第二十八章移植免疫及其免疫檢測(cè)

第二十八章1第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原一、主要組織相容性抗原二、其他組織相容性抗原第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制一、超急性排斥反應(yīng)二、急性排斥反應(yīng)三、慢性排斥反應(yīng)四、移植物抗宿主反應(yīng)第三節(jié)HLA分型一、血清學(xué)分型法二、細(xì)胞學(xué)分型法三、分子生物學(xué)分型法第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)2第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植一、腎臟移植二、肝臟移植三、心臟移植與心肺聯(lián)合移植四、骨髓與其它來(lái)源的干細(xì)胞移植第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療一、組織配型二、移植物與受體的預(yù)處理三、免疫抑制措施第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療3思考題小結(jié)第六節(jié)排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)一、體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義二、尿微量蛋白檢測(cè)的臨床意義三、急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)檢測(cè)的臨床意義四、免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測(cè)的臨床意義思考題第六節(jié)排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)4

移植（transplantation）是指將健康細(xì)胞、組織或器官?gòu)钠湓课灰浦驳阶泽w或異體的一定部位、用以替代或補(bǔ)償機(jī)體所喪失的結(jié)構(gòu)和（或）功能的現(xiàn)代醫(yī)療手段。被移植的細(xì)胞、組織或器官稱(chēng)移植物（graft），提供移植物的個(gè)體稱(chēng)為供體(donor)，接受移植物的個(gè)體稱(chēng)為受體（recipient）或宿主（host）。

移植（transplantation）是指將健康細(xì)胞5自體移植同系移植同種異體移植異種移植原位移植根據(jù)移植部位分類(lèi)異位移植器官移植

移植物種類(lèi)分類(lèi)支架組織移植細(xì)胞移植根據(jù)移植物來(lái)源分類(lèi)移植的類(lèi)型自體移植根據(jù)6

移植名稱(chēng)

供者、受者關(guān)系 舉例

自體移植

同一個(gè)體

自體斷肢再植，自體皮片移植

同系或同基因移植

同系或同基因

人的單卵雙生子間的器官移植

的個(gè)體間

同品系小鼠的皮片移植

同種異基因移植

同種不同基因人與人之間的腎移植

的個(gè)體間不同品系小鼠間的皮片移植

異種移植

異種動(dòng)物間

狗的器官移植給猩猩

豬的器官移植給狗

移植種類(lèi)和命名

移植名稱(chēng) 供者、受者關(guān)系 7第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原主要組織相容性抗原其他組織相容性抗原第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原主要組織相容性抗原其他組織相容性8一、主要組織相容性抗原主要組織相容性復(fù)合體（majorhistocompatibilitycomplex,MHC）編碼的人類(lèi)白細(xì)胞抗原（humanleukocyteantigen,HLA），是不同個(gè)體間進(jìn)行器官或組織細(xì)胞移植時(shí)發(fā)生排斥反應(yīng)的主要成分，這種代表個(gè)體特異性的同種抗原又稱(chēng)組織相容性抗原(histocompatibility)或移植抗原(transplantationantigen)。一、主要組織相容性抗原主要組織相容性復(fù)合體（majorhi9

父

母

HLA是人體多態(tài)性最豐富的基因系統(tǒng)。據(jù)1999年的統(tǒng)計(jì)，HLA復(fù)合物等位基因總數(shù)已達(dá)到1031個(gè)，其中HLA-B等位基因有301個(gè)

A9Cw3B7A2Cw2B13A1Cw1B5A3Cw4B8HLA的遺傳特征單倍體遺傳

高度多態(tài)性父母A9A2A1A3HLA的遺傳特10在三類(lèi)HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ類(lèi)分子是觸發(fā)移植排斥反應(yīng)的首要抗原，尤其是HLA-DR位點(diǎn)的抗原分子HLA的識(shí)別方式：直接識(shí)別間接識(shí)別HLA發(fā)揮雙重作用：介導(dǎo)宿主抗移植物反應(yīng)(HVGR);參與移植物抗宿主反應(yīng)(GVHR)。在三類(lèi)HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ類(lèi)分子是觸發(fā)移植排斥反應(yīng)的首要抗原11二、其他組織相容性抗原次要組織相容性抗原ABO血型抗原系統(tǒng)組織特異性抗原二、其他組織相容性抗原次要組織相容性抗原12第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制移植排斥反應(yīng)（tranlplantationrefection）是針對(duì)移植抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而導(dǎo)致移植物功能喪失或受者機(jī)體損害的過(guò)程。

第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制移植排斥反應(yīng)（tranlpl13排斥反應(yīng)分類(lèi)：超急性排斥反應(yīng)急性排斥反應(yīng)慢性排斥反應(yīng)排斥反應(yīng)分類(lèi)：14預(yù)防措施：ABO血型配型、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)一、超急性排斥反應(yīng)發(fā)生機(jī)制：受者體內(nèi)存有抗供者移植物的預(yù)存抗體，與抗原結(jié)合，激活補(bǔ)體和凝血系統(tǒng),導(dǎo)致血管內(nèi)凝血。預(yù)存抗體來(lái)源：1、供受者之間ABO血型不合；2、受者反復(fù)多次輸血、妊娠或既往作過(guò)移植處理措施：重新移植發(fā)生時(shí)間：血循環(huán)恢復(fù)后的數(shù)分鐘至1～2天內(nèi)預(yù)防措施：ABO血型配型、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)一、超急性排斥反應(yīng)發(fā)生機(jī)15分類(lèi)：急性體液性排斥反應(yīng)：抗體激活補(bǔ)體，并有CD4+T細(xì)胞參與，導(dǎo)致急性血管炎急性細(xì)胞性排斥反應(yīng)：CD8+CTL細(xì)胞的細(xì)胞毒作用、CD4+T和巨噬細(xì)胞的作用，導(dǎo)致急性間質(zhì)炎。二、急性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：移植后數(shù)周至數(shù)月內(nèi)，是排斥反應(yīng)最常見(jiàn)的類(lèi)型處理措施：使用免疫抑制劑分類(lèi)：二、急性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：移植后數(shù)周至數(shù)月內(nèi)，是排16①直接途徑（directpath）:殘留于供者移植物內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞（過(guò)客細(xì)胞）對(duì)受者機(jī)體的免疫系統(tǒng)提供最初的抗原刺激。這種抗原性刺激，來(lái)自移植物中樹(shù)突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞等表面富含的HLA-Ⅰ、-Ⅱ類(lèi)分子②間接途徑（indirectpath）:通過(guò)受者體內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞對(duì)具有同種異基因HLA-Ⅰ、-Ⅱ類(lèi)分子的移植物實(shí)質(zhì)細(xì)胞的識(shí)別。無(wú)論是供者還是受者，其抗原提呈細(xì)胞提供的IL-1、IL-6等刺激信號(hào)，有助于觸發(fā)淋巴細(xì)胞的活化急性排斥反應(yīng)中的兩條抗原提呈途徑①直接途徑（directpath）:殘留于供者移植物內(nèi)的17同種移植排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制同種移植排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制18三、慢性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：一般發(fā)生于移植后數(shù)月甚至數(shù)年臨床特征：對(duì)免疫抑制療法不敏感無(wú)特異性治療方法，最終需要重新進(jìn)行器官移植病理特點(diǎn)：血管壁細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)纖維化和瘢痕形成三、慢性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：一般發(fā)生于移植后數(shù)月甚至數(shù)年臨床19T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等免疫損傷。B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體活化補(bǔ)體或通過(guò)ADCC破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞。急性排斥反應(yīng)反復(fù)發(fā)作所導(dǎo)致的移植物組織退行性變，此與細(xì)胞和體液免疫均有關(guān)系。非免疫相關(guān)因素，諸如局部缺血、再灌注損傷、微生物感染等。受者患有高血壓或糖尿病也可促使慢性排斥反應(yīng)的發(fā)生引起慢性排斥反應(yīng)的因素T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等免疫損傷。引起慢性排20定義：在骨髓移植時(shí)，供者骨髓中的免疫細(xì)胞啟動(dòng)以受者細(xì)胞為靶抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)，引起攻擊受者的移植物抗宿主反應(yīng)。GVHD也可見(jiàn)于脾、胸腺和小腸移植。四、移植物抗宿主反應(yīng)發(fā)生機(jī)制：T細(xì)胞起主要作用IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ等細(xì)胞因子參與ICAM、VCAM、CD44、ELAM-1等粘附分子參與定義：在骨髓移植時(shí)，供者骨髓中的免疫細(xì)胞啟動(dòng)以受者細(xì)胞為靶抗21第三節(jié)HLA分型方法

HLA分型方法的改進(jìn)和不斷完善，使得HLA復(fù)雜的多態(tài)性更加顯現(xiàn)，亦推動(dòng)了HLA與群體及自然選擇關(guān)系的研究，更促進(jìn)了人們對(duì)疾病本質(zhì)的認(rèn)識(shí)。第三節(jié)HLA分型方法HLA分型方法的改進(jìn)和不斷完善，使22一、血清學(xué)分型法應(yīng)用一系列已知抗HLA的特異性標(biāo)準(zhǔn)分型血清與待測(cè)淋巴細(xì)胞混合，借助補(bǔ)體的生物學(xué)作用介導(dǎo)細(xì)胞裂解的細(xì)胞毒試驗(yàn)。耗時(shí)長(zhǎng)不同批號(hào)抗血清結(jié)果常有不同

