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文檔簡介
第2節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用第2節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.掌握配制培養(yǎng)基的原則、方法和操作步驟。[重點]2.理解培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。
[重、難點]3.利用選擇培養(yǎng)基分離土壤中能分解纖維素的微生物,了解其應(yīng)用價值。學(xué)習(xí)導(dǎo)航新知初探思維啟動一、選擇培養(yǎng)基1.定義:允許_______種類的微生物生長,抑制其他微生物生長,從而將所需的微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。特定新知初探思維啟動一、選擇培養(yǎng)基特定2.配制依據(jù)(1)根據(jù)某一種或某一類微生物的________________。(2)根據(jù)某些微生物對一些_____、__________的抗性。特殊營養(yǎng)要求物理化學(xué)因素2.配制依據(jù)特殊營養(yǎng)要求物理化學(xué)因素想一想在混合有細菌和霉菌的微生物類群中,要對霉菌進行分離和培養(yǎng),在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)配制成選擇培養(yǎng)基非常有效,那么這種物質(zhì)是什么?它對細菌有什么作用?【提示】
青霉素;抑制細菌細胞壁的形成。想一想二、平板培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的配方邊加熱邊攪拌原始pH二、平板培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的配方邊加熱邊攪拌原始pH高壓蒸汽滅菌鍋50℃高壓蒸汽滅菌鍋50℃三、纖維素分解菌的分離1.方法:_______________法。2.步驟(1)制備平板培養(yǎng)基。(2)制作_________。(3)用涂布器將土壤稀釋液涂布均勻。(4)取__________覆蓋于培養(yǎng)基上并壓平。(5)將培養(yǎng)皿置于______________上,在_____________下培養(yǎng)10d左右。稀釋涂布平板涂布器無菌濾紙干燥器隔板28
℃~30
℃三、纖維素分解菌的分離稀釋涂布平板涂布器無菌濾紙干燥器隔板2判一判(1)為使培養(yǎng)基徹底滅菌,可先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,然后進行滅菌。(×)(2)在接種時,涂布器經(jīng)過火焰之后不需冷卻就可進行涂布。(×)(3)培養(yǎng)時要保持無菌環(huán)境,為觀察滅菌是否徹底,還應(yīng)設(shè)置空白對照。(√)(4)選擇培養(yǎng)基依據(jù)培養(yǎng)基的化學(xué)成分應(yīng)屬天然培養(yǎng)基。(×)判一判四、選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基分離法是分離微生物的另一種方法,通過這種方法,可以__________地分離和培養(yǎng)不同的微生物。選擇性四、選擇培養(yǎng)基選擇性要點突破講練互動要點一培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制原則1.營養(yǎng)要素(1)微生物的元素組成:C、H、O、N、P、S等,其中C、H、O、N占細胞干重的90%以上。要點突破講練互動要點一培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制原則(2)營養(yǎng)要素的來源營養(yǎng)要素含義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體細胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機化合物:CO
2、NaHCO
3;有機化合物:糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機化合物:N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽;有機化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等(2)營養(yǎng)要素的來源營養(yǎng)要素含義作用主要來源碳源凡能提供所需營養(yǎng)要素含義作用主要來源生長因子生長必不可少的微量有機物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水在生物體內(nèi)含量很高,在低等生物體內(nèi)含量更高不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定無機鹽為微生物提供除碳、氮元素以外的各種重要元素,包括某些大量元素細胞內(nèi)的組成成分,生理調(diào)節(jié)物質(zhì);某些化能自養(yǎng)菌的能源,酶的激活劑營養(yǎng)要素含義作用主要來源生長因子生長必不可少的微量有機物特別提醒①對異養(yǎng)微生物來說,含C、N的有機物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是單一方面的作用。②并不是所有微生物都需添加特殊營養(yǎng)物質(zhì),有些微生物需添加,原因是它們自身缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。特別提醒①對異養(yǎng)微生物來說,含C、N的有機物既是碳源,也是2.配制原則(1)目的要明確(根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等)。例如,培養(yǎng)基可由簡單的無機物組成,生產(chǎn)用的培養(yǎng)基內(nèi)可加入化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì),而分類鑒定用的培養(yǎng)基內(nèi)必須加入已知化學(xué)成分的物質(zhì)。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)。注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。2.配制原則(3)pH要適宜。各種微生物適宜生長的pH范圍不同,如細菌、放線菌和真菌的最適pH分別為:6.5~7.5、7.5~8.5和5.0~6.0。(3)pH要適宜。