2023年重慶市中山高三適應(yīng)性調(diào)研考試生物試題含解析_第1頁
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文檔簡介

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚,將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試題卷上答題無效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.新疆野生油菜(P1)具有低芥酸、抗病蟲等特性,為了改良甘藍型油菜(P2),研究人員將兩種植物的體細胞進行融合獲得了雜種植物F1,然后加入一對引物進行PCR鑒定,結(jié)果如下圖所示。下列敘述不正確的是()A.用PEG可促進兩個親本的原生質(zhì)體融合B.泳道M從下到上表示長短不同的DNA片段C.引物能與DNA上多個不同位點結(jié)合D.F1一2是有低芥酸、抗病蟲等特性的甘藍型油菜2.下列有關(guān)科學(xué)史中研究材料、方法及結(jié)論的敘述,錯誤的是()A.孟德爾以豌豆為研究材料,采用雜交等方法,提出了基因的分離和自由組合定律B.摩爾根以果蠅為研究材料,統(tǒng)計分析后代眼色分離比,證明了基因位于染色體上C.赫爾希與蔡斯以噬菌體為研究材料,利用同位素示蹤技術(shù),證明DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)D.建構(gòu)數(shù)學(xué)模型的方法,可以用于研究種群數(shù)量變化和酶活性變化的規(guī)律3.土壤內(nèi)含有松散的顆粒,有利于微生物和小動物的生存,下列說法正確的是()A.土壤中微生物的存在有利于生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)B.土壤中微生物能將有機物分解,釋放的能量供給綠色植物利用C.利用土壤小動物的避光趨濕怕高溫,可采用帶燈罩的日光燈制作誘蟲器來進行收集D.為調(diào)查土壤中小動物的豐富度,可選用樣方法,并隨機取樣4.某研究小組從某湖泊中選取了四種不同的生物,并對其消化道內(nèi)食物組成進行了分析,結(jié)果如下表所示。下列說法正確的是()生物種類魚甲河蝦魚乙水蚤消化道內(nèi)食物組成魚乙、河蝦水蚤、小球藻水蚤、河蝦小球藻A.小球藻、水蚤在生態(tài)系統(tǒng)中屬于生產(chǎn)者B.表中生物形成的食物網(wǎng)共有4條食物鏈C.魚乙在該湖泊生態(tài)系統(tǒng)中的營養(yǎng)級最高D.河蝦與水蚤二者間的關(guān)系是捕食和競爭5.胃內(nèi)的酸性環(huán)境是通過質(zhì)子泵維持的,質(zhì)子泵催化1分子的ATP水解所釋放的能量,可驅(qū)動1個H+從胃壁細胞進入胃腔和1個K+從胃腔進入胃壁細胞,K+又可經(jīng)通道蛋白順濃度進入胃腔。下列相關(guān)敘述正確的是()A.K+進入胃腔消需要耗能量B.H+從胃壁細胞進入胃腔的方式是主動運輸C.胃壁細胞內(nèi)K+的含量不會影響細胞內(nèi)液滲透壓的大小D.K+進出胃壁細胞的跨膜運動運輸方式是相同的6.家貓體色由X染色體上一對等位基因B、b控制,只含基因B的個體為黑貓,只含基因b的個體為黃貓,其他個體為玳瑁貓。下列說法正確的是()A.只有雌性貓具有純黑色品種B.玳瑁貓與黃貓雜交后代中玳瑁貓占50%C.只有用黑貓和黃貓雜交,才能獲得最大比例的玳瑁貓D.為持續(xù)高效地繁育玳瑁貓,應(yīng)逐代淘汰其他體色的貓7.驅(qū)蚊香草為常用綠化及驅(qū)蚊的優(yōu)良植物,某科研小組研究不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑NAA對驅(qū)蚊香草種子發(fā)芽率的影響。實驗中各實驗組將健壯飽滿的驅(qū)蚊香草種子放在不同濃度NAA溶液中浸泡3h,而后取出各組種子并放于25℃恒溫箱中,培養(yǎng)至第3天和第7天的實驗結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是()A.該實驗的實驗結(jié)果不僅受NAA濃度的影響,還受培養(yǎng)時間的影響B(tài).第3天時NAA促進驅(qū)蚊香草種子萌發(fā)的最適濃度是1.5mg/LC.第3天和第7天的實驗結(jié)果都能說明NAA的作用具有兩重性D.NAA的濃度是該實驗的自變量,培養(yǎng)溫度是該實驗的無關(guān)變量8.(10分)某同學(xué)在進行“綠葉中色素的提取和分離”實驗時,進行了以下操作。該同學(xué)的操作正確的是()A.將5g新鮮菠菜葉片剪碎放入研缽中,加入無水乙醇后直接進行研磨B.將預(yù)備好的濾紙條一端剪去兩角,在距這一端1cm處用鉛筆畫一條橫線C.為增強實驗效果,將濾液細線畫粗些并進行多次重復(fù)D.將濾紙條畫有濾液細線的一端朝下,輕輕插入層析液中,讓濾液細線浸入層析液二、非選擇題9.(10分)回答下列關(guān)于光合作用的問題。生姜屬于耐陰作物,在橘子樹底下種植生姜,不僅可以充分利用果樹的立體空間為生姜提供遮陽,提高光能和土地利用率,而且還能增加單位面積的經(jīng)濟效益。下圖為這兩種植物在溫度、水分等均適宜的條件下,光合作用速率與呼吸速率的比值(P/R)隨光照強度變化的曲線圖。(1)圖中表示生姜的曲線是________。若24小時中光照與黑暗時間相等,生姜正常生長所需的光照強度應(yīng)________。光照強度為a時,B植物葉肉細胞光合作用所需CO2來自________。(2)某種植物A,經(jīng)過長期進化形成獨特光合作用和特有的固定CO2的方式,如圖一和圖二所示(圖三表示大部分植物光合作用固定CO2的方式)。