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文檔簡介

第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充)二、微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級(補(bǔ)充)三、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求四、無菌室基本要求五、食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充1一、食品微生物檢驗(yàn)室基本要求2

微生物檢驗(yàn)室要求高度清潔衛(wèi)生,要盡可能地為其創(chuàng)造無菌條件。為達(dá)此目的,房屋的墻壁和地板,使用的各種家具都要符合便于清洗的要求。一、食品微生物檢驗(yàn)室基本要求2微生物檢驗(yàn)室要求高2(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求一、以食品微生物檢驗(yàn)室基本要求(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求一、以食品3基本要求(關(guān)鍵的、概括的):《GB4789.1-2010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)總則》(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求基本要求(關(guān)鍵的、概括的):(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求4第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件5第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件6第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件7第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件8第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件9一、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求一、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)10(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求1.實(shí)驗(yàn)室管理體系的簡單介紹2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求1.實(shí)驗(yàn)室管理體系的簡單介紹2.11A.食品微生物檢測實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)的目的、過程和組織B.ISO17025和實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可認(rèn)證(CNAS/CMA)ISO17025:檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求《CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》來源于ISO170251.實(shí)驗(yàn)室管理體系的簡單介紹ISO17025:檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求1.實(shí)12中國合格評定國家認(rèn)可委員會CNAS(ChinaNationalAccreditationServiceforConformityAssessment,CNAS)

ISO:國際標(biāo)準(zhǔn)化組織InternationalStandardOrganized計(jì)量認(rèn)證(CMA):《中華人民共和國計(jì)量法》中規(guī)定:為社會提供公證數(shù)據(jù)的產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)機(jī)構(gòu),必須經(jīng)省級以上人民政府計(jì)量行政部門對其計(jì)量檢定、測試能力和可靠性考核合格,這種考核稱為計(jì)量認(rèn)證。中國合格評定國家認(rèn)可委員會CNASISO:國際標(biāo)準(zhǔn)化組織In13第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件14實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù):CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則(ISO17025檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求)舉例:學(xué)校的管理與教學(xué)or班級管理2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù):舉例:學(xué)校的管理與教學(xué)or班級管理2.15CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則16CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則17第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件182.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)要求(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制與保證)(4)檢測報(bào)告要求四方面講解2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)19(1)管理要求1.目標(biāo)和任務(wù):

根據(jù)國際通用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、結(jié)合食品檢驗(yàn)的實(shí)際情況,嚴(yán)格食品微生物檢驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范。2.組織和結(jié)構(gòu):具有明確的法律地位3.管理體系:嚴(yán)格的一整套的技術(shù)管理體系。4.文件控制:檢驗(yàn)工作應(yīng)遵循國際或國家的制定法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)或檢驗(yàn)程序。實(shí)驗(yàn)室四大管理體系文件(舉例):質(zhì)量手冊程序文件作業(yè)指導(dǎo)書(SOP)記錄表格(1)管理要求1.目標(biāo)和任務(wù):根據(jù)國際通用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、結(jié)合20

上述因素對總的測量不確定度的影響程度,在(各類)檢測之間明顯不同。實(shí)驗(yàn)室在制定檢測和校準(zhǔn)的方法和程序、培訓(xùn)和考核人員、選擇和校準(zhǔn)所用設(shè)備時(shí),應(yīng)考慮到這些因素。(2)技術(shù)要求決定實(shí)驗(yàn)室檢測正確性和可靠性的因素有很多,包括:——人員;——設(shè)施和環(huán)境條件;——檢測和校準(zhǔn)方法及方法確認(rèn);——設(shè)備;——測量的溯源性;——抽樣;——檢測和校準(zhǔn)物品的處置。

上述因素對總的測量不確定度的影響程度,在(各類)檢測之21□檢驗(yàn)人員應(yīng)具備相關(guān)教育背景,具備相應(yīng)的資格證,具備檢驗(yàn)操作技能。如:食品檢驗(yàn)工證、特種設(shè)備操作證等;□檢驗(yàn)人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室生物檢驗(yàn)安全操作和消毒知識;□有顏色視覺障礙的人員不能執(zhí)行涉及到辨色的實(shí)驗(yàn)。□

對檢驗(yàn)人員進(jìn)行持續(xù)有效的管理:建立人員檔案,設(shè)定人員發(fā)展目標(biāo),進(jìn)行繼續(xù)教育和培訓(xùn)。(2)技術(shù)要求七大要素:人、機(jī)、料、法、環(huán)、測、抽樣1.人:人員□檢驗(yàn)人員應(yīng)具備相關(guān)教育背景,具備相應(yīng)的資格證,具備檢22□設(shè)備種類和數(shù)量能滿足檢測要求:溫控設(shè)備[培養(yǎng)箱、冰箱、冰凍機(jī)、烤箱]定容設(shè)備[吸管、自動(dòng)分液器、微量移液器]測量設(shè)備[溫度計(jì)、計(jì)時(shí)器、天平、酸度計(jì)、菌落計(jì)數(shù)器]除菌和滅菌設(shè)備[超凈工作臺、生物安全柜、高壓滅菌鍋]其他設(shè)備[顯微鏡、離心機(jī)、均質(zhì)機(jī)])□設(shè)備安裝布局要便于操作、易于維護(hù)、清潔和校準(zhǔn)?!踉O(shè)備要定期進(jìn)行維護(hù)和性能驗(yàn)證,并保存相關(guān)記錄?!趺看翁胤N設(shè)備的操作應(yīng)由受過培訓(xùn)的檢驗(yàn)人員(2人)在場,以防事故。2.機(jī):設(shè)備的要求□設(shè)備種類和數(shù)量能滿足檢測要求:2.機(jī):設(shè)備的要求233.料:檢測物料的要求□樣品