各種微生物適宜生長的pH范圍不同,如細菌、氯苯化合物是重要的有機化工原料,不易降解,會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(如圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培養(yǎng)基配方如表所示。例1圖1氯苯化合物是重要的有機化工原料,不易培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無碳)蒸餾水Ⅰ號10g5g5mg5g--1LⅡ號--50mg5g3g適量1LⅢ號--20mg~80mg5g3g適量1L培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時,除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1%的________。(2)培養(yǎng)基配制時,滅菌與調(diào)pH的先后順序是______________________。(3)在Ⅱ號培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是__________________。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時,SP1菌的菌體會變成一個圓形的休眠體,這種休眠體被稱為________________。(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時,除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知SP1菌在________________________培養(yǎng)條件下最早停止生長。圖2(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到【解析】本題主要考查微生物的相關(guān)知識。(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂;(2)配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌;(3)Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨,則應(yīng)由它為SP1菌提供氮源;(4)在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體,來度過不良環(huán)境;【解析】本題主要考查微生物的相關(guān)知識。(5)SP1菌以氯苯為碳源,當氯苯消耗盡時,菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存,故氯苯含量越少,SP1菌越早停止生長。【答案】
(1)瓊脂(2)先調(diào)pH,后滅菌(3)硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯(5)SP1菌以氯苯為碳源,當氯苯消耗盡時,菌株因缺少碳源而互動探究題目中的細菌在一定條件下可以形成芽孢,而有的時候細菌可以產(chǎn)生孢子,那么芽孢和孢子有區(qū)別嗎?【提示】
芽孢是某些細菌的一種休眠體,不是繁殖體;孢子是某些細菌產(chǎn)生的一種生殖細胞,是繁殖體?;犹骄恳c二培養(yǎng)基種類和功能劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑,如瓊脂觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種要點二培養(yǎng)基種類和功能劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)液劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)。先用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌種,然后分別放在A、B、C三種特殊培養(yǎng)基上培養(yǎng),分別得到菌落①、②、③。其中A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源;B培養(yǎng)基中缺氮源;C培養(yǎng)基中成分如下表:例2培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物請分析回答:(1)菌落③同化作用類型最可能是________。A.光能自養(yǎng)型B.化能自養(yǎng)型C.異養(yǎng)型
D.A或B成分粉狀硫MgSO4·7H2O(NH4)2SO4FeSO4KH2PO4CaCl2H2O含量10g0.5g0.4g0.01g4g25g1000mL請分析回答:成分粉狀硫MgSO4·7H2O(NH4)2SO4(2)如果要獲得具有固氮能力的菌株,應(yīng)選用菌落________________;如果要培育獲得大量蛋白酶的菌株,應(yīng)選用菌落____________________。(3)從題中分析可見,生物進化的內(nèi)在因素是________________________________________________________________________,對生物生存起重要作用的因素是________________。(2)如果要獲得具有固氮能力的菌株,應(yīng)選用菌落_______【解析】由題目可知:A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源,則菌落①的菌株可合成較多的蛋白酶;B培養(yǎng)基缺氮源,只能培養(yǎng)固氮微生物;C培養(yǎng)基中無碳源且含有大量粉狀硫,可培養(yǎng)化能自養(yǎng)型微生物。所以生物的生存是由環(huán)境條件決定的?!敬鸢浮?/p>
(1)B
(2)②
①(3)遺傳和變異外界環(huán)境條件【解析】由題目可知:A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源,則菌落①的【規(guī)律總結(jié)】
①加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。②加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。③若培養(yǎng)基中缺乏氮源時,可以分離固氮微生物。【規(guī)律總結(jié)】①加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。④當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時,也具有分離效果。例如,石油是唯一碳源時,可以抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達到分離出能消除石油污染的微生物的目的。⑤改變微生物的培養(yǎng)條件,也可以達到分離微生物的目的,如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。④當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時,也具有分離效果。例變式訓(xùn)練在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)能分離出所需的微生物。下列選項中,前者是在培養(yǎng)基中加入的物質(zhì),后者是能被分離出的微生物,其中正確的是(
