細(xì)菌性食物中毒病原菌的檢驗(yàn)第六章第一節(jié)食物中毒概述一、食物中毒的概念和分類（一）、概念食源性疾?。褐竿ㄟ^(guò)攝食進(jìn)入人體內(nèi)的各種治病因子引起的、通常具有感染性質(zhì)或中毒性質(zhì)的一類疾病。食物中毒：是指健康人經(jīng)口攝入正常數(shù)量食品后，所引起的以急性病理過(guò)程為主的疾病。微生物性食物中毒：食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒稱為微生物性食物中毒。發(fā)病原因多見于食用了食物中毒性微生物或其毒素，有毒化學(xué)物質(zhì)，有毒生物組織(如甲狀腺、腦垂體、腎上腺、毒魚、有毒食用菌等)以及食品引起的變態(tài)反應(yīng)等。食物中毒屬食源性疾病的范疇，是食源性疾病中最為常見的疾病。食物中毒不包括因暴飲暴食而引起的急性胃腸炎、食源性腸道傳染病(如傷寒)和寄生蟲病(如旋毛蟲病、囊蟲病)，也不包括因一次大量或長(zhǎng)期少量多次攝入某些有毒、有害物質(zhì)而引起的以慢性毒害為主要特征的疾病。（三）、細(xì)菌性食物中毒細(xì)菌性食物中毒：是指人們吃了含有大量活菌或活菌產(chǎn)生的毒素污染了食品所引起的中毒現(xiàn)象。

近幾年來(lái)統(tǒng)計(jì)資料表明，我國(guó)發(fā)生的細(xì)菌性食物中毒是沙門氏菌食物中毒較為常見，其次為副溶血性弧菌、蠟樣芽孢桿菌食物中毒。細(xì)菌性食物中毒可分為感染型食物中毒、毒素型食物中毒和混合型食物中毒。1．感染型食物中毒指食物被污染并繁殖了大量食物中毒性微生物(包括病原菌和條件致病菌，如沙門氏菌、致病性大腸桿菌、副溶血性弧菌、變形桿菌、蠟樣芽胞桿菌，魏氏梭菌、耶爾森氏菌、嗜鹽菌、枯草桿菌及劈球菌等)，這種含有大量活菌(一般含菌數(shù)在107個(gè)／g以上)的食物被攝入機(jī)體后，引起一系列消化道癥狀的現(xiàn)象，稱為感染型食物中毒，此類中毒是由細(xì)菌本身引起的。發(fā)病機(jī)制：病原菌隨食物進(jìn)入腸道，在腸道內(nèi)繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖，靠其侵襲力附于腸黏膜或侵入黏膜及黏膜下層，引起腸黏膜充血、白細(xì)胞浸潤(rùn)、水腫、滲出等炎性病理變化。某些病原菌如沙門氏菌進(jìn)入黏膜固有層后可被吞噬細(xì)胞吞噬或殺滅，病原菌菌體裂解后釋放出電壹塞，內(nèi)毒素可作為致熱源刺激體溫調(diào)節(jié)中樞引起體溫升高，亦可協(xié)同致病菌作用于腸黏膜，引起腹瀉等胃腸道癥狀。

2．毒素型食物中毒

食物被能產(chǎn)生毒素的微生物如葡萄球菌、肉毒梭菌、魏氏梭菌等污染，并在適宜的條件下生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生了某種毒素，這種毒素同污染的微生物一起或單獨(dú)隨食物被攝入人體后，所引起的一系列中毒現(xiàn)象，稱為毒素型食物中毒。此種中毒主要是細(xì)菌產(chǎn)生的大量毒素所引起的，如葡萄球菌腸毒素，魏氏梭菌毒素引起的食物中毒及肉毒毒素引起的食物中毒等，均屬于毒素型食物中毒。

(三)霉菌毒素型食物中毒1、是指某些霉菌如黃曲霉菌、赭曲霉菌污染了食品，并在適宜條件下繁殖，同時(shí)產(chǎn)生了毒素，這些毒素達(dá)到一定量后，隨被污染的食品一同攝入人體內(nèi)而引起的食物中毒。2、當(dāng)霉菌毒素的量很小時(shí)，則不能引起食物中毒．但長(zhǎng)期少量攝入某種霉菌毒素，則可導(dǎo)致癌癥或發(fā)生“三致”（致癌、致畸、致突變）作用。要禁止使用發(fā)霉的原料生產(chǎn)食品和使用發(fā)霉的飼料飼養(yǎng)動(dòng)物。