(1)檢查、確認(rèn)和登記接收到的樣品有效狀況。因?yàn)闉槲⑸餀z驗(yàn)項(xiàng)目,對樣品的儲藏和運(yùn)輸中的溫度、光照或持續(xù)時(shí)間等因素較敏感。(2)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有樣品傳遞、儲存、處置和識別的管理程序。樣品需有可識別的管理系統(tǒng)和狀態(tài)標(biāo)示,(3)在儲藏在適當(dāng)?shù)臈l件下,以確保樣品在保存期內(nèi)不變質(zhì)。3.料:檢測物料的要求□樣品2425□檢測中使用到的藥品試劑等(1)實(shí)驗(yàn)室用水:滿足實(shí)驗(yàn)室用水一級水的要求(2)培養(yǎng)基的管理:是微生物檢驗(yàn)的關(guān)鍵試驗(yàn)材料。實(shí)驗(yàn)室必須對自配和購買的培養(yǎng)基的可靠性采用一定的方法進(jìn)行鑒定,以確保其有效性。如自配的,必須保存配制記錄。正途購買、驗(yàn)收合格、適當(dāng)保存和有效可用。(3)其他試劑藥品:應(yīng)有對試劑進(jìn)行檢查、接收、拒收和儲存的程序,確保符合相關(guān)檢測的需要,正途購買、驗(yàn)收合格、適當(dāng)保存和有效可用。25□檢測中使用到的藥品試劑等254.法:檢測方法的要求

總則:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用適合的方法和程序進(jìn)行所有檢測,包括被檢測物品的抽樣、處理、運(yùn)輸、存儲和準(zhǔn)備。(1)方法的選擇

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用滿足客戶需求并適用于所進(jìn)行的檢測的方法,包括抽樣的方法。應(yīng)優(yōu)先使用以國際、區(qū)域或國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布的方法。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保使用標(biāo)準(zhǔn)的最新有效版本,除非該版本不適宜或不可能使用。必要時(shí),應(yīng)采用附加細(xì)則對標(biāo)準(zhǔn)加以補(bǔ)充,以確保應(yīng)用的一致性。

(2)方法的證實(shí)實(shí)驗(yàn)室采用標(biāo)準(zhǔn)方法時(shí)要進(jìn)行證實(shí)實(shí)驗(yàn),進(jìn)行一定的實(shí)踐驗(yàn)證,確保自身實(shí)驗(yàn)室具備完全可開展的條件后使用。(3)自制檢測方法應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室有資格能力的人進(jìn)行;引用非標(biāo)方法要進(jìn)行標(biāo)注記錄。4.法:檢測方法的要求總則:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用適合的方法和程序26□具備滿足檢驗(yàn)要求的檢測室、功能區(qū)和輔助設(shè)施(大門、走廊、管理區(qū)、樣品室、洗手間、儲存室、文檔室等)□具備可控制工作環(huán)境的設(shè)施:應(yīng)具備相應(yīng)的設(shè)施和保證設(shè)施的有效狀態(tài)。如:空調(diào)、中央空調(diào)、空氣過濾系統(tǒng)、排氣系統(tǒng)設(shè)施、照明等?!蹙邆浔O(jiān)控環(huán)境條件的的測量儀器并定期進(jìn)行計(jì)量校準(zhǔn),如溫度計(jì)、濕度計(jì)、壓力表等?!踔贫茖W(xué)合理的環(huán)境檢測程序(使用諸如空氣采樣器、沉降平板接觸盤等)?!蹙邆浒踩O(shè)施:具備檢測人員的個(gè)人安全防護(hù)裝備,如防護(hù)服、手套、口罩等,具備安全事故處理設(shè)施,如洗眼器、緊急沖淋裝置、藥箱、滅火器材和生物安全污染處理設(shè)施等?!跷廴緩U物的處理。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定方案來減少廢物污染檢測環(huán)境和設(shè)施的可能性。需具備處理廢物的設(shè)備設(shè)施,如污染廢物應(yīng)使用滅菌鍋在121℃持續(xù)滅菌至少45min.5.環(huán):環(huán)境和設(shè)施的要求□具備滿足檢驗(yàn)要求的檢測室、功能區(qū)和輔助設(shè)施(大門、走廊、276.測:測量溯源性要求總則:用于檢測對檢測、抽樣結(jié)果的準(zhǔn)確性或有效性有顯著影響的所有設(shè)備,包括輔助測量設(shè)備(例如用于測量環(huán)境條件的設(shè)備),在投入使用前應(yīng)進(jìn)行檢定校準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定設(shè)備校準(zhǔn)的計(jì)劃和程序。