)A.氫氧化鈉,酵母菌B.鹽酸,放線菌C.適量的青霉素,霉菌D.適量的伊紅-美藍,大腸桿菌變式訓(xùn)練解析:選C。氫氧化鈉、鹽酸為強堿、強酸,酵母菌和放線菌都不能生存,加入伊紅-美藍的培養(yǎng)基是用來鑒定大腸桿菌,并不能分離大腸桿菌。適量的青霉素對原核生物有抑制作用,對真核生物的生命活動并不影響。解析:選C。氫氧化鈉、鹽酸為強堿、強酸,酵母菌和放線菌都不能要點三微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項1.倒平板操作(1)培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至50℃左右才能倒平板,原因是瓊脂在44℃以下凝固。(2)培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要完全打開。要點三微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。(4)平板冷凝后要倒置的原因:防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基,防止雜菌污染。(5)若倒平板時,培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部位,這個平板應(yīng)丟棄。(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。2.平板劃線操作第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌,劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán),每次灼燒目的如下表:第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線的菌種來自上次劃線末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者2.平板劃線操作第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避3.稀釋涂布平板操作(1)稀釋操作時:每支試管中盛有9mL水、試管和移液管需滅菌;操作時,試管口和移液管應(yīng)在離火焰1cm~2cm處。(2)涂布平板時:稀釋涂布平板的操作比較復(fù)雜,且各個細節(jié)均需保證“無菌”,應(yīng)特別注意:①酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適。3.稀釋涂布平板操作②吸管頭不要接觸任何其他物體。③吸管要在酒精燈火焰周圍使用。特別提醒①用手測溫剛好不燙手即可快速倒平板,注意無菌操作。②灼燒接種環(huán)之后,要等其冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種。③劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。②吸管頭不要接觸任何其他物體。④畫線用力要大小適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。⑤移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時,移液后用手指輕壓上端的橡皮頭,吹吸三次,使菌液與水充分混勻。⑥將涂布器末端浸在盛有體積分數(shù)為70%的酒精的燒杯中。取出時,要讓多余的酒精在燒杯中滴盡,然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。④畫線用力要大小適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。⑦操作中一定要注意防火!不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精。⑦操作中一定要注意防火!不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯金黃色葡萄球菌有很強的致病力,能引起食物中毒。某生物課題小組想從已混有其他微生物的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)液中將其分離出來,進行純培養(yǎng),然后進行研究。據(jù)此,請回答下列問題。例3金黃色葡萄球菌有很強的致病力,能引起(1)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時,常采用平板劃線法和__________________法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選,采用平板劃線法時在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán),目的是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(1)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時,常采用平板劃線法和_______(2)為了防止感染操作者,接種后,操作者的雙手應(yīng)_______________________________________________________________________________________________________________。(3)培養(yǎng)時,放入恒溫箱的培養(yǎng)皿倒置的目的是___________________________________________________________________________________________________________________。(2)為了防止感染操作者,接種后,操作者的雙手應(yīng)______(4)實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理后才能倒掉,這樣做的目的是________________________________________________________________________?!窘馕觥?/p>