二、微生物性食物中毒的特點(diǎn)1．與飲食有關(guān)，不吃者不發(fā)病2．引起中毒的原因食品除掉后，不再有新的患者發(fā)生3．發(fā)病呈暴發(fā)性：微生物性食物中毒和其他食物中毒一樣，突然發(fā)生，根據(jù)食用原因食品的人數(shù)不同，可有數(shù)百人致數(shù)千人同時(shí)發(fā)病，而且表現(xiàn)的臨床癥狀一致。4．發(fā)病季節(jié)性強(qiáng)一般多發(fā)生在4—10月份，6～9月進(jìn)入高峰期，這主要與這段時(shí)間氣溫高、微生物易于生長(zhǎng)繁殖和人們的飲食習(xí)慣(吃涼食，冷飲較多)有關(guān)。

三、引起微生物性食物中毒的原因發(fā)生微生物性食物中毒的根本原因是食品受到了某些微生物或微生物毒素的污染，微生物污染的原因有內(nèi)源性污染和有外源性污染，其中外源性污染是經(jīng)常性的和主要的，概括起來(lái)主要有以下幾個(gè)方面：1．食品原料受到了污染2．生產(chǎn)、加工、運(yùn)輸、銷售及食用過(guò)程中的污染

3．加工方法不當(dāng)主要是某些大塊食品在燒煮時(shí)時(shí)間太短或溫度太低，不能足以殺死微生物，或油炸食品時(shí)中心未熟透等。

4．交叉污染在食品制作時(shí)，發(fā)生了生熟食品交叉污染，如用盛放過(guò)生食品的容器、用具、刀板等與熟食品發(fā)生接觸，而導(dǎo)致生食品中的某些微生物污染到熟食品上，這種熟品在食用前沒有經(jīng)過(guò)再加熱或加熱溫度不足以殺滅污染的微生物。5．工作人員的污染接觸食品的工作人員的個(gè)人衛(wèi)生狀況不良，如患有某種腸道傳染病或帶菌，則可以將這種病原微生物污染到食品上而導(dǎo)致食物中毒或食物感染。

四、微生物性食物中毒的預(yù)防微生物性食物中毒常常給人類帶來(lái)嚴(yán)重的危害。是食品衛(wèi)生檢驗(yàn)的重要內(nèi)容之一。1．嚴(yán)格執(zhí)行有關(guān)法規(guī)嚴(yán)格遵守國(guó)家頒布《中華人民共和國(guó)食品衛(wèi)生法》和其他有關(guān)的條例、規(guī)定，以及各地區(qū)制定的各種規(guī)定與衛(wèi)生要求．加強(qiáng)食品衛(wèi)生的檢驗(yàn)與監(jiān)督工左。2．嚴(yán)格防止食品污染3．控制微生物在食品上的繁殖一般食物中毒性細(xì)菌的最適生長(zhǎng)溫度在35+37℃；絕大部分在低溫下即停止繁殖或緩慢繁殖，因此，低溫貯存食品是控制污染微生物在食品上繁殖的重要措施。4．殺滅污染食品中的微生物殺滅食品中微生物的方法很多，如降低食品pH值、提高食品的滲透壓(鹽腌、糖潰)、采用紫外線照射或其它輻射線照射和加熱滅菌等；其中加熱滅菌法對(duì)微生物的殺滅最為徹底，這在食品罐頭生產(chǎn)中已廣泛應(yīng)用。5．加強(qiáng)食品衛(wèi)生檢驗(yàn)和宣傳工作第七章腸道致病菌的檢驗(yàn)與鑒定第一節(jié)概述一、食品中常見的腸道致病菌沙門氏菌志賀氏菌大腸艾希氏菌變形桿菌耶爾森菌