操作簡(jiǎn)便易行節(jié)約試劑、結(jié)果可靠、重復(fù)性好無(wú)需特殊設(shè)備

優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)一、血清學(xué)分型法應(yīng)用一系列已知抗HLA的特異性標(biāo)準(zhǔn)分23用于HLA分型的微量細(xì)胞毒試驗(yàn)用于HLA分型的微量細(xì)胞毒試驗(yàn)24死（著染）細(xì)胞（%）記分結(jié)果判斷0～101陰性11～202可疑陰性21～504弱陽(yáng)性51～806陽(yáng)性>808強(qiáng)陽(yáng)性0未試驗(yàn)或不能讀數(shù)微量細(xì)胞毒試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)死（著染）細(xì)胞（%）記分結(jié)果判斷0～101陰性11～202可25HLA分型結(jié)果舉例HLA分型結(jié)果舉例26二、細(xì)胞學(xué)分型法

以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（mixedlymphocyteculture,MLC）或稱(chēng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（mixedlymphocytereaction,MLR）為基本技術(shù)的HLA分型法。能用本法測(cè)定的抗原稱(chēng)為L(zhǎng)D抗原（lymphocytedefinedantigen）,包括HLA-D、-DP。MLC分為單向MLC和雙向MLC二、細(xì)胞學(xué)分型法以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（mixedlym27將已知HLA型別的分型細(xì)胞用絲裂霉素C或X線照射預(yù)處理，使其失去增殖能力僅作為刺激細(xì)胞；而以具有增殖能力的受檢者外周血單個(gè)核細(xì)胞為反應(yīng)細(xì)胞。兩者混合培養(yǎng)時(shí)，反應(yīng)細(xì)胞可對(duì)刺激細(xì)胞發(fā)生應(yīng)答而增殖，用3H-TdR摻入法測(cè)定細(xì)胞增殖強(qiáng)度，從而判斷受檢細(xì)胞的HLA型別。根據(jù)選用的刺激細(xì)胞類(lèi)型分為：1．陰性分型法

2．陽(yáng)性分型法

1.單向MLC將已知HLA型別的分型細(xì)胞用絲裂霉素C或X線照射預(yù)處28遺傳型不同的兩個(gè)個(gè)體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于兩者HLA不同，能相互刺激導(dǎo)致對(duì)方淋巴細(xì)胞增殖，故稱(chēng)雙向MLC。在此試驗(yàn)中，各自的淋巴細(xì)胞既是刺激細(xì)胞，又是反應(yīng)細(xì)胞，反應(yīng)后形態(tài)上呈現(xiàn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化和分裂現(xiàn)象，可通過(guò)形態(tài)法計(jì)數(shù)轉(zhuǎn)化細(xì)胞。2.雙向MLC本法不能判斷型別，只能說(shuō)明供、受體HLA抗原配合程度遺傳型不同的兩個(gè)個(gè)體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于兩29三、分子生物學(xué)分型法分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，使得HLA的DNA分型技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生，并在開(kāi)展DNA限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析、DNA指紋圖、等位基因特異性寡核苷酸雜交等基礎(chǔ)上，引入多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)，使HLA分型得以在更精密的水平上進(jìn)行。三、分子生物學(xué)分型法分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，使得H30限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）分析：最早建立的研究HLA多態(tài)性的DNA分型技術(shù)

PCR-RFLP分型法：對(duì)DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增，然后再用限制性?xún)?nèi)切酶進(jìn)行酶切分析，可使限制性長(zhǎng)度分析的敏感度大大增加1.RFLP與PCR-RFLP分型法

限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性（restrictionfragmen31序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-sequencespecificoligonucleotide,PCR-SSO）是以PCR為基礎(chǔ)，將凝膠上擴(kuò)增的HLA基因DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜或尼龍膜，進(jìn)而用放射性核素或酶、地高辛等非放射性物質(zhì)標(biāo)記的寡核苷酸探針與之進(jìn)行雜交，從而對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物作出HLA型別判斷。

2.PCR-SSO分型法

分類(lèi)：斑點(diǎn)或印漬法反向斑點(diǎn)或印漬法PCR-SSO是Ⅱ類(lèi)HLA分型應(yīng)用最廣泛的方法，能夠鑒定所有已知序列的HLA-DR、－DQ、－DP等位基因序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-sequence32是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù),將其與PCR-SSO結(jié)合應(yīng)用于HLA分型，可使分型趨于規(guī)?；妥詣?dòng)化，尤其在HLA多態(tài)性和疾病遺傳背景分析等方面更具優(yōu)勢(shì)。HLA的基因芯片分型法，實(shí)際上是PCR-SSO反向斑點(diǎn)或印漬法的微型化。目前，基因芯片在HLA分型領(lǐng)域的應(yīng)用尚屬起步階段。基因芯片(genechip)是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù),將其與PCR-SSO結(jié)合應(yīng)用于H33原理：應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套HLA等位基因的序列特異性引物（sequencespecificprimer,SSP）,對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而獲得HLA型別特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物3.PCR-SSP分型法

HLA基因擴(kuò)增的特異性包括：座位特異性（locus-specific），如HLA-A、－B、-DRB1等；組特異性（group-specific），如DRB1-01、DRB1-02等；等位基因特異性（allele-specific），如DRB1*0401、DRB1*0402等。原理：應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套HLA等位基因的序列特異性引物（sequ34原理：對(duì)ssDNA進(jìn)行無(wú)變性劑的聚丙烯酰凝膠電泳時(shí)，因其序列的差異可形成不同的空間構(gòu)象而導(dǎo)致電泳遷移率的差異，如此可分辨出單一堿基的差異和檢測(cè)出DNA多態(tài)性或點(diǎn)突變，有助于新的HLA等位基因或突變體的發(fā)現(xiàn)。

4.PCR-SSCP分型法

單鏈構(gòu)象特異性－聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-singlestrandconformationpolymorphism,PCR-SSCP）是以對(duì)待測(cè)基因PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)，對(duì)擴(kuò)增的單鏈DNA（ssDNA）的HLA分型方法。特點(diǎn)：PCR-SSCP作為PCR-SSO的補(bǔ)充，在區(qū)分純合子和雜合子基因方面有其獨(dú)到之處，有利于排除SSO雜交的假性。原理：對(duì)ssDNA進(jìn)行無(wú)變性劑的聚丙烯酰凝膠電泳時(shí)，因其序列35基本過(guò)程：分離待測(cè)細(xì)胞的DNA，應(yīng)用座位、組或等位基因特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物的純化和測(cè)序，測(cè)出的基因序列與HLA基因庫(kù)的DNA已知序列比較，判斷待測(cè)的HLA型別。

5.SBT分型法

基于序列的HLA分型法（sequence-basedHLAtyping,SBT），通過(guò)對(duì)擴(kuò)增后的HLA基因片段通過(guò)核酸序列測(cè)定來(lái)判斷HLA型別?；具^(guò)程：分離待測(cè)細(xì)胞的DNA，應(yīng)用座位、組或等位基因特異性36第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植臨床器官移植術(shù)的建立至今已有50多年的歷史。從腎臟移植到心肺移植、肝臟移植；從完整的器官移植到部分組織器官甚至是細(xì)胞移植；從單一的器官移植到器官聯(lián)合移植。第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植臨床器官移植術(shù)的建立至今37一、腎臟移植腎臟移植，創(chuàng)始于1950年，是臨床開(kāi)展最早、應(yīng)用最多和效果最佳的一種器官移植。由于免疫抑制藥物的不斷更新和移植技術(shù)的不斷提高，腎臟移植患者1年和5年的存活率，分別可達(dá)90%

～95%和80%～90%。

一、腎臟移植腎臟移植，創(chuàng)始于1950年，是臨床開(kāi)展最38組織配型是腎臟移植前選擇供者的重要手段包括：ABO血型配型HLA配型交叉配型腎源選擇的原則：以ABO血型完全相同者為好，至少能夠相容選擇最佳HLA配型的供者器官1.組織配型在腎臟移植中的應(yīng)用組織配型是腎臟移植前選擇供者的重要手段1.組織配型在腎臟移植39臨床觀測(cè)項(xiàng)目:

T細(xì)胞總數(shù)、CD4/CD8比值和IL-2及其受體的檢測(cè)，判斷排斥反應(yīng)的發(fā)生和評(píng)估免疫抑制劑治療效果腎組織活檢，預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生CsA血藥濃度檢測(cè)，指導(dǎo)合理用藥，減少腎毒性

