱瓊脂同時(shí)進(jìn)行分離培養(yǎng)，麥康扎培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，在血瓊脂上生長(zhǎng)良好，菌落不溶血，革蘭氏染色為陰性球桿菌。必要時(shí)進(jìn)一步做生化試驗(yàn)。

(3)動(dòng)物試驗(yàn):

用病料研磨制成懸液，或用分離培養(yǎng)菌，皮下注射小鼠、家兔或鴿，動(dòng)物多在24~48h內(nèi)死亡?？捎每寡寤騿慰寺】贵w進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)鑒定莢膜抗原和菌體抗原型。7、防治豬群檢測(cè)血清抗體，淘汰陽(yáng)性豬，建立凈化豬群。雞豬均可注射滅活疫苗預(yù)防。也可用抗菌素防治。四、假單胞菌屬假單胞菌屬是一群革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，專性需氧，菌體單在，呈矢直或彎曲但不呈螺旋，不產(chǎn)生芽胞、莢膜及鞘膜，一般以端鞭毛運(yùn)動(dòng)；過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性，氧化酶多為陽(yáng)性。本屬細(xì)菌繁多，為環(huán)境常在細(xì)菌，致病菌較少，主要有：鼻疽桿菌、偽鼻疽桿菌和綠膿桿菌。1、鼻疽桿菌

本菌為中等大小、無(wú)芽胞、無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛的G-桿菌。在一般條件下專性需氧，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)緩慢；在馬鈴薯培養(yǎng)基上呈黃色粘稠的蜂蜜狀菌苔，在孔雀綠復(fù)紅培養(yǎng)基上呈淡綠色，在血平板上不溶血。本菌在自然條件下主要感染馬、驢、騾等單蹄獸，但也可感染人。單蹄獸感染后，在皮膚、粘膜、肺臟及其它器官上呈現(xiàn)典型的鼻疽結(jié)節(jié)和潰瘍。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中以豚鼠、倉(cāng)鼠和幼貓最易感。將本菌腹腔接種于雄性豚鼠后，可引起典型的睪丸炎和睪丸周?chē)祝G丸腫脹化膿而破潰即Strauss反應(yīng)，對(duì)本病的診斷有一定的價(jià)值。2、偽鼻疽桿菌本菌的形態(tài)染色特性與鼻疽桿菌相似，主要在生理生化特征上有些區(qū)別，如本可在麥康凱培養(yǎng)基上形成紅色菌落，而鼻疽桿菌不能生長(zhǎng)。本菌在自然條件下主要感染嚙齒動(dòng)物，但也可感染馬、牛、羊、豬、犬、貓和人。感染發(fā)病后，其主要臨床表現(xiàn)為急性敗血癥，但也可在皮膚、粘膜、肝臟、脾臟和淋巴結(jié)等處形成慢性的結(jié)節(jié)或膿腫病灶。3、綠膿桿菌也稱為銅綠假單胞菌，是廣泛分布于土壤、水和空氣中的一種細(xì)菌，在正常動(dòng)物和人的皮膚和消化道上也常常存在。本菌主要依靠其致死毒素、腸毒素、溶血毒素、胞外酶和內(nèi)毒素等致病，可引起多種動(dòng)物和人的創(chuàng)傷感染、泌尿系統(tǒng)感染和牛乳房炎，若侵入血流，則導(dǎo)致敗血癥。在臨床上，人燒傷感染、雞注射感染等，常有本菌的存在。綠膿桿菌五、布氏桿菌屬

布氏桿菌又名布魯氏桿菌，是多種動(dòng)物和人布氏桿菌病的病原，不僅危害畜牧生產(chǎn)，而且危害人類健康。

1、形態(tài)及染色特性本菌呈球形、球桿形或短桿形，新分離者趨向球形。0.5-0.7um*0.6-1.5um，多單在。不形成芽孢和莢膜，無(wú)鞭毛不運(yùn)動(dòng)，革蘭氏陰性。經(jīng)柯氏或改良Z-N、改良K氏等鑒別染色法染成紅色，可與其他細(xì)菌相區(qū)別。

2、培養(yǎng)及生化特性此屬細(xì)菌專性需氧，在初代分離培養(yǎng)時(shí)尚需5％-10％CO2。最適生長(zhǎng)溫度37℃，最適pH為6.6-7.4。血清和血液可促進(jìn)其生長(zhǎng)。布氏桿菌純培養(yǎng)物-----革蘭氏陰性的球桿菌3、種和生物型該屬包括6個(gè)種20個(gè)生物型，即馬爾他布氏桿菌生物型1-3、流產(chǎn)布氏桿菌生物型1-9、豬布氏桿菌生物型1-5、綿羊布氏桿菌、沙林鼠布氏桿菌和犬布氏桿菌。

4、抗原性

包括A、M及R抗原等表面抗原。

A抗原與M抗原：其抗原決定簇位于細(xì)胞壁的脂多糖蛋白復(fù)合物上，為外露的多糖鏈部分。光滑型布氏桿菌具有A和M兩種表面抗原。

R抗原：為細(xì)胞壁低蛋白含量的脂多糖復(fù)合物，是大多數(shù)非光滑型布氏桿菌的共同抗原決定簇。5、變異性綿羊種和犬種布氏桿菌是天然的R型種，其他種為S型。布氏桿菌最常見(jiàn)的變異是S-R變異，此種變異很少發(fā)生回變。