(1)在篩選單菌落時常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種,這兩種方法都可以獲得單個微生物形成的菌落。灼燒接種環(huán)是為了防止雜菌的干擾。(4)實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理后才能倒掉,(2)金黃色葡萄球菌有很強的致病力,所以在操作時一定要做到安全防范,接種后雙手用肥皂洗凈,再用75%的酒精棉球擦拭消毒。(3)這樣做是為了防止雜菌落在平板培養(yǎng)基上造成污染,同時,還可防止微生物代謝產(chǎn)生的H2O留存于培養(yǎng)基表面,影響微生物的生長和菌落的形成。(4)用過的培養(yǎng)基不可隨便丟棄,一定要進行滅菌后方可丟棄,以免污染環(huán)境。(2)金黃色葡萄球菌有很強的致病力,所以在操作時一定要做到安【答案】
(1)稀釋涂布平板殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種及其他細菌(2)必須經(jīng)肥皂洗凈,再用75%的酒精棉球擦拭(3)防止雜菌污染和代謝產(chǎn)生的H2O影響微生物生長(4)防止造成環(huán)境污染【答案】(1)稀釋涂布平板殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留變式訓(xùn)練實驗步驟中倒平板及對菌種純化的說法正確的是(
)A.倒平板時左手將滅過菌的培養(yǎng)皿蓋打開,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿(約10~20mL),左手立即蓋上培養(yǎng)皿蓋B.使用已滅菌的接種環(huán),培養(yǎng)基不需要再滅菌變式訓(xùn)練C.稀釋涂布平板時要將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面D.涂布器用火焰灼燒滅菌答案:CC.稀釋涂布平板時要將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)第2節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用第2節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.掌握配制培養(yǎng)基的原則、方法和操作步驟。[重點]2.理解培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。
[重、難點]3.利用選擇培養(yǎng)基分離土壤中能分解纖維素的微生物,了解其應(yīng)用價值。學(xué)習(xí)導(dǎo)航新知初探思維啟動一、選擇培養(yǎng)基1.定義:允許_______種類的微生物生長,抑制其他微生物生長,從而將所需的微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。特定新知初探思維啟動一、選擇培養(yǎng)基特定2.配制依據(jù)(1)根據(jù)某一種或某一類微生物的________________。(2)根據(jù)某些微生物對一些_____、__________的抗性。特殊營養(yǎng)要求物理化學(xué)因素2.配制依據(jù)特殊營養(yǎng)要求物理化學(xué)因素想一想在混合有細菌和霉菌的微生物類群中,要對霉菌進行分離和培養(yǎng),在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)配制成選擇培養(yǎng)基非常有效,那么這種物質(zhì)是什么?它對細菌有什么作用?【提示】
青霉素;抑制細菌細胞壁的形成。想一想二、平板培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的配方邊加熱邊攪拌原始pH二、平板培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的配方邊加熱邊攪拌原始pH高壓蒸汽滅菌鍋50℃高壓蒸汽滅菌鍋50℃三、纖維素分解菌的分離1.方法:_______________法。2.步驟(1)制備平板培養(yǎng)基。(2)制作_________。(3)用涂布器將土壤稀釋液涂布均勻。(4)取__________覆蓋于培養(yǎng)基上并壓平。(5)將培養(yǎng)皿置于______________上,在_____________下培養(yǎng)10d左右。稀釋涂布平板涂布器無菌濾紙干燥器隔板28
℃~30
℃三、纖維素分解菌的分離稀釋涂布平板涂布器無菌濾紙干燥器隔板2判一判(1)為使培養(yǎng)基徹底滅菌,可先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,然后進行滅菌。(×)(2)在接種時,涂布器經(jīng)過火焰之后不需冷卻就可進行涂布。(×)(3)培養(yǎng)時要保持無菌環(huán)境,為觀察滅菌是否徹底,還應(yīng)設(shè)置空白對照。(√)(4)選擇培養(yǎng)基依據(jù)培養(yǎng)基的化學(xué)成分應(yīng)屬天然培養(yǎng)基。(×)判一判四、選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基分離法是分離微生物的另一種方法,通過這種方法,可以__________地分離和培養(yǎng)不同的微生物。選擇性四、選擇培養(yǎng)基選擇性要點突破講練互動要點一培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制原則1.營養(yǎng)要素(1)微生物的元素組成:C、H、O、N、P、S等,其中C、H、O、N占細胞干重的90%以上。要點突破講練互動要點一培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制原則(2)營養(yǎng)要素的來源營養(yǎng)要素含義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體細胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機化合物:CO
2、NaHCO