植物A在夜間開放氣孔吸收CO2,固定CO2形成蘋果酸存儲于________中,從而導(dǎo)致細胞液酸度上升:而白天氣孔關(guān)閉,蘋果酸脫羧釋放CO2用于________。這種特殊的代謝方式,有利于植物生長在___________的地區(qū)。以避免白天由于氣孔關(guān)閉而導(dǎo)致________供應(yīng)不足。10.(14分)某實驗基地水庫中放養(yǎng)了一批羅非魚?之后有人在該水庫中放生了一種大型肉食性魚,一段時間后,羅非魚種群數(shù)量達到了相對穩(wěn)定狀態(tài)?K0是沒釋放大型肉食性魚前的理想環(huán)境容納量?請回答下列問題:(1)水庫中的所有羅非魚形成一個_____________,其特征包括數(shù)量特征?____________等,調(diào)查羅非魚的數(shù)量可以采用___________________?(2)據(jù)圖判斷,羅非魚在a~c段大致呈___________型增長,大型肉食性魚最可能是_____________時間點放入水庫的,判斷依據(jù)是______________________________。(3)在捕食等壓力下,羅非魚種群的環(huán)境容納量更接近____________________________。11.(14分)鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在,可造成土壤酸化而影響植物生長。鋁能抑制植物根尖細胞的分裂,破壞根組織。某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白(ALMT),該通道蛋白能將蘋果酸轉(zhuǎn)運到細胞外來緩解鋁毒。可將控制ALMT的基因?qū)氩荒弯X的植物中,最終獲得耐鋁植物。請回答下列問題:(1)下表是運載體上出現(xiàn)的幾種限制酶的識別序列及切割位點。用表中的限制酶切割DNA后能形成相同黏性末端的是_____。限制酶識別序列和切割位點EcoRIG1AATTCBamHIG1GATCCHindIIIA1AGCTTXhoIC1TCGAGNdeICA1TATGSalIG1TCGAC(2)欲獲得ALMT基因的cDNA,科研人員從_______細胞中獲取總mRNA,在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA,再利用ALMT基因制作出特異性________,通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。(3)啟動子是_______識別并結(jié)合的位點,能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型,其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達,β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導(dǎo)。在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應(yīng)使用_______啟動子,不使用另外一種啟動子的原因是_____________________。(4)科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上,再通過_____技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交,得到的后代中耐鋁植株:普通植株約為3:1,則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了_____個ALMT基因,轉(zhuǎn)入的基因在染色體上的位置關(guān)系是:______;若使這株耐鋁植株自交,后代中耐鋁植株:普通植株約為_______。12.抗體的結(jié)構(gòu)如圖所示,它有兩條H鏈和兩條L鏈。同一物種C區(qū)氨基酸序列恒定,不同抗體的結(jié)合抗原的V區(qū)氨基酸序列有差異。(1)抗體結(jié)構(gòu)中的肽鍵數(shù)目為p,氨基酸數(shù)目為a,二者的關(guān)系式為_____________。(2)取免疫后小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合,經(jīng)篩選得到雜交瘤細胞。將得到的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和_____________檢測以獲得具有_____________特點的雜交瘤細胞。將得到的雜交瘤細胞進行體內(nèi)培養(yǎng)或放入____________培養(yǎng)箱進行體外培養(yǎng),從細胞培養(yǎng)液中提取出單克隆抗體。(3)由于鼠源性抗體會使人產(chǎn)生免疫反應(yīng),導(dǎo)致該抗體失效,科學(xué)家制備了嵌合性單克隆抗體,初步解決了這一問題。推測嵌合性抗體應(yīng)由鼠源性抗體的___________區(qū)和人抗體的___________區(qū)組合而成。(4)為進一步獲得更符合治療要求的單克隆抗體,科研人員對抗體結(jié)構(gòu)進行精細研究,找到既不影響抗體空間結(jié)構(gòu)又降低免疫反應(yīng)的__________序列,通過基因工程技術(shù)對抗體結(jié)構(gòu)進行人源化改造。這種人源單克隆抗體屬于____________工程的產(chǎn)物。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