6、抵抗力本菌對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，在污染的土壤和水中可存活1-4個(gè)月，皮毛2-4個(gè)月，乳、肉食品中約2個(gè)月，糞便中120d，流產(chǎn)胎兒中至少75d，子宮滲出物中200d。但對(duì)濕熱的抵抗力不強(qiáng)，60℃加熱30min或70℃5min即殺死，煮沸立即死亡。對(duì)消毒劑的抵抗力也不強(qiáng)。

7、致病性本菌不產(chǎn)生外毒素，但有毒性較強(qiáng)的內(nèi)毒素。此內(nèi)毒素是細(xì)胞壁的脂多糖(LPS)成分。

本屬細(xì)菌可感染的動(dòng)物種類極多，目前查知者已有60多種，包括馬、牛、豬、綿羊、山羊、駱駝、鹿、兔、犬等各種家畜、野生哺乳動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物、鳥(niǎo)類、爬蟲(chóng)類、兩棲類和魚(yú)類。可引起人和多種動(dòng)物的布病（子宮炎、輸卵管炎、睪丸炎、關(guān)節(jié)炎等），是一種重要的人獸共患病，病理過(guò)程慢長(zhǎng)，經(jīng)濟(jì)危害極大。布氏桿菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染，豚鼠最為易感。

光滑型流產(chǎn)布氏桿菌入侵機(jī)體黏膜屏障后，被吞噬細(xì)胞吞噬成為胞內(nèi)寄生菌，并在淋巴結(jié)生長(zhǎng)繁殖形成感染灶。一旦侵入血流，則出現(xiàn)菌血癥。在不同種別和生物型及同型不同菌株間，毒力有相當(dāng)差異。對(duì)豚鼠致病性順序是馬爾他布氏桿菌≥豬布氏桿菌≥流產(chǎn)布氏桿菌>沙林鼠布氏桿菌≥犬布氏桿菌>綿羊布氏桿菌。流產(chǎn)的母牛從陰道排出污灰白色或棕紅色帶惡臭的分泌液母牛流產(chǎn)，產(chǎn)出發(fā)育比較完全的死胎母牛流產(chǎn),產(chǎn)出發(fā)育不完全的胎兒,全身腫脹,有出血斑8、微生物學(xué)診斷布氏桿菌病常表現(xiàn)為慢性或隱性感染，其診斷和檢疫主要依靠血清學(xué)檢查及變態(tài)反應(yīng)檢查。(1)細(xì)菌學(xué)檢查病料最好用流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物、肺、肝和脾及胎盤(pán)和羊水等。也可用乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜子宮、乳房、精囊、睪丸、附睪、淋巴結(jié)、骨髓和其他與局部病變的器官。

顯微鏡檢查：病料直接涂片，作革蘭氏和柯茲洛夫斯基染色鏡檢。若發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性、鑒別染色勾紅色的球狀桿菌或短小桿菌，即可作出初步的疑似診斷。

分離培養(yǎng)鑒定無(wú)污染病料可直接劃線接種于適宜培養(yǎng)基，5％-10％CO2環(huán)境，37℃培養(yǎng)。每3d觀察1次，如有細(xì)菌生長(zhǎng)，可挑選可疑菌落細(xì)菌鑒定。

(2)血清學(xué)檢查有多種檢查方法，血清中布氏桿菌抗體檢查和病料中布氏桿菌檢查兩類方法。

檢測(cè)細(xì)菌：用已知抗體可檢查病料中是否存在布氏桿菌，或分離培養(yǎng)物是否為布氏桿菌，比細(xì)菌學(xué)檢查法簡(jiǎn)便快速，因而具有較大實(shí)用價(jià)值。常用方法有熒光抗體技術(shù)、反向間接血扒試驗(yàn)、間接炭凝集試驗(yàn)以及免疫酶組化法染色等。

檢測(cè)抗體：動(dòng)物在感染布氏桿菌7-15d可出現(xiàn)抗體，檢測(cè)血清中的抗體是布氏桿菌病診斷和檢疫的主要手段。在實(shí)際工作中，最好用一種以上的方法相互配合。國(guó)內(nèi)常用玻板凝集試驗(yàn)、虎紅平板凝集試驗(yàn)、乳汁環(huán)狀試驗(yàn)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)或牧區(qū)大群檢疫，以試管凝集試驗(yàn)和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室最后確診。(3)變態(tài)反應(yīng)檢查皮膚變態(tài)反應(yīng)一般在感染后20~25d出現(xiàn)，故不宜作早期診斷。適于動(dòng)物大群檢疫，主要用于綿羊和山羊，其次為豬。

檢測(cè)時(shí)，將布氏桿菌水解素0.2m1注射于羊尾根皺襞部或豬耳根部皮內(nèi)，24及48h后各觀察反應(yīng)一次。若注射部發(fā)生紅腫，即判為陽(yáng)性反應(yīng)。此法對(duì)慢性病例的檢出率較高，且注射水解素后無(wú)抗體產(chǎn)生，不妨礙以后扒血清學(xué)檢查。

凝集反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間各有特點(diǎn)。即動(dòng)物感染布氏桿菌后，首先出現(xiàn)凝集反應(yīng)，消失較早；其次出現(xiàn)補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)，消失較晚；最后出現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)，保抖時(shí)間也較長(zhǎng)。為了徹底消除各類病畜，應(yīng)同時(shí)使用三種方法進(jìn)行綜合診斷。9、免疫防治

布氏桿菌菌苗接種雖有顯著效果，但欲根除此病，則尚須嚴(yán)格執(zhí)行畜群全面檢疫及淘汰病畜的措施。已有的菌苗種類很多，我國(guó)創(chuàng)制和應(yīng)用的菌苗有羊型和豬型兩種弱毒菌苗。