2.腎移植受者的療效檢測(cè)療效監(jiān)測(cè)：受者免疫狀態(tài)檢測(cè)臨床觀測(cè)項(xiàng)目:2.腎移植受者的療效檢測(cè)療效監(jiān)測(cè)：受者免疫狀40二、肝臟移植肝臟移植手術(shù)已經(jīng)成為治療原發(fā)性膽道閉鎖、原發(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、肝炎后肝硬化、酒精性肝病、肝細(xì)胞性肝癌、自身免疫性肝病、急性肝功能衰竭以及藥物誘導(dǎo)的肝臟損傷等疾病，挽救晚期肝病患者生命的最有效方法。二、肝臟移植肝臟移植手術(shù)已經(jīng)成為治療原發(fā)性膽道閉鎖、41特點(diǎn)：

HLA是否匹配與肝臟移植效果無(wú)顯著差異機(jī)制：肝臟移植時(shí)，因HLA不配僅發(fā)生較弱的排斥反應(yīng)，而免疫抑制劑的應(yīng)用有效控制了排斥反應(yīng)的發(fā)生肝臟移植時(shí)仍應(yīng)盡可能進(jìn)行HLA配型1.組織配型在肝臟移植中的應(yīng)用特點(diǎn)：HLA是否匹配與肝臟移植效果無(wú)顯著差異1.組織配型在42排斥反應(yīng)發(fā)生幾率：約2/3的肝移植患者出現(xiàn)過(guò)排斥反應(yīng)的病理學(xué)改變，也有8％的病例術(shù)后發(fā)生急、慢性排斥反應(yīng)，占肝移植致死原因的10%。2.肝移植受者的療效檢測(cè)組織病理學(xué)特點(diǎn)：肝移植術(shù)后第2天，匯管區(qū)出現(xiàn)明顯的白細(xì)胞浸潤(rùn)，匯管區(qū)和肝竇的白細(xì)胞浸潤(rùn)第7天達(dá)高峰，涉及到T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性和中性粒細(xì)胞。在浸潤(rùn)的T細(xì)胞中CD8+細(xì)胞高于CD4+細(xì)胞，也見(jiàn)有IL-2R和CD25+的活化T細(xì)胞。排斥反應(yīng)發(fā)生幾率：約2/3的肝移植患者出現(xiàn)過(guò)排斥反應(yīng)的病理學(xué)43三、心臟移植與心肺聯(lián)合移植在世界范圍內(nèi)，約有300多個(gè)心臟中心進(jìn)行心臟移植，總例數(shù)已超過(guò)7萬(wàn)，年病例不下3000，1年和5年存活率分別為80%和70%。心肺聯(lián)合移植已成為人們可以接受的治療終末期心肺疾病的一種有效方法。三、心臟移植與心肺聯(lián)合移植在世界范圍內(nèi)，約有300多44ABO血型匹配：避免急性排斥反應(yīng)的首要條件。HLAI、Ⅱ類(lèi)分子匹配：移植器官長(zhǎng)期存活的重要因素。

淋巴細(xì)胞毒交叉配合和群體反應(yīng)性抗體檢測(cè)1.組織配型在心臟和心肺聯(lián)合移植中的應(yīng)用ABO血型匹配：避免急性排斥反應(yīng)的首要條件。1.組織配型在心45外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)T、B細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力T細(xì)胞亞類(lèi)百分?jǐn)?shù)及比值CTL細(xì)胞毒作用細(xì)胞因子及其受體表達(dá)或轉(zhuǎn)錄水平轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子

NK細(xì)胞數(shù)及其介導(dǎo)的自然殺傷或ADCC效應(yīng)粘附分子及其配體在各類(lèi)細(xì)胞表達(dá)情況2.心臟及心肺聯(lián)合移植受者的療效檢測(cè)免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)46骨髓和干細(xì)胞移植均系非實(shí)質(zhì)性器官移植，其中骨髓移植開(kāi)展的較早，而干細(xì)胞移植正日益受到臨床工作者的重視。四、骨髓與其他來(lái)源的干細(xì)胞移植骨髓和干細(xì)胞移植均系非實(shí)質(zhì)性器官移植，其中骨髓移植開(kāi)47特點(diǎn)：可同時(shí)發(fā)生HVGR和GVHR

分類(lèi)：

自體骨髓移植、同基因骨髓移植同種異基因骨髓移植（多見(jiàn)）

病例較少成功率高

骨髓移植實(shí)際上是造血干細(xì)胞移植，因此，骨髓中造血干細(xì)胞的質(zhì)和量對(duì)移植的成敗致關(guān)重要。1.骨髓移植特點(diǎn)：可同時(shí)發(fā)生HVGR和GVHR病例較少骨髓移植實(shí)際上是48方法：使用藥物動(dòng)員劑促使造血干細(xì)胞從骨髓釋放到外周血，從中獲取足量的干細(xì)胞用于移植，可獲得與骨髓移植同樣的治療目的特點(diǎn)：與骨髓移植相比，具有采集方便、供者不需麻醉、移植后造血恢復(fù)快，GVHR發(fā)生率和嚴(yán)重程度不高等優(yōu)點(diǎn)。

移植前檢測(cè)：HLA和ABO血型配型、血常規(guī)與骨髓檢驗(yàn)、性染色體測(cè)定、造血干細(xì)胞鑒定和GVHR征象追蹤等腫瘤干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)，提示人們?cè)谶M(jìn)行干細(xì)胞應(yīng)用時(shí)應(yīng)該注意生物安全性。2.外周血和臍血干細(xì)胞移植方法：使用藥物動(dòng)員劑促使造血干細(xì)胞從骨髓釋放到外周血，從中獲49適應(yīng)于同種異型或異基因骨髓移植的疾病。乳腺、卵巢、睪丸以及肺部等實(shí)體瘤，不宜行骨髓移植，多應(yīng)用自體末稍血干細(xì)胞移植治療。急性髓樣白血病、急性淋巴母細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金淋巴瘤和何杰金病等，則既是同種異型或異基因骨髓移植的適應(yīng)癥，也可用自體末稍血干細(xì)胞移植進(jìn)行治療。3.適于骨髓或末稍血干細(xì)胞移植的常見(jiàn)疾病

適應(yīng)于同種異型或異基因骨髓移植的疾病。3.適于骨髓或末稍血干50第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療除角膜、腦、睪丸和子宮等少數(shù)組織或器官移植外，移植排斥反應(yīng)仍然是困擾臨床移植的重要問(wèn)題，有效地預(yù)防排斥反應(yīng)是延長(zhǎng)移植物存活時(shí)間和保護(hù)受者的重要手段。第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療除角膜、腦、睪丸和子宮等51一、組織配型HLA是引起同種異型移植排斥反應(yīng)的主要抗原供者與受者的HLA等位基因匹配程度決定了移植排斥反應(yīng)的強(qiáng)弱程度通過(guò)HLA組織配型(tissuetyping)，選擇合適的供者，減輕排斥反應(yīng)

1.HLA配型一、組織配型HLA是引起同種異型移植排斥反應(yīng)的主要抗原1.H52①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位點(diǎn)數(shù)越多，移植物存活機(jī)率越高②供、受者HLA-DR位點(diǎn)相配更重要，因?yàn)镠LA-DR和DQ基因有很強(qiáng)的連鎖不平衡，DR位點(diǎn)相配的個(gè)體，通常DQ位點(diǎn)也相配；③不同地區(qū)HLA匹配程度與移植結(jié)果的關(guān)系有著不同的預(yù)測(cè)價(jià)值，在歐洲HLA匹配的程度對(duì)移植結(jié)果的預(yù)測(cè)性比美國(guó)高，因?yàn)闅W洲人群的近交程度較高，導(dǎo)致HLA位點(diǎn)連鎖不平衡性削弱。移植物存活與HLA配型的關(guān)系①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位點(diǎn)數(shù)越多，移植物存活53交叉配型采用補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)

陽(yáng)性對(duì)照:陽(yáng)性對(duì)照血清可用淋巴細(xì)胞免疫家兔獲得陰性對(duì)照:陰性血清可采用無(wú)受血史的AB血型男性血清根據(jù)反應(yīng)時(shí)參與的細(xì)胞成分分類(lèi)：

淋巴細(xì)胞交叉配型T細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型B細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型流式細(xì)胞法交叉配型自身交叉配型

結(jié)果判讀:

交叉配型陽(yáng)性:表明受者預(yù)存有抗供體的抗體臨床意義:

交叉配型陽(yáng)性:即使組織配型好，也不宜進(jìn)行移植，易發(fā)生超急性排斥反應(yīng)。在做受體選擇時(shí)，組織配型差，但交叉配型為陰性，仍可實(shí)施移植。交叉配型常用于腎臟移植2.HLA交叉配型與預(yù)存抗體的檢測(cè)交叉配型采用補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)2.HLA交叉配型與預(yù)存抗體54方法方法類(lèi)型與參與成分需時(shí)應(yīng)用組織配型補(bǔ)體依賴(lài)的淋巴毒試驗(yàn)血清學(xué)法（HLA抗血清、補(bǔ)體、待測(cè)細(xì)胞）3hHLAⅠ、Ⅱ類(lèi)抗原鑒定交叉配型PBL交叉配型血清學(xué)法（受著血清、供者細(xì)胞、補(bǔ)體、有/無(wú)AHG）3h檢測(cè)受者血清中已存在的抗供者抗體TB交叉配型血清學(xué)法（純化的供者T/B細(xì)胞、受者血清、AHG）3-6hT細(xì)胞：檢測(cè)抗HLAI類(lèi)抗體；B細(xì)胞：檢測(cè)HLAI、II類(lèi)抗體MLC試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)法（供、受者細(xì)胞培養(yǎng)）6dHLAII類(lèi)抗原相容性CML試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)法（受者細(xì)胞、供者刺激細(xì)胞作為靶細(xì)胞）4h抗供者CTL檢測(cè)FCC血清學(xué)法（受者血清、供者細(xì)胞、熒光抗人Ig）3-4h檢測(cè)非常弱的和無(wú)細(xì)胞毒性的抗供者抗體自身交叉配型血清學(xué)法（受者PBL、T和B細(xì)胞以及血清）和FCC3-4h檢測(cè)非特異的淋巴細(xì)胞抗體（自身抗體）HLA抗體篩選HLAI類(lèi)抗體的篩選血清學(xué)法（受者血清、相應(yīng)的HLA類(lèi)型T細(xì)胞或PBL）3h×60細(xì)胞HLAI類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定HLAII類(lèi)抗體的篩選血清學(xué)法（吸附過(guò)的受者血清、用作HLA-DR/DQ分型的B細(xì)胞）4h×60細(xì)胞數(shù)加吸附時(shí)間HLAII類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定CML：細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞溶解試驗(yàn)方法方法類(lèi)型與參與成分需時(shí)應(yīng)用組織配型補(bǔ)體依賴(lài)的淋巴毒試驗(yàn)血55群體反應(yīng)性抗體（panelreactiveantibody,PRA）：指用40～60人含已知HLA的T細(xì)胞或T、B混合細(xì)胞，檢測(cè)待移植受者血清所得到的抗體陽(yáng)性百分?jǐn)?shù)。檢測(cè)意義:

用于判斷器官移植時(shí)受體的敏感程度高PRA血清:可針對(duì)多個(gè)HLA抗原發(fā)生反應(yīng)，受體對(duì)所接受的移植器官或組織威脅大注意:應(yīng)考慮在不同HLA上可能出現(xiàn)的共同表位或稱(chēng)公共抗原（publicantigens）與受體血清發(fā)生的交叉反應(yīng)3.群體反應(yīng)性抗體的檢測(cè)3.群體反應(yīng)性抗體的檢測(cè)56不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同首先是從移植術(shù)的角度對(duì)離體組織器官進(jìn)行外科修整，然后根據(jù)不同器官的要求采取相應(yīng)的預(yù)處理二、移植物與受體的預(yù)處理（一）移植物的預(yù)處理不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同二、移植物與受體57組織配型或交叉配型移植前應(yīng)用一定劑量的免疫抑制劑，其用量視組織配型的結(jié)果而定術(shù)前輸血,視患者的需要進(jìn)行

（二）受體的準(zhǔn)備組織配型或交叉配型（二）受體的準(zhǔn)備58人工調(diào)節(jié)受者機(jī)體的免疫狀態(tài)是控制移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生的主要途徑采取的措施：

使用免疫抑制劑:以此控制受者的免疫應(yīng)答，降低對(duì)移植物的排斥能力

誘導(dǎo)免疫耐受:誘導(dǎo)受者對(duì)移植抗原的特異性免疫耐受三、免疫抑制措施人工調(diào)節(jié)受者機(jī)體的免疫狀態(tài)是控制移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生的主要途593、生物性免疫抑制劑

2、某些中草藥

抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)或抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)

細(xì)胞性單克隆抗體某些融合蛋白反義寡核苷酸(antisenceoligonucleotide)

1、化學(xué)性免疫抑制劑

環(huán)孢菌素A(cyclosporineA，CsA)FK506(tacrolimus)，霉酚酸酯(mycophendatemofetil,MMF)糖皮質(zhì)激素硫唑嘌呤環(huán)磷酰胺（一）免疫抑制劑的應(yīng)用3、生物性免疫抑制劑2、某些中草藥抗淋巴細(xì)胞球蛋白(AL60常見(jiàn)免疫抑制劑作用位點(diǎn)常見(jiàn)免疫抑制劑作用位點(diǎn)61通過(guò)將同種抗原置入子宮或注射給新生兒而誘導(dǎo)同種抗原的特異性免疫耐受封閉同種抗原特異性T細(xì)胞的TCR，以誘導(dǎo)受者特異性T細(xì)胞凋亡，產(chǎn)生免疫耐受干擾共刺激信號(hào)的形成誘導(dǎo)T細(xì)胞無(wú)能阻礙T細(xì)胞活化誘導(dǎo)特異性耐受T細(xì)胞疫苗（Tcellvaccine,TCV）（二）對(duì)移植抗原特異性免疫耐受誘導(dǎo)通過(guò)將同種抗原置入子宮或注射給新生兒而誘導(dǎo)同種抗原的特異性免62第六節(jié)排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，受者體內(nèi)的免疫應(yīng)答將發(fā)生一系列變化，據(jù)此，檢測(cè)機(jī)體的免疫狀態(tài)可幫助診斷或推測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生。第六節(jié)排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)，受者體內(nèi)的63一、體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義特異性抗體水平的檢測(cè)

相關(guān)免疫指標(biāo)：

ABO等血型和HLA抗體抗供者組織細(xì)胞抗體血管內(nèi)皮細(xì)胞抗體冷凝集素

測(cè)定方法:

交叉配型、補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒性試驗(yàn)

血清PRA水平:判斷器官移植時(shí)受體對(duì)移植物的敏感程度，基于細(xì)胞毒性試驗(yàn)的PRA測(cè)定，被作為心臟移植前的常規(guī)項(xiàng)目，若PRA超過(guò)5％，則應(yīng)進(jìn)行供者淋巴細(xì)胞與受者血清的交叉配型。（一）體液免疫水平檢測(cè)的臨床意義一、體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義特異性抗體水平的檢64補(bǔ)體水平的檢測(cè)補(bǔ)體活性與急性移植排斥反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)當(dāng)移植物遭受排斥時(shí)，補(bǔ)體成分的消耗增加可采用溶血法或比濁法進(jìn)行檢測(cè)。補(bǔ)體活性的檢測(cè)補(bǔ)體的裂解產(chǎn)物，如C3a、C3b、C3d等的測(cè)定常用的檢測(cè)方法有免疫電泳、免疫標(biāo)記技術(shù)補(bǔ)體水平的檢測(cè)65（二）細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義外周血T細(xì)胞及其亞類(lèi)的計(jì)數(shù)

CD4/CD8比值大于1.20時(shí):預(yù)示急性排斥即將發(fā)生，CD4/CD8比值小于1.08時(shí):發(fā)生感染的可能性很大。若進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，對(duì)急性排斥反應(yīng)和感染具有鑒別診斷的意義NK細(xì)胞活性測(cè)定混合淋巴細(xì)胞反應(yīng):刺激細(xì)胞:滅活的供者的淋巴細(xì)胞反應(yīng)細(xì)胞:受者淋巴細(xì)胞結(jié)果顯示的是CTL和NK細(xì)胞共同作用的結(jié)果。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)NK細(xì)胞活性則意義更大（二）細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義外周血T細(xì)胞及其亞類(lèi)的計(jì)數(shù)N66血清細(xì)胞細(xì)胞因子測(cè)定

IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ等細(xì)胞因子的水平均可升高

個(gè)體間血清IL-2R的含量差別顯著粘附分子及其配體的檢測(cè)免疫細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞等細(xì)胞膜表面粘附分子及其配體的表達(dá)，與急性排斥反應(yīng)的發(fā)生密切相關(guān)。諸如ELAM-1、VCAM、ICAM和HLA分子等比較受者接受移植物前后的細(xì)胞因子水平環(huán)孢霉素A具有腎毒性，血清肌酐值增高，而IL-2R卻明顯降低血清肌酐值和IL-2R同時(shí)增高提示急性排斥反應(yīng)的發(fā)生巨細(xì)胞病毒感染時(shí)，IL-2R血清含量的升高將更為明顯血清細(xì)胞細(xì)胞因子測(cè)定比較受者接受移植物前后的細(xì)胞因子水平67二、尿微量蛋白檢測(cè)的臨床意義尿微量蛋白檢測(cè)意義：

判斷大器官移植、尤其是腎臟移植時(shí)排斥反應(yīng)的發(fā)生檢測(cè)免疫抑制藥的肝腎毒副作用α1-微球蛋白是能較早反映腎功能損害的指標(biāo)尿α-1微球蛋白和尿IgG與腎移植受者短期腎功能關(guān)系密切尿微量蛋白種類(lèi)：

血漿蛋白：包括白蛋白（Aib）、IgG、IgA、IgM、輕鏈（κλ）、β2-微球蛋白（β2M）、補(bǔ)體C3、α1微球蛋白（α1M）、α2巨球蛋白（α2M）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）、游離血紅蛋白（Hb）、肌紅蛋白（Mb）及其他血漿蛋白和酶

非血漿蛋白：腎臟的Tamm-Horsfall蛋白（THP）、SIgA、腎小球基底膜（GBM）抗原等二、尿微量蛋白檢測(cè)的臨床意義尿微量蛋白檢測(cè)意義：68三、急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)檢測(cè)的臨床意義