三、抗原類型

O抗原也稱菌體抗原，細(xì)胞壁脂肪糖，耐熱100℃不被破壞H抗原也稱鞭毛抗原，鞭毛蛋白，不耐熱，60℃30′可破壞K抗原也稱表面抗原（莢膜抗原），多糖，具有阻抑O抗原發(fā)生凝集的現(xiàn)象，加熱60℃30′可消除抑阻作用菌毛抗原四、致病性（一）、致病物質(zhì)1、內(nèi)毒素：能引起機(jī)體發(fā)熱，白細(xì)胞減少，低血糖，血壓降低，嚴(yán)重者休克。2、外毒素：對(duì)小腸粘膜細(xì)胞具有物殊毒害作用，引起腹瀉。五、微生物檢驗(yàn)的基本程序

檢樣→處理→增菌培養(yǎng)→分離培養(yǎng)→生化試驗(yàn)→血清學(xué)鑒定→報(bào)告

思考題1、腸道致病菌具有哪些生物學(xué)特性?2、腸道致病菌具有哪些抗原？有什么特點(diǎn)？3、寫出腸道致病菌檢驗(yàn)的基本程序（二）沙門氏菌的命名根據(jù)所致疾病命名根據(jù)菌的發(fā)現(xiàn)地區(qū)命名以發(fā)現(xiàn)者的名字命名（三）沙門氏菌的抵抗力60℃30′可殺死其中許多為人畜共患病一大群人與動(dòng)物腸道中的寄生菌菌群菌型甚多，僅少數(shù)對(duì)人致?。ㄋ模┥抽T氏菌的分類地位及定義1、地位：是腸桿菌科、埃希氏菌族、沙門氏菌屬中的細(xì)菌2、定義是腸桿菌科中形態(tài)和培養(yǎng)特征，生化反應(yīng)及抗原結(jié)構(gòu)相似，被O1噬菌體裂解的一群革蘭氏陰性桿菌。(沙門氏菌（紅色）侵入人體細(xì)胞

2、對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好，37℃，24h，能形成菌落中等大小，直徑2～3mm，圓形或卵形，表面光滑濕潤(rùn)，無(wú)色半透明，邊緣整齊的菌落3、在液體培養(yǎng)基中，呈均勻混濁性生長(zhǎng)，無(wú)菌膜。（三）、生化特性1、發(fā)酵GLU，甘露醇，山梨醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒雞傷寒沙門氏菌少數(shù)不產(chǎn)氣）2、不發(fā)酵乳糖，蔗糖，側(cè)金黃花醇3、多數(shù)產(chǎn)生H2S（+），不產(chǎn)靛基質(zhì)（-），不分解尿素（-），不產(chǎn)生乙酰甲基甲醇（V—P）（-），4、能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽（+）5、在KCN培養(yǎng)基中生長(zhǎng)（-），苯丙氨酸脫氨酸（-）（四）、抗原結(jié)構(gòu)主要四種：A、O抗原B、H抗原C、表面抗原（K抗原）D、菌毛抗原2、O抗原（1）O抗原的表示方法共有58種，用字母O和阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)記：O1、O2、O3、O4如：傷寒桿菌：O9、O12（2）沙門氏菌的分群及表示方法用大寫字母及相關(guān)符號(hào)表示：A、B、C、D、E、F……Z、O51~O63、O65~O67（3）沙門氏菌中的主要菌群及其群特異性抗原A群----O2

B群----O4

C群----O6

C1群----O7、C2群----O6O8、C3群----O8、C4群----O6O7O14

D群----O9

F群----O11E群----O3E2群----O3、O10族E3群----O3、O15E4群----O1、O3、O193、H抗原（鞭毛抗原）

耐熱性差：60℃15′或酒精處理可破壞沙門氏H抗原有兩種：第1相：特異相，用英文小寫字母表示a、b、c……zz1~z55第2相：非特異相，用阿拉伯?dāng)?shù)字表示1、2、3……其中也有用小寫字母a、n、x等表示。

4、表面抗原：

沙門氏菌有三種：Vi、M、5抗原、K抗原Vi抗原位于菌體的最表層，包圍了O抗原，可阻礙O抗原的血清學(xué)凝集試驗(yàn)。破壞Vi抗原：60℃30′，100℃5′含有Vi抗原的沙門氏菌：傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌、都柏林沙門氏菌