羊型5號(hào)(M5)弱毒活菌苗對(duì)牛、山羊、綿羊和鹿布氏桿菌病的預(yù)防效果較好。采取皮下注射或氣霧方式，免疫期可達(dá)1-1.5年，其缺點(diǎn)為對(duì)懷孕動(dòng)物可致流產(chǎn)而禁用，對(duì)氣霧人員可引起較嚴(yán)重反應(yīng)。

豬型2號(hào)(S2)弱毒活菌苗毒力弱，生物性狀穩(wěn)定，免疫原性好，對(duì)豬、綿羊、山羊、牦牛、牛等較好的免疫效果，可接種任何年齡的動(dòng)物，甚至可以接種懷孕動(dòng)物而不引起流產(chǎn)。免疫方法有口服(飲水)、氣霧和皮下注射(羊也可作肌肉注射)3種；免疫期為1-2年。六、其他菌屬(自學(xué))1、彎曲桿菌屬了解空腸彎曲菌引致動(dòng)物腹瀉和人急性胃腸炎、食物中毒。2、弧菌屬了解霍亂弧菌引起的人霍亂和副溶血弧菌(存在于魚(yú)類和貝類中)引起的人食物中毒。3、里默氏桿菌如里默氏桿菌，主要引起鴨傳染性漿膜炎。第三節(jié)革蘭氏陽(yáng)性桿菌一、革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢桿菌

(一)李氏桿菌屬

(二)丹毒桿菌屬

(三)分支桿菌屬二、革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌

(一)芽孢桿菌屬

(二)梭狀芽孢桿菌屬一、革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢桿菌

(一)李氏桿菌屬

本屬細(xì)菌中對(duì)動(dòng)物致病性較為重要的是單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌，它是單核細(xì)胞增多癥的病原體，通稱李氏桿菌。

1、形態(tài)與染色：本菌為兩端鈍圓、稍彎曲的小桿菌，大小為0.4-0.5umХ0.5-2.0um；多單在，有時(shí)呈V形或柵狀；革蘭氏染色陽(yáng)性；有鞭毛能運(yùn)動(dòng)，無(wú)莢膜、不產(chǎn)生芽孢。

2、培養(yǎng)與生化特性：本菌為需氧及兼性厭氧，在普通瓊脂培養(yǎng)基中可生長(zhǎng)，但加入1％(W/V)葡萄糖或2％-3％甘油后生長(zhǎng)更佳；在血清瓊脂平板上形成光滑、透明、淡藍(lán)色的圓形小菌落；在鮮血瓊脂平板上可形成狹窄溶血環(huán)。在EM下的李氏桿菌

本菌一般可分解葡萄糖和水楊苷產(chǎn)酸，而對(duì)乳糖、麥芽糖、蔗糖、鼠李糖和山梨醇等反應(yīng)不定，不發(fā)酵衛(wèi)矛醇和甘露醇等。

3、抵抗力：本菌的抵抗力一般，在60~70℃5~10min可被殺滅，2.5%石碳酸、70%酒精、2.5%福爾馬林可殺死本菌。

4、致病性：本菌引起多種畜禽出現(xiàn)神經(jīng)癥狀和血液中單核細(xì)胞增多；雞可出現(xiàn)全身感染和心肌壞死；也可引起綿羊和牛發(fā)生流產(chǎn)。人也可感染本菌。5、微生物學(xué)診斷

(1)細(xì)菌學(xué)檢查：取腦組織研磨，接種葡萄糖血平板，觀察溶血性和染色鏡檢。

(2)血清學(xué)診斷：凝集試驗(yàn)

(3)動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)：(二)丹毒絲菌屬

本屬只有一種，即豬丹毒絲菌，是豬丹毒病的病原體，通稱豬丹毒桿菌。

1、形態(tài)與染色：本菌為直或稍彎曲的細(xì)桿菌，兩端鈍圓，大小0.2-0.4umX0.8-2.5um，單在或呈V形、叢集，易形成長(zhǎng)絲狀；革蘭氏染色陽(yáng)性；無(wú)鞭毛、無(wú)莢膜、不產(chǎn)生芽孢。

2、培養(yǎng)與生化特性：本菌為微需氧菌，實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)時(shí)兼性厭氧。最適pH為7.2-7.6，最適溫度為30-37℃

。

在普通瓊脂培養(yǎng)基和普通肉湯中生長(zhǎng)不良，如加入0.2％-0.5％(W/V)葡萄糖或5％-10％血液、血清則生長(zhǎng)良好；在血瓊脂平皿上經(jīng)37℃

24h培養(yǎng)可形成濕潤(rùn)、光滑、透明、灰白色、露珠樣的圓形小菌落，并形成α溶血環(huán)。在麥康凱培養(yǎng)基不生長(zhǎng)。豬丹毒桿菌形態(tài)---纖細(xì)的小桿菌3、抵抗力：本菌對(duì)腐敗和干燥環(huán)境有較強(qiáng)抵抗力。在飲水中可存活5d，在污物中可存活15d，在深埋尸體中可存活9個(gè)月。對(duì)熱和直射光、常用消毒劑抵抗力不強(qiáng)，對(duì)青霉素很敏感。