器皿:如容量瓶、移液管等儀器設(shè)備:如pH計(jì)、培養(yǎng)箱、天平等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物:微生物檢測實(shí)驗(yàn)室可使用來自認(rèn)可的國內(nèi)或國外菌種收藏機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)菌株,或使用與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效的商業(yè)派生菌株。Keywords:檢定、校準(zhǔn)、計(jì)量院、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)菌株、菌種保藏中心6.測:測量溯源性要求總則:用于檢測對檢測、抽樣結(jié)果的準(zhǔn)28

實(shí)驗(yàn)室為后續(xù)檢測而對物質(zhì)、材料或產(chǎn)品進(jìn)行抽樣時(shí),應(yīng)有用于抽樣的抽樣計(jì)劃和程序。抽樣計(jì)劃和程序在抽樣的地點(diǎn)應(yīng)能夠得到。只要合理,抽樣計(jì)劃應(yīng)根據(jù)適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法制定。抽樣過程應(yīng)注意需要控制的因素,以確保檢測和校準(zhǔn)結(jié)果的有效性。7.抽樣食品微生物檢測常見抽樣方案:見課本《第四章》實(shí)驗(yàn)室為后續(xù)檢測而對物質(zhì)、材料或產(chǎn)品進(jìn)行抽樣時(shí),應(yīng)292.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)要求(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制與保證)(4)檢測報(bào)告要求四方面講解2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)30(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制和保證)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有質(zhì)量控制程序以監(jiān)控檢測的有效性。這種監(jiān)控應(yīng)有計(jì)劃并加以評審,可包括(但不限于)下列內(nèi)容:a)定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進(jìn)行監(jiān)控和/或使用次級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))開展內(nèi)部質(zhì)量控制;b)參加實(shí)驗(yàn)室間的比對或能力驗(yàn)證計(jì)劃;c)使用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測;d)對存留物品進(jìn)行再檢測;

e)分析一個(gè)物品不同特性結(jié)果的相關(guān)性。舉例:測量審核和能力驗(yàn)證(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制和保證)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有質(zhì)量控31(4)檢測報(bào)告要求

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確和客觀地報(bào)告每一項(xiàng)檢測、校準(zhǔn),或一系列的檢測的結(jié)果,并符合檢測方法中規(guī)定的要求。例4789.2:檢測結(jié)果符合檢測方法標(biāo)準(zhǔn)中的《結(jié)果與報(bào)告》的要求(4)檢測報(bào)告要求實(shí)驗(yàn)室應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確和客32333333343434第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充)二、微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級(補(bǔ)充)三、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求四、無菌室基本要求五、食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充35二無菌室基本要求361、新建無菌室的處理及設(shè)計(jì)要求(1)無菌室應(yīng)設(shè)在較潔凈的環(huán)境中,無污染源;(2)一般無菌室面積5-6m2,不要大于10m2,室內(nèi)六面