C反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein,CRP)、IL-1、IL-6、TNF－α以及HSP等炎癥分子，是發(fā)生炎癥反應(yīng)的標(biāo)志性分子，在發(fā)生感染性疾病和自身免疫性疾病時(shí)均有不同程度的增高。三、急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)檢測(cè)的臨床意義C反應(yīng)蛋白(C-69四、免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測(cè)的臨床意義免疫抑制藥物的主要毒副作用：

骨髓抑制，可發(fā)生粒細(xì)胞減少或缺乏癥肝功能損傷，可表現(xiàn)為肝功能異常，如SGPT或ALT的升高影響性功能，尤其是男性，少數(shù)可導(dǎo)致不育癥脫發(fā)出血性膀肌炎，可出現(xiàn)血尿惡心、嘔吐、食欲不振等消化道表現(xiàn)免疫抑制劑檢測(cè)意義：通過(guò)對(duì)血液藥物濃度的觀察，掌握藥代動(dòng)力學(xué)的情況，指導(dǎo)臨床用藥以充分發(fā)揮其防治器官移植排斥反應(yīng)的同時(shí)減少其毒副作用四、免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測(cè)的臨床意義免疫抑制藥物的主要毒701．何謂移植，移植的類(lèi)型有哪些？影響移植物存活時(shí)間的關(guān)鍵因素是什么，其與HLA的關(guān)系如何？2．CDC原理是什么，需要那些器材，在器官、組織和細(xì)胞移植中有何作用，如何判斷結(jié)果？3．HLA等位基因分型技術(shù)有哪些？在分型所用的制劑、過(guò)程等方面各有何特點(diǎn)？4．試思考現(xiàn)有HLA分型方法的優(yōu)缺點(diǎn)，并由此分析分型方法學(xué)改進(jìn)的可能途徑和發(fā)展趨勢(shì)。HLA分型除應(yīng)用于器官移植領(lǐng)域外，還有哪些實(shí)際應(yīng)用價(jià)值？5．HLA是誘導(dǎo)移植排斥反應(yīng)的主要靶抗原，此外還有哪些組織特異性抗原引起臨床工作者的關(guān)注，如何認(rèn)識(shí)器官移植時(shí)的HLA配型？思考題1．何謂移植，移植的類(lèi)型有哪些？影響移植物存活時(shí)間的關(guān)鍵因素716．移植排斥反應(yīng)有那些主要類(lèi)型，其發(fā)生機(jī)制如何？7．HLA交叉配型應(yīng)用哪些方法，交叉配型的意義是什么？何謂群體反應(yīng)性抗體，如何檢測(cè)，意義何在？8．試想如何通過(guò)免疫耐受機(jī)制延長(zhǎng)移植器官的存活時(shí)間？由此推測(cè)器官移植可能的發(fā)展趨勢(shì)。9．排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)包括哪些方面？10．哪種器官的移植有發(fā)生超急性、急性和慢性排斥反應(yīng)的可能？HVGR和GVHR均可發(fā)生的移植是哪一類(lèi)，為什么？請(qǐng)思考干細(xì)胞在移植領(lǐng)域的應(yīng)用前景。6．移植排斥反應(yīng)有那些主要類(lèi)型，其發(fā)生機(jī)制如何？72MHC是引起移植排斥反應(yīng)的主要靶抗原。移植排斥反應(yīng)包括：超急性排斥反應(yīng)、急性排斥反應(yīng)、慢性排斥反應(yīng)和移植物抗宿主病等。通過(guò)組織配型、移植物與受體的預(yù)處理、免疫抑制措施等措施可以預(yù)防和控制移植排斥反應(yīng)的發(fā)生。排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)包括：體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測(cè)、尿微量蛋白檢測(cè)、急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)檢測(cè)和免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測(cè)等。小結(jié)MHC是引起移植排斥反應(yīng)的主要靶抗原。小結(jié)73

第二十八章移植免疫及其免疫檢測(cè)

第二十八章74第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原一、主要組織相容性抗原二、其他組織相容性抗原第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制一、超急性排斥反應(yīng)二、急性排斥反應(yīng)三、慢性排斥反應(yīng)四、移植物抗宿主反應(yīng)第三節(jié)HLA分型一、血清學(xué)分型法二、細(xì)胞學(xué)分型法三、分子生物學(xué)分型法第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)75第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植一、腎臟移植二、肝臟移植三、心臟移植與心肺聯(lián)合移植四、骨髓與其它來(lái)源的干細(xì)胞移植第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療一、組織配型二、移植物與受體的預(yù)處理三、免疫抑制措施第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療76思考題小結(jié)第六節(jié)排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)一、體液免疫與細(xì)胞免疫水平檢測(cè)的臨床意義二、尿微量蛋白檢測(cè)的臨床意義三、急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)檢測(cè)的臨床意義四、免疫抑制劑體內(nèi)藥物濃度檢測(cè)的臨床意義思考題第六節(jié)排斥反應(yīng)的免疫監(jiān)測(cè)77

移植（transplantation）是指將健康細(xì)胞、組織或器官?gòu)钠湓课灰浦驳阶泽w或異體的一定部位、用以替代或補(bǔ)償機(jī)體所喪失的結(jié)構(gòu)和（或）功能的現(xiàn)代醫(yī)療手段。被移植的細(xì)胞、組織或器官稱(chēng)移植物（graft），提供移植物的個(gè)體稱(chēng)為供體(donor)，接受移植物的個(gè)體稱(chēng)為受體（recipient）或宿主（host）。

移植（transplantation）是指將健康細(xì)胞78自體移植同系移植同種異體移植異種移植原位移植根據(jù)移植部位分類(lèi)異位移植器官移植

移植物種類(lèi)分類(lèi)支架組織移植細(xì)胞移植根據(jù)移植物來(lái)源分類(lèi)移植的類(lèi)型自體移植根據(jù)79

移植名稱(chēng)

供者、受者關(guān)系 舉例

自體移植

同一個(gè)體

自體斷肢再植，自體皮片移植

同系或同基因移植

同系或同基因

人的單卵雙生子間的器官移植

的個(gè)體間

同品系小鼠的皮片移植

同種異基因移植

同種不同基因人與人之間的腎移植

的個(gè)體間不同品系小鼠間的皮片移植

異種移植

異種動(dòng)物間

狗的器官移植給猩猩

豬的器官移植給狗

移植種類(lèi)和命名

移植名稱(chēng) 供者、受者關(guān)系 80第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原主要組織相容性抗原其他組織相容性抗原第一節(jié)引起排斥反應(yīng)的靶抗原主要組織相容性抗原其他組織相容性81一、主要組織相容性抗原主要組織相容性復(fù)合體（majorhistocompatibilitycomplex,MHC）編碼的人類(lèi)白細(xì)胞抗原（humanleukocyteantigen,HLA），是不同個(gè)體間進(jìn)行器官或組織細(xì)胞移植時(shí)發(fā)生排斥反應(yīng)的主要成分，這種代表個(gè)體特異性的同種抗原又稱(chēng)組織相容性抗原(histocompatibility)或移植抗原(transplantationantigen)。一、主要組織相容性抗原主要組織相容性復(fù)合體（majorhi82

父

母

HLA是人體多態(tài)性最豐富的基因系統(tǒng)。據(jù)1999年的統(tǒng)計(jì)，HLA復(fù)合物等位基因總數(shù)已達(dá)到1031個(gè)，其中HLA-B等位基因有301個(gè)

A9Cw3B7A2Cw2B13A1Cw1B5A3Cw4B8HLA的遺傳特征單倍體遺傳

高度多態(tài)性父母A9A2A1A3HLA的遺傳特83在三類(lèi)HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ類(lèi)分子是觸發(fā)移植排斥反應(yīng)的首要抗原，尤其是HLA-DR位點(diǎn)的抗原分子HLA的識(shí)別方式：直接識(shí)別間接識(shí)別HLA發(fā)揮雙重作用：介導(dǎo)宿主抗移植物反應(yīng)(HVGR);參與移植物抗宿主反應(yīng)(GVHR)。在三類(lèi)HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ類(lèi)分子是觸發(fā)移植排斥反應(yīng)的首要抗原84二、其他組織相容性抗原次要組織相容性抗原ABO血型抗原系統(tǒng)組織特異性抗原二、其他組織相容性抗原次要組織相容性抗原85第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制移植排斥反應(yīng)（tranlplantationrefection）是針對(duì)移植抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而導(dǎo)致移植物功能喪失或受者機(jī)體損害的過(guò)程。