1、植物體細胞雜交是首先用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁,獲得原生質(zhì)體;用物理法(離心、振動、電刺激)或者化學(xué)法(聚乙二醇)誘導(dǎo)細胞融合,獲得融合的原生質(zhì)體;原生質(zhì)體再生出細胞壁,獲得雜種細胞;雜種細胞經(jīng)過脫分化和再分化獲得雜種植株。2、PCR的含義是多聚酶鏈式反應(yīng)。PCR技術(shù)反應(yīng)的條件:穩(wěn)定的緩沖溶液環(huán)境、DNA模板、合成引物、四種脫氧核甘酸、耐高溫DNA聚合酶、溫控設(shè)備。PCR反應(yīng)過程是:變性→復(fù)性→延伸?!驹斀狻緼、用化學(xué)方法PEG可促進兩個親本的原生質(zhì)體融合,A正確;B、泳道M從下到上表示長短不同的DNA片段,B正確;C、引物能與DNA上多個不同位點結(jié)合,C正確;D、通過圖片中電泳結(jié)果看出,F(xiàn)1-1具有P1、P2的部分遺傳信息,其可能是有低芥酸、抗病蟲等特性的甘藍型油菜,D錯誤。故選D。2、A【解析】

孟德爾以豌豆為實驗材料,應(yīng)用雜交、自交和測交的手段,通過假說演繹法提出了分離定律和自由組合定律。摩爾根證明基因在染色體上,是通過果蠅的雜交和測交實驗去驗證的,識記各生物實驗的實驗材料和實驗方法是本題的解題關(guān)鍵?!驹斀狻緼、孟德爾提出分離定律和自由組合定律時還沒有對基因進行了解,所以不能說基因的分離定律和自由組合定律,A錯誤;B、摩爾根通過白眼果蠅和紅眼果蠅的雜交,統(tǒng)計后代眼色的性別和性狀的比例,證明了基因在染色體上,B正確;C、赫爾希和蔡司提出DNA是遺傳物質(zhì)的實驗過程主要采用了T2噬菌體和大腸桿菌為實驗材料,利用同位素示蹤法將DNA和蛋白質(zhì)分開研究,從而得出了該結(jié)論,C正確;D、種群的數(shù)量變化和酶活性變化都采用了繪制曲線這一數(shù)學(xué)模型來表示,D正確;故選A。3、A【解析】