應(yīng)光滑平整,耐腐蝕、易清洗,室內(nèi)門窗結(jié)構(gòu)應(yīng)密和,并盡量減少活動(dòng)窗口面積,門為推拉門,便于用臂肘及腳開關(guān);(3)隔去1/4左右作緩沖間,室高2-2.5m,做準(zhǔn)備工作;(4)無菌室先用3%的煤酚皂擦洗工作臺面及地面,再用甲醛加高錳酸鉀熏蒸空氣。日后要定期熏蒸;(5)每次使用無菌室前用紫外燈照射30~60分鐘定期檢查殺菌效果;每兩星期用酒精棉球擦拭紫外線燈管(6)新建的無菌室啟用前或細(xì)菌總數(shù)檢測不合格(凈化級別為100級,平均菌落數(shù)《1個(gè)不小于5μm粒子數(shù)《3.5個(gè)/L)二無菌室基本要求361、新建無菌室的處理及設(shè)計(jì)要求(1)無362、無菌室的使用與管理⑴無菌室應(yīng)保持清潔,擺放最必須的檢驗(yàn)用具;⑵檢驗(yàn)用具及桌椅等位置保持固定,不隨便移動(dòng);⑶每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌椅、地面,然后用甲醛加熱或噴霧滅菌,最后紫外燈滅菌30min;⑷定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況,細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下;⑸無菌室殺菌前,應(yīng)將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開紫外燈殺菌30min,時(shí)間一到,關(guān)閉紫外燈。⑹—般實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)入前洗手,自然干燥或烘干,用臀肘推開級沖間門,盡快穿上無菌鞋,關(guān)緩沖間門,打開滅菌衣物,穿好無菌衣,戴上無菌口罩及帽子,女工作人員一定要把頭發(fā)放入帽內(nèi);372、無菌室的使用與管理⑴無菌室應(yīng)保持清潔,擺放最必須的檢37⑺操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。(8)無菌間只允許放置無菌操作臺、轉(zhuǎn)椅、水浴鍋;無菌操作臺上最多只允許擺放以下物品:38物品數(shù)量物品數(shù)量酒精燈1個(gè)滅菌營養(yǎng)瓊脂200ml打火機(jī)1個(gè)滅菌雙料發(fā)酵管6根接種針1個(gè)滅菌單料發(fā)酵管12根消毒面團(tuán)1瓶滅菌平皿10塊洗耳球1個(gè)試管架2副鑷子1個(gè)2ml滅菌吸管5根油筆1支10ml滅菌吸管3根試管簍2個(gè)125ml滅菌燒杯2個(gè)⑺操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說話,不喧嘩,以383、器材及場所的滅菌消毒不同的對象處理方法不同①、高壓蒸汽滅菌(121℃),工作服、口罩,培養(yǎng)基、移液管等。②、火焰滅菌:接種針、接種環(huán)。③、高溫干燥滅菌:各種玻璃器皿、注射器,干燥箱160℃,2h;④、一般消毒:無菌室內(nèi)的凳子、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行滅菌,用其他方法進(jìn)行消毒處理,用2%石炭酸或蘇爾水溶液擦拭消毒;⑤、空氣的消毒:紫外燈照射。3、器材及場所的滅菌消毒不同的對象處理方法不同394、準(zhǔn)備工作要領(lǐng)⑴先進(jìn)行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30-60min;⑵檢驗(yàn)用的有關(guān)器材,檢驗(yàn)前必須消毒滅菌;⑶操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無菌衣帽鞋,采取必要的防護(hù)措施。⑷進(jìn)入無菌室后再一次消毒手部,然后進(jìn)行檢驗(yàn)操作。404、準(zhǔn)備工作要領(lǐng)⑴先進(jìn)行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30-405、操作過程注意事項(xiàng)⑴動(dòng)作要輕,不要太快,玻璃器皿輕拿輕放⑵操作應(yīng)在近火焰區(qū)操作⑶接種針及接種環(huán)使用前后均需灼燒⑷使用吸管時(shí)切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作,不能向含有感染性的溶液中吹入氣體。⑸觀察平板時(shí)不要開蓋,如欲蘸取菌落檢查時(shí),必須靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能大開,而是上下蓋適當(dāng)開縫。⑹使用可疑致病菌涂片染色時(shí),應(yīng)使用夾子夾持玻片,切勿用手直接拿玻片,以免造成污染,用過的玻片也應(yīng)置于消毒液中浸泡。然后再消毒。;⑺工作結(jié)束,收拾好器具,用消毒水擦拭工作臺。415、操作過程注意事項(xiàng)⑴動(dòng)作要輕,不要太快,玻璃器皿輕拿輕放41第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)二、微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級三、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求四、無菌室基本要求五、食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)421、無菌操作要求微生物實(shí)驗(yàn)中最重要的一環(huán),就是要嚴(yán)格地進(jìn)行無菌操作,防止雜菌污染。為此,在實(shí)驗(yàn)過程中,每個(gè)人要嚴(yán)格做到以下幾點(diǎn):①、要穿干凈的白色工作服,帶工作帽:微生物學(xué)工作者在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)穿上白色工作服,離開時(shí)脫去,并經(jīng)常洗滌以保持清潔。②、操作時(shí)要預(yù)防空氣對流:在進(jìn)行微生物實(shí)驗(yàn)操作時(shí),要關(guān)閉門窗,以防空氣對流。③、接種時(shí)不要走動(dòng)和講話:接種時(shí)盡量不要走動(dòng)和講話,以免因塵埃飛揚(yáng)和唾沫四濺而導(dǎo)致雜菌污染。④、進(jìn)行接種所用的平皿、培養(yǎng)基等含菌器具要滅菌消毒后清洗,打開包裝后的器具不能放置后直接使用。431、無菌操作要求微生物實(shí)驗(yàn)中最重要的一環(huán),就是要嚴(yán)格地進(jìn)43⑤、從包裝中取出吸管,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種試管或平皿時(shí),不得觸及試管或平皿邊。⑥、接種樣品轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作,接種細(xì)菌或樣品時(shí),吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。⑦、接種環(huán)和接種針在接種前后均需火焰灼燒全部金屬絲,必要時(shí)還要燒到環(huán)和針與桿的連接處。⑧、吸管吸取菌液或樣品時(shí),不得用口吸。⑨、含培養(yǎng)物的器皿要?dú)⒕笄逑矗涸谇逑磶Ь呐囵B(yǎng)皿、三角瓶或試管等之前,應(yīng)先煮沸10min或進(jìn)行加壓蒸汽滅菌。44⑤、從包裝中取出吸管,吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種44①.無菌間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃,并要密封,不得隨意打開,并設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門,另設(shè)有0.5-0.7m2的小窗,以備進(jìn)入無菌間后傳遞物品。②.無菌間內(nèi)應(yīng)保持清潔,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,擦拭工作臺面,不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。③.無菌間使用前后應(yīng)將門關(guān)緊,打開紫外燈,如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時(shí),需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時(shí)間不少于30min,使用紫外燈,應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕擦拭,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響。④.處理和接種食品標(biāo)本時(shí),進(jìn)入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。⑤.在無菌間內(nèi)如需要安裝空調(diào)時(shí),則應(yīng)有過濾裝置。452、無菌室使用要求①.無菌間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃,并要密封,不得隨意打45463、消毒滅菌要求(1)干熱和濕熱高壓蒸汽滅菌①、滅菌前準(zhǔn)備②、裝放干熱滅菌器③、設(shè)備檢查④、干熱滅菌⑤、高壓濕熱滅菌步驟微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等,必須經(jīng)滅菌后方能使用。463、消毒滅菌要求(1)干熱和濕熱高壓蒸汽滅菌①、滅菌前準(zhǔn)46(四)有毒有害菌污染物處理要求微生物檢驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理,一律不得帶出實(shí)驗(yàn)室。(五)培養(yǎng)基制備的要求P141.經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴(yán)密的容器或鐵絲筐內(nèi),并隼中存放在指定地點(diǎn),待統(tǒng)一進(jìn)行高壓滅菌。2.經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物,必須經(jīng)121℃30min高壓滅菌。3.染菌后的吸管,使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中,最少浸泡24h(消毒液體不得低于浸泡的高度)再經(jīng)121℃30min高壓滅菌。4.涂片染色沖洗片的液體,一般可直接沖入下水道,烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中,經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道,染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24h后,煮沸洗滌。做凝隼試驗(yàn)用的玻片或平皿,必須高壓滅菌后洗滌。5.打碎的培養(yǎng)物,立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時(shí)后再擦拭干凈。6、污染的工作服或進(jìn)行烈性試驗(yàn)所穿的工作服、帽、口罩等,應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。(四)有毒有害菌污染物處理要求微生物檢驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)器材、培養(yǎng)物47參考文件GB4789.1食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)總則GB27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測GB50364-2004生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范GB19489-2004生物安全通用要求GB15981消毒與滅菌效果的評價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則CNAS-CL05:實(shí)驗(yàn)室生物安全認(rèn)可準(zhǔn)則ISO/IEC17025檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求參考文件GB4789.1食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢48第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充)二、微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級(補(bǔ)充)三、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求四、無菌室基本要求五、食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充49一、食品微生物檢驗(yàn)室基本要求50

