生物實(shí)驗(yàn)中試劑的作用及實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)一、化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法

①淀粉——碘液(藍(lán)色)

②還原性糖——斐林試劑\班氏試劑(磚紅色)

③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)

④乳酸——pH試紙

⑤O2——余燼復(fù)然

⑥蛋白質(zhì)——被蛋白酶水解、雙縮脲試劑(紫紅色)

⑦脂肪——蘇丹Ⅲ染液(橘黃色)、蘇丹Ⅳ染液(紅色)

⑧DNA——二苯胺(藍(lán)色)

⑨染色體——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液

二、實(shí)驗(yàn)條件的控制方法

1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物

2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水

3、除去容器中CO2——NaOH溶液

4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境

5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱

6、除去光合對(duì)呼吸干擾——給植株遮光

7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光

8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉

9、線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心

10、骨無(wú)機(jī)鹽的除去——鹽酸溶液

11、滅菌方法——培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒;實(shí)驗(yàn)室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌;整個(gè)過(guò)程都在實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌區(qū)或酒精燈旁進(jìn)行。四、實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法

1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱

2、酶促反應(yīng)——水浴保溫

3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、

4、細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)——恒溫箱培養(yǎng)

五、實(shí)驗(yàn)中常用器材和藥品的使用

1、NaOH：用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H

2、Ca(OH)2：鑒定CO2

3、CaCl2提高細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性

4、HCl：解離或改變?nèi)芤旱膒H

5、NaHCO3：提供CO2

6、NaCl：配制生理鹽水或用于提取DNA

7、瓊脂：激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基的凝固劑

8、亞甲基藍(lán)：用于檢測(cè)污水的細(xì)菌含量

9、酒精：用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液

10、蔗糖：測(cè)定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原、作為碳源和能源物質(zhì)

11、濾紙：過(guò)濾或紙層析

12、紗布、尼龍布：過(guò)濾，遮光

13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色

14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑六、一些常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)方法

⑴、根據(jù)顏色來(lái)確定某種物質(zhì)的存在：

淀粉+I2(藍(lán)色);還原性糖+斐林試劑(磚紅色);脂肪+蘇丹Ⅲ(橘黃)或+蘇丹Ⅳ(紅色);蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑(紫色);

大腸桿菌+伊紅和美藍(lán)(菌落為深紫色，有金屬光澤)

⑵、用顏色標(biāo)記法來(lái)確定原腸胚三個(gè)胚層的分化情況。

⑶、用熒光標(biāo)記法來(lái)證明細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性

⑷、同位素示蹤法：光合作用產(chǎn)生氧氣的來(lái)源;光合作用中二氧化碳的去向;

噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì);

DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制。

⑸、確定某種元素為植物生長(zhǎng)必需的元素的方法:

水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液對(duì)照)⑹、獲得無(wú)籽果實(shí)的方法:

用適宜濃度的生長(zhǎng)素處理花蕾期已去雄的子房，如無(wú)籽蕃茄、

誘導(dǎo)染色體變異，如無(wú)籽西瓜。

⑺、確定某種激素功能的方法：

飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。

⑻、確定傳入、傳出神經(jīng)的功能：

刺激+觀察效應(yīng)器的反應(yīng)或測(cè)定神經(jīng)上的電位變化。

⑼、植物雜交的方法

雌雄同花：花蕾期去雄+套袋+開(kāi)花期人工授粉+套袋

雌雄異花：花蕾期雌花套袋+開(kāi)花期人工授粉+套袋

⑽、確定某一顯性個(gè)體基因型的方法：

測(cè)交;該顯性個(gè)體自交。

⑾、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法：

具有一對(duì)相對(duì)性狀的純合體的雜交

自交，觀察后代是否有性狀分離。

七、實(shí)驗(yàn)研究方法

1、顯微觀察法如觀察植物細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)，觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的實(shí)驗(yàn)。

2、觀察法觀察微生物的外在性狀和表現(xiàn)等，如觀察注射了甲狀腺激素的小狗的活動(dòng)狀況，觀察動(dòng)物的毛色和植物花色的遺傳實(shí)驗(yàn)等。

3、同位素示蹤法如噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)，用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實(shí)驗(yàn)等。

4、加法創(chuàng)意如用飼喂法研究甲狀腺激素的實(shí)驗(yàn)、用注射法研究生長(zhǎng)激素的實(shí)驗(yàn)，用移植法研究性激素的實(shí)驗(yàn)等。

八、實(shí)驗(yàn)技術(shù)

1、光學(xué)顯微鏡的使用

適用于觀察生物的微觀結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，包括光鏡下可看到的各種細(xì)胞器。

2、臨時(shí)裝片、切片和涂片的制作技術(shù)

適用于顯微觀察，凡需在顯微鏡下觀察的生物材料，必須先制成臨時(shí)裝片、切片或涂片。如“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原的實(shí)驗(yàn)”中要制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片，在生物組織中脂肪的鑒定中要制作花生種子的切片等。

6、紙層析技術(shù)

適用于溶液中物質(zhì)分離。重要步驟包括制備濾紙條、畫(huà)濾液細(xì)線、層析分離。