土壤中微生物能將有機物分解成無機物可供綠色植物利用,但其分解釋放的能量不能供給綠色植物利用;利用土壤小動物的避光趨濕怕高溫,可采用帶燈罩的熱光源制作誘蟲器來進行收集;在進行調(diào)查土壤中小動物的豐富度時常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查?!驹斀狻緼、土壤中既有分解者也有生產(chǎn)者和消費者,因此,土壤中微生物的存在有利于生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán),A正確;B、土壤中微生物能將有機物分解成無機物可供綠色植物利用,但其分解釋放的能量除了滿足自身生命活動需要,其余均以熱能的形式散失了,綠色植物無法利用這部分能量,B錯誤;C、利用土壤小動物的避光趨濕怕高溫,可采用帶燈罩的熱光源制作誘蟲器來進行收集,C錯誤;D、許多土壤動物有較強的活動能力,而且身體微小,因此不適于用樣方法或標志重捕法進行調(diào)查,在進行調(diào)查土壤中小動物的豐富度時常用取樣器取樣的方法進行采集、調(diào)查,D錯誤。故選A。4、D【解析】

從消化道中的食物組成來看,河蝦捕食水蚤、小球藻,水蚤捕食小球藻,魚乙捕食水蚤、河蝦,魚甲捕食魚乙、河蝦,故形成的食物鏈有:小球藻→水蚤→魚乙→魚甲,小球藻→水蚤→河蝦→魚乙→魚甲,小球藻→水蚤→河蝦→魚甲,小球藻→河蝦→魚乙→魚甲,小球藻→河蝦→魚甲?!驹斀狻緼、小球藻在生態(tài)系統(tǒng)中屬于生產(chǎn)者,但水蚤屬于初級消費者,A錯誤;B、表中生物形成的食物網(wǎng)共有5條食物鏈,B錯誤;C、魚乙在該湖泊生態(tài)系統(tǒng)中處于3、4兩個營養(yǎng)級,魚甲處于3、4、5三個營養(yǎng)級,因此處于最高營養(yǎng)級的生物是魚甲,C錯誤;D、河蝦與水蚤二者的種間關(guān)系是捕食和競爭,D正確。故選D。【點睛】此題考查生態(tài)系統(tǒng)的成分、結(jié)構(gòu)和種間關(guān)系,側(cè)重考查信息能力和理解能力。5、B【解析】

細胞膜內(nèi)外的離子分布:鈉離子在細胞外的濃度高于細胞內(nèi),鉀離子濃度在細胞內(nèi)高于細胞外,然后結(jié)合題意分析,“質(zhì)子泵催化1分子的ATP水解所釋放的能量,可驅(qū)動1個H+從胃壁細胞進入胃腔和1個K+從胃腔進入胃壁細胞”,說明Na+—K+泵參與離子跨膜運輸過程需要消耗ATP分子,故Na+—K+泵運輸離子的過程是主動運輸。【詳解】A、依題意可知,K+經(jīng)通道蛋白順濃度進入胃腔是協(xié)助擴散,不消耗能量,A錯誤;B、H+從胃壁細胞進入胃腔,需消耗ATP水解所釋放的能量,其方式是主動運輸,需要載體蛋白,B正確;C、胃壁細胞內(nèi)K+的含量會影響細胞內(nèi)液滲透壓的大小,C錯誤;D、由題目信息,K+由胃壁細胞進入胃腔的方式是協(xié)助擴散,而從胃腔進入胃壁細胞是主動運輸,D錯誤。故選B?!军c睛】本題提供了一個全新的信息,需要提取題干的信息,結(jié)合所學(xué)的知識“鈉離子在細胞外的濃度高于細胞內(nèi),鉀離子濃度在細胞內(nèi)高于細胞外”、“主動運輸?shù)奶攸c”,就可以準確的得出答案,這道題的啟示:將知識點和實例進行有機的結(jié)合是將題做正確的前提。6、C【解析】