4、致病機(jī)理與致病性：本菌通過(guò)消化道感染，進(jìn)入血流而后定殖在局部或引致全身感染。

本菌在自然界分布十分廣泛，可寄生于哺乳動(dòng)物、禽和魚(yú)類。其中豬分離率最高，可引致3-12月齡豬豬丹毒；3-4周歲的羔羊可致慢性多發(fā)性關(guān)節(jié)炎；雞與火雞感染后呈現(xiàn)衰弱和下?。圾喛沙霈F(xiàn)敗血癥，并侵害輸卵管。小鼠和鴿子最易感，實(shí)驗(yàn)感染時(shí)皮下注射2-5d內(nèi)呈敗血死亡。人可經(jīng)外傷感染，發(fā)生皮膚病變，稱“類丹毒”。主要發(fā)生于育肥豬，急性病豬----全身皮膚潮紅亞急性和慢性型病豬，皮膚?？梢?jiàn)紅紫色梗塞病豬皮膚上呈菱形、方形紅色疹塊，稍凸起慢性型關(guān)節(jié)炎,受害關(guān)節(jié)腫脹,不能站立,呈犬坐姿勢(shì)慢性型：關(guān)節(jié)囊關(guān)節(jié)液增多慢性型：瓣膜性心內(nèi)膜炎，二尖瓣處可見(jiàn)大小不一黃色疣狀物附著5、微生物學(xué)診斷

(1)顯微鏡檢查：可采取高熱期病豬耳靜脈血作涂片，染色鏡檢。

死后可采取心血、肝、脾、腎、淋巴結(jié)等制成涂片，革蘭氏染色鏡檢。如發(fā)現(xiàn)少量典型桿菌，可初步確診，如為慢性心內(nèi)膜炎病例，可用心臟瓣膜增生物涂片，鏡檢。羔羊患關(guān)節(jié)炎病時(shí)，可檢查關(guān)節(jié)滑膜液。(2)分離培養(yǎng)：分離培養(yǎng)時(shí)可用含有加入0.2％-0.5％(W/V)葡萄糖或5％-10％血液、血清的瓊脂平皿或半固體瓊脂培養(yǎng)基。

(3)細(xì)菌鑒定：血清型鑒定時(shí)，將待鑒定菌株的純培養(yǎng)物甲醛滅活，制成沉淀原，與標(biāo)準(zhǔn)菌株高免血清作瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。

(4)血清學(xué)診斷：可采用培養(yǎng)凝集試驗(yàn)(ESCA)，又稱生長(zhǎng)凝集試驗(yàn)。6、免疫與治療本菌具有良好的免疫原性，目前我國(guó)應(yīng)用豬丹毒弱毒菌株凍干苗[GC42或C4T(10)]，用20％鋁膠生理鹽水稀釋后，在仔豬斷奶后接種5億-7億活菌，有良好的免疫力。

用牛或馬制備的抗豬丹毒血清可用于緊急預(yù)防和治療。也可用青霉素治療病豬。(三)分支桿菌屬

本屬細(xì)菌均為平直或微彎的桿菌，大小為0.2-0.6umXl.0-10um，有時(shí)分支，呈絲狀，不產(chǎn)生鞭毛、芽孢或莢膜。革蘭氏陽(yáng)性，能抵抗3％鹽酸酒精的脫色作用，故稱為抗酸菌。常用齊尼二氏(Ziehl-Neelson)染色法染色，本屬菌染成紅色，非抗酸菌呈藍(lán)色。菌體細(xì)胞壁含有大量類脂，約占干重的20％-40％；需要特殊營(yíng)養(yǎng)條件才能生長(zhǎng)，根據(jù)生長(zhǎng)速度分為快生長(zhǎng)和慢生長(zhǎng)兩類。本屬細(xì)菌分布廣泛，許多是人和多種動(dòng)物的病原菌。

對(duì)動(dòng)物有致病性的主要是：結(jié)核分支桿菌、牛分支桿菌、禽分支桿菌和副結(jié)核分支桿菌。

下面主要介紹結(jié)核分支桿菌

1、形態(tài)與細(xì)胞壁組成：該菌為細(xì)長(zhǎng)、直或微彎；牛分支桿菌菌體較短而粗；禽分支桿菌呈多形性。在陳舊的培養(yǎng)基或病灶內(nèi)的菌體可見(jiàn)分支。

與一般革蘭氏陽(yáng)性菌不同，本菌細(xì)胞壁不僅有肽聚糖，還有特殊的糖脂。因?yàn)樘侵挠绊懀顾崛旧珵榧t色。糖脂的含量超過(guò)菌體總量的10％，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其他細(xì)菌類脂的含量。糖脂成分有效地刺激哺乳動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，分支桿菌因此被制成免疫佐劑得到普遍應(yīng)用。

2、培養(yǎng)與生化特性：本菌為專性需氧菌，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)格，最適pH6.4-7.0，最適溫度37℃。在添加特殊營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)，生長(zhǎng)緩慢，一般需10-30d才能看到菌落。直或微彎的細(xì)長(zhǎng)桿菌，呈單個(gè)或成叢排列，間有分枝狀

常用的培養(yǎng)基是羅杰二氏培養(yǎng)基、改良羅杰二氏培養(yǎng)基和丙酮酸培養(yǎng)基，有5％-10％的CO2利于結(jié)核桿菌生長(zhǎng)。

3、抵抗力：本菌抵抗力很強(qiáng)，在干燥的環(huán)境中可存活6-8個(gè)月。對(duì)濕熱的抵抗力較弱，62-63℃15min即可殺死。對(duì)低溫抵抗力強(qiáng)，在0℃中可存活4-5個(gè)月。一般的消毒藥作用不大。對(duì)常用的磺胺類及多種抗生素藥物不敏感，對(duì)鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸等敏感，但長(zhǎng)期用易產(chǎn)生抗藥菌株。4、致病性：本菌以細(xì)胞內(nèi)寄生和形成局部病灶為特點(diǎn)。細(xì)菌主要通過(guò)呼吸道侵入機(jī)體肺泡，被巨噬細(xì)胞吞噬，但不被消化降解，相反在其內(nèi)繁殖，形成病灶，產(chǎn)生干酪樣壞死。壞死灶被吞噬細(xì)胞、T細(xì)胞與B細(xì)胞等包圍，形成結(jié)核結(jié)節(jié)。免疫低下者病灶可能破潰，菌體隨痰咳出體外傳染。胸腔有干酪樣壞死