微生物檢驗(yàn)室要求高度清潔衛(wèi)生,要盡可能地為其創(chuàng)造無菌條件。為達(dá)此目的,房屋的墻壁和地板,使用的各種家具都要符合便于清洗的要求。一、食品微生物檢驗(yàn)室基本要求2微生物檢驗(yàn)室要求高50(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求一、以食品微生物檢驗(yàn)室基本要求(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求一、以食品51基本要求(關(guān)鍵的、概括的):《GB4789.1-2010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)總則》(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求基本要求(關(guān)鍵的、概括的):(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求52第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件53第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件54第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件55第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件56第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件57一、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求一、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求(一)國標(biāo)規(guī)定的基本要求(二)58(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求1.實(shí)驗(yàn)室管理體系的簡單介紹2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(二)實(shí)驗(yàn)室管理的具體要求1.實(shí)驗(yàn)室管理體系的簡單介紹2.59A.食品微生物檢測實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)的目的、過程和組織B.ISO17025和實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可認(rèn)證(CNAS/CMA)ISO17025:檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求《CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》來源于ISO170251.實(shí)驗(yàn)室管理體系的簡單介紹ISO17025:檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求1.實(shí)60中國合格評定國家認(rèn)可委員會CNAS(ChinaNationalAccreditationServiceforConformityAssessment,CNAS)

ISO:國際標(biāo)準(zhǔn)化組織InternationalStandardOrganized計(jì)量認(rèn)證(CMA):《中華人民共和國計(jì)量法》中規(guī)定:為社會提供公證數(shù)據(jù)的產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)機(jī)構(gòu),必須經(jīng)省級以上人民政府計(jì)量行政部門對其計(jì)量檢定、測試能力和可靠性考核合格,這種考核稱為計(jì)量認(rèn)證。中國合格評定國家認(rèn)可委員會CNASISO:國際標(biāo)準(zhǔn)化組織In61第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件62實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù):CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則(ISO17025檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求)舉例:學(xué)校的管理與教學(xué)or班級管理2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求實(shí)驗(yàn)室管理依據(jù):舉例:學(xué)校的管理與教學(xué)or班級管理2.63CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則64CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則CNAS-CL01檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則65第五章食品微生物檢驗(yàn)室及配置課件662.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)要求(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制與保證)(4)檢測報(bào)告要求四方面講解2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)67(1)管理要求1.目標(biāo)和任務(wù):

根據(jù)國際通用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、結(jié)合食品檢驗(yàn)的實(shí)際情況,嚴(yán)格食品微生物檢驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范。2.組織和結(jié)構(gòu):具有明確的法律地位3.管理體系:嚴(yán)格的一整套的技術(shù)管理體系。4.文件控制:檢驗(yàn)工作應(yīng)遵循國際或國家的制定法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)或檢驗(yàn)程序。實(shí)驗(yàn)室四大管理體系文件(舉例):質(zhì)量手冊程序文件作業(yè)指導(dǎo)書(SOP)記錄表格(1)管理要求1.目標(biāo)和任務(wù):根據(jù)國際通用標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、結(jié)合68

上述因素對總的測量不確定度的影響程度,在(各類)檢測之間明顯不同。實(shí)驗(yàn)室在制定檢測和校準(zhǔn)的方法和程序、培訓(xùn)和考核人員、選擇和校準(zhǔn)所用設(shè)備時(shí),應(yīng)考慮到這些因素。(2)技術(shù)要求決定實(shí)驗(yàn)室檢測正確性和可靠性的因素有很多,包括:——人員;——設(shè)施和環(huán)境條件;——檢測和校準(zhǔn)方法及方法確認(rèn);——設(shè)備;——測量的溯源性;——抽樣;——檢測和校準(zhǔn)物品的處置。