三、沙門氏菌食物中毒

（一）、引起食物中毒最常見的沙門氏菌：鼠傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌（二）、易引起沙門氏菌中毒的食品肉、蛋、乳類食品行業(yè)關(guān)注：美國(guó)兩種花生醬含沙門氏菌(三)、中毒原因

1、食用病畜禽的肉制品食品2、病畜禽、帶菌人和動(dòng)物使食品受污染3、用不潔凈水外理食品

（四）、臨床病狀（所致病菌）

1、腸熱?。簜c副傷寒病，為慢性發(fā)熱的菌血病。由傷寒與副傷寒菌引起，潛伏期7~20天2、急性腸胃類：主要癥狀：頭痛、發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹瀉、出冷汗、及全身不適，病程2~3天3、敗血?。焊邿?、寒戰(zhàn)、厭食、局部發(fā)炎、由豬霍亂沙門氏菌等引起

四、微生物檢驗(yàn)

（一）、基本步驟（程序）檢樣→增菌（前增菌）→分離培養(yǎng)→生化試驗(yàn)初步鑒定→血清學(xué)反應(yīng)最后鑒定→報(bào)告

1、前增菌：用無(wú)選擇性的培養(yǎng)基使處于瀕死狀態(tài)的M恢復(fù)活力;2、選擇性增菌：使沙門氏菌優(yōu)勢(shì)繁殖，基它細(xì)菌變到抑制;3、選擇性平板分離培養(yǎng)：分離出所需的細(xì)菌;4、生化試驗(yàn)：鑒定分離出來(lái)的細(xì)菌是否符合所檢項(xiàng)目的細(xì)菌;5、血清學(xué)鑒定：進(jìn)一步鑒定。（二）、檢驗(yàn)操作關(guān)鍵點(diǎn)

1、增菌：使待檢菌復(fù)壯，抑制雜菌生長(zhǎng)，提高檢出率。

前增菌：用于加工過(guò)的食品，37℃，4~8h或18~24h，長(zhǎng)有雜菌。增菌培養(yǎng)基：增菌液一般用MM和SC兩種，如可能是傷寒沙門氏菌用TTB，用37℃培養(yǎng)。2、平板分離

選擇性培養(yǎng)基：BS、DHL、HE、WS、SSBS中最好，DHL、HE、WS很好，SS最差一般要用：BS和WS/SS兩個(gè)平板，BS主要用于傷寒沙門氏菌的分離BS上的菌落DHL上的菌落SS上的菌落XLD瓊脂：FDABAM——典型菌落：粉色菌落，帶或不帶黑色中心。許多沙門氏菌培養(yǎng)物可呈現(xiàn)大的具光澤的黑色中心或幾乎為全部黑色的菌落。——非典型菌落：黃色帶或不帶黑色中心。ISO——中心黑色、周圍由于指示劑顏色的改變而出現(xiàn)紅色的輕微透明帶。沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性分離培養(yǎng)菌名菌落形態(tài)鼠傷寒沙門氏菌紅色，有黑心傷寒沙門氏菌紅色，有黑心弗氏志賀氏菌紅色大腸埃希氏菌黃色，有膽鹽沉淀環(huán)糞鏈球菌-BS瓊脂：FDABAM——典型菌落：產(chǎn)硫化氫菌落黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍的培養(yǎng)基通常開始呈褐色，但伴隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而變?yōu)楹谏?，并有暈環(huán)效應(yīng)；——非典型菌落：有些菌株不產(chǎn)生硫化氫，形成灰綠色菌落，周圍培養(yǎng)基不變色。沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性分離培養(yǎng)菌名菌落形態(tài)傷寒沙門氏菌黑色，有金屬光澤鼠傷寒沙門氏菌黑色，有金屬光澤奇異變形桿菌褐色或呈黑色，無(wú)金屬光澤弗氏志賀氏菌棕色至綠色大腸埃希氏菌棕色至綠色糞鏈球菌-5007144104Blank50115沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性分離培養(yǎng)HE瓊脂：FDABAM——典型菌落：蘭綠色至蘭色，多數(shù)菌株產(chǎn)硫化氫，菌落帶或不帶黑色中心或幾乎全黑色?！堑湫途洌喝樘顷?yáng)性的菌株為黃色中心黑色或全黑色。菌名菌落形態(tài)傷寒沙門氏菌藍(lán)綠色，部分有黑心鼠傷寒沙門氏菌藍(lán)綠色，部分有黑心奇異變形桿菌藍(lán)綠色，有或無(wú)黑心弗氏志賀氏菌藍(lán)綠色大腸埃希氏菌橙紅色，有膽酸鹽沉淀糞鏈球菌-沙門氏菌檢驗(yàn)生化鑒定TSI：典型反應(yīng)：斜面產(chǎn)堿（K）：紅色；底部產(chǎn)酸（A）：黃色；產(chǎn)H2S：黑色（少數(shù)不產(chǎn)）菌名生化反應(yīng)腸炎沙門氏菌K/A，產(chǎn)氣，產(chǎn)H2S大腸埃希氏菌A/A，產(chǎn)氣銅綠假單胞菌K/K奇異變形桿菌K/A，產(chǎn)H2S弗氏檸檬酸桿菌A/A，產(chǎn)H2S弗氏志賀氏菌K/A沙門氏菌檢驗(yàn)——幾點(diǎn)注意進(jìn)行生化反應(yīng)時(shí)，應(yīng)以純培養(yǎng)物進(jìn)行試驗(yàn)，如出現(xiàn)血清學(xué)陽(yáng)性，而生化反應(yīng)特征不符合時(shí)，應(yīng)對(duì)接種物進(jìn)行純化，用純化后的培養(yǎng)物重新進(jìn)行生化試驗(yàn)。測(cè)試中應(yīng)同時(shí)接種陽(yáng)性對(duì)照菌株。冷凍樣品解凍需在45℃以下，有自動(dòng)調(diào)溫器自控的水浴鍋內(nèi)不斷攪拌進(jìn)行15min或在2-8℃，18小時(shí)內(nèi)軟化。為保證檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性，必須在選擇性培養(yǎng)基上挑取足夠數(shù)量的菌落進(jìn)行生化和血清學(xué)鑒定。3、五項(xiàng)生化試驗(yàn)