3;有機化合物:糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機化合物:N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽;有機化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等(2)營養(yǎng)要素的來源營養(yǎng)要素含義作用主要來源碳源凡能提供所需營養(yǎng)要素含義作用主要來源生長因子生長必不可少的微量有機物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等水在生物體內(nèi)含量很高,在低等生物體內(nèi)含量更高不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定無機鹽為微生物提供除碳、氮元素以外的各種重要元素,包括某些大量元素細胞內(nèi)的組成成分,生理調(diào)節(jié)物質(zhì);某些化能自養(yǎng)菌的能源,酶的激活劑營養(yǎng)要素含義作用主要來源生長因子生長必不可少的微量有機物特別提醒①對異養(yǎng)微生物來說,含C、N的有機物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是單一方面的作用。②并不是所有微生物都需添加特殊營養(yǎng)物質(zhì),有些微生物需添加,原因是它們自身缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。特別提醒①對異養(yǎng)微生物來說,含C、N的有機物既是碳源,也是2.配制原則(1)目的要明確(根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等)。例如,培養(yǎng)基可由簡單的無機物組成,生產(chǎn)用的培養(yǎng)基內(nèi)可加入化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì),而分類鑒定用的培養(yǎng)基內(nèi)必須加入已知化學(xué)成分的物質(zhì)。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)。注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。2.配制原則(3)pH要適宜。各種微生物適宜生長的pH范圍不同,如細菌、放線菌和真菌的最適pH分別為:6.5~7.5、7.5~8.5和5.0~6.0。(3)pH要適宜。各種微生物適宜生長的pH范圍不同,如細菌、氯苯化合物是重要的有機化工原料,不易降解,會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(如圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培養(yǎng)基配方如表所示。例1圖1氯苯化合物是重要的有機化工原料,不易培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無碳)蒸餾水Ⅰ號10g5g5mg5g--1LⅡ號--50mg5g3g適量1LⅢ號--20mg~80mg5g3g適量1L培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時,除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1%的________。(2)培養(yǎng)基配制時,滅菌與調(diào)pH的先后順序是______________________。(3)在Ⅱ號培養(yǎng)基中,為SP1菌提供氮源的成分是__________________。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時,SP1菌的菌體會變成一個圓形的休眠體,這種休眠體被稱為________________。(1)配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時,除添加Ⅱ號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知SP1菌在________________________培養(yǎng)條件下最早停止生長。圖2(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到【解析】本題主要考查微生物的相關(guān)知識。(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂;(2)配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌;(3)Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨,則應(yīng)由它為SP1菌提供氮源;(4)在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體,來度過不良環(huán)境;【解析】本題主要考查微生物的相關(guān)知識。(5)SP1菌以氯苯為碳源,當氯苯消耗盡時,菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存,故氯苯含量越少,SP1菌越早停止生長?!敬鸢浮?/p>
(1)瓊脂(2)先調(diào)pH,后滅菌(3)硝酸銨(4)芽孢(5)20mg/L氯苯(5)SP1菌以氯苯為碳源,當氯苯消耗盡時,菌株因缺少碳源而互動探究題目中的細菌在一定條件下可以形成芽孢,而有的時候細菌可以產(chǎn)生孢子,那么芽孢和孢子有區(qū)別嗎?【提示】
芽孢是某些細菌的一種休眠體,不是繁殖體;孢子是某些細菌產(chǎn)生的一種生殖細胞,是繁殖體?;犹骄恳c二培養(yǎng)基種類和功能劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑,如瓊脂觀察微生物的運動、分類鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種要點二培養(yǎng)基種類和功能劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)液劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)。先用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌種,然后分別放在A、B、C三種特殊培養(yǎng)基上培養(yǎng),分別得到菌落①、②、③。其中A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源;B培養(yǎng)基中缺氮源;C培養(yǎng)基中成分如下表:例2培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物請分析回答:(1)菌落③同化作用類型最可能是________。A.光能自養(yǎng)型B.化能自養(yǎng)型C.異養(yǎng)型
