關(guān)于高中生物第五章第二節(jié)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增NDA片段新人教版選修第1頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六一、基礎(chǔ)知識1、組成元素（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第2頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六一、基礎(chǔ)知識C、H、O、N、P1、組成元素（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第3頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六一、基礎(chǔ)知識C、H、O、N、P1、組成元素2、基本單位（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第4頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六一、基礎(chǔ)知識C、H、O、N、P1、組成元素脫氧核苷酸2、基本單位（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第5頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六一、基礎(chǔ)知識C、H、O、N、P1、組成元素脫氧核苷酸2、基本單位3、脫氧核苷酸結(jié)構(gòu)（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第6頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六OOPOHO堿基OOHOOPOHOOH堿基5’3’3’5’堿基脫氧核糖磷酸基團(tuán)堿基脫氧核糖堿基脫氧核糖5’3’多脫氧核苷酸鏈結(jié)構(gòu)簡圖第7頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六連接ATGC第8頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六連接ATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）第9頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）第10頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）3'端5'端第11頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)第12頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)①DNA分子是由兩條反向平行的脫氧核苷酸長鏈（即一條鏈為3′→5′，另一條鏈為5′→3′）盤旋而成的規(guī)則雙螺旋結(jié)構(gòu)。第13頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)②脫氧核糖與磷酸交替連接，排列在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架；堿基排列在鏈的內(nèi)側(cè)。①DNA分子是由兩條反向平行的脫氧核苷酸長鏈（即一條鏈為3′→5′，另一條鏈為5′→3′）盤旋而成的規(guī)則雙螺旋結(jié)構(gòu)。第14頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六③兩條鏈上的堿基通過氫鍵連接起來，形成堿基對。堿基對的組成有特定的規(guī)律：即腺嘌呤一定與胸腺嘧啶配對，鳥嘌呤一定同胞嘧啶配對。4、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)第15頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（二）DNA的復(fù)制2、時期3、場所1、概念第16頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六2、時期1、概念由一個DNA形成兩個完全相同的DNA的過程（二）DNA的復(fù)制3、場所第17頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六2、時期有絲分裂間期、減數(shù)第一次分裂前的間期1、概念由一個DNA形成兩個完全相同的DNA的過程（二）DNA的復(fù)制3、場所第18頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六2、時期3、場所細(xì)胞核（主）、線粒體、葉綠體1、概念由一個DNA形成兩個完全相同的DNA的過程（二）DNA的復(fù)制有絲分裂間期、減數(shù)第一次分裂前的間期第19頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六5、原料6、基本條件4、模板第20頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六5、原料6、基本條件4、模板DNA母鏈第21頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六5、原料脫氧核苷酸6、基本條件4、模板DNA母鏈第22頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六5、原料脫氧核苷酸6、基本條件酶、ATP、原料、模板4、模板DNA母鏈第23頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六7、復(fù)制過程第24頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六7、復(fù)制過程①DNA的解旋第25頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六7、復(fù)制過程①DNA的解旋親代DNA分子利用細(xì)胞提供的能量在解旋酶的作用下氫鍵斷裂，部分雙螺旋鏈解旋為兩條平行的雙鏈第26頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA聚合酶的特性

DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，而只能從3′端延伸DNA鏈。因此，DNA復(fù)制需要引物。

第27頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六②RNA引物的合成第28頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六②RNA引物的合成以DNA單鏈為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第29頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六②RNA引物的合成③DNA的生成以DNA單鏈為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第30頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六②RNA引物的合成以DNA單鏈為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物③DNA的生成以DNA單鏈為模板，在DNA聚合酶的作用下，在RNA引物的末端由5′端→3′端合成DNA。第31頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA合成的方向

子鏈由5′

端向3′端延伸第32頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？第33頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？第34頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？雙鏈的解開第35頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開雙鏈？雙鏈的解開控制溫度第36頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA分子的熱變性原理：第37頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA雙鏈單鏈DNA分子的熱變性原理：第38頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA雙鏈單鏈復(fù)性（緩慢冷卻）DNA分子的熱變性原理：變性（加熱80-100℃）第39頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA雙鏈單鏈復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：復(fù)性的目的：DNA分子的熱變性原理：變性（加熱80-100℃）第40頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六DNA雙鏈單鏈復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：復(fù)性的目的：解開雙鏈有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ與兩條單鏈的結(jié)合DNA分子的熱變性原理：變性（加熱80-100℃）第41頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六思考：高溫使DNA解旋，但普通DNA聚合酶會失活，__________________找到耐高溫DNA聚合酶。第42頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六思考：高溫使DNA解旋，但普通DNA聚合酶會失活，__________________找到耐高溫DNA聚合酶。托馬斯.布魯克第43頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)第44頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六①DNA模板；②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；③四種脫氧核苷酸；④耐高溫的聚合酶；⑤控制溫度，但不需解旋酶。體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)第45頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（三）PCR的反應(yīng)過程1、PCR的反應(yīng)步驟第46頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六1、PCR的反應(yīng)步驟

PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為三個基本步驟──變性、復(fù)性和延伸（三）PCR的反應(yīng)過程第47頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六①變性（模板DNA解旋）模板DNA加熱至900C以上時，模板DNA雙鏈解離，成為單鏈。2、循環(huán)過程第48頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六靶序列靶序列PCR循環(huán)第一步：加熱變性第49頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六②復(fù)性（退火）溫度下降到50℃左右，兩種引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合。第50頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六PCR循環(huán)第二步：引物與靶序列退火第51頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六③延伸溫度上升到72℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，以脫氧核苷酸為原料，以母鏈為模板，按堿基互補(bǔ)配對的原則，合成一條新的DNA鏈第52頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六PCR循環(huán)第三步：引物延伸第53頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六靶序列

靶序列第1個PCR循環(huán)完成后：得到兩個拷貝的靶序列第54頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六95℃變性（1）PCR循環(huán)——變性第55頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（1）PCR循環(huán)——變性95℃變性第56頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六95℃變性（1）PCR循環(huán)——變性第57頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六55℃復(fù)性（2）PCR循環(huán)—復(fù)性第58頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（3）PCR循環(huán)—延伸第59頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（3）PCR循環(huán)—延伸第60頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（3）PCR循環(huán)—延伸第61頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六（3）PCR循環(huán)—延伸第62頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六第63頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六第64頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六第65頁，共70頁，2022年，5月20日，17點40分，星期六第66頁，共70頁，2022年，5月20日，1