本菌毒力因子：細(xì)菌能在吞噬細(xì)胞內(nèi)存活，與其一種表達(dá)類似溶血素的產(chǎn)物的基因有關(guān)。由于胞壁富含糖脂，可保護(hù)本菌免受吞噬細(xì)胞形成的吞噬溶酶體的氧化破壞。

牛分支桿菌主要引起牛結(jié)核病，其他家畜、野生反芻動(dòng)物、人、靈長(zhǎng)目動(dòng)物、犬、貓等肉食動(dòng)物均可感染。

禽分支桿菌主要引起禽結(jié)核，包括家禽與野禽，也可引起豬的局限性病灶。

結(jié)核分支桿菌主要引起人的結(jié)核病，靈長(zhǎng)類動(dòng)物、犬及其他與人接觸的動(dòng)物均可感染。5、變異性：該菌可發(fā)生多種變異現(xiàn)象。1-10ug/m1異煙肼可誘導(dǎo)本菌形態(tài)變異產(chǎn)生L型，胞壁消失，呈多型性，產(chǎn)生對(duì)異煙肼的耐藥性?？ㄊ虾徒槭蠈⑴７种U菌在培養(yǎng)基上經(jīng)13年230次傳代，培育出廣泛應(yīng)用的卡介苗。

6、免疫性：研究較多的是結(jié)核桿菌。細(xì)菌侵入機(jī)體后，機(jī)體主要產(chǎn)生細(xì)胞免疫。發(fā)現(xiàn)結(jié)核病的細(xì)胞免疫和體液免疫存在分離現(xiàn)象，細(xì)胞免疫隨病情加重而減弱，體液免疫則隨病情的加重而增強(qiáng)。

結(jié)核桿菌在激發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答的同時(shí)，遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)隨之產(chǎn)生?？捎糜诮Y(jié)核病檢測(cè)。結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的蛋白質(zhì)組分之一，用結(jié)核菌素進(jìn)行皮內(nèi)注射或滴入眼結(jié)膜囊，可判定機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌是否引致變態(tài)反應(yīng)。7、微生物學(xué)診斷

(1)顯微鏡檢查：取結(jié)核結(jié)節(jié)病非交界處組織直接涂片，抗酸酸色后鏡檢，如發(fā)現(xiàn)紅色成叢桿菌時(shí)，可做出初步診斷。

(2)分離培養(yǎng)：常用羅杰二氏培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)8周，培養(yǎng)陽(yáng)性時(shí)，進(jìn)行培養(yǎng)特性和生化特性鑒定。(3)動(dòng)物接種：用病料接種于動(dòng)物，皮下或腹腔注射0.5ml，禽分支桿菌用雞；結(jié)核桿菌用豚鼠，皮下注射3～5周可引起明顯病蔓；牛分支桿菌用兔，接種后3周至3個(gè)月死亡。

(4)變態(tài)反應(yīng)：采用PPD皮內(nèi)注射法，按《動(dòng)物檢疫操作規(guī)程》，牛頸部皮內(nèi)注射0.1m1(10萬(wàn)IU/m1)72h后，皮腫脹厚度差≥4mm為陽(yáng)性；皮腫脹厚度差在2-4mm為疑似；皮膚腫脹厚度差在2mm以下為陰性。凡判為疑似牛，30d后需復(fù)檢一次，如仍為疑似，經(jīng)30-45d再次復(fù)檢，如仍為疑似可判為陽(yáng)性。(5)血清學(xué)檢查：鑒于結(jié)核病細(xì)胞免疫與體液免疫的分離現(xiàn)象，可用ELISA檢測(cè)特異性抗體診斷結(jié)核病。

8、免疫與治療人類廣泛采用卡介苗免疫接種，免疫期達(dá)4-5年。犢牛在1月齡時(shí)也可皮下接種卡介苗100mg，20d產(chǎn)生免疫，可維持12-18個(gè)月。接種卡介苗的牛一年后仍維持變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性，檢疫時(shí)無(wú)法與自然感染牛區(qū)別，因而不宜推廣應(yīng)用。

按規(guī)定，飼養(yǎng)牛群不接種卡介苗，每年春、秋需進(jìn)行檢疫，結(jié)核菌素變態(tài)反應(yīng)檢測(cè)陽(yáng)性者，要隔離飼養(yǎng)。對(duì)檢出的患結(jié)核病動(dòng)物要撲殺處理。該病為人畜共患病，凡對(duì)人結(jié)核病有效的藥物，對(duì)動(dòng)物也有效。但除珍稀或觀賞動(dòng)物外，不提倡用藥物治療。二、革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌(一)芽孢桿菌屬

主要介紹炭疽芽孢桿菌炭疽芽孢桿菌又稱炭疽桿菌，是引起人類、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽的病原，在獸醫(yī)學(xué)和醫(yī)學(xué)上占有相當(dāng)重要的地位。

1、形態(tài)及染色特性本菌為革蘭氏陽(yáng)性大桿菌，1.0-1.2umX3-5um。無(wú)鞭毛，不運(yùn)動(dòng)。芽孢橢圓形，位于菌體中央，芽孢囊不大于菌體。可形成莢膜。在動(dòng)物組織和血液中，呈單在或呈短鏈，菌體直，菌端平截，呈竹節(jié)狀，圍繞以豐厚莢膜。莢膜具有較強(qiáng)的抗腐敗能力，當(dāng)菌體因腐敗而消失后，仍有殘留莢膜，稱為“菌影”。