上述因素對總的測量不確定度的影響程度,在(各類)檢測之69□檢驗(yàn)人員應(yīng)具備相關(guān)教育背景,具備相應(yīng)的資格證,具備檢驗(yàn)操作技能。如:食品檢驗(yàn)工證、特種設(shè)備操作證等;□檢驗(yàn)人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室生物檢驗(yàn)安全操作和消毒知識;□有顏色視覺障礙的人員不能執(zhí)行涉及到辨色的實(shí)驗(yàn)。□

對檢驗(yàn)人員進(jìn)行持續(xù)有效的管理:建立人員檔案,設(shè)定人員發(fā)展目標(biāo),進(jìn)行繼續(xù)教育和培訓(xùn)。(2)技術(shù)要求七大要素:人、機(jī)、料、法、環(huán)、測、抽樣1.人:人員□檢驗(yàn)人員應(yīng)具備相關(guān)教育背景,具備相應(yīng)的資格證,具備檢70□設(shè)備種類和數(shù)量能滿足檢測要求:溫控設(shè)備[培養(yǎng)箱、冰箱、冰凍機(jī)、烤箱]定容設(shè)備[吸管、自動(dòng)分液器、微量移液器]測量設(shè)備[溫度計(jì)、計(jì)時(shí)器、天平、酸度計(jì)、菌落計(jì)數(shù)器]除菌和滅菌設(shè)備[超凈工作臺、生物安全柜、高壓滅菌鍋]其他設(shè)備[顯微鏡、離心機(jī)、均質(zhì)機(jī)])□設(shè)備安裝布局要便于操作、易于維護(hù)、清潔和校準(zhǔn)。□設(shè)備要定期進(jìn)行維護(hù)和性能驗(yàn)證,并保存相關(guān)記錄?!趺看翁胤N設(shè)備的操作應(yīng)由受過培訓(xùn)的檢驗(yàn)人員(2人)在場,以防事故。2.機(jī):設(shè)備的要求□設(shè)備種類和數(shù)量能滿足檢測要求:2.機(jī):設(shè)備的要求713.料:檢測物料的要求□樣品

(1)檢查、確認(rèn)和登記接收到的樣品有效狀況。因?yàn)闉槲⑸餀z驗(yàn)項(xiàng)目,對樣品的儲藏和運(yùn)輸中的溫度、光照或持續(xù)時(shí)間等因素較敏感。(2)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有樣品傳遞、儲存、處置和識別的管理程序。樣品需有可識別的管理系統(tǒng)和狀態(tài)標(biāo)示,(3)在儲藏在適當(dāng)?shù)臈l件下,以確保樣品在保存期內(nèi)不變質(zhì)。3.料:檢測物料的要求□樣品7273□檢測中使用到的藥品試劑等(1)實(shí)驗(yàn)室用水:滿足實(shí)驗(yàn)室用水一級水的要求(2)培養(yǎng)基的管理:是微生物檢驗(yàn)的關(guān)鍵試驗(yàn)材料。實(shí)驗(yàn)室必須對自配和購買的培養(yǎng)基的可靠性采用一定的方法進(jìn)行鑒定,以確保其有效性。如自配的,必須保存配制記錄。正途購買、驗(yàn)收合格、適當(dāng)保存和有效可用。(3)其他試劑藥品:應(yīng)有對試劑進(jìn)行檢查、接收、拒收和儲存的程序,確保符合相關(guān)檢測的需要,正途購買、驗(yàn)收合格、適當(dāng)保存和有效可用。25□檢測中使用到的藥品試劑等734.法:檢測方法的要求

總則:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用適合的方法和程序進(jìn)行所有檢測,包括被檢測物品的抽樣、處理、運(yùn)輸、存儲和準(zhǔn)備。(1)方法的選擇

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用滿足客戶需求并適用于所進(jìn)行的檢測的方法,包括抽樣的方法。應(yīng)優(yōu)先使用以國際、區(qū)域或國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布的方法。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保使用標(biāo)準(zhǔn)的最新有效版本,除非該版本不適宜或不可能使用。必要時(shí),應(yīng)采用附加細(xì)則對標(biāo)準(zhǔn)加以補(bǔ)充,以確保應(yīng)用的一致性。