第二節(jié)排斥反應(yīng)的種類(lèi)及發(fā)生機(jī)制移植排斥反應(yīng)（tranlpl86排斥反應(yīng)分類(lèi)：超急性排斥反應(yīng)急性排斥反應(yīng)慢性排斥反應(yīng)排斥反應(yīng)分類(lèi)：87預(yù)防措施：ABO血型配型、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)一、超急性排斥反應(yīng)發(fā)生機(jī)制：受者體內(nèi)存有抗供者移植物的預(yù)存抗體，與抗原結(jié)合，激活補(bǔ)體和凝血系統(tǒng),導(dǎo)致血管內(nèi)凝血。預(yù)存抗體來(lái)源：1、供受者之間ABO血型不合；2、受者反復(fù)多次輸血、妊娠或既往作過(guò)移植處理措施：重新移植發(fā)生時(shí)間：血循環(huán)恢復(fù)后的數(shù)分鐘至1～2天內(nèi)預(yù)防措施：ABO血型配型、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)一、超急性排斥反應(yīng)發(fā)生機(jī)88分類(lèi)：急性體液性排斥反應(yīng)：抗體激活補(bǔ)體，并有CD4+T細(xì)胞參與，導(dǎo)致急性血管炎急性細(xì)胞性排斥反應(yīng)：CD8+CTL細(xì)胞的細(xì)胞毒作用、CD4+T和巨噬細(xì)胞的作用，導(dǎo)致急性間質(zhì)炎。二、急性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：移植后數(shù)周至數(shù)月內(nèi)，是排斥反應(yīng)最常見(jiàn)的類(lèi)型處理措施：使用免疫抑制劑分類(lèi)：二、急性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：移植后數(shù)周至數(shù)月內(nèi)，是排89①直接途徑（directpath）:殘留于供者移植物內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞（過(guò)客細(xì)胞）對(duì)受者機(jī)體的免疫系統(tǒng)提供最初的抗原刺激。這種抗原性刺激，來(lái)自移植物中樹(shù)突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞等表面富含的HLA-Ⅰ、-Ⅱ類(lèi)分子②間接途徑（indirectpath）:通過(guò)受者體內(nèi)的抗原提呈細(xì)胞對(duì)具有同種異基因HLA-Ⅰ、-Ⅱ類(lèi)分子的移植物實(shí)質(zhì)細(xì)胞的識(shí)別。無(wú)論是供者還是受者，其抗原提呈細(xì)胞提供的IL-1、IL-6等刺激信號(hào)，有助于觸發(fā)淋巴細(xì)胞的活化急性排斥反應(yīng)中的兩條抗原提呈途徑①直接途徑（directpath）:殘留于供者移植物內(nèi)的90同種移植排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制同種移植排斥反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制91三、慢性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：一般發(fā)生于移植后數(shù)月甚至數(shù)年臨床特征：對(duì)免疫抑制療法不敏感無(wú)特異性治療方法，最終需要重新進(jìn)行器官移植病理特點(diǎn)：血管壁細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)纖維化和瘢痕形成三、慢性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間：一般發(fā)生于移植后數(shù)月甚至數(shù)年臨床92T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等免疫損傷。B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體活化補(bǔ)體或通過(guò)ADCC破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞。急性排斥反應(yīng)反復(fù)發(fā)作所導(dǎo)致的移植物組織退行性變，此與細(xì)胞和體液免疫均有關(guān)系。非免疫相關(guān)因素，諸如局部缺血、再灌注損傷、微生物感染等。受者患有高血壓或糖尿病也可促使慢性排斥反應(yīng)的發(fā)生引起慢性排斥反應(yīng)的因素T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)等免疫損傷。引起慢性排93定義：在骨髓移植時(shí)，供者骨髓中的免疫細(xì)胞啟動(dòng)以受者細(xì)胞為靶抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)，引起攻擊受者的移植物抗宿主反應(yīng)。GVHD也可見(jiàn)于脾、胸腺和小腸移植。四、移植物抗宿主反應(yīng)發(fā)生機(jī)制：T細(xì)胞起主要作用IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ等細(xì)胞因子參與ICAM、VCAM、CD44、ELAM-1等粘附分子參與定義：在骨髓移植時(shí)，供者骨髓中的免疫細(xì)胞啟動(dòng)以受者細(xì)胞為靶抗94第三節(jié)HLA分型方法

HLA分型方法的改進(jìn)和不斷完善，使得HLA復(fù)雜的多態(tài)性更加顯現(xiàn)，亦推動(dòng)了HLA與群體及自然選擇關(guān)系的研究，更促進(jìn)了人們對(duì)疾病本質(zhì)的認(rèn)識(shí)。第三節(jié)HLA分型方法HLA分型方法的改進(jìn)和不斷完善，使95一、血清學(xué)分型法應(yīng)用一系列已知抗HLA的特異性標(biāo)準(zhǔn)分型血清與待測(cè)淋巴細(xì)胞混合，借助補(bǔ)體的生物學(xué)作用介導(dǎo)細(xì)胞裂解的細(xì)胞毒試驗(yàn)。耗時(shí)長(zhǎng)不同批號(hào)抗血清結(jié)果常有不同

操作簡(jiǎn)便易行節(jié)約試劑、結(jié)果可靠、重復(fù)性好無(wú)需特殊設(shè)備

優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)一、血清學(xué)分型法應(yīng)用一系列已知抗HLA的特異性標(biāo)準(zhǔn)分96用于HLA分型的微量細(xì)胞毒試驗(yàn)用于HLA分型的微量細(xì)胞毒試驗(yàn)97死（著染）細(xì)胞（%）記分結(jié)果判斷0～101陰性11～202可疑陰性21～504弱陽(yáng)性51～806陽(yáng)性>808強(qiáng)陽(yáng)性0未試驗(yàn)或不能讀數(shù)微量細(xì)胞毒試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)死（著染）細(xì)胞（%）記分結(jié)果判斷0～101陰性11～202可98HLA分型結(jié)果舉例HLA分型結(jié)果舉例99二、細(xì)胞學(xué)分型法

以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（mixedlymphocyteculture,MLC）或稱(chēng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)（mixedlymphocytereaction,MLR）為基本技術(shù)的HLA分型法。能用本法測(cè)定的抗原稱(chēng)為L(zhǎng)D抗原（lymphocytedefinedantigen）,包括HLA-D、-DP。MLC分為單向MLC和雙向MLC二、細(xì)胞學(xué)分型法以混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)（mixedlym100將已知HLA型別的分型細(xì)胞用絲裂霉素C或X線照射預(yù)處理，使其失去增殖能力僅作為刺激細(xì)胞；而以具有增殖能力的受檢者外周血單個(gè)核細(xì)胞為反應(yīng)細(xì)胞。兩者混合培養(yǎng)時(shí)，反應(yīng)細(xì)胞可對(duì)刺激細(xì)胞發(fā)生應(yīng)答而增殖，用3H-TdR摻入法測(cè)定細(xì)胞增殖強(qiáng)度，從而判斷受檢細(xì)胞的HLA型別。根據(jù)選用的刺激細(xì)胞類(lèi)型分為：1．陰性分型法

2．陽(yáng)性分型法

1.單向MLC將已知HLA型別的分型細(xì)胞用絲裂霉素C或X線照射預(yù)處101遺傳型不同的兩個(gè)個(gè)體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于兩者HLA不同，能相互刺激導(dǎo)致對(duì)方淋巴細(xì)胞增殖，故稱(chēng)雙向MLC。在此試驗(yàn)中，各自的淋巴細(xì)胞既是刺激細(xì)胞，又是反應(yīng)細(xì)胞，反應(yīng)后形態(tài)上呈現(xiàn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化和分裂現(xiàn)象，可通過(guò)形態(tài)法計(jì)數(shù)轉(zhuǎn)化細(xì)胞。2.雙向MLC本法不能判斷型別，只能說(shuō)明供、受體HLA抗原配合程度遺傳型不同的兩個(gè)個(gè)體淋巴細(xì)胞在體外混合培養(yǎng)時(shí)，由于兩102三、分子生物學(xué)分型法分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，使得HLA的DNA分型技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生，并在開(kāi)展DNA限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析、DNA指紋圖、等位基因特異性寡核苷酸雜交等基礎(chǔ)上，引入多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)，使HLA分型得以在更精密的水平上進(jìn)行。三、分子生物學(xué)分型法分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，使得H103限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）分析：最早建立的研究HLA多態(tài)性的DNA分型技術(shù)

PCR-RFLP分型法：對(duì)DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增，然后再用限制性?xún)?nèi)切酶進(jìn)行酶切分析，可使限制性長(zhǎng)度分析的敏感度大大增加1.RFLP與PCR-RFLP分型法

限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性（restrictionfragmen104序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-sequencespecificoligonucleotide,PCR-SSO）是以PCR為基礎(chǔ)，將凝膠上擴(kuò)增的HLA基因DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜或尼龍膜，進(jìn)而用放射性核素或酶、地高辛等非放射性物質(zhì)標(biāo)記的寡核苷酸探針與之進(jìn)行雜交，從而對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物作出HLA型別判斷。

2.PCR-SSO分型法

分類(lèi)：斑點(diǎn)或印漬法反向斑點(diǎn)或印漬法PCR-SSO是Ⅱ類(lèi)HLA分型應(yīng)用最廣泛的方法，能夠鑒定所有已知序列的HLA-DR、－DQ、－DP等位基因序列特異性寡核苷酸-聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-sequence105是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù),將其與PCR-SSO結(jié)合應(yīng)用于HLA分型，可使分型趨于規(guī)?；妥詣?dòng)化，尤其在HLA多態(tài)性和疾病遺傳背景分析等方面更具優(yōu)勢(shì)。HLA的基因芯片分型法，實(shí)際上是PCR-SSO反向斑點(diǎn)或印漬法的微型化。目前，基因芯片在HLA分型領(lǐng)域的應(yīng)用尚屬起步階段?；蛐酒?genechip)是近年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù),將其與PCR-SSO結(jié)合應(yīng)用于H106原理：應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套HLA等位基因的序列特異性引物（sequencespecificprimer,SSP）,對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而獲得HLA型別特異性的擴(kuò)增產(chǎn)物3.PCR-SSP分型法