動(dòng)物體內(nèi)的炭疽桿菌只有當(dāng)暴露接觸空氣中的氧氣之后，方能形成芽孢。

豬炭疽病料抹片，可見(jiàn)呈鏈的大桿菌、周?chē)忻黠@的夾膜

在培養(yǎng)基中，炭疽桿菌常形成長(zhǎng)鏈并于培養(yǎng)18-24h后開(kāi)始形成芽孢。在普通培養(yǎng)基中不形成莢膜，但若在血液/血清瓊脂或碳酸氫鈉瓊脂上，于10％-20％CO2環(huán)境中培養(yǎng)則形成莢膜。牛、羊炭疽桿菌的純培養(yǎng)物(中央或偏端芽胞)2、培養(yǎng)特性本菌為需氧菌，最適溫度30-37℃。最適pH為7.2-7.6。營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長(zhǎng)良好。

在普通瓊脂上形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥、邊緣呈卷發(fā)狀的粗糙(R)型菌落(圖22-1)，無(wú)毒或弱毒菌株形成光滑(S)型菌落。在血瓊脂上一般不溶血。于普通肉湯中培養(yǎng)后，上部液體清朗透明，液面無(wú)菌膜或菌環(huán)，管底有白色絮狀沉淀，輕搖不消散。在含青霉素0.51U/ml的培養(yǎng)基中，細(xì)胞壁肽聚糖合成抑制，形成原生質(zhì)體串，稱為“串珠反應(yīng)”。若青霉素加至10IU/ml，則完全不能生長(zhǎng)或輕微生長(zhǎng)。3、抵抗力本菌繁殖體的抵抗力不強(qiáng)，60℃30-60min即可殺死。常用消毒劑均能將其殺死，對(duì)青霉素等多種抗生素高度敏感，可用于臨床治療。在未解剖的尸體中，細(xì)菌可隨腐敗而迅速死亡。芽孢的抵抗力特別強(qiáng)，在干燥狀態(tài)下可長(zhǎng)期存活。需經(jīng)煮沸15-25min，121℃滅菌5-10min，或160℃干熱滅菌1h方被殺死。干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。炭疽芽孢對(duì)碘特別敏感，0.04％碘液10min即將其破壞，過(guò)氧乙酸、環(huán)氧乙烷、次氯酸鈉等效果較好，可用于皮毛等消毒。4、抗原結(jié)構(gòu)已知本菌有莢膜抗原、菌體抗原、保護(hù)性抗原及芽孢抗原4種主要抗原成分。

莢膜抗原：僅見(jiàn)于有毒菌株，與毒力有關(guān)，是一種半抗原，無(wú)保護(hù)作用，可用于血清學(xué)鑒定。

菌體抗原：有兩種，一種是存在于本菌細(xì)胞壁及菌體內(nèi)的半抗原，為多糖成分。與細(xì)菌毒力無(wú)關(guān)，但性質(zhì)穩(wěn)定，經(jīng)腐敗、加熱抗原性不被破壞。Ascoli反應(yīng)，加熱處理抗原依據(jù)在此。

保護(hù)性抗原：是一種胞外蛋白質(zhì)抗原成分，為炭疽毒素的組分之一，具免疫原性，能使機(jī)體產(chǎn)生抗本菌感染的保護(hù)力。

芽孢抗原：是芽孢外膜層含有的抗原決定簇，與皮質(zhì)一起組成炭疽芽孢特異性抗原，具有免疫原性和血清學(xué)診斷價(jià)值。5、致病性本菌可引致各種家畜、野獸和人類的炭疽，牛、綿羊、鹿等易感性最強(qiáng)，馬、駝、豬、山羊等次之，犬、貓、食肉獸等則有相當(dāng)大的抵抗力，禽類一般不感染。通過(guò)消化道傳染，但也可經(jīng)呼吸道及皮膚創(chuàng)傷或通過(guò)吸血昆蟲(chóng)傳播。食草動(dòng)物炭疽常表現(xiàn)為急性敗血癥。豬炭疽多表現(xiàn)為慢性的咽部局限感染，犬、貓和食肉獸則多表現(xiàn)為腸炭疽。

人類對(duì)炭疽桿菌的易感性介于食草動(dòng)物與豬之間，經(jīng)消化道、呼吸道或皮膚創(chuàng)傷感染而發(fā)生腸炭疽、肺炭疽或皮膚炭疽。此菌毒力主要與莢膜和毒素有關(guān)。莢膜抗吞噬，使易于擴(kuò)散，引起感染乃至敗血癥。炭疽桿菌的毒素稱為炭疽毒素，包括水腫毒素及致死毒素兩種。6、微生物學(xué)診斷疑似炭疽的病畜尸體嚴(yán)禁剖檢，只能自耳根部采取血液，必要時(shí)可切開(kāi)肋間采取脾臟。皮膚炭疽可采取病灶水腫液或滲出物，腸炭疽可采取糞便。(1)細(xì)菌學(xué)檢查：病料涂片以堿性美藍(lán)、瑞氏染色法或姬姆薩染色法染色鏡檢，如發(fā)現(xiàn)有莢膜竹節(jié)狀大桿菌，即可作出初步診斷。

(2)血清學(xué)檢查：有多種血清學(xué)方法，多以已知抗體來(lái)檢查被檢的抗原。

Ascoli氏沉淀反應(yīng)：用加熱抽提待檢炭疽菌多糖抗原與已知抗體進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。適用于各種病料、皮張、嚴(yán)重腐敗污染尸體材料，方法簡(jiǎn)便，反應(yīng)清晰，故應(yīng)用廣泛。