H2S、靛基質(zhì)、PH7.2尿素酶、KCN、賴氨酸脫羧酶

（1）三糖鐵培養(yǎng)的培養(yǎng)典型沙門氏菌在三糖鐵培養(yǎng)上的特征：表面（-）粉紅色、底層（+）黃色、H2S（+）底層有黑色、有動(dòng)力。在TSI培養(yǎng)基中：表面（+）黃色、H2S（-）的培養(yǎng)物可排除，其它培養(yǎng)物均有可能是沙門氏菌。（2）其余四項(xiàng)生化實(shí)驗(yàn)靛基質(zhì)PH7.2尿素酶KCN賴氨酸脫羧酶

反應(yīng)序號(hào)：A1、A2多見，B1少見（3）、典型沙門氏菌的五項(xiàng)生化反應(yīng)及其檢驗(yàn)的利用A、典型五項(xiàng)生化反應(yīng)：A1

H2S（+）靛基質(zhì)（-）PH7.2尿素酶（-）KCN（-）賴氨酸脫羧E（+）B、利用五項(xiàng)生化反應(yīng)鑒定沙門氏菌的最簡(jiǎn)單方案

a、對(duì)于H2S陽(yáng)性菌，利用五項(xiàng)生化反應(yīng)試驗(yàn)可判別沙門氏菌和檸檬酸桿菌。b、對(duì)于H2S陰性菌，查到B1時(shí)即：H2S（-）靛基質(zhì)（-）PH7.2尿素酶（-）KCN（-）賴氨酸脫羧E（+），補(bǔ)做ONPE試驗(yàn)，可判定沙門氏菌屬和埃希氏菌屬（ONPE（-）為沙門氏菌，ONPE（+）大腸艾希氏菌5、血清學(xué)試驗(yàn)（最后鑒定）

（1）、沙門氏菌診斷血清的種類：10種組合血清：主要用于傷寒和副傷寒沙門氏菌鑒定26種組合血清：常見致病菌的定群與分型57種組合血清：常見定型，初步鑒定A—F群以外的菌型144種組合血清：全套裝