(2)方法的證實(shí)實(shí)驗(yàn)室采用標(biāo)準(zhǔn)方法時(shí)要進(jìn)行證實(shí)實(shí)驗(yàn),進(jìn)行一定的實(shí)踐驗(yàn)證,確保自身實(shí)驗(yàn)室具備完全可開展的條件后使用。(3)自制檢測方法應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室有資格能力的人進(jìn)行;引用非標(biāo)方法要進(jìn)行標(biāo)注記錄。4.法:檢測方法的要求總則:實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用適合的方法和程序74□具備滿足檢驗(yàn)要求的檢測室、功能區(qū)和輔助設(shè)施(大門、走廊、管理區(qū)、樣品室、洗手間、儲存室、文檔室等)□具備可控制工作環(huán)境的設(shè)施:應(yīng)具備相應(yīng)的設(shè)施和保證設(shè)施的有效狀態(tài)。如:空調(diào)、中央空調(diào)、空氣過濾系統(tǒng)、排氣系統(tǒng)設(shè)施、照明等?!蹙邆浔O(jiān)控環(huán)境條件的的測量儀器并定期進(jìn)行計(jì)量校準(zhǔn),如溫度計(jì)、濕度計(jì)、壓力表等?!踔贫茖W(xué)合理的環(huán)境檢測程序(使用諸如空氣采樣器、沉降平板接觸盤等)?!蹙邆浒踩O(shè)施:具備檢測人員的個(gè)人安全防護(hù)裝備,如防護(hù)服、手套、口罩等,具備安全事故處理設(shè)施,如洗眼器、緊急沖淋裝置、藥箱、滅火器材和生物安全污染處理設(shè)施等?!跷廴緩U物的處理。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定方案來減少廢物污染檢測環(huán)境和設(shè)施的可能性。需具備處理廢物的設(shè)備設(shè)施,如污染廢物應(yīng)使用滅菌鍋在121℃持續(xù)滅菌至少45min.5.環(huán):環(huán)境和設(shè)施的要求□具備滿足檢驗(yàn)要求的檢測室、功能區(qū)和輔助設(shè)施(大門、走廊、756.測:測量溯源性要求總則:用于檢測對檢測、抽樣結(jié)果的準(zhǔn)確性或有效性有顯著影響的所有設(shè)備,包括輔助測量設(shè)備(例如用于測量環(huán)境條件的設(shè)備),在投入使用前應(yīng)進(jìn)行檢定校準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定設(shè)備校準(zhǔn)的計(jì)劃和程序。

器皿:如容量瓶、移液管等儀器設(shè)備:如pH計(jì)、培養(yǎng)箱、天平等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物:微生物檢測實(shí)驗(yàn)室可使用來自認(rèn)可的國內(nèi)或國外菌種收藏機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)菌株,或使用與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效的商業(yè)派生菌株。Keywords:檢定、校準(zhǔn)、計(jì)量院、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)準(zhǔn)菌株、菌種保藏中心6.測:測量溯源性要求總則:用于檢測對檢測、抽樣結(jié)果的準(zhǔn)76

實(shí)驗(yàn)室為后續(xù)檢測而對物質(zhì)、材料或產(chǎn)品進(jìn)行抽樣時(shí),應(yīng)有用于抽樣的抽樣計(jì)劃和程序。抽樣計(jì)劃和程序在抽樣的地點(diǎn)應(yīng)能夠得到。只要合理,抽樣計(jì)劃應(yīng)根據(jù)適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法制定。抽樣過程應(yīng)注意需要控制的因素,以確保檢測和校準(zhǔn)結(jié)果的有效性。7.抽樣食品微生物檢測常見抽樣方案:見課本《第四章》實(shí)驗(yàn)室為后續(xù)檢測而對物質(zhì)、材料或產(chǎn)品進(jìn)行抽樣時(shí),應(yīng)772.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)要求(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制與保證)(4)檢測報(bào)告要求四方面講解2.食品微生物實(shí)驗(yàn)室的管理體系要求(1)管理要求(2)技術(shù)78(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制和保證)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有質(zhì)量控制程序以監(jiān)控檢測的有效性。這種監(jiān)控應(yīng)有計(jì)劃并加以評審,可包括(但不限于)下列內(nèi)容:a)定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進(jìn)行監(jiān)控和/或使用次級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))開展內(nèi)部質(zhì)量控制;b)參加實(shí)驗(yàn)室間的比對或能力驗(yàn)證計(jì)劃;c)使用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測;d)對存留物品進(jìn)行再檢測;

e)分析一個(gè)物品不同特性結(jié)果的相關(guān)性。舉例:測量審核和能力驗(yàn)證(3)過程和結(jié)果控制要求(即質(zhì)量控制和保證)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有質(zhì)量控79(4)檢測報(bào)告要求

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確和客觀地報(bào)告每一項(xiàng)檢測、校準(zhǔn),或一系列的檢測的結(jié)果,并符合檢測方法中規(guī)定的要求。例4789.2:檢測結(jié)果符合檢測方法標(biāo)準(zhǔn)中的《結(jié)果與報(bào)告》的要求(4)檢測報(bào)告要求實(shí)驗(yàn)室應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確和客80813381823482第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充)二、微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級(補(bǔ)充)三、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求四、無菌室基本要求五、食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)(補(bǔ)充83二無菌室基本要求841、新建無菌室的處理及設(shè)計(jì)要求(1)無菌室應(yīng)設(shè)在較潔凈的環(huán)境中,無污染源;(2)一般無菌室面積5-6m2,不要大于10m2,室內(nèi)六面