分析題意可知,黑貓個體的基因型為XBXB和XBY,黃貓個體的基因型為XbXb和XbY,玳瑁貓個體的基因型為XBXb,且玳瑁貓只有雌性個體?!驹斀狻緼、黑貓個體的基因型為XBXB和XBY,故雌性與雄性貓均有純黑色品種,A錯誤;B、玳瑁貓與黃貓雜交,即XBXb與XbY雜交,獲得后代中玳瑁貓的概率為25%,B錯誤;C、用雌性黑貓XBXB和雄性黃貓XbY雜交,或用雄性黑貓XBY和雌性黃貓XbXb雜交,獲得玳瑁貓的概率均為50%,后代比例為玳瑁貓的比例最大,C正確;D、玳瑁貓只有雌性個體,淘汰其他體色的貓而只保留玳瑁貓無法繁殖,必須和其他體色的貓雜交才能得到玳瑁貓,D錯誤;故選C。7、B【解析】

生長素的兩重性是指低濃度促進生長,高濃度抑制生長,由圖可知,無論是3天的檢測結(jié)果還是7天的檢測結(jié)果,隨NAA溶液濃度的增加,均是先表現(xiàn)了促進發(fā)芽,然后表現(xiàn)了抑制發(fā)芽,所以均能體現(xiàn)兩重性?!驹斀狻緼、從第3天或第7天的實驗結(jié)果均可看出,NAA的濃度不同導(dǎo)致種子的發(fā)芽率不同,所以NAA的濃度可以影響實驗結(jié)果,第3天和第7天的實驗結(jié)果相比,說明培養(yǎng)時間也可以影響實驗結(jié)果,A正確;B、第3天時雖然1.5mg/L的NAA在圖中的實驗結(jié)果中促進種子萌發(fā)效果最強,但不能判斷該濃度就是促進種子萌發(fā)的最適濃度,B錯誤;C、無論是第3天還是第7天的實驗結(jié)果,與對照組相比,既有發(fā)芽率高于對照組的也有發(fā)芽率低于對照組的,所以能說明NAA的作用具有兩重性,C正確;D、不同組別間的NAA濃度不同,所以NAA的濃度屬于該實驗的自變量,不同組別的培養(yǎng)溫度都是25℃,所以培養(yǎng)溫度屬于該實驗的無關(guān)變量,D正確。故選B。【點睛】理解兩重性以及最適濃度時促進效果最好是解題的關(guān)鍵。8、B【解析】

1、5g菠菜葉需要去掉莖脈,剪碎,然后放入研缽中,加入無水乙醇、石英砂、CaCO3以后,迅速研磨;2、用毛細管吸少量濾液,沿鉛筆線處小心均勻地畫出一條濾液細線,待晾干后再重復(fù)2-3次;3、畫好細線的濾紙條不能浸入到層析液中,防止色素溶解于層析液中。【詳解】A、將5g菠菜葉需要去掉莖脈,剪碎,然后放入研缽中,加入無水乙醇、石英砂、CaCO3以后,迅速研磨,A錯誤;B、將預(yù)備好的濾紙條一端剪去兩角,在距這一端1cm處用鉛筆畫一條橫線,B正確;C、用毛細管吸少量濾液,沿鉛筆線處小心均勻地畫出一條濾液細線,并重復(fù)2-3次,每次等上一次干燥以后再重復(fù)畫,C錯誤;D、把畫好細線的濾紙條插入層析液中,濾液細線不能觸及層析液,D錯誤。故選B?!军c睛】本題考查葉綠素的提取和分離,考查的是實驗操作的步驟,這類習題的特點是操作性非常強,所以這類習題的解答在于平時的功夫,平時應(yīng)該堅持進行是實驗的操作,才會記憶的牢固。二、非選擇題9、B大于a細胞呼吸和外界環(huán)境液泡光合作用的暗反應(yīng)干旱、炎熱地區(qū)CO2【解析】