HLA基因擴(kuò)增的特異性包括：座位特異性（locus-specific），如HLA-A、－B、-DRB1等；組特異性（group-specific），如DRB1-01、DRB1-02等；等位基因特異性（allele-specific），如DRB1*0401、DRB1*0402等。原理：應(yīng)用設(shè)計(jì)的一套HLA等位基因的序列特異性引物（sequ107原理：對(duì)ssDNA進(jìn)行無(wú)變性劑的聚丙烯酰凝膠電泳時(shí)，因其序列的差異可形成不同的空間構(gòu)象而導(dǎo)致電泳遷移率的差異，如此可分辨出單一堿基的差異和檢測(cè)出DNA多態(tài)性或點(diǎn)突變，有助于新的HLA等位基因或突變體的發(fā)現(xiàn)。

4.PCR-SSCP分型法

單鏈構(gòu)象特異性－聚合酶鏈反應(yīng)（PCR-singlestrandconformationpolymorphism,PCR-SSCP）是以對(duì)待測(cè)基因PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)，對(duì)擴(kuò)增的單鏈DNA（ssDNA）的HLA分型方法。特點(diǎn)：PCR-SSCP作為PCR-SSO的補(bǔ)充，在區(qū)分純合子和雜合子基因方面有其獨(dú)到之處，有利于排除SSO雜交的假性。原理：對(duì)ssDNA進(jìn)行無(wú)變性劑的聚丙烯酰凝膠電泳時(shí)，因其序列108基本過(guò)程：分離待測(cè)細(xì)胞的DNA，應(yīng)用座位、組或等位基因特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物的純化和測(cè)序，測(cè)出的基因序列與HLA基因庫(kù)的DNA已知序列比較，判斷待測(cè)的HLA型別。

5.SBT分型法

基于序列的HLA分型法（sequence-basedHLAtyping,SBT），通過(guò)對(duì)擴(kuò)增后的HLA基因片段通過(guò)核酸序列測(cè)定來(lái)判斷HLA型別?；具^(guò)程：分離待測(cè)細(xì)胞的DNA，應(yīng)用座位、組或等位基因特異性109第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植臨床器官移植術(shù)的建立至今已有50多年的歷史。從腎臟移植到心肺移植、肝臟移植；從完整的器官移植到部分組織器官甚至是細(xì)胞移植；從單一的器官移植到器官聯(lián)合移植。第四節(jié)常見(jiàn)的組織或器官移植臨床器官移植術(shù)的建立至今110一、腎臟移植腎臟移植，創(chuàng)始于1950年，是臨床開(kāi)展最早、應(yīng)用最多和效果最佳的一種器官移植。由于免疫抑制藥物的不斷更新和移植技術(shù)的不斷提高，腎臟移植患者1年和5年的存活率，分別可達(dá)90%

～95%和80%～90%。

一、腎臟移植腎臟移植，創(chuàng)始于1950年，是臨床開(kāi)展最111組織配型是腎臟移植前選擇供者的重要手段包括：ABO血型配型HLA配型交叉配型腎源選擇的原則：以ABO血型完全相同者為好，至少能夠相容選擇最佳HLA配型的供者器官1.組織配型在腎臟移植中的應(yīng)用組織配型是腎臟移植前選擇供者的重要手段1.組織配型在腎臟移植112臨床觀測(cè)項(xiàng)目:

T細(xì)胞總數(shù)、CD4/CD8比值和IL-2及其受體的檢測(cè)，判斷排斥反應(yīng)的發(fā)生和評(píng)估免疫抑制劑治療效果腎組織活檢，預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)的發(fā)生CsA血藥濃度檢測(cè)，指導(dǎo)合理用藥，減少腎毒性

2.腎移植受者的療效檢測(cè)療效監(jiān)測(cè)：受者免疫狀態(tài)檢測(cè)臨床觀測(cè)項(xiàng)目:2.腎移植受者的療效檢測(cè)療效監(jiān)測(cè)：受者免疫狀113二、肝臟移植肝臟移植手術(shù)已經(jīng)成為治療原發(fā)性膽道閉鎖、原發(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、肝炎后肝硬化、酒精性肝病、肝細(xì)胞性肝癌、自身免疫性肝病、急性肝功能衰竭以及藥物誘導(dǎo)的肝臟損傷等疾病，挽救晚期肝病患者生命的最有效方法。二、肝臟移植肝臟移植手術(shù)已經(jīng)成為治療原發(fā)性膽道閉鎖、114特點(diǎn)：

HLA是否匹配與肝臟移植效果無(wú)顯著差異機(jī)制：肝臟移植時(shí)，因HLA不配僅發(fā)生較弱的排斥反應(yīng)，而免疫抑制劑的應(yīng)用有效控制了排斥反應(yīng)的發(fā)生肝臟移植時(shí)仍應(yīng)盡可能進(jìn)行HLA配型1.組織配型在肝臟移植中的應(yīng)用特點(diǎn)：HLA是否匹配與肝臟移植效果無(wú)顯著差異1.組織配型在115排斥反應(yīng)發(fā)生幾率：約2/3的肝移植患者出現(xiàn)過(guò)排斥反應(yīng)的病理學(xué)改變，也有8％的病例術(shù)后發(fā)生急、慢性排斥反應(yīng)，占肝移植致死原因的10%。2.肝移植受者的療效檢測(cè)組織病理學(xué)特點(diǎn)：肝移植術(shù)后第2天，匯管區(qū)出現(xiàn)明顯的白細(xì)胞浸潤(rùn)，匯管區(qū)和肝竇的白細(xì)胞浸潤(rùn)第7天達(dá)高峰，涉及到T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性和中性粒細(xì)胞。在浸潤(rùn)的T細(xì)胞中CD8+細(xì)胞高于CD4+細(xì)胞，也見(jiàn)有IL-2R和CD25+的活化T細(xì)胞。排斥反應(yīng)發(fā)生幾率：約2/3的肝移植患者出現(xiàn)過(guò)排斥反應(yīng)的病理學(xué)116三、心臟移植與心肺聯(lián)合移植在世界范圍內(nèi)，約有300多個(gè)心臟中心進(jìn)行心臟移植，總例數(shù)已超過(guò)7萬(wàn)，年病例不下3000，1年和5年存活率分別為80%和70%。心肺聯(lián)合移植已成為人們可以接受的治療終末期心肺疾病的一種有效方法。三、心臟移植與心肺聯(lián)合移植在世界范圍內(nèi)，約有300多117ABO血型匹配：避免急性排斥反應(yīng)的首要條件。HLAI、Ⅱ類(lèi)分子匹配：移植器官長(zhǎng)期存活的重要因素。

淋巴細(xì)胞毒交叉配合和群體反應(yīng)性抗體檢測(cè)1.組織配型在心臟和心肺聯(lián)合移植中的應(yīng)用ABO血型匹配：避免急性排斥反應(yīng)的首要條件。1.組織配型在心118外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)T、B細(xì)胞的轉(zhuǎn)化能力T細(xì)胞亞類(lèi)百分?jǐn)?shù)及比值CTL細(xì)胞毒作用細(xì)胞因子及其受體表達(dá)或轉(zhuǎn)錄水平轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子

NK細(xì)胞數(shù)及其介導(dǎo)的自然殺傷或ADCC效應(yīng)粘附分子及其配體在各類(lèi)細(xì)胞表達(dá)情況2.心臟及心肺聯(lián)合移植受者的療效檢測(cè)免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)119骨髓和干細(xì)胞移植均系非實(shí)質(zhì)性器官移植，其中骨髓移植開(kāi)展的較早，而干細(xì)胞移植正日益受到臨床工作者的重視。四、骨髓與其他來(lái)源的干細(xì)胞移植骨髓和干細(xì)胞移植均系非實(shí)質(zhì)性器官移植，其中骨髓移植開(kāi)120特點(diǎn)：可同時(shí)發(fā)生HVGR和GVHR

分類(lèi)：

自體骨髓移植、同基因骨髓移植同種異基因骨髓移植（多見(jiàn)）

病例較少成功率高

骨髓移植實(shí)際上是造血干細(xì)胞移植，因此，骨髓中造血干細(xì)胞的質(zhì)和量對(duì)移植的成敗致關(guān)重要。1.骨髓移植特點(diǎn)：可同時(shí)發(fā)生HVGR和GVHR病例較少骨髓移植實(shí)際上是121方法：使用藥物動(dòng)員劑促使造血干細(xì)胞從骨髓釋放到外周血，從中獲取足量的干細(xì)胞用于移植，可獲得與骨髓移植同樣的治療目的特點(diǎn)：與骨髓移植相比，具有采集方便、供者不需麻醉、移植后造血恢復(fù)快，GVHR發(fā)生率和嚴(yán)重程度不高等優(yōu)點(diǎn)。