應(yīng)光滑平整,耐腐蝕、易清洗,室內(nèi)門窗結(jié)構(gòu)應(yīng)密和,并盡量減少活動(dòng)窗口面積,門為推拉門,便于用臂肘及腳開關(guān);(3)隔去1/4左右作緩沖間,室高2-2.5m,做準(zhǔn)備工作;(4)無菌室先用3%的煤酚皂擦洗工作臺面及地面,再用甲醛加高錳酸鉀熏蒸空氣。日后要定期熏蒸;(5)每次使用無菌室前用紫外燈照射30~60分鐘定期檢查殺菌效果;每兩星期用酒精棉球擦拭紫外線燈管(6)新建的無菌室啟用前或細(xì)菌總數(shù)檢測不合格(凈化級別為100級,平均菌落數(shù)《1個(gè)不小于5μm粒子數(shù)《3.5個(gè)/L)二無菌室基本要求361、新建無菌室的處理及設(shè)計(jì)要求(1)無842、無菌室的使用與管理⑴無菌室應(yīng)保持清潔,擺放最必須的檢驗(yàn)用具;⑵檢驗(yàn)用具及桌椅等位置保持固定,不隨便移動(dòng);⑶每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌椅、地面,然后用甲醛加熱或噴霧滅菌,最后紫外燈滅菌30min;⑷定期檢查室內(nèi)空氣無菌狀況,細(xì)菌數(shù)應(yīng)控制在10個(gè)以下;⑸無菌室殺菌前,應(yīng)將所有物品置于操作之部位(待檢物例外),然后打開紫外燈殺菌30min,時(shí)間一到,關(guān)閉紫外燈。⑹—般實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)入前洗手,自然干燥或烘干,用臀肘推開級沖間門,盡快穿上無菌鞋,關(guān)緩沖間門,打開滅菌衣物,穿好無菌衣,戴上無菌口罩及帽子,女工作人員一定要把頭發(fā)放入帽內(nèi);852、無菌室的使用與管理⑴無菌室應(yīng)保持清潔,擺放最必須的檢85⑺操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說話,不喧嘩,以保持環(huán)境的無菌狀態(tài)。(8)無菌間只允許放置無菌操作臺、轉(zhuǎn)椅、水浴鍋;無菌操作臺上最多只允許擺放以下物品:86物品數(shù)量物品數(shù)量酒精燈1個(gè)滅菌營養(yǎng)瓊脂200ml打火機(jī)1個(gè)滅菌雙料發(fā)酵管6根接種針1個(gè)滅菌單料發(fā)酵管12根消毒面團(tuán)1瓶滅菌平皿10塊洗耳球1個(gè)試管架2副鑷子1個(gè)2ml滅菌吸管5根油筆1支10ml滅菌吸管3根試管簍2個(gè)125ml滅菌燒杯2個(gè)⑺操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行,操作中少說話,不喧嘩,以863、器材及場所的滅菌消毒不同的對象處理方法不同①、高壓蒸汽滅菌(121℃),工作服、口罩,培養(yǎng)基、移液管等。②、火焰滅菌:接種針、接種環(huán)。③、高溫干燥滅菌:各種玻璃器皿、注射器,干燥箱160℃,2h;④、一般消毒:無菌室內(nèi)的凳子、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進(jìn)行滅菌,用其他方法進(jìn)行消毒處理,用2%石炭酸或蘇爾水溶液擦拭消毒;⑤、空氣的消毒:紫外燈照射。3、器材及場所的滅菌消毒不同的對象處理方法不同874、準(zhǔn)備工作要領(lǐng)⑴先進(jìn)行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30-60min;⑵檢驗(yàn)用的有關(guān)器材,檢驗(yàn)前必須消毒滅菌;⑶操作人員必須將手清洗消毒,穿戴好無菌衣帽鞋,采取必要的防護(hù)措施。⑷進(jìn)入無菌室后再一次消毒手部,然后進(jìn)行檢驗(yàn)操作。884、準(zhǔn)備工作要領(lǐng)⑴先進(jìn)行無菌室空間的消毒,開啟紫外燈30-885、操作過程注意事項(xiàng)⑴動(dòng)作要輕,不要太快,玻璃器皿輕拿輕放⑵操作應(yīng)在近火焰區(qū)操作⑶接種針及接種環(huán)使用前后均需灼燒⑷使用吸管時(shí)切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必須用洗耳球操作,不能向含有感染性的溶液中吹入氣體。⑸觀察平板時(shí)不要開蓋,如欲蘸取菌落檢查時(shí),必須靠近火焰區(qū)操作,平皿蓋也不能大開,而是上下蓋適當(dāng)開縫。⑹使用可疑致病菌涂片染色時(shí),應(yīng)使用夾子夾持玻片,切勿用手直接拿玻片,以免造成污染,用過的玻片也應(yīng)置于消毒液中浸泡。然后再消毒。;⑺工作結(jié)束,收拾好器具,用消毒水擦拭工作臺。895、操作過程注意事項(xiàng)⑴動(dòng)作要輕,不要太快,玻璃器皿輕拿輕放89第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)二、微生物實(shí)驗(yàn)室的生物安全分級三、食品微生物檢驗(yàn)室的基本要求四、無菌室基本要求五、食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一節(jié)食品微生物檢驗(yàn)室一、微生物檢驗(yàn)室的設(shè)計(jì)與建設(shè)901、無菌操作要求微生物實(shí)驗(yàn)中最重要的一環(huán),就是要嚴(yán)格地進(jìn)行無菌操作,防止雜菌污染。為此,在實(shí)驗(yàn)過程中,每個(gè)人要嚴(yán)格做到以下幾點(diǎn):①、要穿干凈的白色工作服,帶工作帽:微生物學(xué)工作者在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)穿上白色工作服,離開時(shí)脫去,并經(jīng)常洗滌以保持清潔。②、操作時(shí)要預(yù)

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