Rg3抑制腫瘤生長的研究

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日期：2010-6-22實驗動物BALB/C-nu純系裸鼠雌性，4～6周齡，體重18～22克。實驗和飼養(yǎng)均在SPF條件下的超凈層流架中進(jìn)行，滅菌處理的水和飼料供給動物自由攝入，所有操作均在無菌超凈工作臺中進(jìn)行。選用瘤株：NCI-H460人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株，A549人肺腺癌LTEP-78人肺鱗癌細(xì)胞株體內(nèi)試驗介紹本實驗進(jìn)行Rg3對非小細(xì)胞肺癌的抑制作用的研究。選取人非小細(xì)胞肺癌瘤株（NCI-H460人大細(xì)胞肺癌、A549人肺腺癌）分別接種于BALB/C-nu純系裸鼠制成荷瘤模型，將接種動物隨機(jī)分6組：空白對照組、陽性對照組（環(huán)磷酰胺，40mg/kg/次，連續(xù)給藥5天）、實驗試劑人參皂苷Rg3濃度為3mg·mL-1使用時用無菌氯化鈉注射液(0.9%)稀釋為所需濃度。陽性對照藥--注射用環(huán)磷酰胺，0.2g/瓶。陰性對照藥--無菌氯化鈉注射液(0.9%)細(xì)胞培養(yǎng)液--H-DMEM培養(yǎng)液,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清。主要儀器超凈工作臺，CO2孵箱,倒置顯微鏡試驗方法

動物接種：取體外培養(yǎng)對數(shù)生長期之所選人瘤細(xì)胞株細(xì)胞，接種于BALB/C-nu純系裸鼠右腋皮下，每只小鼠接種2×107個細(xì)胞。接種腫瘤細(xì)胞后，待可觸及明確瘤結(jié)節(jié)時（直徑約0.5cm，瘤結(jié)節(jié)不明顯者淘汰），將小鼠隨機(jī)分成6組，每組8只。開始腹腔注射連續(xù)給藥，停藥24小時后處死動物。環(huán)磷酰胺連續(xù)給藥，共給5次實驗動物分組

裸鼠接種瘤細(xì)胞后隨機(jī)分為6組：①空白對照組：腹腔注射生理鹽水每次0.2mL②陽性對照組：腹腔注射環(huán)磷酰胺每次40mg·kg-1，連續(xù)5天③20（S）-人參皂苷Rg3低劑量組：0.3mg·kg-1④20（S）-人參皂苷Rg3中劑量組：1.0mg·kg-1⑤20（S）-人參皂苷Rg3高劑量組：3.0mg·kg-1⑥聯(lián)合用藥組：環(huán)磷酰胺+20（S）-人參皂苷Rg3（20mg·kg-1+0.5mg·kg-1）。觀測指標(biāo)①定期測量小鼠體重并記錄一般情況變化。②接種腫瘤后每周用游標(biāo)卡尺測量腫瘤的長度(a)及寬度(b)，按公式求出腫近似體積（V）,或，單位為cm。③試驗結(jié)束后采用脫臼斷頸處死動物，取瘤稱重；留取部分瘤組織用10%中性福爾馬林固定、備用。④計算抑瘤率（%）統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）形式表示，采用SPS