移植前檢測(cè)：HLA和ABO血型配型、血常規(guī)與骨髓檢驗(yàn)、性染色體測(cè)定、造血干細(xì)胞鑒定和GVHR征象追蹤等腫瘤干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)，提示人們?cè)谶M(jìn)行干細(xì)胞應(yīng)用時(shí)應(yīng)該注意生物安全性。2.外周血和臍血干細(xì)胞移植方法：使用藥物動(dòng)員劑促使造血干細(xì)胞從骨髓釋放到外周血，從中獲122適應(yīng)于同種異型或異基因骨髓移植的疾病。乳腺、卵巢、睪丸以及肺部等實(shí)體瘤，不宜行骨髓移植，多應(yīng)用自體末稍血干細(xì)胞移植治療。急性髓樣白血病、急性淋巴母細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金淋巴瘤和何杰金病等，則既是同種異型或異基因骨髓移植的適應(yīng)癥，也可用自體末稍血干細(xì)胞移植進(jìn)行治療。3.適于骨髓或末稍血干細(xì)胞移植的常見(jiàn)疾病

適應(yīng)于同種異型或異基因骨髓移植的疾病。3.適于骨髓或末稍血干123第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療除角膜、腦、睪丸和子宮等少數(shù)組織或器官移植外，移植排斥反應(yīng)仍然是困擾臨床移植的重要問(wèn)題，有效地預(yù)防排斥反應(yīng)是延長(zhǎng)移植物存活時(shí)間和保護(hù)受者的重要手段。第五節(jié)排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療除角膜、腦、睪丸和子宮等124一、組織配型HLA是引起同種異型移植排斥反應(yīng)的主要抗原供者與受者的HLA等位基因匹配程度決定了移植排斥反應(yīng)的強(qiáng)弱程度通過(guò)HLA組織配型(tissuetyping)，選擇合適的供者，減輕排斥反應(yīng)

1.HLA配型一、組織配型HLA是引起同種異型移植排斥反應(yīng)的主要抗原1.H125①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位點(diǎn)數(shù)越多，移植物存活機(jī)率越高②供、受者HLA-DR位點(diǎn)相配更重要，因?yàn)镠LA-DR和DQ基因有很強(qiáng)的連鎖不平衡，DR位點(diǎn)相配的個(gè)體，通常DQ位點(diǎn)也相配；③不同地區(qū)HLA匹配程度與移植結(jié)果的關(guān)系有著不同的預(yù)測(cè)價(jià)值，在歐洲HLA匹配的程度對(duì)移植結(jié)果的預(yù)測(cè)性比美國(guó)高，因?yàn)闅W洲人群的近交程度較高，導(dǎo)致HLA位點(diǎn)連鎖不平衡性削弱。移植物存活與HLA配型的關(guān)系①供、受者HLA-A和HLA-B相配的位點(diǎn)數(shù)越多，移植物存活126交叉配型采用補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)

陽(yáng)性對(duì)照:陽(yáng)性對(duì)照血清可用淋巴細(xì)胞免疫家兔獲得陰性對(duì)照:陰性血清可采用無(wú)受血史的AB血型男性血清根據(jù)反應(yīng)時(shí)參與的細(xì)胞成分分類(lèi)：

淋巴細(xì)胞交叉配型T細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型B細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒性交叉配型流式細(xì)胞法交叉配型自身交叉配型

結(jié)果判讀:

交叉配型陽(yáng)性:表明受者預(yù)存有抗供體的抗體臨床意義:

交叉配型陽(yáng)性:即使組織配型好，也不宜進(jìn)行移植，易發(fā)生超急性排斥反應(yīng)。在做受體選擇時(shí)，組織配型差，但交叉配型為陰性，仍可實(shí)施移植。交叉配型常用于腎臟移植2.HLA交叉配型與預(yù)存抗體的檢測(cè)交叉配型采用補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒試驗(yàn)2.HLA交叉配型與預(yù)存抗體127方法方法類(lèi)型與參與成分需時(shí)應(yīng)用組織配型補(bǔ)體依賴(lài)的淋巴毒試驗(yàn)血清學(xué)法（HLA抗血清、補(bǔ)體、待測(cè)細(xì)胞）3hHLAⅠ、Ⅱ類(lèi)抗原鑒定交叉配型PBL交叉配型血清學(xué)法（受著血清、供者細(xì)胞、補(bǔ)體、有/無(wú)AHG）3h檢測(cè)受者血清中已存在的抗供者抗體TB交叉配型血清學(xué)法（純化的供者T/B細(xì)胞、受者血清、AHG）3-6hT細(xì)胞：檢測(cè)抗HLAI類(lèi)抗體；B細(xì)胞：檢測(cè)HLAI、II類(lèi)抗體MLC試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)法（供、受者細(xì)胞培養(yǎng)）6dHLAII類(lèi)抗原相容性CML試驗(yàn)細(xì)胞學(xué)法（受者細(xì)胞、供者刺激細(xì)胞作為靶細(xì)胞）4h抗供者CTL檢測(cè)FCC血清學(xué)法（受者血清、供者細(xì)胞、熒光抗人Ig）3-4h檢測(cè)非常弱的和無(wú)細(xì)胞毒性的抗供者抗體自身交叉配型血清學(xué)法（受者PBL、T和B細(xì)胞以及血清）和FCC3-4h檢測(cè)非特異的淋巴細(xì)胞抗體（自身抗體）HLA抗體篩選HLAI類(lèi)抗體的篩選血清學(xué)法（受者血清、相應(yīng)的HLA類(lèi)型T細(xì)胞或PBL）3h×60細(xì)胞HLAI類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定HLAII類(lèi)抗體的篩選血清學(xué)法（吸附過(guò)的受者血清、用作HLA-DR/DQ分型的B細(xì)胞）4h×60細(xì)胞數(shù)加吸附時(shí)間HLAII類(lèi)抗體檢測(cè)，抗體特異性鑒定CML：細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞溶解試驗(yàn)方法方法類(lèi)型與參與成分需時(shí)應(yīng)用組織配型補(bǔ)體依賴(lài)的淋巴毒試驗(yàn)血128群體反應(yīng)性抗體（panelreactiveantibody,PRA）：指用40～60人含已知HLA的T細(xì)胞或T、B混合細(xì)胞，檢測(cè)待移植受者血清所得到的抗體陽(yáng)性百分?jǐn)?shù)。檢測(cè)意義:

用于判斷器官移植時(shí)受體的敏感程度高PRA血清:可針對(duì)多個(gè)HLA抗原發(fā)生反應(yīng)，受體對(duì)所接受的移植器官或組織威脅大注意:應(yīng)考慮在不同HLA上可能出現(xiàn)的共同表位或稱(chēng)公共抗原（publicantigens）與受體血清發(fā)生的交叉反應(yīng)3.群體反應(yīng)性抗體的檢測(cè)3.群體反應(yīng)性抗體的檢測(cè)129不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同首先是從移植術(shù)的角度對(duì)離體組織器官進(jìn)行外科修整，然后根據(jù)不同器官的要求采取相應(yīng)的預(yù)處理二、移植物與受體的預(yù)處理（一）移植物的預(yù)處理不同的組織器官的移植，其移植物的處理不盡相同二、移植物與受體130組織配型或交叉配型移植前應(yīng)用一定劑量的免疫抑制劑，其用量視組織配型的結(jié)果而定術(shù)前輸血,視患者的需要進(jìn)行

（二）受體的準(zhǔn)備組織配型或交叉配型（二）受體的準(zhǔn)備131人工調(diào)節(jié)受者機(jī)體的免疫狀態(tài)是控制移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生的主要途徑采取的措施：

使用免疫抑制劑:以此控制受者的免疫應(yīng)答，降低對(duì)移植物的排斥能力

誘導(dǎo)免疫耐受:誘導(dǎo)受者對(duì)移植抗原的特異性免疫耐受三、免疫抑制措施人工調(diào)節(jié)受者機(jī)體的免疫狀態(tài)是控制移植術(shù)后排斥反應(yīng)發(fā)生的主要途1323、生物性免疫抑制劑

2、某些中草藥

抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)或抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)

細(xì)胞性單克隆抗體某些融合蛋白反義寡核苷酸(antisenceoligonucleotide)

1、化學(xué)性免疫抑制劑

環(huán)孢菌素A(cyclosporineA，CsA)FK506(tacrolimus)，霉酚酸酯(mycophendatemofetil,MMF)糖皮質(zhì)激素硫唑嘌呤環(huán)磷酰胺（一）免疫抑制劑的應(yīng)用3、生物性免疫抑制劑2、某些中草藥抗淋巴細(xì)胞球蛋白(AL133常見(jiàn)免疫抑制劑作用位點(diǎn)常見(jiàn)免疫抑制劑作用位點(diǎn)134通過(guò)將同種抗原置入子宮或注射給新生兒而誘導(dǎo)同種抗原的特異性免疫耐受封閉同種抗原