間接血凝試驗(yàn)：將炭疽抗血清吸附于炭粉或乳膠，制成炭粉診斷血清或乳膠診斷血清。檢查被檢樣品中是否含有炭疽芽孢。協(xié)同凝集試驗(yàn)：可快速檢測(cè)炭疽桿菌或病料中的可溶性抗原。串珠熒光抗體檢查：將串珠試驗(yàn)與熒光抗體法結(jié)合起來(lái)。另外還有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶標(biāo)葡萄球菌A蛋白間接染色法、熒光抗體間接染色法等。7、免疫防治炭疽痊愈動(dòng)物可獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，再次感染者很少。抗炭疽血清也可用于治療和緊急預(yù)防，我國(guó)目前應(yīng)用的菌苗有兩種。

(1)第Ⅱ號(hào)炭疽芽孢苗：此菌苗系將培養(yǎng)產(chǎn)生的炭疽芽孢，用30％甘油蒸餾水混懸制成，有效期2年。適用牛、馬、驢、騾、駱駝、綿羊、山羊和豬，一般不引起接種反應(yīng)。注射后14d即可產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免度力，免疫期1年。(2)無(wú)毒炭疽芽孢苗：其殘余毒力較第Ⅱ號(hào)炭疽芽孢苗強(qiáng)，可殺死小鼠及部分豚鼠，有效期2年。適用于牛、馬、驢、騾、綿羊和豬，免疫期1年。但是必須注意，此苗對(duì)山羊反應(yīng)強(qiáng)烈，可引起嚴(yán)重局部反應(yīng)，有的甚至發(fā)生死亡，故禁用于山羊。(二)梭狀芽孢桿菌屬

本屬細(xì)菌的菌體呈梭桿狀、厭氧呼吸、不還原硫酸鹽成硫化物，這三項(xiàng)特性可與其他革蘭氏陽(yáng)性產(chǎn)芽孢桿菌相區(qū)別。

1、屬的特征菌體桿狀，兩端鈍圓或尖銳，常單在，革蘭氏染色陽(yáng)性?？尚纬陕褕A形或圓形的芽孢，常使菌體膨大。由于芽孢的形狀和位置不同，芽孢體可表現(xiàn)為不同的形狀。當(dāng)芽孢位于菌體中央而膨大時(shí)，則芽孢體形如梭狀，并非梭菌屬的細(xì)菌均為梭形。2、梭菌分布

梭菌在自然界分布廣泛，常見(jiàn)于土壤、污水、腐爛的動(dòng)植物，人和其他脊椎動(dòng)物的腸道、人與動(dòng)物的傷口及軟組織感染灶。

3、病原梭菌及梭菌病的診斷原則本屬有80多種，多為非病原菌，常見(jiàn)的致病菌約11種，多為人獸共患病病原。病原梭菌通常均能產(chǎn)生外毒素，其毒力強(qiáng)。由梭菌引起動(dòng)勿的疾病，按性質(zhì)和癥狀可大致分為5類。(1)氣腫疽與惡性水腫：兩病皆為急性敗血性傳染病，而且均有氣性水腫的癥狀特征，在臨床上極為相似，應(yīng)注意鑒別。氣腫疽病原為氣腫疽梭菌，主要通過(guò)消化道感染。惡性水腫由刨傷感染引起，其病原復(fù)雜多樣，在動(dòng)物主要是腐敗梭菌、在人主要是A型產(chǎn)氣莢膜梭菌，此外還可能是A型諾維梭菌或其他，也可是兩種以上梭菌的混合感染。兩病的微生物學(xué)診斷主要衣靠病原菌檢查。(2)快疫與類快疫：是一類病程極短的急性致死性傳染病，包括羊快疫、羊猝狙、腸毒血癥、黑疫及細(xì)菌性血紅素尿，在臨床上有許多相似之處，本質(zhì)均為毒血癥。

羊猝狙和腸毒血癥的病原為產(chǎn)氣莢膜梭菌，系在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素，細(xì)菌不一定侵人體內(nèi)，故微生物學(xué)診斷主要依靠腸內(nèi)容物的毒素檢查。

羊快疫系腐敗梭菌經(jīng)消化道感染所致，病菌雖最初在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素，但其后則侵人體內(nèi)造成敗血癥，故微生物學(xué)診斷為依靠病原菌檢查。黑疫的病原為B型諾維梭菌，細(xì)菌性血紅素尿的病原為溶血梭菌，二者均主要存在于肝臟，因肝組織損害，細(xì)菌乘機(jī)繁殖，產(chǎn)生毒素而引起發(fā)生。微生物學(xué)診斷主要依靠病原菌檢查，但也可檢查毒素。(3)痢疾與腸炎：是由產(chǎn)氣莢膜梭菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素引起，包括羔羊痢疾、犢牛痢疾和人、禽壞死性腸炎，細(xì)菌不一定侵入體內(nèi)，微生物學(xué)診斷亦主要依靠腸內(nèi)容物的毒素檢查。(4)食物中毒：包括人畜肉毒中毒癥與人產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒，都是由于病原菌在食物或飼料中生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生毒素被食人而致病。肉毒中毒癥的微生物學(xué)診斷主要檢測(cè)肉毒毒素，其次是細(xì)菌檢查。產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒則須依靠由可疑食物分離細(xì)菌，并測(cè)定其毒素產(chǎn)生能力。