ISO6579沙門氏菌檢驗(yàn)流程前增菌25g樣+225mLBP勻質(zhì)37±1℃、4h或18±2h選擇性增菌

1ml+10mlMM/TTB1ml+10mlSC41.5±1℃、24±3h37±1℃、24±3h

（水浴培養(yǎng)）分離培養(yǎng)劃線接種選擇性培養(yǎng)基（如BS,SS,HE）37℃、24~48h（BS）每個(gè)平板挑取至少5個(gè)可疑菌進(jìn)行純培養(yǎng)和確認(rèn)試驗(yàn)37℃、24±3h

生化鑒定TSI、尿素酶、賴氨酸脫羧酶、β-半乳糖、V-P、吲哚試驗(yàn)血清學(xué)血清學(xué)試驗(yàn)——沙門氏菌的分類報(bào)告結(jié)果五、檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告1、凡血清學(xué)鑒定與生化反應(yīng)均符合者，報(bào)告發(fā)現(xiàn)沙門氏菌。經(jīng)檢驗(yàn)，×××食品發(fā)現(xiàn)有沙門氏菌2、凡血清學(xué)鑒定與生化反應(yīng)均不符合者，報(bào)告未發(fā)現(xiàn)沙門氏菌。

思考題：1、典型沙門氏菌的五項(xiàng)生化試驗(yàn)結(jié)果如何？2、沙門氏菌的形態(tài)特征，培養(yǎng)特性是什么？3、沙門氏菌檢驗(yàn)時(shí)為什么要進(jìn)行前增菌和增菌？4、沙門氏菌有哪些抗原？各有何特點(diǎn)？O、H抗原如何表示，A—F群沙門氏菌中，代表每群O特異性抗原的獨(dú)特因子是什么？5、沙門氏菌哪幾個(gè)菌型具有Vi抗原，Vi抗原對(duì)O抗原血清學(xué)試驗(yàn)有何影響，對(duì)含Vi抗原菌，如何做O抗原血清學(xué)試驗(yàn)。6、沙門氏菌在SS平板，TSI培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的現(xiàn)象如何，說(shuō)明其原理。7、分離純化后怎樣選用最少的生化試驗(yàn)方法初步鑒定檢驗(yàn)菌是否是沙門氏菌屬的細(xì)菌。8、如何進(jìn)行沙門氏菌的血清學(xué)試驗(yàn)。第三節(jié)、志賀氏菌的檢驗(yàn)一、生物學(xué)特性（一）、形態(tài)與染色革蘭氏陰性短桿菌、無(wú)莢膜，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛

2~3um*0.5~0.7um

（二）、培養(yǎng)特性1、需氧或兼氧性厭氧，最適溫度37℃，PH7.2~7.42、在普通瓊脂和SS平板上，能形成圓形、微凸、光滑濕潤(rùn)、無(wú)色半透明、邊緣整齊、在中等大小的菌落3、宋氏志賀氏菌菌落較大，較不透明，粗糙而扁平，在SS平板上可遲發(fā)酵乳糖，菌落呈玫瑰紅色。4、在肉湯中呈均勻混濁生長(zhǎng)，無(wú)菌膜。

（三）、生化反應(yīng)1、發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，除宋氏志賀氏菌外，均不發(fā)酵乳糖。2、不發(fā)酵側(cè)金盞花醇、肌醇、水楊苷。3、不產(chǎn)生H2S，不分解尿素，V-P試驗(yàn)陰性，不能利用檸檬酸鹽。4、甲基紅陽(yáng)性。（四）、抗原結(jié)構(gòu)1、抗原構(gòu)成：O抗原：群特異性抗原：A、B、C、DK抗原：除B群外，一般有K抗原2、志賀氏菌的分群與血清型志賀氏菌分為四群：A群（痢疾志賀氏菌）：1~10型B群（福氏志賀氏菌）：1~6型+X、Y兩個(gè)變種，C群（鮑氏志賀氏菌）：1~15型D群（宋內(nèi)氏志賀氏菌）