分析坐標圖,A是陽生植物,B是陰生植物,圖中表示生姜(耐陰作物)的曲線是B。

分析下圖:植物A在夜間開放氣孔吸收CO2,形成蘋果酸存儲于液泡中,以避免白天由于氣孔關(guān)閉而導(dǎo)致二氧化碳供應(yīng)不足?!驹斀狻浚?)由于生姜屬于耐陰作物,在橘子樹底下種植生姜,上圖中P/R=1時的光照強度為光補償點,達到最大值所需要的最小光照強度為光飽和點,據(jù)圖可知B曲線的光補償點和飽和點均較低,故B曲線表示生姜。a點時B植物的P/R接近1,若光照與黑暗時間相等,由于生姜正常生長需要保證光合速率大于呼吸速率,且一晝夜中有有機物的積累,故所需的光照強度應(yīng)大于a。光照強度為a時,可以認為對于生姜整個植株而言,光合速率=呼吸速率,而對于葉肉細胞來說,光合速率大于呼吸速率,故葉肉細胞光合作用所需的二氧化碳一部分來自線粒體的呼吸作用,一部分來自于外界環(huán)境。

(2)由圖可知:植物A在夜間開放氣孔吸收CO2,固定CO2形成蘋果酸存儲于液泡中。白天氣孔關(guān)閉,蘋果酸脫羧釋放CO2用于暗反應(yīng)CO2的固定,這種特殊的代謝方式,以避免白天由于氣孔關(guān)閉而導(dǎo)致CO2供應(yīng)不足,有利于植物生長在干旱、炎熱的地區(qū)?!军c睛】本題主要考查光合作用的相關(guān)知識,意在考查考生對圖形的分析與理解,把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力。10、種群空間特征標志重捕法“J”cc時間點之后羅非魚種群的環(huán)境阻力增大,增長速率變慢使種群數(shù)量的最高點沒有達到K0K2【解析】

據(jù)圖分析,a~b種群數(shù)量呈“J”型增長:此時食物、空間充足,無天敵,生物無限增長;c-d種群數(shù)量增加緩慢;e以后種群數(shù)量處于相對穩(wěn)定狀態(tài)?!驹斀狻浚?)所有羅非魚形成一個種群;種群的特征包括數(shù)量特征和空間特征;魚類活動能力強,活動范圍廣,所以采用標志重捕法調(diào)查種群密度。(2)羅非魚在a~c段大致呈“J”型增長,c時間點之后羅非魚種群的環(huán)境阻力增大,增長速率變慢,使種群數(shù)量的最高點沒有達到K0,所以推測在c點放入了大型肉食性魚。(3)羅非魚種群數(shù)量在K2附近波動,所以推測羅非魚種群的環(huán)境容納量更接近K2。【點睛】本題考查種群數(shù)量的數(shù)量變化的相關(guān)知識,難點是(2)題需要考生分析曲線的斜率,從而得出增長速率降低的結(jié)論。11、XhoI與SalI植物甲的根(根毛)細胞引物RNA聚合酶αβ啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸,導(dǎo)致正常土壤酸化,并影響植物自身的生長植物組織培養(yǎng)2分別位于兩條非同源染色體上15:1【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成?;虮磉_載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)??抗原?抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)根據(jù)圖示中限制酶的識別序列和酶切位點可判斷XhoI與SalI切割DNA后都能形成TCGA的黏性末端。(2)根據(jù)“某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白(ALMT)”可知,ALMT基因在根毛細胞中表達,所以欲獲得ALMT基因的cDNA,科研人員應(yīng)從植物甲的根(根毛)細胞中獲取總mRNA,在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA,再利用ALMT基因制作出特異性的引物,通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。(3)啟動子是RNA聚合酶特異性識別并結(jié)合的位點,能調(diào)控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型,其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達,β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導(dǎo)。鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在,可造成土壤酸化而影響植物生長,而α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達,則在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時應(yīng)使用α啟動子,不使用另外一種啟動子的原因是β啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉(zhuǎn)運有機酸,導(dǎo)致正常土壤酸化,并影響植物自身的生長。(4)科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,首先將ALM基因?qū)胫参锛毎⒄系绞荏w細胞染色體的DNA上,再通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。若將一株耐鋁植株與普通植株雜交,由于該雜交相當于測交,所以若得到的后代中耐鋁植株:普通植株約為3:1,則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉(zhuǎn)入了2個ALMT基因,且轉(zhuǎn)入的基因分別位于兩條非同源染色體上;若使這株耐鋁植株(基因型相當于AaBb,A和B均為ALMT基因)自交,后代中耐鋁

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