D.A或B成分粉狀硫MgSO4·7H2O(NH4)2SO4FeSO4KH2PO4CaCl2H2O含量10g0.5g0.4g0.01g4g25g1000mL請分析回答:成分粉狀硫MgSO4·7H2O(NH4)2SO4(2)如果要獲得具有固氮能力的菌株,應(yīng)選用菌落________________;如果要培育獲得大量蛋白酶的菌株,應(yīng)選用菌落____________________。(3)從題中分析可見,生物進化的內(nèi)在因素是________________________________________________________________________,對生物生存起重要作用的因素是________________。(2)如果要獲得具有固氮能力的菌株,應(yīng)選用菌落_______【解析】由題目可知:A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源,則菌落①的菌株可合成較多的蛋白酶;B培養(yǎng)基缺氮源,只能培養(yǎng)固氮微生物;C培養(yǎng)基中無碳源且含有大量粉狀硫,可培養(yǎng)化能自養(yǎng)型微生物。所以生物的生存是由環(huán)境條件決定的?!敬鸢浮?/p>
(1)B
(2)②
①(3)遺傳和變異外界環(huán)境條件【解析】由題目可知:A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源,則菌落①的【規(guī)律總結(jié)】
①加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。②加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。③若培養(yǎng)基中缺乏氮源時,可以分離固氮微生物?!疽?guī)律總結(jié)】①加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。④當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時,也具有分離效果。例如,石油是唯一碳源時,可以抑制不能利用石油的微生物的生長,使能夠利用石油的微生物生存,達到分離出能消除石油污染的微生物的目的。⑤改變微生物的培養(yǎng)條件,也可以達到分離微生物的目的,如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。④當培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時,也具有分離效果。例變式訓(xùn)練在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)能分離出所需的微生物。下列選項中,前者是在培養(yǎng)基中加入的物質(zhì),后者是能被分離出的微生物,其中正確的是(
)A.氫氧化鈉,酵母菌B.鹽酸,放線菌C.適量的青霉素,霉菌D.適量的伊紅-美藍,大腸桿菌變式訓(xùn)練解析:選C。氫氧化鈉、鹽酸為強堿、強酸,酵母菌和放線菌都不能生存,加入伊紅-美藍的培養(yǎng)基是用來鑒定大腸桿菌,并不能分離大腸桿菌。適量的青霉素對原核生物有抑制作用,對真核生物的生命活動并不影響。解析:選C。氫氧化鈉、鹽酸為強堿、強酸,酵母菌和放線菌都不能要點三微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項1.倒平板操作(1)培養(yǎng)基滅菌后,需冷卻至50℃左右才能倒平板,原因是瓊脂在44℃以下凝固。(2)培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,不要完全打開。要點三微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意事項(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。(4)平板冷凝后要倒置的原因:防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基,防止雜菌污染。(5)若倒平板時,培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部位,這個平板應(yīng)丟棄。(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進行,避免雜菌污染。2.平板劃線操作第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌,劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán),每次灼燒目的如下表:第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使下次劃線的菌種來自上次劃線末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者2.平板劃線操作第一次灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒目的避3.稀釋涂布平板操作(1)稀釋操作時:每支試管中盛有9mL水、試管和移液管需滅菌;操作時,試管口和移液管應(yīng)在離火焰1cm~2cm處。(2)涂布平板時:稀釋涂布平板的操作比較復(fù)雜,且各個細節(jié)均需保證“無菌”,應(yīng)特別注意:①酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適。3.稀釋涂布平板操作②吸管頭不要接觸任何其他物體。③吸管要在酒精燈火焰周圍使用。特別提醒①用手測溫剛好不燙手即可快速倒平板,注意無菌操作。②灼燒接種環(huán)之后,要等其冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種。③劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。②吸管頭不要接觸任何其他物體。④畫線用力要大小適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。⑤移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時,移液后用手指輕壓上端的橡皮頭,吹吸三次,使菌液與水充分混勻。⑥將涂布器末端浸在盛有體積分數(shù)為70%的酒精的燒杯中。取出時,要讓多余的酒精在燒杯中滴盡,然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。④畫線用力要大小適當,防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。⑦操作中一定要注意防火!不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精。⑦操作中一定要注意防火!不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯金黃色葡萄球菌有很強
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