：1個(gè)型志賀氏菌屬抗原的分類菌名

血清分類生化特性群型亞型甘露醇鳥氨酸脫羧酶志賀氏菌A1～10

－-福氏菌B1～6x、y變種1a、1b、2a、2b、3a、3b3c、4a、4b+-鮑氏菌C1～15

+-宋內(nèi)氏菌D1

+＋葡萄糖+乳糖-甘露醇-痢疾志賀氏菌1、3、4、5、6、9、10型痢疾志賀氏菌2、7、8型福氏6型，鮑氏1、2、3、4、5、6、8、10、12、14型福氏痢疾菌（1、2、3、4、5型）鮑氏5、7、9、11、13、15型靛基質(zhì)-乳糖+宋氏志賀氏菌

靛基質(zhì)-靛基質(zhì)+靛基質(zhì)-靛基質(zhì)+甘露醇+3、屬內(nèi)外抗原關(guān)系（1）群內(nèi)抗原關(guān)系：A群：2與10型，具有密切關(guān)系C群：1與4和11型，10與11相關(guān)B群：群抗原是B群各型之間的共同抗原（2）群間抗原關(guān)系：C群17型與A群3型相關(guān)C群18型與A群11型相關(guān)（3）屬外抗原關(guān)系：

志賀氏菌與艾希氏菌屬的O抗原關(guān)系非常密切，除A群9型和D群宋氏菌與埃氏希菌的O抗原關(guān)系未見報(bào)道外，每一個(gè)型都與一定的艾希氏菌的O抗原有關(guān)。4、K抗原對(duì)O抗原血清學(xué)試驗(yàn)的影響

可阻礙O抗原的血清學(xué)凝集試驗(yàn)，煮沸處理即可。

（五）志賀氏菌的抵抗力志賀氏菌屬在外界環(huán)境中的生存力，以宋內(nèi)氏最強(qiáng)，福氏菌次之，志賀氏菌最弱。一般在潮濕土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在糞便內(nèi)（室溫）存活11天。日光直接照射30分鐘，56-60℃10分即被殺死，對(duì)高溫和化學(xué)消毒劑很敏感，1%石炭酸中15-30分鐘即被殺死，對(duì)氯霉素、磺胺類、鏈霉素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。

二、志賀氏菌的致病性與食物中毒（一）流行病學(xué)傳染源食物、病人、糞便、蒼蠅等（二）志賀氏菌的致病性致病因素：腸毒素、菌體內(nèi)毒素、細(xì)胞毒素（二）臨床癥狀A(yù)、急性細(xì)菌性痢疾：急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢。B、慢性細(xì)菌性痢疾：慢性遷延型、慢性隱伏型、慢性急性發(fā)作型。三、微生物檢驗(yàn)

（一）檢驗(yàn)步驟（程序）檢樣→樣品處理→增菌培養(yǎng)→SS、EMB平板分離培養(yǎng)→初步生化鑒定→最后血清學(xué)鑒定→報(bào)告（二）檢驗(yàn)操作要點(diǎn)志賀氏菌在常溫中生存的時(shí)間較短，應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn)。如24h內(nèi)不能檢驗(yàn)，樣品應(yīng)在冰箱內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間不能檢驗(yàn)，放在低溫冰箱內(nèi)。

1、增菌培養(yǎng)培養(yǎng)基：GN增菌液在36±1℃6—8h，當(dāng)培養(yǎng)液出現(xiàn)輕微混濁即中止培養(yǎng)。2、分離培養(yǎng)

強(qiáng)選擇性平板：SS或HE、WS弱選擇性平板：EMB或麥康數(shù)在工作中36±1℃培養(yǎng)18—24h，菌落特征：無(wú)色透明，中等大小，光滑圓形菌落。HE平板原理及反應(yīng)發(fā)酵乳糖的某種腸桿菌不發(fā)酵乳糖的某種腸道菌，而且產(chǎn)生硫化氫，可能是沙門氏菌不發(fā)酵乳糖的腸道菌，可能就是志賀氏菌SS平板原理及反應(yīng)SSAgar(SalmonellaShigellaAgar)大腸桿菌或者別的發(fā)酵乳糖的腸桿菌是沙門氏菌。有黑色中心。如果沒有黑色中心，就很可能是志賀氏菌了麥康凱瓊脂平板

EMB平板照片及原理

3、初步生化鑒定

從平板上挑取3—4個(gè)可疑菌落，接種于TSI和葡萄糖半固體培養(yǎng)基各一管，36℃，18—2