(5)破傷風(fēng)：系破傷風(fēng)梭菌經(jīng)創(chuàng)傷感染，在感染部位發(fā)育繁殖，產(chǎn)生毒素而引起疾?。ǘ狙Y）。此病癥狀極其特征，通常不需微生物學(xué)診斷。4、分離鑒定梭菌大多專性厭氧，培養(yǎng)須采用厭氧培養(yǎng)法。諾維梭菌、溶血梭菌等厭氧要求十分苛刻，所用培養(yǎng)基必須新鮮制備或保存于厭氧環(huán)境之中。若在空氣環(huán)境中放置超過(guò)數(shù)小時(shí)，其中某些物質(zhì)轉(zhuǎn)化為氧化型，雖再作厭氧培養(yǎng)，細(xì)菌亦不生長(zhǎng)。這些細(xì)菌對(duì)氧極為敏感，僅在空氣中暴露20-30min即遭抑制而不再生長(zhǎng)。因此劃線接種后應(yīng)立即厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)物應(yīng)迅速移植，不能久置于空氣之中。

污染材料分得純培養(yǎng)，可根據(jù)梭菌芽孢耐熱性較強(qiáng)的特點(diǎn)，先經(jīng)80℃加熱20min以殺死不耐熱的細(xì)菌，然后再作分離培養(yǎng)。

腐敗梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌易于死后侵入，諾維梭菌、溶血梭菌等存在于正常動(dòng)物體中，由動(dòng)物體內(nèi)分出梭菌，并不能肯定是病原，應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)、病變及微生物學(xué)檢查。此時(shí)，細(xì)菌毒力測(cè)定極為重要。5、產(chǎn)氣莢膜梭菌本菌舊名魏氏梭菌，在自然界分節(jié)極廣，可見(jiàn)于土壤、污水、飼料、食物、糞便以及人畜腸道等中，在一定條件下，也可引起多種嚴(yán)重疾病。

(1)形態(tài)及染色特征：菌體直桿狀，兩端鈍圓，0.6-2.4umXl.3-19.0um，單在，革蘭氏陽(yáng)性。芽孢大圓，位于菌體中央或近端，使菌體膨脹，但在一般條件下罕見(jiàn)形成芽孢。多數(shù)菌株可形成莢膜。

(2)致病性：本菌致病作用主要在于它所產(chǎn)生的毒素。A型菌主要是引起人氣性壞疽和食物中毒，也引起動(dòng)物氣性壞疽，還可引起牛、羔羊、新生羊駝、野山羊、馴鹿、仔豬等腸毒血癥；

B型菌主要引起羔羊痢疾，還可引起駒、犢牛、羔羊、綿羊和山羊的腸毒血癥或壞死性腸炎；

C型菌主要是綿羊猝狙的病原，也能引起羔羊、犢牛、仔豬、綿羊的腸毒血癥和壞死性腸炎以及人的壞死性腸炎；

D型菌引起羔羊、綿羊、山羊、牛的腸毒血癥；E型菌可致?tīng)倥?、羔羊腸毒血癥。產(chǎn)氣莢膜梭菌(3)微生物學(xué)診斷：本菌A型所致氣性壞疽及人食物中毒的微生物學(xué)診斷，主要依靠細(xì)菌分離鑒定。其余各型所致的各種疾病，均系細(xì)菌在腸道內(nèi)產(chǎn)生毒素所致，因止從病料中檢出該菌，并不能說(shuō)明它就是病原。所以細(xì)菌學(xué)檢查只有當(dāng)分離到毒力強(qiáng)大的此菌才具有一定的參考意義。

鑒定本菌要點(diǎn)：厭氧生長(zhǎng)、菌落整齊、生長(zhǎng)快、革蘭氏陽(yáng)性粗干菌、不運(yùn)動(dòng)，有雙層溶血環(huán)，引起牛奶暴烈發(fā)酵，胸肌注射鴿越夜死亡，胸肌涂片可見(jiàn)有莢膜的菌體。

有效微生物學(xué)診斷方法是腸內(nèi)容物毒素檢查，即取回腸內(nèi)容物，加適量生理鹽水，離心取上清液分兩份，一份不加熱，一份加熱(60℃

30min)，分別靜脈注射家兔(1-3m1)或小鼠(0.1-0.3m1)。如有毒素存在，不加熱組動(dòng)物常于數(shù)分鐘至十?dāng)?shù)小時(shí)內(nèi)死亡，而加熱組動(dòng)物不死亡。

(4)免疫防治預(yù)防羔羊痢疾、猝狙、腸毒血癥以及仔豬腸毒血癥等，可用三聯(lián)菌苗或五聯(lián)菌苗。6、肉毒梭菌本菌廣泛分布于土壤，動(dòng)物腸道，飼料以及食品中。不能在活的機(jī)體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。當(dāng)有適宜營(yíng)養(yǎng)和厭氧環(huán)境時(shí)，即可生長(zhǎng)繁殖并產(chǎn)生肉毒毒素。人畜食人含此毒素的食品、飼料或其他物品，即可中毒而發(fā)生肉毒中毒癥。

(1)形態(tài)及染色特性：本菌多呈直桿狀，單在或成雙，革蘭氏陽(yáng)性。著生周鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。芽孢卵圓，位于菌體近端，大于菌體直徑，使細(xì)胞膨大，易于在液體和固體培養(yǎng)基上形成芽孢。(2)培養(yǎng)特性：本菌專性厭氧。最適溫度30-37℃。產(chǎn)毒素的最適溫度為25-30℃。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中均能生長(zhǎng)。在血平板上，可形成直徑1-6mm，圓形到扇狀、裂葉狀或根狀邊緣的不規(guī)則菌落，常帶